×
22.05.2023
223.018.6b4a

Результат интеллектуальной деятельности: Универсальная питательная среда для культивирования микроорганизмов

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к биотехнологии. Предложена питательная среда для культивирования Pseudomonas fluorescens АР-33, Bacillus subtilis В-12079, Bacillus subtilis B-2896 или Azotobacter chroococcum. Среда содержит исходные компоненты, г/л: меласса 10, фосфат калия 2,5, сульфат магния 1, сульфат железа (III) 1, нитрат аммония 1, суспензия, полученная путем смешивания 80 г шлифованного гороха с водой, доведенной до литра, варкой смеси в течение 30 минут и настаиванием в течение одного часа, с последующим охлаждением до комнатной температуры и процеживанием дважды через два слоя марли, дистиллированная вода до литра. Изобретение позволяет оптимизировать технологический процесс производства биотехнологических препаратов, где в составе находятся микроорганизмы разных таксономических групп. 3 табл., 3 пр.

Область техники

Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии, а также к сельскому хозяйству и может быть использовано для получения высокоэффективных препаратов - средств защиты растений.

Современные средства защиты растений - это консорциумы микроорганизмов. Культивирование каждого штамма на определенной питательной среде - процесс трудоемкий и дорогостоящий.

Известна питательная среда для культивирования Pseudomonas fluorescens АР-33, состоящая из следующих компонентов, при их соотношении, г/л:

Меласса 15, Калий фосфорнокислый двузамещенный трехводный 0,5, Сульфат магния семиводный 0,2, Горох шлифованный, предварительно обработанный автоклавированием 250, Янтарная кислота 0,05, Лапрол или агар соответственно 5 или 18, Дистиллированная вода до 1 л [1]. Данная среда не предназначена для культивирования Bacillus subtilis и Azotobacter chroococcum.

Известна питательная среда для культивирования Bacillus subtilis L-бульон. Его готовят следующим образом: состав (г/л): дрожжевой экстракт - 5, пептон ферментативный - 15, хлорид натрия - 5, дистиллированная вода - до 1 л (рН 6,8-7,0). Стерилизацию проводили при давлении 1,1 атм. в течение 40 минут [2].

Недостатком данной среды является то, что при культивировании Bacillus subtilis ВКПМ В-12079 максимальное количество организмов не выше 5×109 КОЕ/мл. Не предназначена для культивирования Pseudomonas fluorescens АР-33 и Azotobacter chroococcum.

Известна питательная среда для культивирования Azotobacter chroococcum: горох (отвар) - 100,0 мл; глюкоза - 10,0 г; (NH4)2SO4 - 1,0 г; KH2PO4 H2O - 0,5 г; K2HPO4 - 0,5 г; MgSO4 7H2O - 0,3 г; Са СО3 - 1,0 г, затем изготовление рабочей культуры на среде, содержащей (г/л): глюкоза - 20,0; кукурузный экстракт - 10,0; дрожжевой экстракт - 0,25; KH2PO4 H2O - 0,5; K2HPO4 - 0,5; MgSO4 7H2O - 0,3; Са СО3 - 1,0 [3].

Недостатком среды является многокомпонентный состав, не предназначена для культивирования Bacillus subtilis, Pseudomonas fluorescens.

Целью настоящего исследования является создание недорогой универсальной питательной среды для культивирования микроорганизмов различных таксономических групп, на примере Pseudomonas fluorescens АР-33 Bacillus subtilis 27 D, Bacillus subtilis B-12079, Bacillus subtilis B-2896, Azotobacter chroococcum. Предлагаемая питательная среда, способствует оптимизации технологического процесса и удешевлению готового продукта, когда в одном препарате используются консорциум микроорганизмов.

Сущность технического решения поясняется следующим.

Технология приготовления питательной среды

Для использования гороха шлифованного требуется его предварительная обработка. Горох шлифованный, в количестве 80 г промыть водопроводной водой, помесить в емкость, и довести до литра водой. Затем варить на плите 30 минут и настаивать 1 час. После приготовления остудить до комнатной температуры и дважды процедить через два слоя марли. Полученную суспензию соединить с компонентами (г/л): меласса 10, фосфат калия 2,5, сульфат магния 1, сульфат железа(III) 1, нитрат аммония 1 довести до 1 л дистиллированной водой. Значение рН должно соответствовать 7,5-7,6 ед. рН. Затем стерилизовать в автоклаве 30 минут 1,0 Bar. Полученная среда имеет светло-желтый цвет, «чистый» запах и незначительный осадок. Культивирование микроорганизмов Pseudomonas fluorescens АР-33 Bacillus subtilis 27 D, Bacillus subtilis B-12079, Bacillus subtilis B-2896 производиться 20-24 часа, температура - 30±2°C, принудительная аэрация со скоростью вращения 125 об/мин, культивирование Azotobacter chroococcum через 72 часа без принудительной аэрации.

Контроль за численностью микроорганизмов осуществляют стандартным методом десятикратных разведений.

Пример 1. Сравнение результатов культивирования на питательных средах Pseudomonas fluorescens АР-33

Из таблицы 1 видно, что численность Pseudomonas fluorescens АР-33 на исследуемой питательной среде выше.

Пример 2. Сравнение результатов культивирования на питательных средах Bacillus subtilis 27 D, Bacillus subtilis В-12079, Bacillus subtilis B-2896

Из таблицы 2 видно, что численность микроорганизмов, Bacillus subtilis 27 D и Bacillus subtilis B-2896 сопоставим с ростом на L-бульоне, а численность Bacillus subtilis В-12079 выше.

Пример 3. Сравнение результатов культивирования на питательных средах Azotobacter chroococcum

Из таблицы 3 видно, что численность Azotobacter chroococcum на исследуемой питательной среде выше.

Таким образом, предлагаемая питательная среда для культивирования различных штаммов бактерии Pseudomonas fluorescens АР-33, Bacillus subtilis 27 D, Bacillus subtilis B-12079, Bacillus subtilis B-2896, Azotobacter chroococcum универсальна, содержит не дорогое и доступное сырье, малокомпетентная, проста в приготовлении, не требует дополнительного оборудования для культивирования (нет необходимости темостатировать культуры) что позволяет оптимизировать технологический процесс.

Список литературы

1. ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ PSEUDOMONAS FLUORESCENS АР-33 Яценко Е.С., Ширманов М.В., Евдокимов И.Ю., Бойко С.С, Дурникин Д.А. Патент на изобретение RU 2678133 С1, 23.01.2019.

2. ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ BACILLUS SUBTILIS. Рыженков Н.С., Яценко Е.С., Микушина И.В., Ширманов М.В., Евдокимов И.Ю. Патент на изобретение RU 2668178 С1, 26.09.2018.

3. Хотянович А.В. Методы культивирования азотфиксирующих бактерий, способы получения и применения препаратов на их основе (Методические рекомендации), Ленинград, 1991.

Источник поступления информации: Роспатент

Showing 41-50 of 78 items.
05.07.2019
№219.017.a633

Штамм бактерий bacillus toyonensis вкпм в-13249, обладающий выраженным антагонизмом по отношению к микроорганизмам escherichia coli, candida albicans, staphylococcus aureus, st. epidermidis, salmonella typhimurium, shigella sonnei, pseudomonas aeruginosa

Изобретение относится к биотехнологии. Предложенный штамм бактерий Bacillus toyonensis 15, обладающий широким спектром антагонистической активности в отношении Escherichia coli, Candida albicans, Staphylococcus aureus, St. epidermidis, Salmonella typhimurium, Shigella sonnei, Pseudomonas...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002693439
Дата охранного документа: 02.07.2019
05.07.2019
№219.017.a674

Безопасный вольтамперометрический способ определения висмута (iii)

Изобретение относится к аналитической химии элементов, а именно к методам определения висмута (III) и может быть использовано для санитарно-эпидемиологического контроля питьевых вод, водных объектов, а также аналитическом контроле висмута в сточных водах различных химических производств и вод...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002693515
Дата охранного документа: 03.07.2019
05.07.2019
№219.017.a675

Способ борирования поверхностных слоев углеродистой стали при помощи индукционного воздействия

Изобретение относится к способу химико-термической обработки и может быть использовано для повышения эксплуатационной стойкости изделий из углеродистых сталей. Способ борирования поверхностных слоев углеродистой стали включает нанесение борсодержащей обмазки и индукционное воздействие....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002693416
Дата охранного документа: 02.07.2019
17.07.2019
№219.017.b5e0

Штамм бактерий bacillus pumilus вкпм в-13250, обладающий выраженным антагонизмом по отношению к микроорганизмам escherichia coli, candida albicans, staphylococcus aureus, st. epidermidis

Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии. Штамм бактерий Bacillus pumilus 16, обладающий антагонистической активностью по отношению к микроорганизмам Escherichia coli, Candida albicans, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, депонирован во Всероссийской Коллекции...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694522
Дата охранного документа: 16.07.2019
19.07.2019
№219.017.b69c

Способ получения плитных материалов на основе растительного сырья и бифункциональных синтетических связующих

Изобретение относится к производству плитных материалов типа древесноволокнистых высокой плотности из растительного сырья с использования синтетических связующих. Способ получения плитных материалов включает введение в пресс-массу в виде частиц растительного сырья от 5 до 10 мас.% связующего,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694748
Дата охранного документа: 16.07.2019
23.07.2019
№219.017.b7e4

Способ определения трофического уровня пресноводного водоема

Способ включает отбор проб воды и измерение ее спектральной прозрачности с использованием спектрофотометра на длине волны 430 нм. В качестве эталонной жидкости используют дистиллированную воду. Рассчитывают спектральный показатель ослабления света в воде и определяют трофический уровень,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002695154
Дата охранного документа: 22.07.2019
23.07.2019
№219.017.b813

Способ получения коллоидных квантовых точек селенида кадмия в оболочке хитозана

Изобретение относится к области нанотехнологии, а именно нанотехнологии интерактивного взаимодействия, датчиков или приведения в действие, например, квантовых точек в качестве биомаркеров. Способ получения квантовых точек селенида кадмия в оболочке хитозана основан на взаимодействии...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002695130
Дата охранного документа: 22.07.2019
16.08.2019
№219.017.c09e

Способ измерения электропроводности тонких металлических пленок

Изобретение относится к контрольно-измерительной технике и может применяться для бесконтактного измерения удельной электрической проводимости тонких металлических пленок толщиной от 0,05 до 5 мкм. Cпособ измерения электропроводности тонких пленок представляет собой оценку усредненной амплитуды...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002697473
Дата охранного документа: 14.08.2019
27.01.2020
№220.017.fa98

Способ моделирования термического поражения кожи степени iiia

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для моделирования термического поражения кожи степени IIIA у крысы с предварительно подготовленными участками кожи, находящейся под эфирным наркозом. Осуществляют термическое поражение кожи в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002712051
Дата охранного документа: 24.01.2020
05.02.2020
№220.017.fe33

Способ контроля качества меда

Изобретение относится к спектральному методу контроля. Способ контроля качества меда заключается в анализе спектров поглощения. Анализируются спектры прохождения света в диапазоне длин волн 200-900 нм. Определяется интегральная спектральная энергия в этом диапазоне. Сравниваются значения...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002713022
Дата охранного документа: 03.02.2020
Showing 21-24 of 24 items.
29.05.2020
№220.018.21c6

Питательная среда для культивирования bacillus subtilis вкпм в-12079

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для культивирования бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-12079. Питательная среда для культивирования бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-12079 содержит пептон ферментативный, дрожжевой экстракт, натрий хлористый, горох...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002722071
Дата охранного документа: 26.05.2020
27.05.2023
№223.018.7144

Безопасный вольтамперометрический способ определения ионов сурьмы с помощью графитового электрода

Изобретение относится к области аналитической химии ионов сурьмы и направлено на разработку вольтамперометрического способа определения ионов сурьмы в водных растворах. Технический результат заключается в повышении безопасности за счёт использования электрода без ртутной плёнки. В заявленном...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002760479
Дата охранного документа: 25.11.2021
27.05.2023
№223.018.7183

Способ увеличения численности bacillus subtilis фотостимуляцией

Изобретение относится к биотехнологии. Способ увеличения численности Bacillus subtilis предусматривает приготовление питательной среды, содержащей пептон ферментативный, дрожжевой экстракт, натрий хлористый, сульфат аммония, мителеновый синий и дистиллированную воду в заданных количествах, и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002763791
Дата охранного документа: 11.01.2022
27.05.2023
№223.018.71a1

Безопасный вольтамперометрический способ определения ионов мышьяка с помощью золотого электрода

Изобретение относится к области аналитической химии ионов мышьяка и направлено на разработку вольтамперометрического способа определения ионов мышьяка в водных растворах. Изобретение предназначено для практического химического анализа ионов мышьяка в жидких образцах (природных поверхностных и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002758975
Дата охранного документа: 03.11.2021
+ добавить свой РИД