Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НАРУШЕНИЙ МИКРОЦИРКУЛЯЦИИ ПРИ ДЕФОРМИРУЮЩЕМ ОСТЕОАРТРОЗЕ У ЖЕНЩИН, РАБОТАЮЩИХ В УСЛОВИЯХ ФИЗИЧЕСКОГО ПЕРЕНАПРЯЖЕНИЯ

Изобретение относится к медицине, а именно к профессиональной патологии и может быть использовано для диагностики нарушений микроциркуляции при деформирующем остеоартрозе (ДОА) у женщин, работающих в условиях физического перенапряжения.

Нарушения микроциркуляции при ДОА выявляют при помощи реовазографии, ультразвуковой допплерографии (Амбулаторная ангиология / В.Ф. Агафонов, В.В. Андрияшкин, В.Ю. Богачев, Л.И. Богданец и др.; под общей ред. А.И. Кириенко, В.М. Кошкина, В.Ю. Богачева - М.: Литтерра, 2007. - с.65).

Недостатки способа: недостаточная чувствительность приборов не позволяет выявить ранние признаки нарушений микроциркуляции.

Технический результат изобретения: повышение точности диагностики нарушений микроциркуляции при ДОА у женщин, работающих в условиях физического перенапряжения.

Указанная задача решается путем определения содержания оксида азота (NO) у женщин, работающих в условиях физического перенапряжения, и при показателе равном 21 мкмоль/л и менее диагностируют нарушение микроциркуляции при данном заболевании. Для оценки наличия и степени дисфункции эндотелия используют метод количественного определения оксида азота в плазме крови. Из всех факторов, синтезируемых эндотелием, роль регулятора основных функций эндотелия принадлежит NO.

Способ осуществляют следующим образом: для сбора образцов крови из локтевой вены используют пробирки Vacuette (Австрия) объемом 2,7 мл с антикоагулянтом ЭДТА. Затем плазму отделяют центрифугированием в течение 30 мин при 8000 об/мин. Все образцы плазмы разбавляют в 2 раза реакционным буфером, а затем фильтруют через центрифужные молекулярные фильтры. Микрокон с массой 10000 (YM-10) для удаления белков на центрифуге с фиксированным углом с пределом роторного сечения мембраны NM WL 10,000, с максимальным угловым ускорением g=14000 в течение 30 мин. После приготовления реагентов, рабочих разведений стандартов и образцов по инструкции, а также необходимого количества стрипов, в ячейку для бланка добавляли 200 мкл, в ячейку для нулевого стандарта 50 мкл реакционного буфера. В оставшиеся ячейки вносят по 50 мкл стандарта нитрата или образца, добавляют по 25 мкл NADH и по 25 мкл нитрат-редуктазы в ячейки для всех стандартов и образцов, перемешивают и инкубируют 30 мин при 37°C под пленкой в термостате. Затем во все ячейки, кроме бланка, вносят по 50 мкл реактива Грисса 1 и по 50 мкл реактива Грисса 11, перемешивают и инкубируют 10 мин при комнатной температуре. Затем строят калибровочную кривую и определяют оптическую плотность ячеек при 540 нм. Концентрацию общего NO выражают в мкмоль/л. Общее количество оксида азота (Total Nitric Oxide Assay) в плазме крови определяют методом ИФА на анализаторе StatFax (США), используя наборы SYSTEMS (США) группы компаний ВСМ ЗАО «БиоХимМак». Переходная и изменчивая природа NO делает его непригодным для приемлемых методов обнаружения. Большая часть NO окисляется в нитрит (NO₂-) и нитрат (NO₃-), являющихся более стабильными NO-метаболитами, концентрации которых использовались, как количественная мера продукции NO. Тест основан на принципе превращения нитрата в нитрит в реакции, катализируемой ферментом нитрат-редуктазой. Реакция регистрирует колориметрически концентрацию нитрита по азо-красителю, образующемуся в реакции Грисса, основанной на двухстадийной реакции диазотирования.

Средний показатель NO у работниц, имеющих деформирующий остеоартроз равен 17.92±6.469 мкмоль/л. При значении NO менее 21 мкмоль/л диагностируют нарушение микроциркуляции при деформирующем остеоартрозе у женщин, работающих в условиях физического перенапряжения

Методика определения NO использовалась у 15 сельскохозяйственных работниц, имеющих деформирующий остеоартроз, находящихся на стационарном лечении в краевом областном профпатологическом центре, городском профпатологическом центре. Возраст больных составил от 40 до 56 лет. Выявлена высокая эффективность данного метода. Методика не требует значительных экономических затрат. Способ позволяет своевременно выявить нарушение микроциркуляции при деформирующем остеоартрозе на ранней стадии, позволяет значительно снизить экономические затраты на лечение, на оплачивание больничных листов.

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1.

Больная Б., 54 лет, 35 лет работала дояркой, работа связана с физическим перенапряжением. Больна в течение 15 лет, когда появились боли в плечевом и локтевом суставе справа, позднее появились боли в суставах левой руки. В областном профцентре наблюдается с 2001 года с диагнозом: наружный эпикондилез правого плеча от физического перенапряжения. С 2003 года двухсторонний миофиброз разгибателей предплечий, двухсторонний наружный эпикондилез. В 2005 году КЭК утвердила диагноз: двусторонний плечелопаточный периартроз. Рекомендовано рациональное трудоустройство. Трудоспособна ночным скотником. Получает 20% утраты трудоспособности. При рентгенологических исследованиях плечевых суставов выявлен деформирующий артроз. Перестройка костной структуры в области больших бугорков с краевым склерозом за счет плече-лопаточного периартрита. При рентгенологическом обследовании локтевых суставов выявлен деформирующий артроз локтевых суставов. Наружный и внутренний эпикондилез с обеих сторон. При рентгенологическом исследовании кистей признаки ДОА дистальных межфаланговых суставов справа и слева. Однако рентгенологические методы не позволяют выявить нарушения кровотока при данном заболевании. При ультразвуковой допплерографии гемодинамически значимых изменений артерий верхних конечностей не выявлено. Уровень NO равен 11,4 мкмоль/л. В результате проведенного обследования установлен диагноз: Двусторонний миофиброз разгибателей предплечий. Двусторонний эпикондилез. Двусторонний плече-лопаточный периартроз от физического перенапряжения с нарушением функции кровообращения I степени. Заболевание профессиональное.

Пример 2.

Больная Д., 50 лет, инвалид III группы. Профессиональный анамнез: 31 год работала дояркой. Считает себя больной с 1980 года, когда впервые появились боли в руках, за медицинской помощью не обращалась, лечилась самостоятельно. В 1990 году обратилась за медицинской помощью по месту жительства. Проходила лечение у невролога, терапевта. В 2000 году направлена в профцентр краевой областной больницы с жалобами на боли в верхнем плечевом поясе, боли в плечевых, локтевых суставах, кистях, онемение в правой кисти, боли в мышцах предплечья, боли в поясничном отделе позвоночника, боли в тазобедренных, коленных суставах, ограничение движения в правом тазобедренном суставе, боли при ходьбе. В профцентре поставлено профзаболевание. Регресс 30%. Рентгенологическое обследование плечевых суставов: признаки плече-лопаточного периартрита с обеих сторон. Рентгенологическое обследование локтевых суставов: начальные проявления артроза обоих локтевых суставов. Рентгенологическое обследование кистей: ДОА межфаланговых суставов, костей запястьев, лучезапястных суставов. Кистевидная перестройка в ладьевидных костях. Периартикулярный остеопороз. Рентгенологическое обследование коленных суставов: ДОА коленных суставов. Ультразвуковая допплерография сосудов нижних конечностей: гемодинамически значимых изменений артерий нижних конечностей не выявлено. Ультразвуковая диагностика сосудов верхних конечностей: гемодинамически значимых изменений линейной скорости кровотока не выявлено. Уровень NO равен 12,8 мкмоль/л. В результате проведенного обследования поставлен диагноз: Миофиброз разгибателей предплечий. Двусторонний наружный эпикондилез плечевых костей от физического перенапряжения. Нарушение функции кровообращения I степени. Заболевание профессиональное. Сопутствующий диагноз: Дорсопатия поясничного отдела позвоночника. Полиостеоартроз, декомпенсированный II степени. Нарушение функции сустава II степени.

Пример 3.

Больная К., 54 года, 20 лет работала дояркой, 8 лет учетчиком молока. Считает себя больной с 1996 года, когда впервые появились боли в кистях, обратилась по месту жительства за медицинской помощью. Направлена в профцентр, поставлено профессиональное заболевание в 1996 году, на учете в профцентре с 1996 года. Каждый год проходит обследование и лечение в профцентре. С 2000 года получает регресс 20%. Обратилась с жалобами на боли в кистях, тяжесть в руках, онемение в кистях, снижение чувствительности в правом суставе, судороги в руках. При лучевых методах обследования кистей выявляется деформирующий артроз дистальных межфаланговых суставов. Периартикулярный остеопороз. При рентгенографии правого плечевого сустава выявлены признаки артроза. Костно-деструктивных изменений не выявлено. Уплотнен большой бугорок (краевой склероз). Уплотнена гленоидальная впадина-артроз. Ультразвуковая допплерография сосудов верхних конечностей: не выявлено гемодинамически значимых изменений. Уровень NO равен 14 мкмоль/л. В результате проведенного обследования поставлен диагноз: Деформирующий полиостеоартроз межфаланговых суставов кистей от физического перенапряжения, декомпенсированный. Нарушение функции кровообращения I степени.

Пример 4.

Женщина Н., 48 лет. Работа не связана с физическим перенапряжением. Жалоб не предъявляет. Уровень NO равен 34,5 мкмоль/л. То есть деформирующего артроза у женщины не наблюдается.

Положительный эффект от использования данного способа заключается в своевременном выявлении деформирующего остеоартроза на ранней стадии, значительном снижении экономических затрат на лечение, на оплачивание больничных листов.