Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ МИКОТОКСИКОЗОВ ЖИВОТНЫХ

Изобретение относится к области ветеринарной микологии и санитарии, в частности к профилактике алиментарных микотоксикозов животных.

Аналоги изобретения. Для профилактики и лечения микотоксикозов предложены препараты Полисорб ВП (Ж. Комбикорма, 2003. №3, с.68), Микросорб-П (Ж. Ветеринария, 2001, №11, с.15-17), цеолит (ж. Ветеринария, 2002, №9, с.3-8), которые проявляют выраженную адсорбирующую способность по отношению к микотоксинам.

Известен профилактический препарат «Субалин», изготовленный из штамма Bacillus subtilis ВКПМ В-4759 и обладающий антибактериальной и антивирусной активностью (патент РФ на изобретение №2035185 С1, опубл. 20.05.1995). Предложены штаммы бактерий Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis, используемые в качестве компонентов препарата против вирусных и бактериальных инфекций (№2142287, С1, опубл. 10.12.1999).

Однако биопрепарат Субалин, а также штаммы бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-7092, ВКПМ В-7048 и штамм бактерий Bacillus licheniformis ВКПМ В-7038 не обладают активностью против плесневых токсинообразующих грибов, таких как Penicillium, Aspergillus, Stachybotrus, т.е. наиболее распространенных возбудителей микотоксикозов животных.

Известен штамм бактерий Bacillus subtilis, используемый для обеззараживания птичьего помета и навоза от патогенных микроорганизмов (патент РФ на изобретение №2105810, С 12 N1/20, В09С 1/10, опубл. 27.02.1998, бюл. №6). Предложен способ профилактики диарейных болезней новорожденных телят и поросят путем использования суспензии штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП, обладающих антагонистической активностью в отношении патогенных бактерий (патент РФ №2218924, А61Р 1/00, опуб. 20.12.2003, бюл. №35).

Однако нет сведений по использованию штаммов бактерий Bacillus subtilis, в том числе Bacillus subtilis ТНП-3 и Bacillus subtilis ТНП-5 для профилактики микотоксикозов животных, вызываемых плесневыми грибами.

В основу изобретения положена задача профилактики отравления животных токсинами плесневых грибов.

Для профилактики микотоксикозов, вызываемых токсинами плесневых грибов, используют препарат «Сахабактисубтил», представляющий собой суспензию штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП в равных соотношениях. Крупному рогатому скоту, в рацион которого включаются корма, пораженные плесневыми грибами, дают препарат «Сахабактисубтил» перорально 1 раз в сутки в течение 30 дней из расчета 50 млрд. микробных клеток на 1 голову. Препарат обладает выраженной антагонистической активностью по отношению к токсинообразующим плесневым грибам рода Penicillium, Aspergillus и Stachybotrus, повышает иммунобиологическую реактивность организма, нормализует кишечный микробиоценоз.

Препарат «Сахабактисубтил» изготовляют из штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП в равных соотношениях, депонированных в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного института контроля стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ) (справки о депонировании штаммов от 6 февраля 2001 г, №180/15 и №181/15).

Получен патент Всероссийской Федерации «Способ профилактики диарейных болезней новорожденных телят и поросят» №2218924 от 20.12.2003 г.

Штаммы могут быть получены в лаборатории по разработке микробных препаратов ГНУ Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства СО РАСХН и ВГНКИ.

Изготовление, контроль и испытание препарата «Сахабактисубтил» проводят согласно Техническим условиям «Препарат «Сахабактисубтил» для профилактики и лечения диареи новорожденных телят» №9383-003-00670203-01 от 12 марта 2001 г.

Штаммы бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП выращивают в мясопептонном агаре pH 7,0-7,2 в течение 5-7 суток при 37°С, затем суспензируют в физиологическом растворе хлористого натрия в концентрации 5 млрд. микробных клеток в 1 мл.

Антагонистическую активность штаммов бактерий Bacillus subtilis в отношении токсикообразующих плесневых грибов определяют методом диффузии в агар на средах Чапека и МПА. Для этого штаммы бактерий высевают сплошным газоном на поверхность среды в чашках. В качестве тест-культур используют плесневые грибы Penicillium citrinum, Aspergillus fumigatus и Stachybotrys alternans. Микологической иглой осторожно захватывают кусочек мицелия (инокулят) и помещают на поверхность среды. Посевы культивируют при температуре 22-25°С, через 10-15 дней ведут учет по зоне задержки роста вокруг инокулята. Для контроля используют среду без штаммов бактерий. Штаммы бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП проявляют выраженную антагонистическую (фунгицидную) активность по отношению к плесневым грибам рода Penicillium, Aspergillus и Stachybotrys.

Для профилактики микотоксикозов, вызываемых кормами, пораженными токсинообразующими плесневыми грибами, назначают препарат «Сахабактисубтил» перорально 1 раз в сутки в течение 30 дней из расчета 50 млрд. микробных клеток на 1 голову.

Для определения профилактической эффективности препарата «Сахабактисубтил» при микотоксикозах отбирают 20 голов молодняка крупного рогатого скота холмогорской породы в возрасте 6-8 месяцев. Первой группе (10 голов) дают препарат «Сахабактисубтил» индивидуально перорально 1 раз в сутки в течение 30 дней из расчета 10 мл, содержащий 50 млрд. микробных клеток.

Контрольная группа (10 голов) не получает препарат. В рацион обеих групп животных включают сено, контаминированное токсикообразующими плесневыми грибами рода Penicillium, Aspergillus и Stachybotrys. До и после применения препарата проводят иммунобиологические и бактериологические исследования.

Применение препарата «Сахабактисубтил» повышает бактерицидную и лизоцимную активность, содержание глобулиновых фракций, каротина сыворотки крови.

При скармливании сена неудовлетворительного качества в контрольной группе отмечается нарушение микробиоценоза кишечника с явлениями дисбактериоза. Уменьшается количество представителей нормальной микрофлоры. Так, содержание лактобактерий снижается в 3 раза (в начале опыта - 0,19±0,06 млн. микробных клеток, в конце опыта - 0,066±0,006 млн. микробных клеток в 1 г). При этом значительно увеличивается количество энтеропатогенных микроорганизмов. Так, содержание лактозоотрицательных эшерихий повышается в 5960 раз (от 0,2±0,02 до 1192,0±105,0 млн. микробных клеток в 1 г).

У молодняка, получавшего препарат «Сахабактисубтил», отмечается повышение количества лактобактерий в 114 раз (до 21,66±12,7 млн. микробных клеток в 1 г) и снижение лактозоотрицательных эшерихий в 6 раз (до 182,0±56,1 млн. микробных клеток в 1 г) по сравнению с контролем.

Таким образом, применение препарата «Сахабактисубтил» молодняку крупного рогатого скота подавляет негативное влияние на организм токсинообразующих плесневых грибов, нормализует кишечный микробиоценоз и может быть использован в качестве способа профилактики микотоксикозов животных.