×
17.07.2019
219.017.b511

Результат интеллектуальной деятельности: Тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к области биотехнологии. Описана тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Тест-система включает в себя буфер для проведения полимеразной цепной реакции, смесь для ее проведения, состоящую из дезоксинуклеозидтрифосфатов, праймеров и флуоресцентных зондов, специфичных для ротавируса А, смесь ферментов из ДНК полимеразы с антителами, ингибирующих активность фермента, TAQ POLYMERASE и обратной транскриптазы MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE. Смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома вируса RVA и фрагмент генома бактериофага MS2, содержит следующие нуклеотидные последовательности: RVF5 5'-ATTTCAGTTGATGAGACCA-3'; прямой праймер; RVR6 5'-CAATTCTAAGCGTGAGTCC-3' обратный праймер; зонд RVP FAM - 5'-AATATGACACCAGCGGTA-3' - BHQ1, MS2F, 5'-TGGCACTACCCCTCTCCGTATTCAC-3' - прямой праймер; MS2R, 5'-GTACGGGCGACCCCACGATGAC-3' - обратный праймер; зонд MS2P, Су5 5'-CACATCGATAGATCAAGGTGCCTACAAGC-3' BHQ2. Изобретение расширяет арсенал средств для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных. 4 табл., 1 пр.

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, а именно к средствам диагностики ротовирусной инфекции у животных, как в практике ветеринарной службы, так и для научных исследований.

Известна тест-система для обнаружения РНК вируса инфекционной болезни, путем проведения полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием специфичных для участка генома возбудителя инфекции олигонуклеотидных праймеров, флуоресцентно-меченного зонда и контрольных образцов (патент РФ №2515916, кл. C12N 15/11, 2014).

Также известна тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовирусной инфекции с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени, включающий буфер для проведения полимеразной цепной реакции, смесь для ее проведения состоящая из дезоксинуклеозидтрифосфатов, праймеров и флуоресцентных зондов специфичные для ротавируса А, смесь ферментов из ДНК полимеразы с антителами, ингибирующих активность фермента, TAQ POLYMERASE и обратной транскриптазы MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE; буфер для разведения РНК в виде деионизованной воды, внутренний контрольный образец, отрицательный контрольный образец, положительный контрольный образец, (патент РФ №2506317, C12Q 1/68, 2014 г. - прототип).

Общим недостатком известных технических решений является отсутствие возможности диагностики ротовирусной инфекции у животных.

Техническим результатом является расширение функциональных возможностей и получение достоверной диагностики с помощью ОТ - ПЦР в реальном времени.

Технический результат достигается тем, что в тест-системе для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени, включающей буфер для проведения полимеразной цепной реакции, смесь для ее проведения, состоящая из дезоксинуклеозидтрифосфатов, праймеров и флуоресцентных зондов специфичные для ротавируса А, смесь ферментов из ДНК полимеразы с антителами, ингибирующих активность фермента, TAQ POLYMERASE и обратной транскриптазы MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE, буфер для разведения РНК в виде деионизованной воды, внутренний контрольный образец, отрицательный контрольный образец, положительный контрольный образец, согласно изобретению для внутреннего контрольного образца используют суспензию бактериофага MS2 с концентрацией 5×103/мл, а для положительного контрольного образца используют смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома вируса RVA и фрагмент генома бактериофага MS2, взятых в соотношении 1:1, со следующими нуклеотидными последовательностями:

RVAF5 5'- ATTTCAGTTGATGAGACCA -3'; прямой праймер;

RVAR6 5'- CAATTCTAAGCGTGAGTCC -3' обратный праймер;

зонд RVAP FAM - 5'-AATATGACACCAGCGGTA-3'- BHQ1,

MS2F, 5'-TGGCACTACCCCTCTCCGTATTCAC-3'- прямой праймер;

MS2R, 5'-GTACGGGCGACCCCACGATGAC-3'- обратный праймер;

зонд MS2P, Су5 5'-CACATCGATAGATCAAGGTGCCTACAAGC-3' BHQ2.

Новизна заявляемого технического решения заключается в том, что для получения достоверной диагностики ротовирусной инфекции животных используют тест-систему с использованием специфичных для участка генома ротавируса типа А олигонуклеотидных праймеров флуоресцентно-меченного зонда и разных видов контроля для которых используют различные формы материала бактериофага MS2: суспензия и фрагмент генома со с специфическими к нему праймерами и зондом.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».

Заявляемый способ рекомендовано использовать в ветеринарной вирусологии, а именно в качестве средств диагностики ротовирус А у животных, как в практике ветеринарной службы, так и для научных исследований, что соответствует критерию «промышленная применимость».

Использование заявляемых олигонуклеотидных праймеров RVAF5, RVAR6 и флуоресцентно-меченного зонда RVAP обеспечивает специфическое выявление РНК ротавируса типа А у животных.

Использование разных видов контроля для которых используют различные формы материала бактериофага MS2: суспензия и фрагмент генома со специфическими к нему праймерами и зондом, бактериофага MS2 обусловлено тем, что это позволяет контролировать корректное прохождение реакции в каждой пробирки, а также контролируется этап выделения РНК из образцов.

Для выбора последовательности и расчета первичной структуры олигонуклеотидных праймеров и зондов, был проведен сравнительный анализ доступных в базе данных GenBank нуклеотидных последовательности гена RVP6, кодирующего белок внутренней оболочки капсида вируса и являющегося важнейшим компонентом вириона (inner capsid protein gene) ротавирусов, входящих в семейство реовирусов. Как и другие представители этого семейства, ротавирусы обладают двунитевой фрагментированной РНК, размером порядка 18 500 пар нукдеотидов.

С помощью программы "BioEdit 7.0" выравнены нуклеотидные последовательности гена VP6 генома вирусов - представителей родов Ротавирусов (А-Н видов) и орбивирусов последовательностью гена VP6 генома ротавируса А изолята NCDV (Bovine rotavirus NCDV inner capsid protein VP6 mRNA (код доступа AF317127). В результате анализа построенного элайнмента

внутри гена капсидного белка VP6 выбран участок между 500 и 900 нуклеотидами, содержащий уникальные нуклеотидные последовательности. С помощью программы "Oligo 6.0" рассчитаны первичные структуры олигонуклеотидных праймеров, фланкирующих выбранный участок генома. Для детекции продуктов амплификации подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченный зонд RVAP, комплементарный участку нуклеотидной последовательности, ограниченной позициями отжига праймеров RVAF5 и RVAR6. Используя программу "Oligo 6.0" описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР.

С помощью программы "Oligo 6.0" проанализирована нуклеотидная последовательность бактериофага MS2 (Enterobacteria phage MS2 isolate ST4, complete genome.ACCESSION EF204940). Бактериофаг MS2 содержит однонитевую позитивно ориентрованную РНК размером 3569 оснований. В результате анализа внутри гена белка `созревания` (maturation protein) выбран участок между 200 и 350 нуклеотидами, содержащий уникальные нуклеотидные последовательности, рассчитаны первичные структуры олигонуклеотидных праймеров, фланкирующих выбранный участок генома. Для детекции продуктов амплификации подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченный зонд MS2P, комплементарный участку нуклеотидной последовательности, ограниченной позициями отжига праймеров MS2F и MS2R. Используя программу "Oligo 6.0" описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР.

Пример применения тест- системы для выявления генома

возбудителя ротовируса типаА у животных

Для исследования используют следующий материал:

- фекалии весом 5 г. отбирают в стерильный пластиковый контейнер.

- из тканей кишечника вырезают кусочки размером 1 см3 и помещают в стерильный контейнер. Далее обрабатывают исследуемый материал.

Пробы тканей кишечника с содержимым (до 1 г) гомогенизируют с использованием стерильных фарфоровых ступок и пестиков, затем готовят 10% суспензию на стерильном физиологическом растворе. Суспензию переносят в пробирку объемом 1,5 мл и центрифугируют при 9000 об/мин в течение 1 мин. Аликвоту надосадочной жидкости (0,1 мл) используют для экстракции РНК.

Из фекалий (1-5 г) готовят 10% суспензию на стерильном физиологическом растворе. Взвесь фекалий декантируют в течение 5-10 минут. Отбирают 1 мл надосадочной жидкости и переносят в чистую пробирку 1,5 мл, центрифугируют при 5000 об./мин на центрифуге «MiniSpin», Eppendorf, в течение 5 мин. Экстракцию РНК из осветленного экстракта фекалий проводят по возможности, сразу. При необходимости хранения замораживают.

Анализ проводят с помощью набора реагентов (см. таблицу 1 и 2). «ПЦР-РОТАВИРУС-ФАКТОР» Технические условия ТУ 21.10.60-102-51062356-2015, ранее 9398-102-51062356-2015 «ПЦР-РОТАВИРУС-ФАКТОР, http://www.vetfaktor.ru/» набор реагентов для выявления РНК ротавируса типа А в клиническом материале методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Анализ состоит из трех этапов:

- экстракция НК;

- проведение ОТ-ПЦР РВ с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени;

- учет результатов анализа.

Реакция ОТ-ПЦР РВ проводится в одной пробирке.

Экстракция (выделение) НК из исследуемых проб

Отбирают необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл, включая отрицательный контроль выделения. Вносят во все пробирки с исследуемыми образцами, включая пробирку для ОКО (отрицательный контрольный образец), по 10 мкл ВКО RVA (внутренний контрольный образец).

В набор не входят реактивы для экстракции НК. Выделение РНК может проводиться, например, с помощью наборов на основе сорбционного метода, в состав которых входит силика или микроцентрифужные колонки, наборов на основе фенол-хлороформной экстракции и т.п. Рекомендуется использовать набор «ДНК/РНК-С-ФАКТОР» http://www.vetfaktor.ru/ либо аналогичный.

Подготовка образцов к проведению ПЦР

Общий объем реакционной смеси - 25 мкл, объем РНК-пробы - 10 мкл.

Успешное прохождение реакции контролируют использованием ПКО RV, ВКО RV и РНК буфера.

При формировании ПКО количество внесенных рекомбинантных плазмид составляет 5000 копий специфического фрагмента в 1 мкл.

Буфер для проведения ОТ-ПЦР, ПЦР буфер RV; состав: 2,5х ПЦР-буфер (хлорид калия, 100 мМ, Трис-HCl, рН 8,8 100 мМ, глицерол 1%, Tween-20 0.02%); хлорид магния, 5 мМ; деионизированная вода.

- Смесь для проведения ПЦР, ПЦР-смесь RV состав: эквимолярная смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов (дНТФ) в концентрации 0,25 мМ («Синтол», Россия); деионизированная вода, для ПКО: смесь праймеров и флуоресцентного зонда на ротавирус А (прямой и обратный праймеры RVF и RVR в концентрации 0,2 мкМ, зонд RVP-FAM в концентрации 0,1 мкМ, т.е. в соотношении 1:1:0,5), смесь праймеров и флуоресцентного зонда на (бактериофага MS2) (прямой и обратный праймеры MS2F и MS2R с концентрацией 0,2 мкМ, зонд MS2P -Су5 в концентрации 0,1 мкМ, в соотношении 1:1:0,5) («Синтол», Россия). Смесь праймеров и флуоресцентного зонда на ротавирус А и смесь праймеров и флуоресцентного зонда на бактериофага MS2 берется в соотношении 1:1.

Смесь ферментов, RT PCR ENZ, состав: ДНК полимераза с антителами, ингибирующими активность фермента, TAQ POLYMERASE (5 ед/мкл) («Альфа-фермент», Россия), обратная транскриптаза MMLV REVERSE TRANSCRIPTASE (100 ед/мкл) («Альфа-фермент», Россия).

Буфер для разведения РНК, РНК буфер, состав: деионизованная вода.

Внутренний контрольный образец, ВКО RV; состав: суспензия бактериофага MS2 с концентрацией 5×103/мл.

- Отрицательный контрольный образец, ОКО (ТЕ буфер); состав: ТЕ буфер (10 мМ Tris-HCl, 0,5 мМ EDTA, рН 8,0)

- Положительный контрольный образец, ПКО RV; состав: смесь рекомбинантных плазмидных ДНК, содержащих фрагмент генома вируса RVa А и фрагмент генома бактериофага MS2, взятых в соотношении 1:1.

В отдельной пробирке смешивают компоненты набора из расчета на каждую реакцию:

10 мкл ПЦР БУФЕР RV

5 мкл ПЦР СМЕСЬ RV

0,75 мкл RT PCR ENZ.

Перемешивают смесь на вортексе и сбрасывают капли кратковременным центрифугированием. Отбирают необходимое количество пробирок для амплификации НК исследуемых и контрольных проб. Вносят по 15 мкл приготовленной реакционной смеси.

Используя наконечники с фильтром в подготовленные пробирки вносят:

а) в пробирку отрицательного контроля ПЦР (К-) 10 мкл РНК буфера;

б) в ряд пробирок для исследуемых проб - в каждую внести по 10 мкл НК соответствующей пробы;

в) в пробирку с положительным контролем ПЦР (К+) 10 мкл ПКО RV.

Проводят реакции ПЦР РВ с флуоресцентной детекцией на приборах «Rotor-Gene Q», «ДТ-96» и «CFX96».

Помещают подготовленные для проведения ПЦР пробирки в ячейки амплификатора и программируют прибор.

Синтез кДНК проводят при температуре 55°С в течение 15 мин, а затем терминируют реакцию 5-минутным прогреванием реакционной смеси при температуре 95°С. Далее следует стадия ПЦР.

Температурный режим для проведения ПЦР включает 40 циклов амплификации (95°С - 15 сек, 58°С - 30 сек, 72°С - 20 сек). Обе реакции проводятся в одной пробирке последовательно, без открывания пробирки и переноса материала.

Детекция продуктов амплификации осуществляется методом регистрации флуоресценции, накапливающейся в результате разрушения гибридизационного зонда, содержащего на 5'-конце флуорофор (FAM/Cy5), а на 3'-

конце - гаситель (BHQ1/BHQ2). В реакции используется два зонда одновременно, пара FAM -BHQ1 для мишени RV и пара Су5 - BHQ2 для MS2. В отсутствие мишени флуорофор и гаситель сближены и наблюдается лишь незначительная флуоресценция, так как гаситель поглощает испускаемое флуорофором излучение. В процессе ПЦР зонд гибридизуется на участок одной из нитей ампликона, при синтезе комплементарной нити ДНК Taq=полимераза приближается к флуорофору, что ведет к его разрушению за счет 5'-экзонуклеазной активности Taq-полимеразы. В результате флуорофор отделяется от гасителя и его излучение может быть детектировано. Таким образом, увеличение количества синтезированного ПЦР-продукта приводит к росту сигнала флуоресценции.

В результате ПЦР получают данные - кривые накопления флуоресцентного сигнала, которые анализируются с помощью программного обеспечения используемого прибора для проведения ПЦР в режиме «реального времени».

Учет результатов ОТ-ПЦР проводится по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией (что соответствует наличию или отсутствию значения порогового цикла «Ct» для исследуемого образца.

Результат считается достоверным в случае корректного прохождения положительных и отрицательных контролей амплификации и экстракции НК в соответствии с таблицей 4.

Появление любого значения Ct в таблице результатов для отрицательного контроля этапа экстракции (ВК-) на канале FAM/Green и для отрицательного контроля этапа ПЦР (К-) на любом из каналов свидетельствует о наличии контаминации реактивов или образцов. В этом случае результаты анализа по всем пробам считаются недействительными. Требуется повторить анализ всех проб, а также предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации.

Анализ результатов амплификации для канала Cy5/Red (ВКО) по графику (рис 2) показал характерное экспоненциальное нарастание флуоресцентного сигнала. Образцы, для которых по каналу Cy5/Red значение Ct отсутствует или превышает 35 цикл (при этом по каналу FAM/ Green значение Ct также отсутствует) требуют повторного проведения исследования с этапа ПЦР. Задержка в значениях пороговых циклов для исследуемых образцов на канале Cy5/Red указывает на присутствие ингибиторов в пробах или на ошибки при постановке реакции ОТ-ПЦР. Требуется провести исследование, начиная с этапа экстракции НК.

Анализ результатов амплификации для канала FAM/Green (Ротавирус А) по графику (рис. 1) показал характерное экспоненциальное нарастание флуоресцентного сигнала. Образец считается положительным, РНК ротавируса А присутствует, т.к. наблюдается рост специфического сигнала на канале FAM/Green, при этом значения Ct контрольных образцов находятся в пределах нормы (см. Табл. 4). Если для исследуемого образца по каналу FAM7 Green значение Ct определяется позднее 35 цикла при корректном прохождении положительных и отрицательных контролей - он считается спорным и исследуется повторно с этапа выделения НК. Если при повторной постановке наблюдается схожий результат (наблюдается рост специфического сигнала на канале FAM/Green) - образец считается положительным.

Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 171-180 из 465.
27.04.2019
№219.017.3d2a

Питательная среда для культивирования лактобактерий

Изобретение относится к микробиологии и сельскому хозяйству и может быть использовано для получения пробиотической добавки с целью повышения мясной продуктивности перепелов. Предложенная питательная среда для культивирования лактобактерий состоит из мелассы кормовой, KНРО, дрожжевого экстракта...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002686326
Дата охранного документа: 25.04.2019
27.04.2019
№219.017.3da6

Установка для разделения отходов откормочного комплекса

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к оборудованию для разделения отходов откормочных комплексов на жидкие и сгущенные фракции; к пищевой промышленности, например для обезвоживания сырья при производстве пектина, отделения жидкой фазы из сыпучих материалов, при сушке...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002686221
Дата охранного документа: 24.04.2019
09.05.2019
№219.017.49f7

Многофункциональный агрегат для обработки почвы

Изобретение относится к области сельскохозяйственного машиностроения. Многофункциональный агрегат для обработки почвы содержит энергосредство с несущей рамой, на которой симметрично установлены право- и левооборачивающие плужные корпуса с лемехами, отвалами и стойками, опорное колесо,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002687201
Дата охранного документа: 07.05.2019
14.05.2019
№219.017.5182

Способ измерения активных сопротивлений постоянному току обмоток силового трансформатора

Изобретение относится к области электрических измерений и может быть использовано при эксплуатации, ремонте или сушке трансформаторов. Техническим результатом является снижение трудоемкости измерения активного сопротивления обмоток трансформатора. Способ измерения сопротивлений постоянному току...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002687298
Дата охранного документа: 13.05.2019
24.05.2019
№219.017.5e13

Способ очистки навозных стоков

Изобретение может быть использовано в сельском хозяйстве для очистки животноводческих стоков. Способ включает предварительную очистку стоков флотацией и центрифугированием, затем очищенные стоки подвергают тонкодисперсному распылению с диаметром капель от 1,0 до 10,0 мкм в озоно-воздушной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002688610
Дата охранного документа: 21.05.2019
24.05.2019
№219.017.5eb1

Способ получения белкового корма для сельскохозяйственных животных в реальном времени

Изобретение относится к области сельского хозяйства и предназначено для использования в кормопроизводстве для приготовления белкового корма. Способ включает очистку, экструдирование фрагментов корзинок, стеблей подсолнечника и его семян, охлаждение продукта переработки масличных культур до...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002688481
Дата охранного документа: 21.05.2019
24.05.2019
№219.017.5f54

Копнитель зерноуборочного комбайна

Изобретение относится к сельскохозяйственному машиностроению. Копнитель зерноуборочного комбайна включает разъемный корпус из двух частей, образующих прессовальную камеру с загрузочным окном, расположенным у схода соломосепаратора. Между корпусом молотилки и копнителем расположен подающий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002688488
Дата охранного документа: 21.05.2019
24.05.2019
№219.017.5f67

Установка для стационарной выпойки телят

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к механизации животноводства, в частности к автопоилкам. Установка для стационарной выпойки телят содержит емкость для жидкого корма, трубопровод с патрубками, на которых установлены сосковые поилки, циркулирующий насос и подогреватель....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002688465
Дата охранного документа: 21.05.2019
29.05.2019
№219.017.6274

Способ получения пробиотической добавки для перепелов

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству. Предложен способ получения пробиотической добавки для перепелов, включающий культивирование микроорганизмов Lactobacillus agilis в среде, состоящей из мелассы кормовой - 45,0 г, КНРО - 2,0 г и дрожжевого экстракта - 0,02 г из расчета...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002688429
Дата охранного документа: 21.05.2019
29.05.2019
№219.017.62cc

Устройство для электролиза водных растворов

Изобретение относится к устройству для электролиза водных растворов, содержащему двухкамерный электролизер с корпусом из непроводящего ток материала, в котором размещены электроды прямоугольной формы с диафрагмой, патрубки для подвода и отвода жидкости, которые гидравлически связаны с входами...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002688183
Дата охранного документа: 21.05.2019
Показаны записи 171-180 из 219.
02.10.2019
№219.017.cf10

Тест-система для определения видовой принадлежности тканей кур и свиней в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой тест-систему для определения видовой принадлежности тканей кур и свиней в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах в тест-системе для определения видовой принадлежности тканей кур и свиней в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700480
Дата охранного документа: 17.09.2019
02.10.2019
№219.017.cf61

Способ выявления днк провируса лейкоза крупного рогатого скота (bovine leukosis virus, blv)

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ выявления ДНК провируса лейкоза крупного рогатого скота (Bovine leukosis virus, BLV), включающий выделение ДНК из биологического материала от инфицированных животных сорбционным методом, постановку одноэтапной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700245
Дата охранного документа: 13.09.2019
02.10.2019
№219.017.cfbf

Тест-система для выявления генома возбудителя бруцеллезной инфекции (brucella spp.) у сельскохозяйственных животных

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой тест-систему для выявления генома возбудителя бруцеллезной инфекции (Brucella spp.) у сельскохозяйственных животных с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, включающую пластиковые флаконы и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700255
Дата охранного документа: 13.09.2019
02.10.2019
№219.017.cff5

Тест-система для выявления днк провируса лейкоза крупного рогатого скота (bovine leukosis virus, blv)

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой тест-систему для выявления ДНК провируса лейкоза крупного рогатого скота (Bovine leukosis virus, BLV), включающую пластиковые флаконы и пробирки, термостабильный фермент Tag-полимеразу, буфер для постановки реакции,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700450
Дата охранного документа: 17.09.2019
02.10.2019
№219.017.d008

Способ выявления рнк возбудителя вируса артериита у лошадей

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ выявления РНК возбудителя вируса артериита у лошадей, включающий выделение РНК из биологического материала инфицированных особей сорбционным методом, синтез кДНК на матрице РНК путем постановки одноэтапной с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700481
Дата охранного документа: 17.09.2019
02.10.2019
№219.017.d08e

Способ выявления днк хламидий у сельскохозяйственных животных и птиц

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ выявления ДНК хламидий у сельскохозяйственных животных и птиц, включающий выделение ДНК хламидий Chlamydia spp. из биологического материала от инфицированных животных сорбционным методом, постановку...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700381
Дата охранного документа: 16.09.2019
02.10.2019
№219.017.d0ad

Способ выявления днк вируса ринотрахеита (bovine herpes virus 1, bohv-1) у крупного рогатого скота

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ выявления ДНК вируса ринотрахеита (bovine herpes virus 1, BoHV-1) у крупного рогатого скота, включающий выделение ДНК сорбционным методом, постановку одноэтапной полимеразной цепной реакции с одновременным...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700449
Дата охранного документа: 17.09.2019
02.10.2019
№219.017.d0e0

Способ определения видовой принадлежности тканей кур и свиней в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ определения видовой принадлежности тканей кур и свиней в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах, включающий выделение сорбционным методом ДНК из тканей курицы (Gallus gallus) и свиньи (Sus scrofa),...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700479
Дата охранного документа: 17.09.2019
02.10.2019
№219.017.d0e4

Способ выявления днк возбудителя лептоспироза (leptospira spp.) у сельскохозяйственных животных

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ выявления ДНК возбудителя лептоспироза (Leptospira spp.) у сельскохозяйственных животных, включающий выделение нуклеиновой кислоты из биологического материала от инфицированных животных сорбционным методом,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002700478
Дата охранного документа: 17.09.2019
12.10.2019
№219.017.d495

Инъекционное средство для лечения и профилактики заболеваний печени у животных

Изобретение относится к области ветеринарии и представляет собой инъекционное средство для лечения и профилактики заболеваний печени у животных, включающее бетаина гидрохлорид, L-орнитин, воду для инъекций, отличающееся тем, что дополнительно содержит сухой экстракт солянки холмовой,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002702658
Дата охранного документа: 09.10.2019
+ добавить свой РИД