×
20.07.2014
216.012.df4e

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФРАКЦИИ ЛИПОФИЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ ИЗ ЧАГИ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения биологически активных липофильных соединений на основе лекарственного сырья - гриба чаги. Способ заключается в том, что из водного экстракта чаги осаждают меланин путем добавления водного раствора хлористоводородной кислоты, затем меланин экстрагируют петролейным эфиром при перемешивании до получения смеси однородной консистенции, полученную смесь замораживают, а после размораживания отделяют слой органического экстракта, удаляют растворитель с получением сухого остатка фракции липофильных веществ. Способ позволяет извлечь из чаги фракцию липофильных веществ, включающих стериновые соединения, которые обладают выраженной биологической активностью. 2 табл., 4 пр.
Основные результаты: Способ получения фракции липофильных веществ из чаги, включающий осаждение меланина путем добавления к водному экстракту чаги водного раствора хлористоводородной кислоты до pH 1,5-2,0, удаление фильтрата, экстрагирование меланина органическим растворителем, отделение экстракта и удаление растворителя, отличающийся тем, что меланин экстрагируют петролейным эфиром при перемешивании до получения смеси однородной консистенции, причем массовое соотношение меланин:петролейный эфир составляет 1:5, затем смесь замораживают, а слой органического экстракта отделяют после размораживания смеси.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к получению фракции биологически активных липофильных соединений на основе лекарственного сырья - гриба чаги.

Природные липофильные вещества, в частности стериновые соединения, обладают высоким фармакологическим потенциалом. Для ряда этих соединений, выделенных из чаги, показаны высокие противоопухолевые, имунномодулирующие и противовоспалительные свойства (Kahlos К. [and others] // Planta Medica. - 1986. - №52. - P. 554, Nakata T. [and others] // Bioorganic & Medicinal Chemistry. - 2007.- V.15, I. 1. - P.257-264; M.J. Chung [and others] // Nutrition research and practice. - 2010. - V.4, №3. - P.177-182).

В настоящее время для получения биологически активных стериновых соединений и их производных в фармацевтической промышленности используется направленный химический синтез (Lednicer D. Steroid chemistry at a glance / D. Lednicer. - 2011. - 144 p.).

Недостатками химической технологии получения целевых соединений являются сложность и трудоемкость процесса, сопряженные с высокими экономическими затратами.

Известен способ выделения биологически активных соединений из сухого экстракта чаги (Г.Л. Рыжова [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 1997. - №10. - С.44-47). Способ включает осаждение меланина путем подкисления хлористоводородной кислотой экстракта чаги, проведение гидролиза меланина в автоклаве при давлении 1,5 атм и температуре 126°С, дальнейшее экстрагирование гидролизата хлороформом и обработку бикарбонатом натрия.

Недостатком данного способа является проведение гидролиза меланина в жестких условиях (повышенное давление и высокая температура), что не позволяет выделить биологически активные соединения в нативном состоянии. Способ позволяет извлечь в основном вещества фенольной природы, из липофильных соединений удается извлечь только высшие жирные кислоты.

Наиболее близким к заявляемому способу является способ выделения липофильных соединений из водного экстракта чаги (W. Mazurkiewicz [and others] // Acta Poloniae Pharmaceutica. - 2010. - V.67, I. 4. - P.397-406). Сконцентрированный и высушенный водный экстракт чаги перерастворяют в горячей воде, проводят гидролиз хлористоводородной кислотой, отделяют осадок 1, оставшийся фильтрат упаривают досуха и получают осадок 2. Осадки 1 и 2 обрабатывают этилацетатом и метанолом, полученные экстракты объединяют и удаляют растворители под вакуумом с получением сухого остатка черного цвета. Разделение веществ сухого остатка проводят с помощью колоночной хроматографии. Был идентифицирован ряд биологически активных соединений, в том числе липофильные, представленные насыщенными и ненасыщенными углеводородами, высшими алифатическими спиртами и альдегидами, высшими жирными кислотами и их эфирами.

Данный способ не позволяет извлечь из сырья стериновые соединения, а использование кислотного гидролиза, как и в вышеописанном способе, приводит к изменению химической структуры биологически активных веществ.

Технической задачей настоящего изобретения является разработка способа получения фракции биологически активных липофильных веществ, включающих стериновые соединения, из чаги.

Поставленная задача достигается способом, в котором сначала из водного экстракта чаги осаждают меланин путем добавления водного раствора хлористоводородной кислоты до pH 1,5-2,0, удаляют фильтрат, меланин экстрагируют петролейным эфиром при перемешивании до получения смеси однородной консистенции, причем массовое соотношение меланин:петролейный эфир составляет 1:5, затем смесь замораживают, а после размораживания отделяют слой органического экстракта, удаляют растворитель с получением сухого остатка фракции липофильных веществ.

Технический результат заключается в получении фракции биологически активных липофильных веществ, включающих стериновые соединения.

Сущность способа заключается в следующем.

Для осаждения меланина используют водный экстракт чаги, так как экстракция чаги водой позволяет извлечь из нее максимальное количество меланина по сравнению с другими растворителями. При этом водный экстракт чаги может быть получен любым известным способом (например, способом, описанным в патенте RU №2343930). После добавления к экстракту чаги водного раствора хлористоводородной кислоты происходит осаждение меланина. После удаления фильтрата меланин с влажностью 90±2% экстрагируют петролейным эфиром, выбор которого в качестве растворителя обоснован селективностью по отношению к липофильным веществам чаги, в том числе и к стериновым соединениям, при этом в петролейном эфире не растворяются вещества фенольной природы, содержащиеся в чаге в значительном количестве. Экстрагирование проводят при перемешивании до получения смеси однородной консистенции. Массовое соотношение меланин:эфир 1:5 является оптимальным для получения однородной стабильной при нормальных условиях смеси, разрушение которой возможно лишь при замораживании. После размораживания происходит разделение смеси на два слоя: верхний слой органического экстракта и нижний водный слой.

Верхний слой органического экстракта, содержащий липофильные вещества, отделяют, после удаления растворителя под вакуумом получают сухой остаток фракции липофильных веществ.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.

Получение фракции липофильных соединений проводили при использовании различных партий сырья чаги, поскольку сырье может существенно отличаться по количественному и качественному составу липофильных веществ в зависимости от места и времени сбора или от возраста гриба.

Пример 1.

Использовали сырье ООО «КФХ «Кентавр», партия 011209.

Водный экстракт чаги получали по фармакопейной статье (Государственная Фармакопея СССР: Вып.2. - М.: Медицина, 1990. - 400 с.).

50 г чаги заливали 1200 мл воды, настаивали 1 ч при комнатной температуре, далее кипятили 2 ч, отделяли экстракт и доводили объем экстракта до 2500 мл. Из водного экстракта добавлением 25% раствора хлористоводородной кислоты до pH 1,5-2,0 осаждали 50±2 г меланина, фильтрат удаляли. К меланину приливали 250 мл петролейного эфира и проводили экстрагирование при перемешивании до получения смеси однородной консистенции, затем смесь замораживали, после размораживания отделяли верхний слой органического экстракта, удаляли петролейный эфир на вакуумном испарителе при 25-30°С и получали 0,033±0,001 г фракции липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составило 2,83±0,20 мас.% от экстрактивных веществ.

Пример 2.

Использовали сырье ОАО «Красногорсклексредства», партия 61208.

Водный экстракт чаги получали методом ремацерации (патент RU №2343930, А61К 36/06, B01D 11/02, 2007).

50 г чаги заливали 300 мл воды, настаивали 5 ч при температуре 70°С, отделяли экстракт с первой стадии, к оставшемуся шроту чаги добавляли 200 мл воды, настаивали еще 5 ч при температуре 70°С, отделяли экстракт со второй стадии и объединяли с экстрактом с первой стадии. Из объединенного водного экстракта (390±10 мл) добавлением 25% раствора хлористоводородной кислоты до pH 1,5-2,0 осаждали 50±3 г меланина, фильтрат удаляли. К меланину приливали 250 мл петролейного эфира и проводили экстрагирование при перемешивании до получения смеси однородной консистенции, затем смесь замораживали, после размораживания отделяли верхний слой органического экстракта, удаляли петролейный эфир на вакуумном испарителе и получали 0,0387±0,0165 г фракции липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составило 3,53±0,83 мас.% от экстрактивных веществ.

Пример 3.

Аналогичен примеру 2, но использовано сырье ОАО «Красногорсклексредства», партия 10210.

Получили 0,0097±0,0046 г фракции липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составляет 7,98±1,46 мас.% от экстрактивных веществ.

Пример 4.

Аналогичен примеру 2, но использовано сырье ООО «КФХ «Кентавр», партия 011209.

Получили 0,0113±0,002 г фракции липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составляет 9,9±0,3 мас.% от экстрактивных веществ.

Качественный состав полученных фракций липофильных веществ определяли методом тонкослойной хроматографии на пластинах «Sorbfil» с использованием двух систем растворителей: для разделения нейтральных липофильных соединений - №1 (петролейный эфир - диэтиловый эфир - уксусная кислота в соотношении 90:10:1, Кейтс М. Техника липидологии / М. Кейтс. - М., 1975. - 324 с.) и для разделения стериновых соединений - №2 (толуол - муравьиная кислота - этилацетат в соотношении 5:1:4, Y. Shin [and others] // Journal of Wood Science. - 2001. - V.47, I. 4. - P.313-316).

Хроматограммы обрабатывали специфичным реагентом на стериновые соединения - раствором хлорного железа (Кейтс М. Техника липидологии / М. Кейтс.- М., 1975. - 324 с.). Идентификацию веществ проводили по значениям коэффициента распределения (Rf). Присутствие в экстрактах сквалена и ланостерола подтверждено использованием стандартов-метчиков: Lanosterol (№8446793-1ЕА Sigma-Aldrich) и Squalene (№83626-10ML Sigma-Aldrich).

Результаты хроматографии представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1
Качественный состав фракций липофильных веществ, выделенных из чаги
Коэффициент распределения (Rf) Отнесение
0,81-0,90 углеводороды, эфиры стеринов, воски, сквален
0,54 высшие алифатические альдегиды, витамин К∗∗
0,27-0,36 триацилглицериды
0,15-0,17 высшие жирные кислоты
0,13-0,15 высшие алифатические спирты
0.07-0,12 стерины
0,05-0,09 O-диалкиловые эфиры глицерина
0,02-0,04 1,3- и 1,2-диацилглицериды
0,00 моноацилглицериды, 1-O-моноалкиловые эфиры глицерина
- Кейтс М. Техника липидологии / М. Кейтс.- М., 1975. - 324 с;
∗∗ - для сырья ОАО «Красногорсклексредства», партия 10210.

Данные, приведенные в таблице 1, показывают, что независимо от исходного сырья и способа получения водного экстракта чаги все полученные фракции липофильных соединений, содержат ряд биологически активных веществ, в том числе и стериновые соединения. Из обнаруженных веществ при хроматографировании в системе №2 были идентифицированы 5 стериновых соединений (табл.2), обладающих выраженной биологической активностью (Y. Shin [and others] // Journal of Wood Science. - 2001. - V.47, I. 4. - P.313-316.). Неидентифицированные соединения с Rf=0,89-0,90, 0,61-0,63 и 0,37-0,38 также можно отнести к стериновым веществам по специфической окраске пятен на хроматограмме.

Таблица 2
Состав стериновых соединений фракций липофильных веществ, выделенных из чаги
Коэффициент распределения (Rf) Отнесение
0,89-0,90 не идентифицировано
0,83-0,85 3β-гидрокси-ланоста-8,24-диен (ланостерол)
0.77 не идентифицировано
0,72-0,73 3β,22-дигидрокси-ланоста-8,24-диен (инотодиол), 3β-гидрокси-ланоста-8,24-диеновая-21-кислота (траметеноловая кислота)
0,70-0,71 не идентифицировано
0,61-0,63 не идентифицировано
0,54-0,58 21,24-циклопента-ланоста-3β,21,25-триол-8-ен
0,45-0,47 3β-гидрокси-8,24-диен-ланоста-21,23-лактон
0,37-0,38 не идентифицировано
- Y. Shin [and others] //Journal of Wood Science. - 2001. - V.47, I. 4. - P.313-316.

Спектрофотометрическим методом было определено количество стериновых соединений во фракциях липофильных веществ, выделенных из водных экстрактов чаги (Антипов Л.В. Физические методы контроля сырья и продуктов в мясной промышленности. - СПб.: ГИОРД, 2006. - 200 с.). Показано, что в зависимости от используемой партии сырья их содержание составляет 2,83-9,90 мас.% от экстрактивных веществ фракций.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет извлечь из чаги фракцию липофильных веществ, включающих стериновые соединения, обладающие выраженной биологической активностью. Необходимо отметить, что на получение фракции липофильных веществ, включающих стериновые соединения, не оказывают влияние выбор партии сырья, а также способ получения водного экстракта чаги. Фракция липофильных веществ, полученная предлагаемым способом, может быть использована для разработки биологически активных добавок и лекарственных препаратов различной направленности действия.

Способ получения фракции липофильных веществ из чаги, включающий осаждение меланина путем добавления к водному экстракту чаги водного раствора хлористоводородной кислоты до pH 1,5-2,0, удаление фильтрата, экстрагирование меланина органическим растворителем, отделение экстракта и удаление растворителя, отличающийся тем, что меланин экстрагируют петролейным эфиром при перемешивании до получения смеси однородной консистенции, причем массовое соотношение меланин:петролейный эфир составляет 1:5, затем смесь замораживают, а слой органического экстракта отделяют после размораживания смеси.
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 51-55 из 55.
20.01.2016
№216.013.a1b0

Способ термической переработки органосодержащего сырья

Изобретение относится к области переработки органических веществ. Способ включает конвективную сушку (1) сырья при температуре 160-200°С разбавленным топочным газом, дозирование (2) органосодержащего сырья (3) в реактор пиролиза барабанного типа (4) с последующим его термическим разложением при...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002573034
Дата охранного документа: 20.01.2016
27.04.2016
№216.015.39cd

Способ получения меланина из чаги

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к получению меланина чаги. Способ получения меланина включает получение водного экстракта чаги, к которому добавляют водный раствор поливинилпирролидона, подкисление раствором хлороводородной кислоты, полученный осадок...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002582972
Дата охранного документа: 27.04.2016
27.08.2016
№216.015.50a3

Способ получения водного экстракта свинушки тонкой

Изобретение относится к фармацевтической, пищевой и косметической промышленности и касается получения водного экстракта свинушки тонкой. Измельченную свинушку заливают водой при соотношении свинушка : вода, равном 1:30, и подвергают обработке сверхвысокими частотами при мощности обработки 180...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002595833
Дата охранного документа: 27.08.2016
29.06.2019
№219.017.a087

Способ получения экстракта из березового гриба чага

Изобретение относится к фармацевтической, пищевой и косметической промышленности, в частности к способу получения экстракта из березового гриба чага. Способ получения экстракта березового гриба чага, включающий экстрагирование измельченной чаги водным раствором, содержащим глицерин и этиловый...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002438685
Дата охранного документа: 10.01.2012
14.07.2019
№219.017.b4d2

Способ получения противокоррозионного пигмента

Изобретение относится к области защиты металла от коррозии лакокрасочными покрытиями. Задачей изобретения является изыскание высокоэффективных слабогидролизуемых фосфонатных пигментов. Техническая задача решается способом получения кернового противокоррозионного пигмента путем взаимодействия в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002442810
Дата охранного документа: 20.02.2012
Показаны записи 51-60 из 60.
27.04.2016
№216.015.39cd

Способ получения меланина из чаги

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к получению меланина чаги. Способ получения меланина включает получение водного экстракта чаги, к которому добавляют водный раствор поливинилпирролидона, подкисление раствором хлороводородной кислоты, полученный осадок...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002582972
Дата охранного документа: 27.04.2016
27.08.2016
№216.015.50a3

Способ получения водного экстракта свинушки тонкой

Изобретение относится к фармацевтической, пищевой и косметической промышленности и касается получения водного экстракта свинушки тонкой. Измельченную свинушку заливают водой при соотношении свинушка : вода, равном 1:30, и подвергают обработке сверхвысокими частотами при мощности обработки 180...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002595833
Дата охранного документа: 27.08.2016
09.08.2018
№218.016.79bc

Способ получения функционального кисломолочного продукта

Изобретение относится к пищевой промышленности, в частности к молочной. Способ включает нормализацию и термическую обработку молока, охлаждение до температуры заквашивания, внесение активированной биомассы бифидобактерий и кисломолочной закваски, сквашивание и охлаждение готового продукта....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002663140
Дата охранного документа: 01.08.2018
19.04.2019
№219.017.2e0f

Способ получения осажденного полифенольного комплекса из чаги

Изобретение относится к фармацевтической, косметической промышленности. Осуществляют получение диффузионного сока чаги, осаждение его добавлением 20%-ного раствора соляной кислоты до значения рН 2,0-2,2. Диффузионный сок чаги получают с использованием, в качестве экстрагента, водного раствора...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002392952
Дата охранного документа: 27.06.2010
19.04.2019
№219.017.32a8

Способ получения водных экстрактов чаги

Изобретение относится к фармацевтической, пищевой и косметической промышленности. Проводят экстрагирование измельченной чаги горячей водой при постоянной температуре 60-70°С ступенчато в экстракторе. На первой ступени экстрагирования экстрагируют при соотношении чага: вода 1:(9-11) в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002406514
Дата охранного документа: 20.12.2010
27.04.2019
№219.017.3d98

Комбинированное магнитожидкостное уплотнение

Изобретение относится к комбинированному магнитожидкостному уплотнению, которое содержит размещенные в корпусе сальниковое, магнитожидкостное и торцовое уплотнения. Магнитожидкостное уплотнение установлено на двух втулках, одна из которых нажимная для сальникового уплотнения окружена...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002686358
Дата охранного документа: 25.04.2019
09.06.2019
№219.017.7c16

Способ получения осажденного препарата из березового гриба чага

Изобретение относится к фармацевтической, пищевой и косметической промышленности. Получают диффузионный сок чаги. Проводят осаждение его добавлением 20%-ного раствора соляной кислоты до значения pH 2,0-2,2. До стадии осаждения к соку чаги добавляют водный раствор гиперразветвленного полимера с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002366439
Дата охранного документа: 10.09.2009
29.06.2019
№219.017.9f63

Способ получения осажденного препарата из березового гриба чага

Изобретение относится к фармацевтической, косметической промышленности. Способ получения осажденного препарата из березового гриба чага включает получение диффузионного сока чаги, его обработку водным раствором Boltorn 40 при определенных условиях, осаждение полифенольного комплекса с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002425686
Дата охранного документа: 10.08.2011
29.06.2019
№219.017.a087

Способ получения экстракта из березового гриба чага

Изобретение относится к фармацевтической, пищевой и косметической промышленности, в частности к способу получения экстракта из березового гриба чага. Способ получения экстракта березового гриба чага, включающий экстрагирование измельченной чаги водным раствором, содержащим глицерин и этиловый...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002438685
Дата охранного документа: 10.01.2012
30.03.2020
№220.018.1192

Питательная среда для выращивания гриба чага

Изобретение относится к биотехнологии. Предложена питательная среда для культивирования гриба Inonotus obliquus на основе картофельного отвара, содержащая (г/л) глюкозу 20,0; глицин 0,1-0,5; комплекс меланина с железом 0,1-0,5; полифепан 0,1. Изобретение обеспечивает повышение выхода биомассы...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002717974
Дата охранного документа: 27.03.2020
+ добавить свой РИД