×
20.06.2019
219.017.8de1

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИВОГРИБКОВОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения вещества, обладающего противогрибковой активностью. Способ получения вещества, обладающего противогрибковой активностью, представляющего собой 7-О-метилкемпферол, путем подготовки лекарственного растительного сырья - почек каштана конского обыкновенного (Aesculus hippocastanum L.), экстрагирования сырья органическими растворителями, упаривания и хроматографической очистки, при этом извлечение из воздушно-сухого растительного сырья проводят с использованием хлороформа в аппарате Сокслета в соотношении сырье : экстрагент 1:3, последующее выделение целевого вещества из сгущенного хлороформного извлечения осуществляют методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь хлороформа и этилового спирта в соотношении 99:1 объемом 1,5 л, а дальнейшую очистку целевого вещества осуществляют путем перекристаллизации упаренных под вакуумом элюатов, содержащих 7-О-метилкемпферол, смесью хлороформа и этилового спирта. Вышеописанный способ позволяет получить высокий выход вещества 7-О-метилкемпферола - 1,5% от массы исходного воздушно-сухого сырья. 1 ил.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности, к производству лекарственных средств в виде субстанций и индивидуальных биологически активных соединений и касается способа получения 7-О-метилкемпферола (рамноцитрина) из почек каштана конского обыкновенного (Aesculus hippocastanum L.).

В настоящее время в мировой практике применяются семена и листья каштана конского обыкновенного, однако перспективным видом лекарственного растительного сырья являются почки растения ввиду их богатого химического состава (1).

Известен способ выделения 7-О-метилкемпферола из сырья ретамы обыкновенной (Retama raetam (Forssk.) Webb & Berthel) (2). Согласно данной методике проводится: измельчение пробы воздушно-сухого сырья (4 кг) травы ретамы обыкновенной, экстрагирование теплым этанолом (80%) и отгонка растворителя с помощью роторного испарителя. Упаренный экстракт (398 г) подвергается хроматографическому исследованию и определению биологической активности. Экстракт хроматографируется на колонке (6×70 см) с силикагелем с использованием элюента состава бензол : этилацетат, 9:1 с получением 100 фракций. Фракция номер 93 очищается колоночной флэш-хроматографией на сефадексе с использованием абсолютного этанола в качестве элюента и получением на выходе целевого соединения 7-О-метилкемпферола в количестве 17 мг.

Данный метод взят нами в качестве прототипа. Недостатками этого метода являются низкий выход целевого вещества - 7-О-метилкемпферола (17 мг, что составляет 0,000425% от массы воздушно-сухого сырья), продолжительность и многостадийность хроматографической очистки с использованием различных сорбентов и элюента, представляющего собой смесь сложных систем растворителей.

Таким образом, технической задачей изобретения является обеспечение возможности повышения выхода целевого вещества (7-О-метилкемпферола) и подтверждение его противогрибковой активности.

Технический результат достигается тем, извлечение из воздушно-сухого растительного сырья проводят с использованием хлороформа в аппарате Сокслета в соотношении сырье : экстрагент 1:3, последующее выделение целевого вещества из сгущенного хлороформного извлечения осуществляют методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь хлороформа и этилового спирта в соотношении 99:1 объемом 1,5 л, а дальнейшую очистку целевого вещества осуществляют путем перекристаллизации упаренных под вакуумом элюатов, содержащих 7-О-метилкемпферол, смесью хлороформа и этилового спирта.

Способ реализуется следующим образом. Измельченные воздушно-сухие почки каштана конского обыкновенного (100,0 г) экстрагируют хлороформом в аппарате Сокслета в соотношении сырье : экстрагент 1:3 до полного истощения сырья. Хлороформное извлечение упаривают под вакуумом до густого остатка (около 100 мл), полученный упаренный экстракт смешивают с 50 г силикагеля (Silicagel L 100/160), высушивают и вносят на колонку (8×10 см), заполненную силикагелем в виде взвеси в хлороформе. Целевое вещество элюируют смесью хлороформ-этиловый спирт в соотношении 99:1 (1,5 л). Контроль за разделением веществ осуществляют хроматографированием на пластинках "Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ-254" в системе растворителей н-бутанол: уксусная кислота : вода 4:1:2. Содержащий 7-О-метилкемпферол элюат подвергают очистке методом перекристаллизации смесью хлороформа с этанолом. Полученный осадок представляет собой готовый продукт (7-О-метилкемпферол) с выходом 1,5% от массы воздушно-сухого сырья.

Предлагаемый способ поясняется следующим примером.

Воздушно-сухие почки каштана конского обыкновенного (100,0 г) измельчают, экстрагируют хлороформом в аппарате Сокслета в соотношении 3:1 к массе воздушно-сырья до полного истощения сырья. Хлороформное извлечение упаривают под вакуумом до густого остатка (около 100 мл), полученный упаренный экстракт смешивают с 50 г силикагеля (Silicagel L 100/160), высушивают и вносят на колонку (8×10 см), заполненную силикагелем в виде взвеси в хлороформе. Целевое вещество элюируют смесью хлороформ-этиловый спирт в соотношении 99:1 (1,5 л). Контроль за разделением веществ осуществляют хроматографированием на пластинках "Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ-254" в системе растворителей н-бутанол : уксусная кислота : вода 4:1:2. Элюат подвергают очистке методом перекристаллизации смесью хлороформа с этанолом. Полученный осадок представляет собой готовый продукт (7-О-метилкемпферол) с выходом 1,5 г, что составляет 1,5% от массы воздушно-сухого сырья.

Химическая структура 7-О-метилкемпферола представлена в Приложении 1 на фигуре 1.

Спектральные и физико-химические свойства 7-О-метилкемпферола. Желтый кристаллический порошок состава С16Н12О6 (молекулярная масса 300 а.е.м.) с т.пл. 226-228°С; УФ- спектр: λmaxEtOH - 272 и 334 нм.

1Н-ЯМР спектр (300 МГц, ДМСО-d6, δ, м.д., J/Гц): 12,48. (с, 1Н, 5-ОН), 10.12 (с, 1Н, 41-ОН), 9.50 (с, 1Н, 3-ОН), 8.07 (д, 2Н, 9 Гц, H-21,61), 6.95 (д, 2Н, 9 Гц, Н-31,51), 6.75 (д, 1Н, 2.5 Гц, Н-8), 6.34 (д, 1Н, 2.5 Гц, Н-6), 3.87 (с, 3Н, СН3О).

13С-ЯМР спектр (50 МГц, ДМСО-d6, δС, м.д.): С-4 (176,01), С-2 (164,89), С-7 (160,36), С-41 (159,31, С-5 (156,09), С-9 (136,95), С-21 (130,18), С-61 (129,56), С-11 (121,57), С-31 (115,64), С-51 (115,44), СН3О (55,99).

Масс-спектр спектр (ESI-MS, 180°С, m/z): М+ 301 (300+Н), М+ 339 (300+K).

7-О-метилкемпферол, полученный разработанным способом, исследовали на наличие противомикробной активности.

Наличие противомикробной активности определяли на лабораторных штаммах Candida albicans (СР. Robin). Определение минимальной ингибирующей концентрации проводили методом двойных серийных разведений в бульоне в соответствии с МУ 4.2.1890-04 (3). Учет результатов анализа осуществляли через 48-72 часа после инкубации при температуре 37°С. При этом проводили визуальнуя оценку задержки роста. Из лунок с видимой задержкой роста осуществляли высев на питательные среды (5% кровяной агар-агар), через 24 часа отсутствие роста оценивали как фунгицидный эффект, а появление видимого роста, но с его задержкой - как фунгистатический.

Результаты исследования показали выраженную противогрибковую активность. Вплоть до разведения 1:256 включительно наблюдается фунгицидное действие, при дальнейшем разведении рост культуры возобновляется.

Таким образом, предлагаемый способ получения 7-О-метилкемпферола (рамноцитрина) из почек каштана конского обыкновенного методом колоночной хроматографии разработан впервые для данного вида сырья и обладает следующими преимуществами:

1. Разработанный способ позволяет получать более высокий выход вещества 7-О-метилкемпферола - 1,5% вместо 0,000425% у прототипа, то есть в 3500 раз выше по сравнению с прототипом.

2. Разработанный способ менее трудоемок, поскольку включает однократную хроматографическую очистку на силикагеле с использованием элюента, представляющего собой смесь двух растворителей (хлороформ и этиловый спирт) вместо двухкратной хроматографической очистки в прототипе с использованием различных сорбентов и элюента, представляющего собой смесь сложных систем растворителей. Следовательно, заявленный способ включает 5 стадий в отличие от прототипа, в котором реализуется выделение целевого вещества в 8 этапов.

3. Целевой продукт (7-О-метилкемпферол), полученный разработанным способом, обладает выраженной противогрибковой активностью.

Разработанный способ может применяться в химико-фармацевтической промышленности для получения субстанций для производства лекарственных препаратов с противогрибковым действием.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ:

1. Куцик, Р.В. Каштан конский (Aesculus hippocastanum L.). Аналитический обзор / Р.В. Куцик, Б.М. Зузук, В.В. Дьячок // Провизор. - 2002. - №4. - С. 12-18.

2. Albalawi, М. A. D. Isolation of Rhamnocitrin Insezcticide from Retamaraetam via Shephadex LH-20 / M. A. D. Albalawi // IOSR Journal of Applied Chemistry. - 2016. - Vol. 9. - p. 70-74.

3. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Методические указания. МУК 4.2.1890-04 // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2004. - Т. 6, №4. - С. 306-359.

Способ получения вещества, обладающего противогрибковой активностью, путем подготовки лекарственного растительного сырья - почек каштана конского обыкновенного (Aesculus hippocastanum L.), экстрагирования сырья органическими растворителями, упаривания и хроматографической очистки, отличающийся тем, что извлечение из воздушно-сухого растительного сырья проводят с использованием хлороформа в аппарате Сокслета в соотношении сырье : экстрагент 1:3, последующее выделение целевого вещества из сгущенного хлороформного извлечения осуществляют методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь хлороформа и этилового спирта в соотношении 99:1 объемом 1,5 л, а дальнейшую очистку целевого вещества осуществляют путем перекристаллизации упаренных под вакуумом элюатов, содержащих 7-О-метилкемпферол, смесью хлороформа и этилового спирта.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИВОГРИБКОВОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 1-10 of 122 items.
26.08.2017
№217.015.e95f

Способ лечения хронических ран

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, в частности к местному лечению хронических ран. Предварительно санированную рану укрывают биопластической мембраной «Коллост», фиксируя ее отдельными узловыми швами на расстоянии 0,3 мм друг от друга. Вблизи верхнего края раны устанавливают...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002627814
Дата охранного документа: 11.08.2017
29.12.2017
№217.015.f04b

Способ лазерного лечения диабетического макулярного отека

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в лазерном лечении диабетического макулярного отека. Осуществляют наложение тестовых коагулятов вне зоны макулярного отека. В предоперационном периоде пациенту проводят оптическую когерентную томографию...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002629041
Дата охранного документа: 24.08.2017
29.12.2017
№217.015.f7f9

Способ определения у взрослых степени тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного вирусом эпштейна - барр

Изобретение относится к медицине, в частности к инфектологии, и касается оценки степени тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного вирусом Эпштейна - Барр у взрослых. Осуществляют измерение температуры тела человека, выявляют увеличение селезенки, печени и лимфатических узлов при...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002639596
Дата охранного документа: 21.12.2017
29.12.2017
№217.015.f804

Способ лечения пациентов с эректильной дисфункцией

Изобретение относится к области медицины, а именно к урологии, андрологии и сексопатологии. Для лечения эректильной дисфункции ежедневно однократно в течение 10-12 минут проводят гравитационное воздействие на пациента в направлении голова-нижние конечности. Скорость вращения при первых двух...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002639457
Дата охранного документа: 21.12.2017
29.12.2017
№217.015.f812

Способ неинвазивного определения стадии фиброза печени у пациентов с хроническим вирусным гепатитом

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для неинвазивного определения стадии фиброза печени у пациентов с хроническим вирусным гепатитом. Пациенту проводят общее и биохимическое исследование крови и УЗИ органов брюшной полости. Определяют возраст, абсолютное содержание...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002639432
Дата охранного документа: 21.12.2017
29.12.2017
№217.015.f9d6

Способ внутриротовой пневмостимуляции тканей челюстно-лицевой области

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии, и предназначено для использования при лечении патологий жевательной мускулатуры, касается способа пневмостимуляции тканей челюстно-лицевой области. В боковые отделы одного из принимающих лож двухсторонней внутриротовой каппы для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002639436
Дата охранного документа: 21.12.2017
19.01.2018
№218.016.0292

Сироп календулы лекарственной

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к сиропу календулы лекарственной. Сироп календулы лекарственной включает водное извлечение цветков календулы лекарственной и сорбит, при этом его готовят на основе 64,0 г сорбита и 36,0 г водного извлечения, получаемого...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002630058
Дата охранного документа: 05.09.2017
19.01.2018
№218.016.07b6

Способ медикаментозной поддержки пациентов при выполнении костно-пластических операций

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для медикаментозной поддержки пациентов при выполнении стоматологических костно-пластических операций. За семь дней до операции и на протяжении трех недель после операции пациенту вводят препарат Трентал в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002631416
Дата охранного документа: 21.09.2017
13.02.2018
№218.016.1ea5

Способ получения препарата на основе гиматомелановых кислот низкоминерализованных иловых сульфидных грязей

Изобретение относится к медицине, в частности к способу получения препарата на основе гиматомелановых кислот из низкоминерализованных иловых сульфидных грязей. Способ получения препарата на основе гиматомелановых кислот из низкоминерализованных иловых сульфидных грязей, заключающийся в том, что...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002641046
Дата охранного документа: 15.01.2018
10.05.2018
№218.016.3a9d

Способ верхнечелюстной синусотомии

Изобретение относится к медицине, а именно к челюстно-лицевой хирургии и стоматологии, а так же оториноларингологии, и предназначено для использования при лечении заболеваний верхнечелюстного синуса, требующих доступа в полость синуса. Доступ в верхнечелюстной синус осуществляют со стороны...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002647610
Дата охранного документа: 16.03.2018
Showing 1-10 of 67 items.
27.06.2013
№216.012.4f95

Лекарственное средство, обладающее мочегонной активностью

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству, обладающему мочегонной активностью. Лекарственное средство, обладающее мочегонной активностью, содержащее жидкий или сухой экстракт зверобоя продырявленного и стандартный сахарный/сорбитный сироп при определенном...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002485966
Дата охранного документа: 27.06.2013
20.02.2014
№216.012.a39d

Способ и устройство для моделирования инфицированной раны слизистой оболочки полости рта в эксперименте

Группа изобретений относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, стоматологии и патофизиологии. Моделирование инфицированной раны слизистой оболочки полости рта проводят на внутренней поверхности нижней губы животного по средней линии. Для этого накладывают на нижнюю губу...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002507600
Дата охранного документа: 20.02.2014
27.04.2014
№216.012.bc8d

Сироп женьшеня

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству, обладающему адаптогенной активностью. Сироп женьшеня, обладающий адаптогенной активностью, содержащий настойку корней женьшеня на 40% спирте, сорбит или фруктозу и воду очищенную в определенном соотношении. 3 ил.,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002514008
Дата охранного документа: 27.04.2014
20.07.2014
№216.012.df64

Способ количественного определения суммы антраценпроизводных веществ в корнях щавеля конского

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к способу количественного определения антраценпроизводных веществ в корнях щавеля конского. Экстракцию сырья осуществляют 70% этиловым спиртом, аликвоту полученного извлечения разбавляют щелочно-аммиачным раствором,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002522974
Дата охранного документа: 20.07.2014
10.01.2015
№216.013.1c6d

Способ лечения воспалительных заболеваний пародонта

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии. Способ лечения воспалительных заболеваний пародонта включает введение в пародонтальные карманы лекарственной формы с ее полным погружением под край десны, для этого проводят ирригацию пародонтальных карманов раствором «Дентос»,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002538705
Дата охранного документа: 10.01.2015
20.01.2015
№216.013.1f2b

Способ лечения пародонтита

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии, и может быть использовано для лечения воспалительных заболеваний пародонта. Способ включает наложение на ткани пародонта лечебной повязки. До наложения лечебной повязки производят многократную ирригацию тканей пародонта...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002539420
Дата охранного документа: 20.01.2015
27.06.2015
№216.013.5ac7

Способ количественного определения флавоноидов в желчегонном сборе № 3

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в контрольно-аналитических лабораториях при проведении анализа флавоноидов в лекарственном растительном сборе «Желчегонный сбор №3». Способ основан на количественном определении суммы флавоноидов методом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002554780
Дата охранного документа: 27.06.2015
27.07.2015
№216.013.6708

Сироп крушины ломкой

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к сиропу, обладающему слабительным действием. Сироп из коры крушины ломкой, обладающий слабительным действием, отличающийся тем, что его получают путем приготовления отвара из коры крушины ломкой кипячением сырья с водой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002557929
Дата охранного документа: 27.07.2015
27.07.2015
№216.013.6720

Способ количественного определения антоцианов в лекарственном растительном сырье

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в центрах контроля качества лекарственных средств и контрольно-аналитических лабораториях при проведении анализа антоцианов в таком лекарственном растительном сырье, как плоды черники обыкновенной, аронии...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002557953
Дата охранного документа: 27.07.2015
10.01.2016
№216.013.9efc

Способ определения подлинности сиропа пижмы обыкновенной

Изобретение относится к способу определения подлинности сиропа пижмы обыкновенной. Указанный способ предполагает определение в сиропе методом тонкослойной хроматографии доминирующего компонента цветков пижмы обыкновенной - флавоноида тилианина, который предварительно извлекают путем обработки...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002572337
Дата охранного документа: 10.01.2016
+ добавить свой РИД