СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НЕЙРОСИФИЛИСА

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано в определении степени тяжести повреждений структур мозга бледной трепонемой у пациентов с сифилисом в анамнезе.

Проблема своевременной диагностики нейросифилиса остается актуальной, несмотря на создание широкой базы лабораторных тестов, включающих общеклинические и серологические показатели при исследовании спинномозговой жидкости. Однако из-за недостаточной чувствительности используемых тестов нередко возникают ситуации, в которых нельзя исключить или подтвердить инвазию бледной трепонемы в структуры нервной системы. В ряде случаев только опыт клинициста является решающим в диагностике данной патологии, и своевременное назначение адекватной терапии способствует предупреждению необратимых органических нарушений в нервной системе и гибели пациента. В то же время есть и формы раннего асимптомного течения нейросифилиса, т.е. отсутствуют клинические признаки заболевания при потере чувствительности традиционных лабораторных методов и следования.

Известен способ диагностики нейросифилиса при исследовании спинномозговой жидкости с помощью серологических тестов (Лукьянов A.M. Нейросифилис. Современные аспекты клиники, диагностики, терапии. Минск, Парадокс, 2009, с. 246-263), включающий определение и исследование VDRL (Veneral Disease Reserch Laboratory), РПГА, РИФц (РИФ с цельным ликвором), ИФА-IgG.

Однако в настоящее время результаты серологических тестов при исследовании спинномозговой жидкости в большинстве случаев являются нечувствительными или малочувствительными, что не позволяет поставить диагноз нейросифилиса. Такая ситуация сложилась в 21 веке в связи с изменением реакции организма людей на широкое применение антибиотиков, чего не отмечалось ранее (первая половина 20 века), когда вышеперечисленные тесты являлись высокочувствительными и однозначно решали вопросы диагностики нейросифилиса.

Известен способ диагностики нейросифилиса (Патент РФ №2230323, МПК 33/50, опубл. 2004), включающий определение сфингомиелина в ликворе больных с помощью проточной тонкослойной хроматографии, по уровню которого проводят диагностику.

Недостатком этого способа является его сложность и трудоемкость, требуется дорогостоящая аппаратура и реагенты, а также наличие высококвалифицированных кадров. Данный способ может быть осуществлен только в лабораториях специализированных НИИ, поэтому в практической работе сложно его использовать.

Наиболее близким к заявляемому изобретению является способ диагностики нейросифилиса, включающий микроскопическое исследование спинномозговой жидкости (Лукьянов A.M. Нейросифилис. Современные аспекты клиники, диагностики, терапии. Минск, Парадокс, 2009, с. 233).

Недостатком данного способа является то, что в настоящее время чувствительность организма к воспалительным процессам, вызванным внедрением бледной трепонемы в структуры мозга, резко снизилась за счет широкого использования населением антибактериальных препаратов, что повлияло на снижение иммунной реакции организма на чужеродный антиген.

В связи с этим задачей изобретения является устранение указанных недостатков, получение объективных критериев для диагностики нейросифилиса, обеспечение ранней, в том числе доклинической диагностики заболевания, сокращение сроков получения данных, снижение затрат на проведение исследований.

Для этого в способе диагностики нейросифилиса, включающем микроскопическое исследование образцов спинномозговой жидкости, предложено проводить краевую дегидратацию образцов спинномозговой жидкости, а их микроскопическое исследование осуществлять в поляризованном свете. При этом при выявлении анизотропных структур в виде дендритов либо сферолитов, внутри которых расположены образования в форме овалов, содержащих липиды, диагностируют раннюю форму нейросифилиса; при выявлении множества овалов, сгруппированных в форме шаров, включенных в анизотропные структуры и/или отдельно расположенных, диагностируют поздний менинговаскулярный нейросифилис.

Известно, что состав жидкокристаллических структур базируется на системах «липид - вода», «липид - белок - вода», которые при переводе в твердофазное состояние методом краевой дегидратации биологических жидкостей формируют структуры, наблюдаемые при микроскопии в поляризованном свете (Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей человека. М., Триада, 2001, с. 52-54). Мембраны клеток головного и спинного мозга богаты липидами и белками. При их разрушении продукты деструкции попадают в спинномозговую жидкость, одной из функций которой является выведение токсичных веществ из ткани мозга. Так как бледная трепонема проникает в мозг и формирует в нем множественные очаги деструкции, вызывающие патологические изменения в центральной нервной системе (парезы, параличи, инсульты, психические нарушения и др.), возникла идея - исследовать структуры спинномозговой жидкости систем «липид - вода», «липид - белок - вода» у больных, которые перенесли сифилис, с целью диагностики деструктивных процессов в ткани мозга.

На фиг. 1 представлен сферолит спинномозговой жидкости здорового человека. Видно, что его структура монолитна и в ней отсутствуют какие-либо дополнительные включения (×300); на фиг. 2 представлен анизотропный дендрит с наличием включений в виде овалов, содержащих липиды у больного с ранним асимптомным нейросифилисом. Аморфные овалы характеризуют процессы деструкции в центральной нервной системе (×300); на фиг. 3 - множество овалов, сгруппированных в форме шаров, расположенных внутри сферолита и вне его (×50), на фиг. 4 - то же (×200). Способ осуществляется следующим образом.

У больного, в анамнезе которого был сифилис (серопозитивная реакция сыворотки крови на сифилис), получают спинномозговую жидкость с целью диагностики нейросифилиса. Для этого проводят исследование методом краевой дегидратации, для чего на поверхность предметного стекла наносят каплю спинномозговой жидкости и накрывают ее покровным стеклом (создание аналитической ячейки). Через 72 часа ячейки микроскопируют в поляризованном свете при различных увеличениях и при выявлении структур диагностируют раннюю или позднюю форму нейросифилиса.

Пример 1

Пациент М., 36 лет. 2 года назад установлен диагноз сифилиса. Получил курс специфической терапии. В настоящее время пациент находится в психиатрической больнице, неадекватен, дезориентирован в пространстве. Результаты общеклинического исследования спинномозговой жидкости: концентрация белка - 0,47; цитоз 5/3 (лимфоциты - 3, моноциты - 2), что соответствует параметрам нормы.

Серологические исследования: VDRL - отрицательно, РПГА - слабоположительно (2+), РИФц - положительно (3+), ИФА G - отрицательно, т.е. результат сомнительный.

Результаты исследования заявляемым способом: обнаружены дендриты с включенными в их структуру овалами (фиг. 2).

Заключение: нейросифилис, ранняя форма.

Осмотр клиницистом: имеются анамнестические и психоневрологические данные, которые в совокупности с результатами, полученными заявляемым способом, позволяют поставить диагноз нейросифилиса и назначить курс специфической терапии по нейросифилису.

Было проведено адекватное лечение, через 6 месяцев повторное исследование спинномозговой жидкости по предлагаемому способу не выявило структур, характерных для нейросифилиса.

Пример 2

Пациентка Ф., 52 года. Установлен поздний сифилис. Курс специфической терапии не получала. В настоящее время поступила в неврологическое отделение по поводу последствий инфаркта мозга, правостороннего гемипареза.

Результаты общеклинического исследования спинномозговой жидкости: концентрация белка - 0,21; цитоз 8/3 (лимфоциты - 8), что соответствует параметрам нормы.

Серологические исследования: VDRL - отрицательно, РПГА - слабоположительно (2+), РИФц - слабоположительно (2+), ИФА G - слабоположительно (КП=2,5), т.е. результат сомнительный.

Результаты исследования заявляемым способом: в аналитических ячейках обнаружено большое количество овалов, сгруппированных в форме шаров, включенных в анизотропные структуры и вне их (фиг. 3, 4). Заключение: нейросифилис, поздняя менинговаскулярная форма.

Осмотр клиницистом: имеются неврологические данные, которые в совокупности с результатами, полученными заявляемым способом, позволяют поставить диагноз поздней формы нейросифилиса и назначить курс специфической терапии по нейросифилису.

Пример. 3

Пациент О., 40 лет. Перенес сифилис 8 лет назад. Получил 2 курса специфической терапии.

Проведено исследование по вышеописанной методике.

Результаты исследования заявляемым способом: во всех аналитических ячейках обнаружены сферолиты с параметрами нормы (фиг. 1).

Заключение: признаки нейросифилиса отсутствуют.

Осмотр клиницистом: клинические признаки нейросифилиса не обнаружены.

По предлагаемому способу были проведены исследования у 106 человек, имеющих в анамнезе сифилис и различную неврологическую симптоматику, была получена спинномозговая жидкость с целью диагностики нейросифилиса.

Были проведены исследования известными способами: нейросифилис был подтвержден серологическими исследованиями и результатами подсчета клеток ликвора у 42 человек. У остальных 64 пациентов были получены отрицательные или слабоположительные результаты анализа.

Тем пациентам (64 человека), которым требовалось уточнение диагноза, было проведено исследование заявленным способом. Полученные результаты показали, что деструктивный процесс в центральной нервной системе, вызванный бледной трепонемой, имел место только у 26 человек. Этим больным было назначено дополнительное лечение и при контрольном исследовании через 6 месяцев отмечалась положительная динамика неврологической симптоматики (восстановление речи, чувствительности, двигательных функций) и отсутствие признаков нейросифилиса по заявленному способу при повторном исследовании. Остальным 38 пациентам диагноз нейросифилис был снят.

Заявленный способ диагностики нейросифилиса в ряде случаев является единственным, позволяющим получить обоснованные критерии диагностики в виде картины разрушения структур мозга, что позволяет уверенно поставить диагноз нейросифилиса и своевременно назначить специфическую терапию. В ГБУЗ МО МОККВД данный способ востребован клиницистами, особенно в тех случаях, когда постановка диагноза нейросифилиса является спорной. Проведение своевременной диагностики обеспечивает целенаправленную и, следовательно, эффективную терапию.