СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ НПВП-ПАНКРЕАТОПАТИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Изобретение относится к экспериментальной медицине, патологической физиологии, гастроэнтерологии, фармакологии и может быть использовано для моделирования поражения поджелудочной железы, индуцированного приемом нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) - НПВП-панкреатопатии.

Известны следующие варианты воспроизведения в эксперименте в НПВП-индуцированного поражения поджелудочной железы (НПВП-панкреатопатии). Так, Zhang W. et al., 2010, предлагают моделировать НПВП-панкреатопатию путем перорального или внутрибрюшинного введения напроксена в дозе 20 и 40 мг/кг в течение 3 недель, что приводит к формированию фиброзных изменений в поджелудочной железе животных [Zhang W., Gao J., Zhao Т., Wu W., Bai Y., Zou D., Li Z. High-dose naproxen aggravates pancreatic fibrosis in a rat model of chronic pancreatitis // Pancreas. 2010 Apr; 39(3): 293-300].

Прототипом является экспериментальная модель Nasif W.A. et al., 2011, основанная на введении аспирина (ацетилсалициловой кислоты) в дозе 400 мг/кг (в 4 раза выше максимальной терапевтической дозы) крысам-самцам Sprague-Dawley в течение 21 дня перорально [Nasif W.A,, Lotey М., Mahmoud M.R. Protective effect of gum acacia against the aspirin induced intestinal and pancreatic alterations // European Review for Medical and Pharmacological Sciences. - 2011; 15: 285-292]. Недостатком модели является то, что аспирин в настоящее время редко используется в клинической практике в дозировках, необходимых для лечения ревматической патологии и купирования лихорадочного синдрома, а также то, что при использовании аспирина на первый план выходит поражение пищеварительного тракта - слизистой оболочки желудка и тонкой кишки с образованием язв, что существенно искажает в эксперименте картину НПВП-ассоциированного поражения поджелудочной железы, поскольку поджелудочная железа страдает вторично при развитии гастрита и энтерита, обусловленного введением НПВП.

Технический результат: повышение объективности и точности способа моделирования НПВП-панкератопатии в эксперименте.

Указанная задача достигается путем перорального введения нелинейным белым крысам (самцам и самкам) нестероидного противовоспалительного препарата (НПВП) Найз® - в дозе 5 мг/кг массы тела животного один раз в день в течение 21 дня.

Найз® («Д-р Редди′с Лабораторис Лтд.», Индия, г. Хайдерабад) - международное непатентованное название - нимесулид, химическая формула - 4′-нитро-2′-фенокси-метан сульфонанилид, таблетки 100 мг. Найз® - НПВП из класса сульфонанилидов. Селективный ингибитор ЦОГ-2 - фермента, участвующего в синтезе простагландинов - медиаторов отека, воспаления и боли. Препарат применяют при ревматоидном артрите, остеоартрозе, артритах различной этиологии, артралгии, миалгии, послеоперационных и постравматических болях, бурситах, тендинитах, альгодисменорее, зубной боли, головной боли [Справочник лекарственных препаратов Vidal: http://www.vidal.ru].

Для моделирования в эксперименте поражения поджелудочной железы, индуцированного приемом нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП-панкреатопатии), ранее не использовался.

Способ осуществляют следующим образом. Лабораторному животному (нелинейной белой крысе) перорально в течение 21 дня вводят нестероидный противовоспалительный препарат Найз® в разовой дозе 5 мг/кг массы тела животного. Для этого таблетку Найз® (содержание нимесулида 100 мг) делят пополам, 50 мг растворяют в 10 мл чистой дистиллированной воды, в результате получают раствор, содержащий 5 мг вещества в 1 мл, к полученному раствору добавляют 4,0 мл воды (концентрацию раствора уменьшают в 5 раз); в полученном растворе нимесулида содержится 1 мг в 1 мл (доза 5 мг/кг). Экспериментальным животным вводят по 1,0 мл полученного раствора.

Примеры конкретного выполнения

Пример 1. Крыса, самец, масса 246 г. Животному в течение 21 дня перорально ежедневно в 1,0 мл дистиллированной воды вводили нестероидный противовоспалительный препарат Найз® в разовой дозе 5 мг/кг. На 22-е сутки животное выведено из эксперимента под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии. Проведен забор аутопсийного материала (ткань поджелудочной железы - 10 образцов) для гистологического исследования.

Результаты гистологического исследования: при микроскопии препаратов в паренхиме поджелудочной железы выявляли обширные участки вакуольной дистрофии экзокриноцитов и участки некроза с нарушением структуры ацинусов, а также дегранулирующие тучные клетки. По периферии зон некроза визуализировались двуядерные клетки. Отмечено уплощение эпителия внутридольковых и междольковых выводных протоков и фиброз их стенок. Гемодинамические нарушения были представлены полнокровием кровеносных сосудов (вен).

Таким образом, у экспериментального животного, которому в течение 21 дня перорально вводили нестероидный противовоспалительный препарат Найз® в разовой дозе 5 мг/кг, отмечались патоморфологические изменения, характерные для токсического лекарственного поражения поджелудочной железы.

Пример 2. Крыса, самка, масса 218 г. Животному в течение 21 дня перорально в 1,0 мл дистиллированной воды вводили нестероидный противовоспалительный препарат Найз® в разовой дозе 5 мг/кг. На 22-е сутки животное выведено из эксперимента под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии. Проведен забор аутопсийного материала (ткань поджелудочной железы - 10 образцов) для гистологического исследования.

Результаты гистологического исследования: в паренхиме поджелудочной железы выявлено полнокровие кровеносных сосудов. В ткани поджелудочной железы обнаружены разного размера очаги вакуольной дистрофии экзокриноцитов, обширные очаги некроза с регенерацией - появлением большого количества двуядерных клеток, а также белковые массы и десквамированные эпителиальные клетки в просветах отдельных выводных протоков.

Следовательно, у экспериментального животного, которому в течение 21 дня перорально вводили нестероидный противовоспалительный препарат Найз® в разовой дозе 5 мг/кг, отмечались патоморфологические изменения, характерные для токсического лекарственного поражения поджелудочной железы.

Пример 3. Крыса, самец, масса 228 г. Животному в течение 21 дня перорально в 1,0 мл дистиллированной воды вводили нестероидный противовоспалительный препарат Найз® в разовой дозе 5 мг/кг. На 22-е сутки животное выведено из эксперимента под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии. Проведен забор аутопсийного материала (ткань поджелудочной железы - 10 образцов) для гистологического исследования.

Результаты гистологического исследования: при микроскопии препаратов отмечалось полнокровие кровеносных сосудов поджелудочной железы. В паренхиме органа выявились ограниченные участки белковой (вакуольной) дистрофии экзокриноцитов с нарушением структуры ацинусов, отдельные клетки с жировой дистрофией, фиброз междольковой соединительной ткани и большое количество в ней тучных клеток. В просветах отдельных выводных протоков обнаруживались белковые массы и десквамированные эпителиальные клетки; недесквамированные эпителиальные клетки выглядели набухшими.

Таким образом, у экспериментального животного, которому в течение 21 дня перорально вводили нестероидный противовоспалительный препарат Найз® в разовой дозе 5 мг/кг, отмечались патоморфологические изменения, характерные для токсического лекарственного поражения поджелудочной железы.