Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ МИКРОСКОПИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ АГРЕГАТНОГО СОСТОЯНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ В АУТОПЛАЗМЕ

Изобретение относится к медицине и биологии, а именно к исследованию реологических свойств крови, и может быть использовано для оценки агрегатного состояния эритроцитов.

Известен фотометрический способ оценки агрегации эритроцитов в аутоплазме (Schmid-Schonbein et al., Microvasc. Res. 1973.Vol. 6. P. 366-376), включающий выделение эритроцитов из крови, смешивание с аутоплазмой, помещение в кювету реоскопа и регистрацию записи агрегатограммы.

Однако этот способ требует специального и дорогого оборудования (реоскопа). Кроме того, с помощью фотометрического метода можно определить только степень агрегации эритроцитов в виде «монетных столбиков». Практически не изученным остается прижизненная морфология агрегатного состояния эритроцитов при большом увеличении микроскопа.

Известен способ микроскопической оценки агрегатного состояния эритроцитов в крови, включающий помещение капли крови на предметное стекло, опускание в нее объектива 100^х и проведение микрофотосъемки (Свищева Т.Я. Перспективная диагностика. Биорезонансная, световая, темнопольная, люминисцентная. - Спб.: Издательство Диля, 2006). Этот способ взят за прототип.

Однако этот способ имеет существенные недостатки. В данном способе забор крови проводится без антикоагулянта. В течение нескольких минут кровь свертывается, что не позволяет работать длительное время. Кроме того, гематокритное число крови составляет 40-45, что создает трудности в фокусировании изображения.

Известен также способ определения степени агрегации эритроцитов (Повзнер А.А., Муравьев А.В., Вдовин В.А., Тихомирова И.А. Способ определения степени агрегации клеток крови. Пат. 2484465 РФ, 2016).

Однако в данном способе используется низкое гематокритное число (разведение эритроцитов плазмой в 200 раз) и малое увеличение микроскопа.

Задачей предлагаемого изобретения является создание способа микроскопической оценки агрегатного состояния эритроцитов в течение длительного времени и при большом увеличении светового микроскопа.

Поставленная задача решается за счет того, что забор крови проводят с антикоагулянтом, бестромбоцитарную плазму смешивают с эритроцитами в соотношении 2:1, каплю смеси помещают на предметное стекло, перемешивают, опускают в нее объектив (100^х) светового микроскопа и после достижения фокуса (x1000) наблюдают через окуляр микроскопа. Для микроскопической оценки агрегатного состояния эритроцитов проводят микрофотосъемку.

Способ осуществляется следующим образом. Кровь забирают в вакуумные пробирки, содержащие 3.8% цитрат натрия (соотношение 9:1). Пробирки центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин. Плазму и клетки белой крови убирают, после чего бестромбоцитарную плазму смешивают с эритроцитами в соотношении 2:1, каплю смеси помещают на предметное стекло, перемешивают, опускают в нее объектив (100^х) светового микроскопа и после достижения фокуса (x1000) проводят микрофотосъемку.

Пример 1. Бестромбоцитарную плазму крови здоровых людей смешивали с эритроцитами в соотношении 2:1, каплю смеси помещали на предметное стекло, перемешивали, опускали в каплю смеси объектив 100^х, фокусировали и проводили микрофотосъемку. На рис. 1 видно образование «монетных столбиков» из здоровых эритроцитов в аутоплазме.

Пример 2. Бестромбоцитарную плазму крови, хранящейся 7 дней при 4°C, смешивали с хранящимися эритроцитами в соотношении 2:1, помещали на предметное стекло, перемешивали, опускали в каплю смеси объектив 100^х, фокусировали и проводили микрофотосъемку. На рис. 2 видно, что наряду с агрегацией эритроцитов, состоящей из «монетных столбиков», наблюдается агрегация эхиноцитов.

Приведенные примеры показывают возможности применения способа микроскопической оценки агрегатного состояния эритроцитов в аутоплазме.