СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЯЗКОСТИ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, стоматологии, терапии, и может быть использовано для изучения свойств роговой жидкости.

Качественный состав ротовой жидкости отражает весь спектр органических метаболитов крови: глюкоза, аминокислоты, лактат, пируват, цитрат, мочевина, мочевая кислота, креатинин, некоторые представители класса липидов, витамины и гормоны.

В последние годы отмечен значительный рост интереса к разработке методов диагностики различных заболеваний путем анализа ротовой жидкости (смешанной слюны) и слюны. Внимание исследователей обращено на так называемые интегральные показатели ротовой жидкости, которые могут быть использованы в качестве диагностических и прогностических тестов. В этом плане перспективным является изучение вязкости ротовой жидкости.

Известен способ исследования вязкости ротовой жидкости с помощью U-образного вискозиметра Освальда и его модификаций (Вавилова Т.П., Слюна. Аналитические возможности и перспективы / Т.П. Вавилова, О.О. Янушевич, И.Г. Островская. - М.: Издательство Бином, 2014. - 312 с., с. 85). С помощью вискозиметра Освальда определяют время прохождения между двумя метками аппарата вначале дистиллированной воды, а затем ротовой жидкости. Вычисляют вязкость по соотношению времени вытекания ротовой жидкости и вытекания дистиллированной воды. При расчетах исходят из того, что вязкость дистиллированной воды при температуре 20°С равна 1 сантипуаз (сП).

Определяют вязкость по формуле:

V=t₁/t₂,

где t₁- время вискозиметрии слюны; t₂ - время вискозиметрии воды.

Известен способ определения вязкости ротовой жидкости по Рединовой-Поздееву (Вавилова Т.П., Слюна. Аналитические возможности и перспективы / Т.П. Вавилова, О.О. Янушевич. И.Т. Островская. - М.: Издательство Бином, 2014. - 312 с., с. 86). Для определения вязкости ротовой жидкости требуется пипетка объемом 1,0 мл. До начала исследования пипетку калибруют на дистиллированную воду. Для этого ее устанавливают и удерживают рукой в вертикальном положении, набирают воду до отметки, равной 1,0 мл. Затем палец отпускают, и вода начинает вытекать. После того как вода начала вытекать по секундомеру устанавливают точный отрезок времени - 5 сек. За такой промежуток времени из пипетки вытекает 0,92 мл воды. Затем набирают 1 мл ротовой жидкости, палец отпускают и фиксируют количество ротовой жидкости, вытекшей за 5 сек. Вязкость ротовой жидкости определяют в относительных единицах (отн. ед.).

Расчет осуществляют исходя из соотношения: VB/VC=BC/BB,

где VB - объем вытекшей воды (мл); VC - объем вытекшей ротовой жидкости (мл); ВС - вязкость ротовой жидкости (отн. ед.); ВВ - вязкость воды равна 1,0 (отн. ед.).

Окончательно формула определения вязкости ротовой жидкости принимает вид:

BC=VB/VC=0,92/VC.

По данным авторов диапазон показателей вязкости ротовой жидкости в норме составляет 1,5-4,0 отн. ед. или сП.

Указанные способы являются сложными в проведении, особенно вискозиметрия, требуют для исследования большего количества ротовой жидкости и затрат по времени на ее получение, проведение исследований осуществляется специалистом - лаборантом.

Технический результат заявленного изобретения заключается в упрощении исследования и сокращении времени его проведения.

Заявленный технический результат достигается в способе определения вязкости ротовой жидкости, включающем нанесение на фильтровальную бумагу, помещенную в рамку типа пяльцев, с одинаковой высоты от поверхности фильтровальной бумаги ротовой жидкости и дистиллированной воды в объеме 1 капли, измерение через одну минуту после нанесения диаметров растекшихся капель и определение вязкости ротовой жидкости по формуле

КВС=ДВ/ДС,

где КВС - вязкость ротовой жидкости, отн. ед.;

ДВ - средний диаметр пятна растекшейся капли воды, мм;

ДС - средний диаметр пятна растекшейся капли ротовой жидкости, мм.

За счет размещения фильтровальной бумаги в рамке типа пяльцев создается одинаковое поверхностное натяжение фильтра, так как он не касается поверхности рабочего стола, которая может быть изготовлена из различных материалов, влияющих на энергетику распределения исследуемой жидкости по поверхности фильтра (фиг. 1, 2). Это создает стандартные условия при проведении серий исследований и обеспечивает возможность их сравнения и статистической обработки.

Для исследования требуется ротовая жидкость в объеме 1 капли, для этого достаточно забирать со дна полости рта пипеткой ротовую жидкость в объеме 3-4 капли.

Учитывая, что жидкость растекается в виде неправильного круга, для расчетов используют их средние диаметры: измеряют наибольший и наименьший диаметры пятна и находят их среднее значение.

Исследование вязкости ротовой жидкости предложенным способом не требует сложного оборудования, специальных навыков и подготовки и может быть использовано как в медицинских учреждениях, так и самостоятельно пациентами в домашних условиях.

Способ поясняется изображениями, на которых:

на Фиг. 1 представлено сравнение результатов исследования ротовой жидкости больного в разных условиях размещения фильтровальной бумаги - в рамке и на столе;

на Фиг. 2 - сравнение результатов исследования дистиллированной воды (контроль) в разных условиях размещения фильтровальной бумаги - в рамке и на столе.

Способ осуществляют, например, следующим образом.

Ротовую жидкость получают всегда в одно и то же время, утром через 1,5-2,0 часа после завтрака. Для исследования ротовую жидкость забирают со дна полости рта пипеткой в объеме 3-4 капли. Фильтровальную бумагу помещают в специальную рамку типа пяльцев и наносят на нее с высоты 1 см от ее поверхности при помощи пипетки ротовую жидкость в объеме 1 капли (Фиг. 1). Через одну минуту после нанесения капли, контуры растекшейся капли обводят, измеряют наибольший и наименьший диаметры пятна и находят средний диаметр пятна растекшейся капли ротовой жидкости.

Контролем служит дистиллированная вода, которую аналогичным образом наносят на фильтровальную бумагу и через одну минуту после нанесения определяют средний диаметр пятна растекшейся капли: (Фиг. 2).

Вязкость ротовой жидкости определяют по формуле

КВС=ДВ/ДС,

где КВС - вязкость ротовой жидкости, отн. ед.;

ДВ - средний диаметр пятна растекшейся капли воды, мм;

ДС - средний диаметр пятна растекшейся капли ротовой жидкости, мм.

По заявленному способу было проведено обследование 19 человек, из них 10 здоровых людей в возрасте 18-30 лет (6 мужчин и 4 женщины) и 9 больных в возрасте 18-90 лет (4 мужчины и 5 женщин). У 8 больных была гипертоническая болезнь III стадии. 4 (44,5%) больных имели до двух сопутствующих заболеваний, 2 (22,2%) - до трех и 3 (33,3%) - более трех сопутствующих заболеваний. У всех обследованных проводилось исследование состояния ротовой полости с обязательной оценкой гигиенического индекса (индекс Грин-Вермильона), индекса поражения кариесом (индекс КПУ), оценка состояния слизистой оболочки полости рта протезного ложа (по Суппле).

Оценивали показатели: вязкость ротовой жидкости (КВС) и поверхностное натяжение ротовой жидкости (ПНС).

Вязкость ротовой жидкости определяли по заявленному способу.

Поверхностное натяжение ротовой жидкости определяли методом Рединовой Т.Л. (Вавилова Т.П., Слюна. Аналитические возможности и перспективы / Т.П. Вавилова, О.О. Янушевич, И.Г. Островская. - М.: Издательство Бином, 2014. - 312 с., с. 86), но бумажные фильтры закрепляли в устройстве типа пяльцев. ПНС рассчитывали по формуле ПНС=72,7×SC/SB ,где SC - площадь растекшейся капли ротовой жидкости, SB - площадь растекшейся капли воды.

Для исследования ротовой жидкости использовали бумажные фильтры (КРАСНАЯ ЛЕНТА, обеззоленные для количественных и качественных анализов, диаметром 12.5 см: ТУ 6-09-1678-95: код ОКП 2642210050; Изготовитель - ЗАО «НПО Экрос», Санкт-Петербург) и специальную рамку - устройство типа пяльцев, состоящее из двух металлических цилиндров (фиг. 1, 2).

Установлены значения нормальных показателей вязкости и поверхностного натяжения ротовой жидкости (Таблица).

Полученные данные существенно не отличаются от результатов других исследований, определяющих вязкость слюны указанными выше методами.

В группе обследованных больных мужчин с ГБ III стадии средние показатели КВС были существенно выше, чем у больных женщин: 1,75±0,46 и 1,4±0,25 отн. ед. соответственно, а средние значения ПНС были значительно ниже, чем у обследованных женщин: 26,2±8,12 и 46.7±10,56 мН/м соответственно. Это указывает на тенденцию развития синдрома повышенной вязкости ротовой жидкости у обследованных мужчин с ГБ Ш стадии.

Установлены достоверные сильные обратные корреляционные зависимости между вязкостью ротовой жидкости и поверхностным натяжением ротовой жидкости как у здоровых (r=-0,927; р<0,01), так и больных с полиморбидной патологией (r=-0,900; р<0,01).

Установлены достоверные сильные прямые корреляционные зависимости между вязкостью ротовой жидкости и индексом поражения кариесом (КПУ) как у здоровых (r=0,821; р<0,01), так и больных с полиморбидной патологией (r=0,927; р<0,01). Следовательно, повышение вязкости смешанной слюны может быть прогностическим в отношении развития кариеса.

Значение КВС выше 1,48 является неблагоприятным в отношении кариеса прогностическим показателем.

Неудовлетворительное состояние гигиены ротовой полости характеризуется повышением вязкости ротовой жидкости и снижением ПНС. Критическим является уровень вязкости ротовой жидкости >1,69 отн. ед.

2,3 класс состояния слизистой оболочки полости рта протезного ложа также характеризуется повышением вязкости ротовой жидкости. Критическим: является уровень вязкости ротовой жидкости >1,79 отн. ед.

Установлено, что концентрация креагинина в крови обследованных больных находится в достоверных корреляционных зависимостях со значениями показателей вязкости ротовой жидкости (r=0,789; р<0,01) и поверхностного натяжения ротовой жидкости (r=-0,726; р<0,01). Креатининемия, которая свидетельствует о повреждении органов-мишеней при ГБ (почки), является одним из факторов риска повышения вязкости ротовой жидкости. Повышение уровня креатинина и сахара в крови у обследованных больных сопровождалось повышением: показателей вязкости ротовой жидкости и снижением ПНС, а, следовательно, развитием синдрома повышенной вязкости ротовой жидкости.

Вязкость ротовой жидкости у здоровых находится в достоверной сильной прямой зависимости с уровнем систолического артериального давления (АДс) (r=0,724; р<0,05).

У больных с полиморбидной патологией установлено наличие достоверной сильной обратной корреляционной зависимости между ПНС и АДс (r=-0,701; р<0,05).

У обследованных отмечена тенденция к повышению вязкости ротовой жидкости и снижению поверхностного натяжения ротовой жидкости с увеличением: возраста как в группе здоровых, так и больных с полиморбидной патологией. Увеличение КВС отмечено у курящих обследованных здоровых людей.

Таким образом, наиболее информативным является показатель КВС, который существенно взаимосвязан с возрастом, индексом КПУ, курением, показателями гемодинамики, как у здоровых, так и обследованных больных с полиморбидной патологией.

Исследование вязкости ротовой жидкости предложенным способом возможно в качестве простого маркера синдрома повышенной вязкости ротовой жидкости, метода экспресс-диагностики и скрининговых исследований с целью его выявления.

Способ прост в исполнении, не требует сложного оборудования, специальных навыков и подготовки, может быть использован как в медицинских учреждениях, так и самостоятельно пациентами в домашних условиях, создает стандартные условия при проведении исследований и обеспечивает возможность сравнения результатов и их статистаческой обработки.