×
10.09.2015
216.013.7772

СИНТЕТИЧЕСКИЕ ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫЕ ПРАЙМЕРЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В СПОСОБЕ ИДЕНТИФИКАЦИИ ШТАММОВ И ИЗОЛЯТОВ БАКТЕРИИ Pasteurella multocida СЕРОГРУППЫ D У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ.

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретения относятся к области ветеринарной микробиологии и касаются олигонуклеотидных праймеров для идентификации штаммов и изолятов бактерии Pasteurella multocida серогруппы D, а также способа с их использованием. Предложенный способ включает выделение культур микроорганизмов из патологического материала на искусственных питательных средах. Проведение ПЦР с синтетическими олигонуклеотидными праймерами, имеющими нуклеотидные последовательности SEQ ID NO:1 - 5' catcgcatccagaatagcaaact 3', SEQ ID NO:2 - 5' ctccgatgctttggttgtg 3' на район гена dcbF, отвечающего за синтез гепарозансинтетазы. Перенос продукта амплификации на гель и оценку проведения реакции. В случае положительной реакции синтезируется фрагмент, соответствующий размеру 355 п.н. Представленные изобретения могут быть использованы в ветеринарной микробиологии для диагностики пастереллеза сельскохозяйственных животных. 2 н.п. ф-лы, 5 табл., 1 ил., 4 пр.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии, а именно к генетической инженерии, и может быть использовано для диагностики пастереллеза сельскохозяйственных животных.

Pasteurella multocida - условно-патогенная грамотрицательная бактерия, постоянно обитающая на слизистой оболочки верхних дыхательных путей животных и птиц. На основании строения капсульного антигена все штаммы бактерии делятся на 5 серогрупп.Штаммы серогруппы D вызывают пневмонии у крупного рогатого скота и овец, а также атрофический ринит у свиней (Griffin, D. Bovine Pasteurellosis and Other Bacterial Infections of the Respiratory Tract / D. Griffin // Vet. Clin. Food. Anim. - 2010. №26. - P.57-71).

В нашей стране нашел применение способ типизации штаммов и изолятов Р. multocida серогруппы D методом акрифлавиновой пробы, основанный на способности к флокуляции культур бактерий этой серогруппы в растворе акрифлавина, включающий, получение бульонной культуры, ее отмывку, смешивание с водным раствором акрифлавина и оценку образовавшегося в течение 10-15 минут флокулята (Методические указания по лабораторной диагностике пастереллезов животных и птиц. Утверждены главным управлением ветеринарии министерства сельского хозяйства РФ. - 1992. - 20 с.).

К недостаткам данного способа можно отнести то, что флокулят могут образовывать диссоциированные культуры других серогрупп, что затрудняет интерпретацию результата. Требуется выделение и очистка на питательных средах культур Р. multocida. Очень низкая специфичность.

До настоящего времени за рубежом для типизации штаммов и изолятов Р. multocida серогруппы D, применяются серологические методы, основанные на реакции непрямой гемагглютинации или встречного иммуноэлектрофореза с использованием типоспецифических гипериммунных сывороток. (Chengappa, M.M. Identification of type D Pasteurella multocida by counterimmunoelectrophoresis. / M.M. Chengappa, G.R. Carter, W.E. Bailie // J. Clin. Microbiol. - 1986. - 24(5). - P.721-723).

Эти методы обладают более высокой специфичностью, по сравнению с акрифлавиновой пробой. К их недостаткам следует отнести необходимость получения чистых культур, невозможность типирования бескапсульных вариантов Р. multocida, длительность и трудоемкость.

Наиболее приемлемым, с точки зрения описанных недостатков и принятым за прототип, является способ, основанный на мультиплексной ПЦР для выявления Р. multocida и одновременного типирования капсульных групп А, В, D, E, F при помощи специфических праймеров: CAPA-F 5′-TGCCAAAATCGCAGTCAG-3′, CAPA-R5′-TTGCCATCATTGTCAGTG-3′, CAPB-F 5′-CATTTATCCAAGCTCCACC-3′, САРВ-R 5′-GCCCGAGAGTTTCAATCC-3′, CAPD-F 5′-TTACAAAAGAAAGACTAGGAGCCC-3′, CAPD-R 5′-CATCTACCCACTCAACCATATCAG-3′, CAPE-F 5′-TCCGCAGAAAATTATTGACTC-3′, CAPE-R 5′- GCTTGCTTGATTTTGTC-3′, CAPF-F 5′-AATCGGAGAACGCAGAAATCA-3, CAPF-R 5′-TTCCGCC-GTCAATTACTCTG-3′, KMT1T7- 5′-ATCCGCTATTTACCCAGTGG-3′ KMT1SP6 5′-GCTGTAAACGAACTCGCCAC-3′. В ходе реакции со штаммами и изолятами Р. multocida серогруппы D синтезируются 2 фрагмента, размером 460 и 657 п.н. (Townsend, K.M. Genetic organization of Pasteurella multocida cap loci and development of a multiplex capsular PCR typing system / K.M. Townsend, J.D. Boyce, J.Y. Chung, A.J. Frost, B. Adier // Journal of Clinical Microbiology. - 2001. - №39. - P.924-929).

Способ используется в качестве быстрого альтернативного метода типирования и, в отличие от серологических методов, позволяет определять принадлежность к серогруппе бескапсульных вариантов бактерии. Как и любая мультиплексная ПЦР, данный способ имеет низкую чувствительность и предназначен только для типирования чистых культур.

Задачей изобретения является разработка высокоспецифичного и чувствительного способа на основе полимеразной цепной реакции (ПЦР), позволяющего идентифицировать штаммы и изоляты бактерии Pasteurella multocida серогруппы D у крупного рогатого скота в пробах патологического материала от больных животных, смешанных и чистых бактериальных культурах.

Поставленная задача решается тем, что подобраны и синтезированы синтетические олигонуклеотидные праймеры для идентификации штаммов и изолятов бактерии Pasteurella multocida серогруппы D у крупного рогатого скота, согласно изобретению, праймеры имеют нуклеотидные последовательности: SEQ ID NO:1-5′ catcgcatccagaatagcaaact 3′, SEQ ID NO:2-5′ ctccgatgctttggttgtg 3′.

Задача решается также тем, что в способе идентификации штаммов и изолятов бактерии Pasteurella multocida серогруппы D у крупного рогатого скота с помощью синтетических олигонуклеотидных праймеров в полимеразной цепной реакции, включающем выделение ДНК из проб биоматериала или бактериальных культур и проведение полимеразной цепной реакции, согласно изобретению, используют синтетические олигонуклеотидные праймеры SEQ ID NO:1-5′ catcgcatccagaatagcaaact 3′, SEQ ID NO:2-5′ ctccgatgctttggttgtg 3′, полимеразную цепную реакцию проводят в 1 раунд, при получении фрагмента, соответствующего размеру 355 п.н., диагностируют штаммы и изоляты бактерии Pasteurella multocida серогруппы D.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Получение синтетических олигонуклеотидных праймеров.

Поиск новых синтетических олигонуклеотидных праймеров осуществляют на основе полного генома штамма Pasteurella multocida «HN06» в базе данных GenBank (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/GenBank/GenBankSearch.html), при помощи пакета программного обеспечения «Lasergen». Полученные последовательности нескольких пар праймеров дополнительно тестируют на специфичность с помощью моделирования ПЦР в программе "Vector NTI Suite" с последовательностями геномов представителей семейства Pasteurellaceae и Enterobacteriaceae, представленных в базе данных GenBank.

Окончательный выбор праймеров основывают на следующих критериях: высокий индекс сходства фрагмента и ДНК различных штаммов Pasteurella multocida серогруппы D, высокая температура отжига (GC- метод), большая длина консенсусов, отсутствие гетеродуплексов.

Химический синтез праймеров осуществляют амидофосфитным методом на автоматическом синтезаторе ASM-102U. Концентрацию синтетических олигонуклеотидных праймеров в маточном растворе определяют спектрометрическим методом.

Таким образом, были выбраны синтетические олигонуклеотидные праймеры, комплементарные высоко консервативной области генома Pasteurella multocida участка гена dcbF, отвечающего за синтез гепарозансинтетазы:

SEQ ID NO:1-5′ catcgcatccagaatagcaaact 3′,

SEQ ID NO:2-5′ ctccgatgctttggttgtg 3′.

Пример 2. Способ выявления бактерии Pasteurella multocida серогруппы D с помощью синтетических олигонуклеотидных праймеров в полимеразной цепной реакции (ПЦР) в пробах патологического материала и культурах бактерий.

Способ осуществляется в несколько этапов.

Этап 1. Подготовка проб патологического материала и бактериальных культур для исследования

Для исследования от павших или вынужденно убитых животных с признаками бронхопневмонии отбирают пробы внутренних органов (легких на границе нормального и измененного участка, бронхиальных и средостенных лимфатических узлов) не позднее 3-5 часов после гибели животного.

Из полученных проб делают посев методом отпечатков на мясопептонный агар с добавлением 5% дефибрированной крови барана (кровяной мясопептонный агар). Инкубируют в термостате при температуре 37°С в атмосфере 5% CO2.

Через 24±2 часа инкубации просматривают чашки Петри с агаром на наличие типичных для пастерелл колоний (прозрачных, диаметром до 3 мм, округлых с ровными краями, слизистой консистенции, серого цвета). Их этих колоний делают мазки на стекле и окрашивают их по Грамму для предварительного типирования. При обнаружении в мазке грамотрицательных кокобактерий, колонию отбирают для исследования в ПЦР.

Для этого отдельные колонии, не смешивая, снимают с поверхности агара, переносят в отдельные стерильные стеклянные пробирки, содержащие 200 мкл стерильной дистиллированной воды, перемешивают на вортексе. Взвесь бактерий разводят стерильной дистиллированной водой до концентрации 109 КОЕ/мл.

Пробы органов животных помещают в фарфоровые ступки, растирают с песком и разводят физиологическим раствором в соотношении 1/5-1/10, затем центрифугируют и надосадочную жидкость используют для выделения ДНК.

Взвесь бактерий к концентрации 109 КОЕ/мл используют для выделения ДНК без подготовки.

Этап 2. Выделение ДНК из проб биоматериала или взвеси бактерий.

Выделение ДНК проводят любым доступным способом, включающим лизис клеток, депротеинизацию лизата, осаждением ДНК из раствора, отмывку спиртами, высушивание и растворение ДНК в буферном растворе.

Этап 3. Амплификация участка ДНК Pasteurella multocida

Полимеразная цепная реакция. Состав реакционной смеси: ПНР-буфер (60 mM Tris-HCl [рН 8.5],1,5 мМ MgCl2, 25 тМ КСl, 10 мМ 2-меркаптэтанола, 0,1% Тритон Х-100), 0,2 мМ dNTP, no 0,2 мкг каждого праймера, 1.25 е.а. Taq-ДНК-полимеразы, 5 мкл выделенной ДНК.

Температурный режим проведения ПНР: 95°С - 5 мин - 1 цикл; 95°С - 10 сек, 55°С - 15 сек, 72°С - 20 сек - 35 циклов; 72°С - 5 мин.

Этап 4. Определение размера продуктов ПНР.

Продукты ПНР анализируют методом электрофореза в 2%-ном агарозном геле в стандартном трис-боратном буфере (рН 8,0) по стандартной методике. Результаты электрофореза учитывают, просматривая гель в ультрафиолетовом свете с длиной волны 254 нм на приборе «Трансиллюминатор».

Используют маркер молекулярного веса 100 bp. Результат ПНР считают положительным, если продукт ПЦР соответствует размеру фрагмента в 355 нуклеотидных пар.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет эффективно выявлять штаммы и изоляты бактерий вида Pasteurella multocida серогруппы D при помощи ПНР.

Пример 3. Определение чувствительности, специфичности и эффективности ПНР по заявленному способу и по способу, взятому за прототип

Для определения чувствительности реакции по заявленному способу в сравнении с прототипом суточную культуру контрольного штамма Pasteurella multocida «T80», выращенную на кровяном агаре, переносят в бактериологическую пробирку, содержащую 1000 мкл стерильной дистиллированной воды или физиологического раствора, разводят до концентрации 1011 КОЕ/мл, титруют методом 10-кратных разведений до разведения 101 КОЕ/мл, каждое разведение подвергают исследованию в ПЦР. Чувствительность разработанной ПЦР составляет 103 КОЕ/мл.

Результаты опытов по определению чувствительности реакции представлены в таблице 1.

Таблица 1
Концентрация Pasteurella multocida серогруппы D в пробе, КОЕ/мл Результаты ПЦР по заявленному способу Результаты ПЦР по способу, взятому за прототип
107 + +
106 + +
105 + +
104 + +
103 + -
102 - -

Результаты опытов по определению специфичности реакции заявленному способу в сравнении с прототипом представлены в таблице 2.

Таблица 2
Бактерии Результаты ПЦР по заявленному способу Результаты ПЦР по способу, взятому за прототип
Pasteurella multocida серогруппа D (штамм Т80) + +
Pasteurella multocida серогруппа А (штамм «W13Ф») - -
Pasteurella multocida серогруппа В (штамм 681) - -
Salmonella typhimurium - -
Е. coli - -
Примечание: «+»- положительный результат;
«-» - отрицательный результат.

Результаты опытов по сравнению эффективности реакции при исследовании патологического материала, полученного от больных телят, и культур бактерий, выделенных на искусственных питательных средах из органов телят по заявленному способу в сравнении с прототипом, представлены в таблице 3.

Таблица 3
№ п/п Исследованные пробы Количество Количество положителных проб по заявленному способу/% от исследованных Количество положителных проб по способу, взятому за прототип/% от исследованных
1 Легкое 30 30/100 15/50
2 Бронхиальные лимфатические узлы 30 30/100 14/47
3 Средостенные лимфатические узлы 30 30/100 12/40
4 Культура бактерий, выделенная из органов телят 30/100 30/100 25/83

Таким образом, предлагаемый способ обладает высокой чувствительностью (103 КОЕ/мл), специфичностью и эффективностью при выявлении участка гена dcbF бактерии Pasteurella multocida серогруппы D. в пробах патологического материала, полученного от больных телят, культурах бактерий, выделенных на искусственных питательных средах. Способ, принятый за прототип, обладает более низкой чувствительностью (10 КОЕ/мл) и на 17-33% менее эффективен при исследовании проб легких, бронхиальных и средостенных лимфоузлов от больных животных.

Пример 4. Сравнение эффективности идентификации штаммов и изолятов бактерии Pasteurella multocida серогруппы D по заявленному способу и по способу, взятому за аналог.

Преимущества разработанного способа представлены в таблицах 4 и 5.

Таблица 4
Штаммы и изоляты Pasteurella multocida Результаты типирования Pasteurella multocida серогруппы D по заявленному способу Результаты типирования Pasteurella multocida серогруппы D по способу, взятому за аналог (акрифлавиновая проба)
1 2 3
Штамм Т80 (серогруппа В) - -
Штамм 681 (серо группа А) - -
Изолят Л31 - +
Изолят К35 + +
1 2 3
Изолят Алмаз - -
Изолят НВ-53 + -
Изолят Б-37 - -
Изолят АГМ + -
Примечание: «+» - положительный результат;
«-» - отрицательный результат.

Таблица 5
Показатель Типирование Pasteurella multocida серогруппы А по заявленному способу Типирование Pasteurella multocida серогруппы А по способу, взятому за аналог (акрифлавиновая проба)
Время исследования одной пробы биоматериала 4 часа 10 суток
Себестоимость исследования одной пробы (руб.):
Трудозатраты (чел). 2 3
Оплата труда сотрудников 500 2750
Стоимость реактивов и питательных сред 60 120
Прочие расходы 200 500
Необходимость получения чистой культуры Не обязательно Обязательно

Таким образом, заявляемый способ позволяет идентифицировать участок гена dcbF, отвечающего за синтез гепарозансинтетазы Pasteurella multocida, непосредственно в пробах легких, бронхиальных и средостенных лимфоузлов и культурах бактерий. Он позволяет сократить сроки проведения исследований до четырех часов, снизить себестоимость диагностики в 4,5 раза, трудозатраты в 1,5 раза, исключить необходимость выделения чистой культуры.


СИНТЕТИЧЕСКИЕ ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫЕ ПРАЙМЕРЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В СПОСОБЕ ИДЕНТИФИКАЦИИ ШТАММОВ И ИЗОЛЯТОВ БАКТЕРИИ Pasteurella multocida СЕРОГРУППЫ D У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ.

Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 31.
10.01.2013
№216.012.1729

Способ диагностики беременности у коров

Изобретение относится к ветеринарии. Способ включает аускультацию шумов кровеносных сосудов тазовой полости с помощью устройства и компьютерный анализ полученного сигнала. При этом осуществляют построение амплитудно-частотной характеристики шумов. Полученную характеристику сравнивают с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002471421
Дата охранного документа: 10.01.2013
27.02.2013
№216.012.29d6

Способ повышения эффективности вакцинации лошадей

Изобретение относится к ветеринарии. Способ повышения качества вакцинации лошадей включает внутримышечное введение препарата, состоящего из экстракта пантов северных оленей, наполнителей и стабилизатора, причем препарат вводят однократно, в дозе 10 мл, одновременно с вакциной, в разные точки....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002476237
Дата охранного документа: 27.02.2013
10.03.2013
№216.012.2e0e

Способ выявления патогенных штаммов и изолятов бактерии pasteurella multocida

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии, а именно к генетической инженерии. Предложен способ выявления патогенных штаммов и изолятов бактерии Pasteurella multocida при помощи ПЦР. Способ может быть использован в ветеринарной микробиологии для диагностики пастереллеза...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002477321
Дата охранного документа: 10.03.2013
27.04.2013
№216.012.393e

Способ лечения калицивироза кошек

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает пероральное введение рибавирина-Липинт в дозе 20-25 мг/кг массы тела 1 раз в день, перед приемом корма, в течение 10 дней. Способ обладает высоким терапевтическим эффектом, ускоряет сроки выздоровления животных. 4 табл., 3 пр.
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002480215
Дата охранного документа: 27.04.2013
10.05.2013
№216.012.3dd9

Синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus в заквасочных культурах, используемых при производстве кисломолочных продуктов

Изобретение относится к области биотехнологии и касается олигонуклеотидных праймеров и способа их использования для выявления Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus в заквасочных культурах. Предложенные синтетические олигонуклеотидные праймеры имеют нуклеотидные последовательности:...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481400
Дата охранного документа: 10.05.2013
10.05.2013
№216.012.3ddb

Синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления lactobacillus acidophilus в заквасочных культурах, используемых при производстве кисломолочных продуктов

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к ДНК-технологиям. Предложены синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления Lactobacillus acidophilus в заквасочных культурах, используемых при производстве кисломолочных продуктов. Предложенный способ включает проведение...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481402
Дата охранного документа: 10.05.2013
10.05.2013
№216.012.3ddc

Синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления днк вируса инфекционной анемии цыплят с помощью синтетических олигонуклеотидных праймеров в полимеразной цепной реакции в режиме реального времени

Изобретения относятся к биотехнологии, а именно к генетической инженерии, и представляют собой синтетические олигонуклеотидные праймеры: P1 - 5'-TGGTTACTATTCCATCACCATT-3' (сайт отжига 11-32 п.н.), Р2 - 5'-CGAAACGTCACTTTCGCAAC-3' (сайт отжига 259-278 п.н.) и способ выявления ДНК вируса...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481403
Дата охранного документа: 10.05.2013
20.09.2013
№216.012.6d0e

Способ диагностики лептоспироза сельскохозяйственных животных

Изобретение относится к ветеринарии. Способ диагностики лептоспироза сельскохозяйственных животных, включающий определение наличия антител к антигенам семи серогрупп L.hebdomadis, L.pomona, L.tarassovi, L.grippotyphosa, L.canicola, L.sejroe и L.icterohaemorrhagiae в сыворотке крови методом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002493569
Дата охранного документа: 20.09.2013
27.05.2014
№216.012.c89b

Способ повышения качества хирургической нити

Изобретение относится к области ветеринарии и медицины, в частности к способу получения хирургической нити с антибактериальным покрытием. Готовят суспензию путем смешивания порошкообразного серебра с размерами частиц 300-500 мкм с порошкообразным диоксидом титана в соотношении 1:30, затем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002517121
Дата охранного документа: 27.05.2014
10.06.2014
№216.012.cd65

Способ комплексной оценки уровня инфицированности стада вирусом лейкоза крупного рогатого скота

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для комплексной оценки уровня инфицированности стада вирусом лейкоза крупного рогатого скота. Способ комплексной оценки уровня инфицированности стада вирусом лейкоза крупного рогатого скота включает выявление антител в сборной пробе...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002518352
Дата охранного документа: 10.06.2014
Показаны записи 1-10 из 38.
10.01.2013
№216.012.1729

Способ диагностики беременности у коров

Изобретение относится к ветеринарии. Способ включает аускультацию шумов кровеносных сосудов тазовой полости с помощью устройства и компьютерный анализ полученного сигнала. При этом осуществляют построение амплитудно-частотной характеристики шумов. Полученную характеристику сравнивают с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002471421
Дата охранного документа: 10.01.2013
27.01.2013
№216.012.2005

Синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления bifidobacterium longum subspecies longum в заквасочных культурах, используемых при призводстве кисломолочных продуктов

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к ДНК-технологиям. Предложены синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ для выявления Bifidobacterium longum subspecies longum в заквасочных культурах, используемых при производстве кисломолочных продуктов. Предложенный способ включает...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002473698
Дата охранного документа: 27.01.2013
27.02.2013
№216.012.29d6

Способ повышения эффективности вакцинации лошадей

Изобретение относится к ветеринарии. Способ повышения качества вакцинации лошадей включает внутримышечное введение препарата, состоящего из экстракта пантов северных оленей, наполнителей и стабилизатора, причем препарат вводят однократно, в дозе 10 мл, одновременно с вакциной, в разные точки....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002476237
Дата охранного документа: 27.02.2013
10.03.2013
№216.012.2e0e

Способ выявления патогенных штаммов и изолятов бактерии pasteurella multocida

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии, а именно к генетической инженерии. Предложен способ выявления патогенных штаммов и изолятов бактерии Pasteurella multocida при помощи ПЦР. Способ может быть использован в ветеринарной микробиологии для диагностики пастереллеза...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002477321
Дата охранного документа: 10.03.2013
27.04.2013
№216.012.393e

Способ лечения калицивироза кошек

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает пероральное введение рибавирина-Липинт в дозе 20-25 мг/кг массы тела 1 раз в день, перед приемом корма, в течение 10 дней. Способ обладает высоким терапевтическим эффектом, ускоряет сроки выздоровления животных. 4 табл., 3 пр.
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002480215
Дата охранного документа: 27.04.2013
10.05.2013
№216.012.3dd9

Синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus в заквасочных культурах, используемых при производстве кисломолочных продуктов

Изобретение относится к области биотехнологии и касается олигонуклеотидных праймеров и способа их использования для выявления Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus в заквасочных культурах. Предложенные синтетические олигонуклеотидные праймеры имеют нуклеотидные последовательности:...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481400
Дата охранного документа: 10.05.2013
10.05.2013
№216.012.3ddb

Синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления lactobacillus acidophilus в заквасочных культурах, используемых при производстве кисломолочных продуктов

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к ДНК-технологиям. Предложены синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления Lactobacillus acidophilus в заквасочных культурах, используемых при производстве кисломолочных продуктов. Предложенный способ включает проведение...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481402
Дата охранного документа: 10.05.2013
10.05.2013
№216.012.3ddc

Синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления днк вируса инфекционной анемии цыплят с помощью синтетических олигонуклеотидных праймеров в полимеразной цепной реакции в режиме реального времени

Изобретения относятся к биотехнологии, а именно к генетической инженерии, и представляют собой синтетические олигонуклеотидные праймеры: P1 - 5'-TGGTTACTATTCCATCACCATT-3' (сайт отжига 11-32 п.н.), Р2 - 5'-CGAAACGTCACTTTCGCAAC-3' (сайт отжига 259-278 п.н.) и способ выявления ДНК вируса...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481403
Дата охранного документа: 10.05.2013
20.09.2013
№216.012.6d0e

Способ диагностики лептоспироза сельскохозяйственных животных

Изобретение относится к ветеринарии. Способ диагностики лептоспироза сельскохозяйственных животных, включающий определение наличия антител к антигенам семи серогрупп L.hebdomadis, L.pomona, L.tarassovi, L.grippotyphosa, L.canicola, L.sejroe и L.icterohaemorrhagiae в сыворотке крови методом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002493569
Дата охранного документа: 20.09.2013
27.05.2014
№216.012.c89b

Способ повышения качества хирургической нити

Изобретение относится к области ветеринарии и медицины, в частности к способу получения хирургической нити с антибактериальным покрытием. Готовят суспензию путем смешивания порошкообразного серебра с размерами частиц 300-500 мкм с порошкообразным диоксидом титана в соотношении 1:30, затем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002517121
Дата охранного документа: 27.05.2014
+ добавить свой РИД