×
03.08.2019
219.017.bca1

Результат интеллектуальной деятельности: Способ выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у сельскохозяйственных животных

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ выделения РНК из биологического материала по выбору: цельная кровь, сыворотка крови, фрагменты тканей и органов сорбционным методом, синтез кДНК на матрице РНК путем постановки одноэтапной с добавлением внутреннего и положительного контрольных образцов мультиплексной реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции - с проведением 45 циклов амплификации с детекцией в реальном времени с использованием специфичных для участка генома возбудителя вируса Шмалленберга олигонуклеотидных праймеров флуоресцентно-меченого зонда и контрольных образцов, измерение накопления флуоресцентного сигнала по каналам соответствующих флуоресцентных красителей и интерпретацию результатов на основании наличия/отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией Threshold, согласно изобретению для внутреннего контрольного образца используют суспензию бактериофага MS2 с концентрацией 5×10 копий нуклеотидных последовательностей на 1 мкл, а для положительного контрольного образца используют смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома возбудителя вируса Шмалленберга и фрагмент генома бактериофага MS2, взятых в соотношении 1:1, со следующими нуклеотидными последовательностями: при этом накопление флуоресцентного сигнала измеряют по каналам: JOE/Yellow для специфического сигнала возбудителя вируса Шмалленберга; Cy5/Red для сигнала внутреннего контроля, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считают положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции - отрицательный. Изобретение позволяет повысить точность диагностики в способе выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у сельскохозяйственных животных. 4 табл., 3 ил.

Изобретение откосится к ветеринарной вирусологии, а именно к средствам диагностики вирусных и инфекционных заболеваний у животных, в частности к методам выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у животных.

Известен способ выявления инфекций методом мультиплексной ПЦР с детекцией в режиме реального времени (патент РФ №2460803, C12Q 1/68, 2014 г), включающий выделение РНК из биологического материала инфицированных особей сорбционным методом, синтез кДНК на матрице РНК путем постановки одноэтапной с добавлением внутреннего и положительного контролей образцов мультиплексной реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с проведением 45 циклов амплификации с детекцией в реальном времени с использованием специфичных для участка генома вирусного возбудителя олигонуклеотидных праймеров, флуоресцентно-меченого зонда и контрольных образцов, измерение накопления флуоресцентного сигнала по каналам соответствующих флуоресцентных красителей и интерпретацию результатов на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией - Threshold.

Наиболее близким потехнической сущности является способ выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у животных, включающий выделение РНК из биологического материала по выбору: цельная кровь, сыворотка крови, фрагменты тканей и органов сорбционным методом, синтез кДНК на матрице РНК путем постановки одноэтапной с добавлением внутреннего и положительного контрольных образцов мультиплексной реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции - с проведением 45 циклов амплификации с детекцией в реальном времени с использованием специфичных для участка генома возбудителя вируса Шмалленберга олигонуклеотидных праймеров флуоресцентно-меченого зонда и контрольных образцов, измерение накопления флуоресцентного сигнала по каналам соответствующих флуоресцентных красителей и интерпретацию результатов на основании наличия/отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией Threshold (патент РФ №2515916, C12Q 1/68, 2014 г. - прототип

Недостатком прототипа является недостаточная специфичность и чувствительность, олигонуклеотидных праймеров, флуоресцентно-меченого зонда и контрольных образцов, что влияет на точность диагностики.

Техническим результатом является повышение точности диагностики.

Технический результат достигается тем, что в способе выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у сельскохозяйственных животных, включающем выделение РНК из биологического материала по выбору: цельная кровь, сыворотка крови, фрагменты тканей и органов сорбционным методом, синтез кДНК на матрице РНК путем постановки одноэтапной с добавлением внутреннего и положительного контрольных образцов мультиплексной реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции - с проведением 45 циклов амплификации с детекцией в реальном времени с использованием специфичных для участка генома возбудителя вируса Шмалленберга олигонуклеотидных праймеров флуоресцентно-меченого зонда и контрольных образцов, измерение накопления флуоресцентного сигнала по каналам соответствующих флуоресцентных красителей и интерпретацию результатов на основании наличия/отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией Threshold, согласно изобретению для внутреннего контрольного образца используют суспензию бактериофага MS2 с концентрацией 5×103 копий нуклеотидных последовательностей на 1 мкл, а для положительного контрольного образца используют смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома возбудителя вируса Шмалленберга и фрагмент генома бактериофага MS2 взятых в соотношении 1:1 со следующими нуклеотидными последовательностями:

при этом накопление флуоресцентного сигнала измеряют по каналам:

JOE/ Yellow для специфического сигнала возбудителя вируса Шмалленберга;

Cy5/Red для сигнала внутреннего контроля, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считают положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции - отрицательный.

Новизна заявляемого технического решения заключается в том, что для получения достоверной диагностики вируса болезни Шмалленберга используют две последовательные реакции: обратной транскрипции вирусной РНК для получения кДНК и полимеразной цепной реакции для амплификации фрагмента полученной кДНК матрицы. Обе реакции проводятся последовательно в одной ПЦР-пробирке (one-tube) с использованием специфичных для участка генома артериита олигонуклеотидных праймеров, флуоресцентно-меченого зонда и разных видов контроля для которых используют различные формы материала бактериофага MS2: суспензия и фрагмент генома со специфическими к нему праймерами и зондом. Такая постановка ОТ-ПЦР в реальном времени сокращает и упрощает процедуру анализа, снижает риск контаминации и возможность ошибки при переносе кДНК в другую пробирку для ПЦР. Кроме того, детекция продуктов амплификации осуществляется с использованием принципа выщепления флуоресцентной метки на 5' конце олигонуклеотидного зонда.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».

Заявляемый способ рекомендовано использовать в ветеринарной вирусологии, а именно к средствам диагностики возбудителя вируса болезни Шмалленберга, что соответствует критерию «промышленная применимость».

Сущность изобретения поясняется чертежом, где представлены скриншоты графиков и таблицы, на рис. 1 - представлен канал Cy5/Red - для тестирования сигнала внутреннего контрольного образца (ВКО), на рис. 2 представлен канал JOE/Yellow для специфического сигнала возбудителя вируса Шмалленберга; на рис. 3 - таблица количественных данных для Cycling A. A.Yellow (вирус Шмалленберга) и A.Red (ВКО).

Способ выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у сельскохозяйственных животных осуществляется следующим образом.

Для исследования с целью выделения РНК используют биологический материал животных по выбору: цельная кровь, сыворотка крови, фрагменты тканей и органов взятые от животных инфицированных возбудителем вируса болезни Шмалленберга. Для внутреннего контрольного образца используют суспензию бактериофага MS2 с концентрацией 5×103 копий нуклеотидных последовательностей на 1 мкл, а для положительного контрольного образца используют смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома возбудителя вируса болезни Шмалленберга и фрагмент генома бактериофага MS2 взятых в соотношении 1:1, со следующими нуклеотидными последовательностями:

Затем измеряют накопление флуоресцентного сигнала измеряют по каналам: JOE/ Yellow для специфического сигнала возбудителя вируса Шмалленберга; Cy5/Red для сигнала внутреннего контроля, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считают положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции - отрицательный.

Вирус болезни Шмалленберг является представителем семейства буньявирусы (Bunyaviridae), рода ортобуньявирусы (Orthobunyavirus), серогруппы Симбу (Simbu serogroup). Вирус состоит из трех сегментов, называемых S (короткая), М (средняя) и L (длинная) и передается через кровососущих насекомых. Праймеры комплементарны консервативной области гена нуклеокапсидного белка N вируса болезни Шмалленберг (Schmallenberg virus N, NSs genes for nucleocapsid protein, non-structural protein, complete cds, strain: 167/Wiltshire/2012, код доступа LC309157.1, участок между 360 и 446) и не комплементарны каким-либо участкам геномов других вирусов. Праймеры были спроектированы с использованием Primer Express Software v3.0 (Applied Biosystems) и исследованы с использованием BLAST, чтобы подтвердить их специфичность. Для детекции продуктов амплификации был подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченый зонд Shm-Z (комплементарный участку нуклеотидной последовательности, ограниченной позициями отжига праймеров Shm-F и Shm-R). Зонд был помечен красителем HEX. Для гашения самопроизвольной флуоресценции на 3'-конце олигонуклеотидного зонда прикреплен гаситель BHQ-1 Используя программу "Oligo 6.0" описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР.

С помощью программы «O1igo 6.0» проанализирована нуклеотидная последовательность бактериофага MS2 (Enterobacteria phage MS2 isolate ST4, complete genome. ACCESSION EF204940). Бактериофаг MS2 содержит однонитевую позитивно ориентрованную РНК размером 3569 оснований. В результате анализа внутри гена белка `созревания` (maturation protein) выбран участок между 200 и 350 нуклеотидами, содержащий уникальные нуклеотидные последовательности, рассчитаны первичные структуры олигонуклеотидных праймеров, фланкирующих выбранный участок генома. Для детекции продуктов амплификации подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченый зонд MS2P, комплементарный участку нуклеотидной последовательности, ограниченной позициями отжига праймеров MS2F и MS2R. Используя программу «Oligo 6.0» описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР.

Пример конкретного осуществления способа выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у сельскохозяйственных животных.

Для исследования используют следующий материал:

- Цельную кровь забирают в пробирку с ЭДТА, желательно использовать одноразовые системы взятия крови. Закрытую пробирку с кровью несколько раз переворачивают.

- Сыворотку крови для ее получения берут 5 мл крови в пробирку без антикоагулянта. Желательно использовать одноразовые системы взятия крови.

- Фрагменты тканей и органов павших животных (головной мозг, спинной мозг, плацента, пуповина), отбирают в стерильный контейнер.

- Околоплодную жидкость новорожденных животных с пороками развития и мертворожденных плодов, берут в объеме не менее 1 мл в стерильные пробирки.

- Кровососущие насекомые, переносчики вируса (комары, мокрецы), отбирают не менее 20 особей в контейнер.

Исследуемые образцы подготавливают следующим образом.

Пробы цельной крови с ЭДТА, сыворотки крови, околоплодной жидкости используют без предварительной подготовки. Для экстракции РНК используют 50 мкл цельной крови, околоплодной жидкости или 100 мкл сыворотки.

Из тканей и органов вырезают небольшие кусочки до 1 г весом. Растирают в отдельных фарфоровых ступках, добавляют по 5-10 мл стерильного физиологического раствора и тщательно перемешивают. Смесь отстаивают при комнатной температуре в течение 3 мин, после чего переносят 50 мкл верхней фазы в пробирки типа «Эппендорф» и используют для экстракции РНК.

Пробу комаров (используют 20-40 особей) растирают в 1 мл стерильного физиологического раствора с использованием стерильных фарфоровых ступок и пестиков Полученные суспензии центрифугируют при 12 тыс об/мин в течение 1 мин. Для экстракции РНК используют 100 мкл надосадочной жидкости.

Далее проводят анализ с помощью набора реагентов «ПЦР-ШМАЛЛЕНБЕРГ-ФАКТОР»

Набор состоит из комплектов 1 и 2 реагентов для проведения обратной транскрипции и мультиплексной ПЦР РВ и контрольных образцов.

Наборы используют в соответствии с инструкцией по применению набора реагентов «ПЦР-ШМАЛЛЕНБЕРГ-ФАКТОР» для выявления РНК вируса Шмалленберга в биологическом материале методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакцией (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени (ОТ ПЦР РВ) ТУ 21.10.60-122-51062356-2016 (для диагностики in vitro) http://www.vetfaktor.ru/.

Состав набора приведен в таблицах 1 и 2.

* Возможна легкая опалесценция

Анализ состоит из трех этапов:

- экстракция (нуклеиновых кислот) НК;

- проведение ОТ-ПЦР РВ;

- учет результатов анализа.

Реакция ОТ-ПЦР РВ проводится в одной пробирке.

Экстракция (выделение) НК из клинического материала

Отбирают необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл, включая отрицательный контроль выделения. Вносят во все пробирки, включая пробирку для отрицательного контрольного образца (ОКО), внутренний контрольный образец (ВКО SHMAL) по 10 мкл.

Внести исследуемые пробы в объеме согласно инструкции к набору для выделения НК, в пробирку отрицательного контроля выделения вместо исследуемой пробы внести ОКО (пробирку обозначают как ВК-).

Выделять НК из анализируемых и контрольных образцов согласно протоколу инструкции производителя набора для выделения НК.

Выделенную РНК можно хранил, до 3 часов при температуре от 2°C до 8°C или в течение месяца при температуре не выше минус 68°C.

Подготовка образцов к проведению ОТ-ПЦР РВ

Общий объем реакционной смеси - 25 мкл, объем РНК-пробы - 10 мкл.

Успешное прохождение реакции контролируют использованием положительного контрольного образца (ПКО SCHMAL), ВКО SCHMAL и РНК буфера.

В отдельной пробирке смешивают компоненты набора из расчета на каждую реакцию:

5 мкл ПЦР СМЕСЬ SCHMAL

10 мкл ПЦР БУФЕР SCHMAL

0,75 мкл RT PCR ENZ

Перемешивают смесь на вортексе и сбрасывают капли кратковременным центрифугированием. Отбирают необходимое количество пробирок для амплификации НК исследуемых и контрольных проб. Затем вносят по 15 мкл приготовленной реакционной смеси, используя наконечники с фильтром в подготовленные пробирки:

а) в пробирку отрицательного контроля ПЦР (К-) 10 мкл РНК буфера;

б) в ряд пробирок для исследуемых проб - в каждую внести по 10 мкл НК соответствующей пробы, (включая пробу ВК-);

в) в пробирку с положительным контролем ПЦР (К+) 10 мкл ПКО SCHMAL.

Проведение ОТ-ПЦР РВ с флуоресцентной детекцией

Параметры температурно-временного режима амплификации на приборе «Rotor-Gene Q», представлены в таблице 3.

Поместить подготовленные для проведения ПЦР пробирки в ячейки амплификатора. Запрограммировать прибор согласно инструкции производителя.

После завершения программы амплификации отработанные пробирки утилизируют в соответствии с МУ 1.3. 2569 -09.

Учет результатов анализа

Полученные данные - кривые накопления флуоресцентного сигнала анализируются с помощью программного обеспечения используемого прибора для проведения ПЦР в соответствии с инструкцией производителя к прибору и в соответствии с Приложениями 2, 3, 4 и 5 Инструкции.

Учет результатов ОТ-ПЦР РВ проводится по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией (что соответствует наличию или отсутствию значения порогового цикла «Ct» для исследуемого образца).

Результат считается достоверным в случае корректного прохождения положительных и отрицательных контролей амплификации и экстракции НК в соответствии с таблицей 4 и рис. 1, 2, 3.

Появление любого значения Ct (см. таблице 4, рис. 1,2) результатов для отрицательного контроля этапа экстракции ВК- на канале JOE (HEX)/Yellow и для отрицательного контроля этапа ОТ-ПЦР К- на любом из каналов свидетельствует о наличии контаминации реактивов или образцов. В этом случае результаты анализа по всем пробам считаются недействительными. Требуется повторить анализ всех проб, а также предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации.

Образцы, для которых по каналу Cy5/Red значение Ct отсутствует или превышает 35 цикл (при этом по каналу JOE (HEX)/Yellow значение Ct также отсутствует) требуют повторного проведения исследования с этапа ПЦР (таблица 4. Задержка в значениях пороговых циклов для исследуемых образцов на канале Cy5/Red указывает на присутствие ингибиторов в пробах или на ошибки при постановке реакции ОТ-ПЦР РВ. Требуется провести исследование, начиная с этапа экстракции НК.

Образец считается положительным (РНК вируса Шмалленберга обнаружена) если наблюдается экспоненциальный рост сигнала на канале JOE(HEX)/Yellow, при этом значения Ct контрольных образцов находятся в пределах нормы (табл. 4, рис. 2, 3). Если для исследуемого образца по каналу JOE(HEX)/ Yellow значение Ct определяется позднее 37 цикла при корректном прохождении положительных и отрицательных контролей - он считается спорным и исследуется повторно с этапа выделения НК. Если при повторной постановке наблюдается схожий результат (Ct на канале JOE(HEX)/Yellow > 37), требуется повторное взятие материала от того же животного для проведения ПЦР-исследования и (или) использование альтернативных методов диагностики.

Для оценки специфичности предлагаемых внутреннего и положительного контрольных образцов для метода обратной транскрипции и полимеразной цепной реакцией (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени (ОТ ПЦР РВ)ОТ-ПЦР РВ» для выявления РНК вируса Шмалленберга в биологическом материале исследовали препараты РНК, выделенной из образцов, содержащих гетерологичные вирусы и кровь от интактных животных.

Показано отсутствие неспецифических реакций компонентов набора в отношении НК следующих вирусов и микроорганизмов: Bovine coronavirus, Bovine leukemia virus, Bovine respiratory syncytial virus, Bovine viral diarrhoea virus, Rotavirus, Brucella abortus, Pasteurella multocida, Leptospira interrogans, Listeria monocytogenes, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium paratuberculosis, Escherichia coli, Campylobacter fetus, Clostridium perfringens, Salmonella dublin, Staphylococcus aureus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pseudotuberculosis. Также показано отсутствие неспецифических реакций компонентов набора в отношении образцов ДНК КРС, овец, свиньи, курицы, человека, а также комаров рода Culex.

Для оценки чувствительности ОТ-ПЦР РВ проводили постановку реакции с использованием в качестве матрицы титрованного препарата транкрипта, полученного на рекомбинантной плазмиде, содержащей ограниченный праймерами ShmF и ShmR фрагмент генома вируса болезни Шмалленберг. Чувствительность системы составила 105 г-экв/мл.


Способ выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у сельскохозяйственных животных
Способ выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у сельскохозяйственных животных
Способ выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у сельскохозяйственных животных
Способ выявления РНК вируса болезни Шмалленберга у сельскохозяйственных животных
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 191-200 of 465 items.
04.06.2019
№219.017.7378

Система аутентификации пользователей в промышленных условиях

Изобретение относится к вычислительной технике. Технический результат заключается в обеспечении проведения аутентификации с возможностью восстановления утерянных аутентификационных и идентификационных данных. Система аутентификации пользователей включает блок считывания аутентификационной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690221
Дата охранного документа: 31.05.2019
06.06.2019
№219.017.7412

Способ повышения оплодотворения коров и телок при однократном осеменении

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ повышения оплодотворяемости коров и телок при однократном осеменении, включающий выявление половой охоты по активности поведения животного, ректальное клиническое обследование половых органов и фолликулов...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690657
Дата охранного документа: 04.06.2019
06.06.2019
№219.017.7464

Вращающаяся печь для приготовления цементного клинкера

Изобретение относится к устройствам для получения цемента, в частности к вращающейся печи для приготовления цементного клинкера, и может быть использовано в цементной промышленности, строительстве и производстве строительных материалов. Печь содержит установленный горизонтально и смонтированный...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690624
Дата охранного документа: 04.06.2019
06.06.2019
№219.017.748e

Печь для обжига цемента

Изобретение относится к печи для обжига цемента. Печь содержит барабан, расположенный горизонтально и смонтированный на плите, закрепленной с помощью упругих элементов на основании, снабженный виброактиватором и расположенной внутри по всей длине барабана пружиной с устройством для изменения...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690622
Дата охранного документа: 04.06.2019
07.06.2019
№219.017.74c6

Зерноуборочная машина

Изобретение относится к сельскохозяйственному машиностроению. Зерноуборочная машина включает жатку, корпус молотильного устройства и воздушно-решетную систему очистки с приводом. Задняя часть корпуса молотильного устройства снабжена для сбора соломы, половы и семян сорной растительности...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690649
Дата охранного документа: 05.06.2019
07.06.2019
№219.017.74f8

Установка для выделения жидкой фракции из материалов

Изобретение относится к охране окружающей среды, в частности к охране почвенных ресурсов от техногенных загрязнений в зоне влияние предприятий и организаций, в том числе кормооткормочных комплексов, птицефабрик, свиноферм, т.е. и к сельскому хозяйству, в частности, к оборудованию для разделения...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690822
Дата охранного документа: 05.06.2019
07.06.2019
№219.017.751b

Селекционная установка для обмолота початков кукурузы

Изобретение относится к сельскохозяйственному машиностроению. Селекционная установка для обмолота початков кукурузы содержит молотильный аппарат с двумя расположенными параллельно вальцами и загрузочное устройство, расположенное у продольной стороны одного из вальцов. Один валец имеет выступы...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690794
Дата охранного документа: 05.06.2019
08.06.2019
№219.017.75a9

Линия для получения белкового корма для сельскохозяйственных животных в реальном времени

Изобретение относится к области сельского хозяйства и предназначено для приготовления белкового корма для животных. Линия включает емкость для обогащающих питательных микроэлементов, экструдер, смеситель, емкость для хранения и выдачи готового корма, воздушно-решетную зерноочистительную машину,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690882
Дата охранного документа: 06.06.2019
09.06.2019
№219.017.762f

Способ прогнозирования зон развития вторичных коллекторов трещинного типа в осадочном чехле для поиска залежей углеводородов

Изобретение относится к области геофизики и может быть использовано для поиска зон развития вторичных коллекторов углеводородов трещинного типа в осадочном чехле. Сущность: осуществляют прогноз и поиск месторождений углеводородов и ряда характеристик этих месторождений по топографическим...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002690977
Дата охранного документа: 07.06.2019
13.06.2019
№219.017.80cc

Станок для шлифования семян

Изобретение относится к области сельскохозяйственного машиностроения. Станок для шлифования семян содержит шлифовальный барабан, внутренняя поверхность которого покрыта слоем резины, с разгрузочным окном, с размещенным внутри шлифовального барабана рабочим органом в виде пружины, оборудованной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002691316
Дата охранного документа: 11.06.2019
Showing 191-200 of 324 items.
01.09.2018
№218.016.81c8

Способ выращивания высокопродуктивных бройлеров

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к способу выращивания высокопродуктивных бройлеров. Способ характеризуется тем, что, начиная с 14-дневного возраста, бройлерам дополнительно вводят в рацион совместно «Бетулин» в количестве 2,5 мг на голову и пробиотик Моноспорин в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002665485
Дата охранного документа: 30.08.2018
04.10.2018
№218.016.8e31

Улавливатель микроорганизмов

Изобретение относится к гигиене и санитарии и предназначено для определения количества микроорганизмов в воздухе. Предложен улавливатель микроорганизмов. Указанный улавливатель содержит конусообразную емкость с крышкой, блок фильтров в верхней части емкости, отверстие диаметром 3-5 мм для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002668820
Дата охранного документа: 02.10.2018
04.10.2018
№218.016.8e51

Способ профилактики маститов у высокопродуктивных коров

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к способу профилактики маститов у высокопродуктивных коров. Сущностью изобретения является то, что разработана фармакологическая композиция, состоящая из доксициклина как действующего вещества, диметилглицеролатов кремния, глицеролатов...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002668535
Дата охранного документа: 01.10.2018
19.10.2018
№218.016.9423

Способ получения биологически активной добавки к пище, обладающей антиоксидантными и гепатопротекторными свойствами

Изобретение относится к пищевой промышленности и может быть использовано для получения высококачественной биологически активной добавки (БАД), обладающей антиоксидантными и гепатопротекторными свойствами. Способ получения БАД к пище, обладающей антиоксидантными и гепатопротекторными свойствами,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002670149
Дата охранного документа: 18.10.2018
19.10.2018
№218.016.9433

Амиды 5-о-гемисукцината авермектина в, способ их получения и антипаразитарные средства на их основе

Изобретение относится к области химии макролидов, а именно к неизвестным ранее соединениям - амидам гемисукцината авермектина B общей формулы I, R=a: NH-CH-CH b: N(Et) с: NHCH(CH)CHOCHd: NH(CH)CH e: NH(CH)CH f: NH(CH)CH g: NH(CH)CH h: j: обладающим антипаразитарной активностью, а также к...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002670107
Дата охранного документа: 18.10.2018
19.10.2018
№218.016.9454

Кормовая добавка, обладающая антиоксидантными свойствами

Изобретение относится к комбикормовой промышленности и может быть использовано для получения кормовой добавки, обладающей антиоксидантными свойствами, применяемой для кормления животных и птицы. Кормовая добавка, обладающая антиоксидантными свойствами, содержит в качестве активного начала...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002670118
Дата охранного документа: 18.10.2018
19.10.2018
№218.016.946c

Этиловый эфир 5-о-сукцината авермектина в, способ его получения и антипаразитарное средство на его основе

Изобретение относится к области химии макролидов, а именно к неизвестному ранее соединению - этиловому эфиру 5-О-сукцината авермектина В формулы I, обладающему антипаразитарной активностью, а также к способу его получения, заключающемуся в том, что авермектин B (III) подвергают взаимодействию с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002670092
Дата охранного документа: 18.10.2018
21.10.2018
№218.016.94d4

5,4"-бис[(арил)амино](тиоксо)ацетаты ивермектина, способ их получения и антипаразитарные средства на их основе

Изобретение относится к области химии макролидов, а именно к неизвестным ранее соединениям - 5,4''- бис[(арил)амино](тиоксо) ацетатам ивермектина общей формулы I (1 а-j), обладающим антипаразитарной активностью, а также к способу их получения и антипаразитарным средствам на их основе. Способ...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002670202
Дата охранного документа: 19.10.2018
21.11.2018
№218.016.9f93

Способ лечения гепатозов у крупного рогатого скота

Изобретение относится к ветеринарной медицине и предназначено для лечения гепатозов у крупного рогатого скота. Коровам с интервалом в 5 дней курсом 45 дней по 10 мл парентерально вводят масляный раствор гепатопротектора, содержащего 0,03-0,06% диацетофенонилселинида, 0,09-0,18% бета-каротина,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002672863
Дата охранного документа: 20.11.2018
25.01.2019
№219.016.b3e2

Способ производства мясорастительных котлет с мясом страуса

Изобретение относится к пищевой промышленности, а именно к технологии получения полуфабрикатов на мясорастительной основе. Способ производства мясорастительных котлет предусматривает измельчение на волчке мяса, лука репчатого свежего, свежего картофеля, куттерирование с одновременным введением...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002678118
Дата охранного документа: 23.01.2019
+ добавить свой РИД