Фармакологическое средство для лечения язвенной болезни желудка

Изобретение относится к медицине, а именно фармакологии, гастроэнтерологии и может быть использовано для профилактики и лечения язвенной болезни желудка.

Несмотря на снижение общей и первичной заболеваемости язвенной болезнью желудка в России за последние годы, смертность от этого заболевания повышается. Это связано с частым возникновением осложнений, таких как перфорация, переход в злокачественное образование.

Широко используемыми средствами лечения язвенной болезни остаются традиционные препараты, действие которых обусловлено снижением кислотности в желудке (блокаторы протонного насоса, антагонисты гистаминовых рецепторов), эрадикацией H.Pilory (амоксициллин, кларитромицин), созданием «защитной пленки» на поверхности слизистой. Наряду с высокой эффективностью, эти препараты имеют ряд нежелательных побочных эффектов (различные нарушение пищеварения, головные боли, аллергические реакции), так как являются ксенобиотиками для организма.

На сегодняшний день актуальным является представление о язвенной болезни желудка как о системном гастроэнтерологическом заболевании со сложным патогенезом, включающим экзо- и эндогенные факторы. Среди эндогенных факторов важную роль играет нарушение нейрогуморальной регуляции, которое может происходить как на центральном, так и периферическом уровне.

Важная роль в данном случае отводится эндогенным пептидам, осуществляющим ряд регулирующих функций. Олигопептиды не являются ксенобиотиками для человека и обладают высокой биологической активностью. В связи с этим высок интерес современного научного сообщества к поиску пептидных препаратов с гастропротекторным действием. В ряде работ показано действие глипролинов на процессы в слизистой оболочке желудка в различных условиях, изучалась роль мелатонина и других пептидов в процессах ульцерогенеза. В России зарегистрирован пептидный препарат Даларгин, обладающий эффективностью при язвенной болезни желудка.

Наиболее близким по достигаемому результату прототипом является средство трипептид Pro-Gly-Pro обладающее гастропротекторным действием (патент РФ 2217158). Его вводят внутрибрюшинно в количестве 1,0-1,25 мг/кг или перорально в количестве 0,1-0,9 мг/кг. Способ обеспечивает противоязвенный эффект, выражающийся в уменьшении процента площади пораженной слизистой: от 61 до 74% на фоне этаноловой язвы, 62% на фоне стрессовой язвы, 67% на фоне ацетатной язвы.

Недостатками названного средства являются недостаточно высокая эффективность противоязвенного действия, кроме того, данное средство обладает и другими видами биологической активности: антикоагулянтной, фибринолитической и фибриндеполимеризационной, которые могут вызывать нежелательные побочные эффекты, в том числе внутрижелудочные кровотечение из-за снижения свертываемости крови.

Авторы предлагают новое фармакологическое средство для лечения язвенной болезни, обладающее высоким терапевтическим действием на фоне НПВС-индуцированной язвенной болезни желудка.

Техническим результатом заявляемого изобретения является расширение ассортимента средств для лечения язвенной болезни желудка.

Технический результат достигается тем, что в качестве фармакологического средства для лечения язвенной болезни желудка используется трипептид Leu-Ile-Lys (лейцин - изолейцин - лизин).

Фармакологические свойства средства для лечения язвенной болезни желудка найдены экспериментальным путем.

Эксперименты по изучению эффективности средства для лечения язвенной болезни желудка были проведены на 24 самцах крыс Wistar средней массой 150 г), разделенных поровну на 3 группы: контрольная (моделирование язвенной болезни желудка), подопытная (моделирование язвенной болезни желудка + введение трипептида Leu-Ile-Lys (лейцин - изолейцин - лизин) и группа сравнения (моделирование язвенной болезни желудка + введение препарата сравнения омепразола).

Модель индометацинового повреждения слизистой желудка крыс воспроизводили путем однократного внутрижелудочного введения индометацина в дозе 60 мг/кг в 1 мл физиологического раствора. Трипептид Leu-Ile-Lys (лейцин - изолейцин - лизин) вводили животным подопытной группы внутрижелудочно через зонд ежесуточно в течение 7 дней до моделирования индометацинового повреждения слизистой желудка в дозе 11,5 мг/кг. Последнее введение приходилось за 1 ч до начала действия язвообразующего фактора. Животным группы сравнения вводили препарат сравнения омепразол в дозе 37 мг/кг, животные контрольной группы получали эквиобъемные количества физиологического раствора в соответствующих режимах введения.

По окончании эксперимента крыс подвергали эвтаназии, желудки извлекали, вскрывали по малой кривизне, промывали холодным физиологическим раствором и фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. В каждом случае на макроскопическом уровне в слизистой оболочке желудка (СОЖ) подсчитывали среднее общее число эрозий, среднее число глубоких полосовидных эрозий, число поверхностных точечных эрозий, а также процентное распределение различных видов повреждений. Высчитывали индекс Паулса (ИП), или индекс изъязвления для каждого вида повреждений по формуле: (N×K)/100, где N - среднее число деструкций на 1 животное, K - процент поражений животных в группе.

При микроскопическом исследовании проводили морфологическую оценку картины язвенной болезни в желудках экспериментальных животных.

Для этого материал фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Препараты окрашивали гематоксилином и эозином. Гистохимическое выявление нейтральных мукополисахаридов осуществляли с помощью ШИК-реакции, кислые мукополисахариды выявляли при помощи окраски альциановым синим (рН-2,5). Плотность воспалительного инфильтрата подсчитывали в 1 мм² при помощи окулярной сетки Автандилова Г.Г. Морфометрические измерения слизистой оболочки желудка (СОЖ) осуществляли при помощи морфометрической программы Image Tool 3.0. Статистический анализ проводили при помощи программы «Statistica for Windows 6.0». Рассчитывали среднее значение, стандартную ошибку, для выявления достоверности различий использовали критерий Манна-Уитни. Результаты исследований представлены в примерах.

Пример 1.

При макроскопическом исследовании поверхность СОЖ крыс контрольной группы выглядела деструктивно, были отчетливо видны изменения в виде глубоких полосовидных и поверхностных точечных эрозий (Фиг. 1). Число повреждений СОЖ составило в среднем 9,6 эрозий на крысу. При этом 51% повреждений был представлен глубокими полосовидными эрозиями. Индекс Паулса для полосовидных эрозий составил 24 (таблица).

При микроскопическом исследовании СОЖ у крыс контрольной группы выглядела арофичной, покровно-ямочный эпителий находится в состоянии дистрофии. Некротические изменения в язвенных дефектах достигали мышечного слоя. Во многих эрозиях отмечались массивные отложения солянокислого гематина. В мышечном слое фиксировались явления отека и умеренно выраженного воспаления.

Пример 2.

У животных подопытной группы исследования макроскопически СОЖ выглядела ровной, атрофических изменений обнаружено не было. Деструктивные изменения имели невыраженный характер, они проявлялись лишь в виде мелких точечных эрозий (Фиг. 2). Подобные деструктивные изменения были выявлены у всех животных. Число точечных эрозий варьировало от 1 до 2 и в среднем число повреждений составило 1,75±0,25 на 1 животное, то есть на 81,7% меньше, чем в контрольной группе (таблица). Эрозии располагались преимущественно в верхней трети СОЖ. Средняя глубина эрозий была меньше на 85,3%. Индекс Паулса для точечных эрозий составил - 1,75.

Толщина СОЖ по периферии эрозий была больше на 36,6%. При гистохимическом окрашивании ШИК-реактивом на нейтральные мукополисахариды столбчатый эпителий поверхностных отделов СОЖ давал хорошо выраженную реакцию. При окрашивании по Стидмену на кислые мукополисахариды интенсивное окрашивание выявлялось в клетках глубоких отделах желудочных ямок. В подслизистом слое отмечали явления слабо выраженного воспаления.

Пример 3.

У животных группы сравнения макроскопически СОЖ выглядела ровной, складки выражены слабо, атрофических изменений обнаружено не было. Слабо выраженные деструктивные изменения в виде мелких точечных эрозий, содержащих солянокислый гематин, определялись лишь на некоторых участках. Подобные деструктивные изменения были выявлены у 71,4% животных. Все повреждения были представлены точечными эрозиями (Фиг. 3). В подслизистом слое видны явления слабо выраженного воспаления. Сосуды умеренно полнокровны. Число повреждений СОЖ было уменьшено на 85,4% по сравнению с контролем заболевания, толщина слизистой увеличена почти на 45%. Глубина точечных эрозий на 70% меньше, чем в контроле заболевания (таблица).

Примечание: * обозначены достоверные отличия по сравнению с контрольной группой.

Заявляемое средство в эксперименте проявило выраженное фармакологическое действие при язвенной болезни, проявившееся в предотвращении появления наиболее опасных полосовидных эрозий, уменьшении количества эрозий на 81,7% и их глубины на 85,3% по сравнению с контролем. Эффективность заявляемого средства исходя из результатов статистического анализа сопоставима с эффективностью препарата традиционной терапии омепразола.