×
17.04.2019
219.017.1539

Результат интеллектуальной деятельности: АЛЛЕРГОИД ИЗ ЯДА ПЧЕЛ ДЛЯ АЛЛЕРГЕН-СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИММУНОТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ С АЛЛЕРГИЧЕСКИМИ РЕАКЦИЯМИ НА УЖАЛЕНИЕ ПЧЕЛАМИ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и медицине. Аллергоид для аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергическими реакциями на ужаления пчелами содержит аллергенные фракции с молекулярной массой 3-12; 16-31; 38-46, а также 20 и 60 kD и получен путем полимеризации суммарно аллергенной фракции формальдегидом и стабилизации NaBH. Предложен способ получения аллергоида и способ аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергической реакцией на ужаления пчелами с использованием данного аллергена. Изобретение обеспечивает получение аллергоида с высокой специфической активностью и безопасностью при применении. 3 н. и 2 з.п.ф-лы, 2 табл.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается создания безопасного высокоэффективного гипосенсибилизирующего аллергоида с иммуностимулирующим эффектом для аллерген-специфической иммунотерапии больных, страдающих аллергией к яду пчел.

Аллергия, формирующаяся при ужалениях пчел, ос, признана наиболее опасным видом инсектной аллергии.

Яд пчел содержит ряд фармакологически и биохимически активных веществ: биогенные амины (норадреналин, гистамин, серотонин и др.), пептиды (мелиттин, Мс-пептид, МСП-пептид, секапин, минимин, терциатин и др.), ферменты (фосфолипазы А, В, гиалуронидазу, кислую и щелочную фосфатазы, и др.). В настоящее время описаны и представлены в соответствии с требованиями современной Международной Номенклатуры следующие аллергены пчелы медоносной (табл.1).

Отмечено также, что яд пчелы, осы и шмеля имеет общие антигенные детерминанты, с которыми может быть связан эффект перекрестно-аллергических реакции при укусах указанных насекомых. На укусы пчел формируются токсические реакции как локальные, так и системные. В основе аллергических реакций лежат иммунологические механизмы, в том числе обширные локальные (местные) реакции, анафилактические, по типу сывороточной болезни. Природа аллергического ответа на яд перепончатокрылых (Hymenoptera) характеризуется продукцией специфических IgE- и IgG-антител. Последние могут быть выявлены у пациентов в течение недель и месяцев с момента укуса. Большинство авторов полагает, что увеличение IgG-антител связывается с ростом "блокирующих" (защитных) антител в организме больного. Клинически защитный эффект этих антител не во всех случаях имел место. Наличие IgE-антител связывают с наличием позитивных кожных тестов у больных. Специфические к яду пчелы IgE-антитела выявлены в сыворотках больных с общей и сильно выраженной местной реакцией на ужаление перепончатокрылым. Значительные уровни специфических IgG-антител выявлены у пчеловодов, которые неоднократно подвергались ужалению, что, по-видимому, свидетельствует о возможных защитных функциях IgG-антител, титры которых резко возрастают и у больных после специфической иммунотерапии.

Из известной разработки аллергоидной формы аллергена из яда пчел следует, что при ужалении пчелами лиц, имеющих сенсибилизацию к яду перепончатокрылых, могут возникать острые аллергические реакции вплоть до анафилактического шока. Единственным надежным методом профилактики и терапии этих состояний является специфическая иммунотерапия (СИТ) аллергеном из яда пчел (ЯП). Однако в процессе СИТ при введении малых доз аллергенов сохраняется риск получения у больных реакций анафилактического типа.

Разработан препарат аллергоид (АЛД) из яда пчел Apis mellifera на основе модификации формальдегидом нативного аллергена с использованием иммунохимического (гель-хроматография, иммуноблоттинг) и клинико-лабораторного анализа (ИФА, хемилюминисценция). На основе главных аллергенов (фракции с ММ=3-12 kD, 16-31 kD, 38-46 kD) сформирована основная аллергенная фракция (ОАФ). В экспериментах на животных изучена динамика IgG-"блок"-антител по А.Д.Адо и соавт., 1991 (В.Н.Федосеева, А.И.Мартынов, И.А.Орлова, Т.Г.Федоскова. Разработка лечебной формы аллергоида из яда пчел. -"Аллергология и иммунология, том 4, №2, 2003, стр.84. Материалы V Съезда иммунологов и аллергологов СНГ, Санкт-Петербург, Россия, 8-11 июля 2003).

Задачей настоящего изобретения является создание препарата для аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергическими реакциями на ужаления пчелами, обладающего специфической активностью и безопасного.

Для решения поставленной задачи предлагается группа изобретений, объединенных единым изобретательским замыслом:

Аллергоид для аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергическими реакциями на ужаления пчелами, содержащий аллергенные фракции с молекулярной массой 3-12, 16-31, 38-46, а также 20 и 60 kD и полученный путем полимеризации суммарной аллергенной фракции формальдегидом и стабилизации NaBH4.

Предложен способ получения аллергоида, заключающийся в экстрагировании яда пчел, растворении яда в физрастворе, стабилизации сывороточным альбумином человека, осветлении, очищении диализом не более 3-х часов и выделении суммарной аллергенной фракции с последующей обработкой формальдегидом для полимеризации белков при смене температуры от +4°С до +22°С, по окончании полимеризации проводят диализ, центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 мин, стабилизируют NaBH4, лиофильно высушивают.

Осветление пчелиного яда проводят центрифугированием.

Полимеризацию осуществляют в течение 30 дней.

Предложен также способ аллерген-специфической иммунотерапии больных с аллергическими реакциями на ужаления пчелами, в котором используется вышеназванный аллергоид.

Для получения аллергоида проводят:

1) Растворение пчелиного яда в физиологическом растворе,

2) Стабилизацию пчелиного яда сухим ЧСА (сывороточный альбумин человека),

3) Осветление стабилизированного пчелиного яда центрифугированием,

4) Коррекцию рН (до 7,0),

5) Очистку диализом,

6) Хроматографию и выделение главных и минорных аллергенов,

7) Получение суммарной аллергенной фракции для перевода в аллергоидную форму (фракции с ММ=3-12, 16-31, 38-46 kD - главные; 20 и 60 kD - малые),

8) Изучение иммунохимических свойств,

9) Изучение биологических свойств,

10) Обработку суммарной аллергенной фракции формальдегидом, при которой происходит полимеризация белков, в течение 30 дней со сменой температурных режимов от 4 до 22°С,

11) Диализ,

12) Центрифугирование (6000 об/мин в течение 30 мин),

13) Стабилизацию NaBH4,

14) Лиофильное высушивание.

Проводили изучение иммунохимических свойств аллергоида, разработана схема АСИТ (аллерген-специфическая иммунотерапия), изучены биологические свойства аллергоида, специфическая активность, доказана безопасность препарата.

Для лечения больных с аллергическими реакциями на ужаление пчелами проводили симптоматическую терапию острой реакции на ужаление пчелы и аллерген-специфическую иммунотерапию аллергенами из яда пчел.

Разработана схема гипосенсибилизации животных, которая может быть использована в клинике. Принцип введения возрастающих доз по определенной схеме приведен в таблице 2.

Приведенные экспериментальные исследования и испытания на добровольцах показали, что заявленный аллергоид безвреден.

Таблица 1
Аллергены яда пчелы медоносной (Apis mellifera)
НазваниеАллергенMm
Apis mellifera (Honey bee)Api m 1 (Phosfolipase A2)16,000
Api m 2 (Hyaluronidase)44,000
Api m 4 (Melittin)3,000

1.Аллергоиддляаллерген-специфическойиммунотерапиибольныхсаллергическимиреакцияминаужаленияпчелами,характеризующийсятем,чтоонсодержиталлергенныефракциисмолекулярноймассой3-12;16-31;38-46,атакже20и60kDиполученныйпутемполимеризациисуммарноаллергеннойфракцииформальдегидомистабилизацииNaBH.12.Способполученияаллергоида,характеризующийсятем,чтоядпчелэкстрагируют,приэтомядрастворяютвфизрастворе,далеестабилизируютсывороточнымальбуминомчеловека,осветляют,затемочищаютдиализомнеболее3чивыделяютсуммарнуюаллергеннуюфракциюсмолекулярноймассой3-12;16-31;38-46,атакже20и60kD,которуюзатемобрабатываютформальдегидомдляполимеризациибелковприсменетемпературыот4до22°С,поокончанииполимеризациипроводятдиализ,центрифугируютпри6000об/минвтечение30мин,полученныйаллергоидстабилизируютNaBHилиофильновысушивают.23.Способпоп.2,осветлениепчелиногоядапроводятцентрифугированием.34.Способпоп.2,полимеризациюосуществляютвтечение30дней.45.Способаллерген-специфическойиммунотерапиибольныхсаллергическойреакциейнаужаленияпчелами,характеризующийсятем,чтоиспользуюталлергоидпоп.1.5
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 13.
27.10.2013
№216.012.781a

Способ регистрации изменения энергетического показателя живого организма, устройство для его осуществления и способ изготовления термочувствительного элемента этого устройства (варианты)

Группа изобретений относится к медицине. Способ регистрации заключается в том, что устанавливают в зоне измерений датчик, содержащий чувствительный элемент с нанесенным на него сорбирующим слоем, при этом в качестве чувствительного элемента датчика используют вещество, способное обратимо...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002496408
Дата охранного документа: 27.10.2013
27.12.2014
№216.013.16a9

Комплексный препарат на основе аллергенов пыльцы березы и мурамилпептидов

Изобретение относится к комплексному инъекционному препарату для лечения поллинозов методом АСИТ. Указанный препарат получают путем простого смешивания аллергоида пыльцы березы и мурамилпептида без проведения химической конъюгации составляющих, причем на дозу в 1000 PNU аллергоида добавляют 2...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002537225
Дата охранного документа: 27.12.2014
20.04.2015
№216.013.434d

Аллерготропины для лечения аллергии, вызываемой клещами домашней пыли

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и аллергологии, и может быть использовано для лечения аллергии к клещам домашней пыли. Для этого получают аллерготропин методом химической конъюгации аллергоида и синтетического высокомолекулярного иммуномодулятора -...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002548727
Дата охранного документа: 20.04.2015
20.09.2015
№216.013.7c1d

Устройство для определения влажности и температуры выдыхаемого человеком воздуха

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к средствам инструментальных методов медицинских исследований, и может быть использовано для контроля дыхательных функций организма. Технический результат, достигаемый изобретением, заключается в получении достоверных количественных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002563370
Дата охранного документа: 20.09.2015
27.05.2016
№216.015.4237

Рекомбинантный белок rec-mp, содержащий в своем составе последовательности миелопептидов для лечения вторичных иммунодефицитных состояний

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к получению рекомбинантного белка, содержащего в своем составе последовательности миелопептидов, и может быть использовано для лечения вторичных иммунодефицитов. Рекомбинантный белок (REC-MP) конструируют чередованием коротких активных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002585494
Дата охранного документа: 27.05.2016
13.01.2017
№217.015.7ec6

Способ получения биологически активных пептидов

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения рекомбинантного биологически активного пептида на основе пептидов, входящих в состав миелопида. Представленный способ включает трансфекцию клеток Escherichia coli BL21 (DE3) плазмидной ДНК рЕТ30а, несущей ген,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002601126
Дата охранного документа: 27.10.2016
25.08.2017
№217.015.98ea

Способ дифференциальной диагностики гиперчувствительности к яду пчелы (apis mellifera)

Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии и иммунологии, и может быть использовано при дифференциальной диагностике гиперреактивности (ГР) к яду пчел. Для этого выявляют в анамнезе пациента контакта с пчелой Apis mellifera. Определяют уровень общего IgE, уровень...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002609839
Дата охранного документа: 06.02.2017
25.08.2017
№217.015.a903

Способ прогнозирования развития аллергического ринита

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для прогнозирования развития аллергического ринита. Для этого проводят оценку экспрессии генов дифференцировочных факторов субпопуляций Т-хелперов: Tbet, GATA3, RORC. Рассчитывают величину 2 по формуле: , где 2...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002611402
Дата охранного документа: 21.02.2017
25.08.2017
№217.015.b30d

Способ прогнозирования характера течения хронического рецидивирующего афтозного стоматита путем оценки мукозального иммунитета

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может использоваться для прогнозирования характера течения хронического рецидивирующего афтозного стоматита путем оценки мукозального иммунитета. Способ включает определение бактерицидной активности образца слюны (БАС) методом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002613892
Дата охранного документа: 21.03.2017
25.08.2017
№217.015.b4df

Оптимизированный ген, кодирующий рекомбинантный белок - аналог интерферона бета человека

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению интерферонов, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка - аналога интерферона бета. Нуклеотидная последовательность, кодирующая рекомбинантный белок - аналог интерферона бета, оптимизирована...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002614264
Дата охранного документа: 24.03.2017
Показаны записи 1-10 из 16.
27.10.2013
№216.012.781a

Способ регистрации изменения энергетического показателя живого организма, устройство для его осуществления и способ изготовления термочувствительного элемента этого устройства (варианты)

Группа изобретений относится к медицине. Способ регистрации заключается в том, что устанавливают в зоне измерений датчик, содержащий чувствительный элемент с нанесенным на него сорбирующим слоем, при этом в качестве чувствительного элемента датчика используют вещество, способное обратимо...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002496408
Дата охранного документа: 27.10.2013
27.12.2014
№216.013.16a9

Комплексный препарат на основе аллергенов пыльцы березы и мурамилпептидов

Изобретение относится к комплексному инъекционному препарату для лечения поллинозов методом АСИТ. Указанный препарат получают путем простого смешивания аллергоида пыльцы березы и мурамилпептида без проведения химической конъюгации составляющих, причем на дозу в 1000 PNU аллергоида добавляют 2...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002537225
Дата охранного документа: 27.12.2014
20.04.2015
№216.013.434d

Аллерготропины для лечения аллергии, вызываемой клещами домашней пыли

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и аллергологии, и может быть использовано для лечения аллергии к клещам домашней пыли. Для этого получают аллерготропин методом химической конъюгации аллергоида и синтетического высокомолекулярного иммуномодулятора -...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002548727
Дата охранного документа: 20.04.2015
20.09.2015
№216.013.7c1d

Устройство для определения влажности и температуры выдыхаемого человеком воздуха

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к средствам инструментальных методов медицинских исследований, и может быть использовано для контроля дыхательных функций организма. Технический результат, достигаемый изобретением, заключается в получении достоверных количественных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002563370
Дата охранного документа: 20.09.2015
27.05.2016
№216.015.4237

Рекомбинантный белок rec-mp, содержащий в своем составе последовательности миелопептидов для лечения вторичных иммунодефицитных состояний

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к получению рекомбинантного белка, содержащего в своем составе последовательности миелопептидов, и может быть использовано для лечения вторичных иммунодефицитов. Рекомбинантный белок (REC-MP) конструируют чередованием коротких активных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002585494
Дата охранного документа: 27.05.2016
13.01.2017
№217.015.7ec6

Способ получения биологически активных пептидов

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения рекомбинантного биологически активного пептида на основе пептидов, входящих в состав миелопида. Представленный способ включает трансфекцию клеток Escherichia coli BL21 (DE3) плазмидной ДНК рЕТ30а, несущей ген,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002601126
Дата охранного документа: 27.10.2016
25.08.2017
№217.015.98ea

Способ дифференциальной диагностики гиперчувствительности к яду пчелы (apis mellifera)

Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии и иммунологии, и может быть использовано при дифференциальной диагностике гиперреактивности (ГР) к яду пчел. Для этого выявляют в анамнезе пациента контакта с пчелой Apis mellifera. Определяют уровень общего IgE, уровень...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002609839
Дата охранного документа: 06.02.2017
25.08.2017
№217.015.a903

Способ прогнозирования развития аллергического ринита

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для прогнозирования развития аллергического ринита. Для этого проводят оценку экспрессии генов дифференцировочных факторов субпопуляций Т-хелперов: Tbet, GATA3, RORC. Рассчитывают величину 2 по формуле: , где 2...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002611402
Дата охранного документа: 21.02.2017
25.08.2017
№217.015.b30d

Способ прогнозирования характера течения хронического рецидивирующего афтозного стоматита путем оценки мукозального иммунитета

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может использоваться для прогнозирования характера течения хронического рецидивирующего афтозного стоматита путем оценки мукозального иммунитета. Способ включает определение бактерицидной активности образца слюны (БАС) методом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002613892
Дата охранного документа: 21.03.2017
25.08.2017
№217.015.b4df

Оптимизированный ген, кодирующий рекомбинантный белок - аналог интерферона бета человека

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению интерферонов, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка - аналога интерферона бета. Нуклеотидная последовательность, кодирующая рекомбинантный белок - аналог интерферона бета, оптимизирована...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002614264
Дата охранного документа: 24.03.2017
+ добавить свой РИД