Способ прогнозирования течения бронхиальной астмы у беременных

Изобретение относится к области медицины, в частности к пульмонологии, и может быть использовано для прогнозирования ухудшения течения бронхиальной астмы (БА) у беременных.

Известно несколько способов прогнозирования течения БА во время беременности [1, Нахамчен, Л.Г. Прогнозирование характера течения бронхиальной астмы во время беременности / Л.Г. Нахамчен //Материалы III научной конференции «Системный анализ в медицине». Информатика и системы управления - 2009. - №4 (22). - С. 88-89; 2, Приходько О.Б., Ландышев Ю.С., Бабцева А.Ф., Романцова Е.Б. Способ прогнозирования динамики течения бронхиальной астмы в гестационном периоде/патент на изобретение RU 2423910 18.10.2009]. Однако в данных способах не учитываются такие особенности клинического течения БА, как форма заболевания и уровень контроля, который, согласно последним рекомендациям [Global Initiative for Asthma (GINA), 2014; 147], имеет определяющее значение для объема назначаемой терапии. В предложенных ранее способах также не учтено наличие сопутствующих сердечно-сосудистых заболеваний беременной, состояние социального статуса, что также откладывает отпечаток на течение БА во время беременности [3, Лучникова Т.А., Приходько О.Б. Особенности социально-экономического статуса у беременных, больных бронхиальной астмой // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2015. Вып. 56. С. 78-82.], биохимические показатели, генетические особенности.

Техническая проблема, на решение которой направленно данное изобретение, состоит в создании способа, позволяющего спрогнозировать ухудшение течения БА у беременных.

Сущность изобретения состоит в том, что в способе прогнозирования течения БА во время беременности, включающем определение клинико-анамнестических данных: форма и контроль БА, наличие сердечно-сосудистых заболеваний, дополнительно изучается социальный статус беременной, с помощью методов функциональной диагностики определяется уровень NOex, осуществляется забор крови и исследуется уровень гомоцистеина, витамина D в сыворотке, определяется полиморфизм генов, приводящих к нарушению синтеза гомоцистеина и NOex у беременных, и решается дискриминантное уравнение:

Df=-0,44+0,04⋅А-1,75⋅B+1,02⋅С+0,67⋅D+0,16⋅Е+1,17⋅F+0.62⋅G+2,03⋅Н+0,3⋅I-1,5⋅J-0.03⋅K-0.12⋅L,

где A - значение NOex в ppb;

B - форма БА, аллергическая при B=1, неаллергичекая при B=2;

C - уровень контроля: при С=1 - контролируемое течение БА, С=2 – частично контролируемое, C=3 - неконтролируемое течение БА;

D - при D=1 - наличие, при D=0 - отсутствие сердечно-сосудистых заболеваний;

E - образование: при Е=0 - средние общеобразовательное, при Е=1 - среднее специальное, при Е=2 - высшее;

F - семейное положение: при F=1 - замужем, при F=0 - одинокая;

G - при G=1 - наличие полиморфизма в гене eNOS 894; при G=0 - отсутствие мутации в гене eNOS 894;

H - при H=1 - наличие полиморфизма в гене MTFIFR677, при Н=0 - отсутствие мутации в гене MTHFR677;

I - при I=1 - наличие полиморфизма в гене MTR 2756, при I=0 - отсутствие мутации в гене MTR 2756;

J - при J=1 - наличие полиморфизма в гене MTR 66, при J=0 - отсутствие мутации в гене MTR 66;

K - концентрации гомоцистеина в крови, мкмоль/л;

L - концентрация витамина D в сыворотке крови, нг/мл,

при этом при Df>-1 прогнозируют ухудшение течения БА во время беременности, при Df<-1 прогнозируют улучшение течения БА.

Данный способ с учетом клинических данных пациенток (контроль и форма БА, наличие сопутствующих заболеваний сердечно-сосудистой системы), показателя и уровня оксида азота в выдыхаемом воздухе (NOex), биохимических показателей (гомоцистеин, витамин D), полиморфизма генов, приводящих к нарушению образования гомоцистеина и NOex, помогает определить ухудшение течения БА у беременных на различных сроках гестации и скорректировать дальнейшую лечебную тактику.

Способ осуществляется следующим образом. Из анамнестических (образование, семейное положение) и клинических данных устанавливают наличие или отсутствие у беременной сердечно-сосудистых заболеваний, формы БА (1 - аллергическая, 2 - неаллергичекая), уровня контроля БА (1 - контролируемое течение БА, 2 - частично-контролируемое, 3 - неконтролируемое течение БА). Далее с помощью методов функциональной диагностики определяют уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе (NOex), которая проводится на аппарате NO Breath (Великобритания) в каждом триместре беременности. После глубокого вдоха пациентка делает продолжительный выдох в течение 12 сек через специальный загубник, ориентируясь на устройство обратной связи на мониторе. Проба повторяется трехкратно, берется среднее значение. В качестве единицы измерения NOex используется 1 ppb (part per billion) - одна частица газа на 10⁹ воздушной смеси, выдыхаемой пациенткой. Для дальнейшей диагностики производится забор крови у беременной для определения концентрации гомоцистеина методом иммуноферментного анализа. Витамин D в сыворотке крови определяется с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии анализатором. Для анализа полиморфизма генов проводится выделение ДНК из цельной крови беременной, полиморфные участки генов амплифицируют на амплификаторе ДТпрайм ООО «ДНК-Технология» с помощью полимеразной цепной реакции, используя структуру праймеров и параметры температурных циклов, описанных в геномной базе данных.

Далее составляется дискриминантное уравнение:

Df=-0,44+0,04⋅A-1,75⋅B+1,02⋅C+0,67⋅D+0,16⋅E+1,17⋅F+0.62⋅G+2,03⋅H+0,3⋅I-1,5⋅J-0.03⋅K-0.12⋅L,

где A - значение NOex в ppb;

B - форма БА: аллергическая при B=1, неаллергичекая при B=2;

C - уровень контроля: при C=1 - контролируемое течение БА, C=2 – частично контролируемое, C=3 - неконтролируемое течение БА;

D - при D=1 - наличие, при D=0 - отсутствие сердечно-сосудистых заболеваний;

E - образование: при E=0 - средние общеобразовательное, при Е=1 - среднее специальное, при Е=2 - высшее;

F - семейное положение: при F=1 - замужем, при F=0 - одинокая;

G - при G=1 - наличие полиморфизма в гене eNOS 894; при G=0 - отсутствие мутации в гене eNOS 894;

H - при H=1 - наличие полиморфизма в гене MTFIFR677, при Н=0 - отсутствие мутации в гене MTHFR677;

I - при I=1 - наличие полиморфизма в гене MTR 2756, при I=0 - отсутствие мутации в гене MTR 2756;

J - при J=1 - наличие полиморфизма в гене MTR 66, при J=0 - отсутствие мутации в гене MTR 66;

K - концентрации гомоцистеина в крови, мкмоль/л;

L - концентрация витамина D в сыворотке крови, нг/мл.

Значение Df дискриминантного уравнения позволяет однозначно идентифицировать пациенток: с утяжелением БА в период гестации при значении Df>-1, при Df<-1 позволяет отнести беременную в группу с улучшением течения БА.

Эффективность дискриминантной функции подтверждается Λ-статистикой Уилкса (Λ=0,15) - остаточной дискриминантной способностью, F-статистикой Фишера (F_эмп=18,49 при F_0,95(28,68)=3,72, p≤0,000). Полученные значения теста значимости χ² свидетельствуют о достоверности различий, выявляемых Df между группами на уровне значимости p≤0,000003 (χ²=75,26).

Данный метод позволяет правильно определить больных, относящихся к группе с ухудшением течения БА во время беременности, в 96,8% случаев. Правильность разграничения группы с улучшением течения БА составляет 94,23%.

Способ иллюстрируется следующими конкретными примерами.

Пример 1. Больная К., 25 лет, срок беременности - 10 недель, страдает неконтролируемой аллергической бронхиальной астмой в течение 10 лет. Имеет среднее специальное образование, замужем. Хронических заболеваний сердечно-сосудистой системы и ЛОР-органов нет. При обследовании уровень NOex во 1 триместре составил 38 ppb. При исследовании полиморфизма наличие мутаций выявлено в генах eNOS 894, MTR 2756. Уровень гомоцистеина составил 8,7; уровень витамина D-25,4.

Df=-0,44+0,04⋅38-1,75⋅1+1,02⋅3+0,67⋅0+0,16⋅1+1,17⋅1+0.62⋅1+2,03⋅0+0,3⋅1-1,5⋅0-0.03⋅8.4-0.12⋅25.4=1,34.

Т.к. значение Df 1,34>-1, диагностируется ухудшение течения БА у пациентки в динамике беременности.

При дальнейшем наблюдении за состоянием беременной, при сроке 16 недель, отмеченно утяжеление течения БА, участились приступы БА до 5 раз в сутки, присоединились ночные приступы в количестве до 4 раз в неделю. Это потребовало коррекции терапии: увеличение дозы ИГКС (пульмикорт) до 400 мкг.

Пример 2. Больная В., 26 лет, срок беременности - 20 недель, страдает аллергической частично-контролируемой бронхиальной астмой в течение 4 лет. Имеет среднее специальное образование, замужем. Хронических заболеваний сердечно-сосудистой системы и ЛОР-органов нет. При обследовании уровень NOex во 2 триместре составил 27 ppb. При исследовании полиморфизма наличие мутаций выявлено в генах eNOS894, MTR2756, MTR66. Уровень гомоцистеина составил 19,1; уровень витамина D -30,1.

Df=-0,44+0,04⋅27-1,75⋅1+1,02⋅2+0,67⋅0+0,16⋅1+1,17⋅1+0.62⋅1+2,03⋅0+0,3⋅1-1,54-0.03⋅19.1-0.12⋅30.1=-2,51.

Т.к. значение Df -2,51>-1, прогнозируется улучшение течения БА в динамике беременности.

При дальнейшем наблюдении за больной на протяжении всей беременности не зарегистрировано ни одного обострения БА.

Техническим результатом использования изобретения является повышение точности прогнозирования течения БА за счет дополнительного введения клинико-анамнестических данных и количественных диагностических показателей. Поставленная цель достигается комплексным клинико-функциональным обследованием, с использованием метода определения NOex, гомоцистеина, витамина D в сыворотке, полиморфизма генов метаболизма фолатов и эндотелиальной NO синтазы (eNOS3) у беременных.