×
10.01.2014
216.012.9486

ВИДОСПЕЦИФИЧЕСКИЙ ВИРУЛЕНТНЫЙ ШТАММ БАКТЕРИОФАГА, ОБЛАДАЮЩИЙ ЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ Staphylococcus aureus, ВКЛЮЧАЯ МУЛЬТИРЕЗИСТЕНТНЫЕ ШТАММЫ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к области медицинской вирусологии и микробиологии, а именно к штамму бактериофага. Штамм обладает литической активностью в отношении Staphylococcus aureus. Штамм депонирован под номером Ph 62 в коллекции «ГКПМ-Оболенск». Штамм может найти применение для разработки комплекных лечебных и дезинфекционных препаратов против инфекций, вызванных золотистым стафилококком, а также препаратов для санации продуктов питания от Staphylococcus aureus1 табл.,3 ил., 6 пр.
Основные результаты: Видоспецифический вирулентный штамм бактериофага, обладающий литической активностью в отношении Staphylococcus aureus, включая мультирезистентные штаммы, депонированный в Государственной Коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур (ГКПМ - ОБОЛЕНСК) Федерального бюджетного учреждения науки Государственного научного центра прикладной микробиологии и биотехнологии (ФБУН ГНЦ ПМБ) под регистрационным номером Ph 62.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к медицинской вирусологии и микробиологии и касается штамма бактериофага Staphylococcus aureus SA18, кодирующего фаг-ассоциированный литический фермент, причем как бактериофаг, так и фаговый литический фермент могут быть использованы для создания новых лечебных и дезинфекционных препаратов.

Бактерии вида Staphylococcus aureus часто являются возбудителями инфекций кожи и мягких тканей, остеомиелита, артрита. Они могут вызывать вне- и внутрибольничную пневмонию, эндокардит, сепсис.

Клинически значимыми особенностями Staphylococcus aureus являются множественная устойчивость к различным классам антимикробных препаратов, устойчивость к дезинфицирующим средствам, высушиванию, ультрафиолетовому облучению, толерантность к детергентам. Высокая выживаемость на объектах внешней среды и способность персистировать в течение продолжительного периода в условиях больничного окружения увеличивает риск горизонтальной передачи этого микроба через медицинский персонал или предметы обихода, что на фоне интенсивного использования антибиотиков широкого спектра приводит к возрастающему распространению метициллинрезистентных (MRSA) и метициллинчувствительных (MSSA) штаммов Staphylococcus aureus в стационарах лечебных учреждений.

В связи с этим чрезвычайно актуальной является проблема поиска и разработки новых средств лечения инфекций, вызываемых Staphylococcus aureus. Одним из таких средств могут быть бактериофаги, хорошо зарекомендовавшие себя, например, при комплексном лечении госпитальных инфекций, вызываемых псевдомонадами.

Известен штамм бактериофага КСТС 11154 ВР, обладающий литической активностью против Staphylococcus aureus (США, патент №8043613).

В описании патента указано, что данный бактериофаг относится к группе рhi29 - подобных фагов семейства Podoviridae, которое объединяет известные умеренные фаги, не указывается литический спектр бактериофага и примеры строятся на использовании одного чувствительного штамма S.aureus, выделенного от маститных коров.

Известен штамм бактериофага КАСС 9700IP, обладающий литической активностью против Staphylococcus aureus (США, патент №8071352).

В описании патента не указывается литический спектр бактериофага и примеры строятся на использовании одного чувствительного штамма S.aureus, выделенного от маститных коров.

В настоящее время существует коммерческий препарат бактериофага для лечения инфекций, вызванных стафилококками - Бактериофаг стафилококковый (http:// www.microgen.ru/catalog/detail.php?ID=485). Согласно описанию производителя препарат представляет собой фильтрат фаголизата, активный в отношении стафилококковых бактерий наиболее распространенных фаготипов, в т.ч. Staphylococcus aureus. Состав коммерческого препарата не охарактеризован, соответственно характеристики бактериофагов, входящих в его состав, отсутствуют.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является новый вирулентный штамм видоспецифического бактериофага Staphylococcus aureus и его фаг-ассоциированный литический фермент, эффективно лизирующие клинические изоляты MRSA и MSSA.

Технический результат достигается получением нового видоспецифического вирулентного штамма бактериофага Staphylococcus aureus SA18, семейства Myoviridae, обладающего высокой литической активностью, широким спектром действия в отношении штаммов Staphylococcus aureus, низкой частотой образования фагорезистентных форм и кодирующего литический фермент с высокой лизирующей активностью против стафилококков при применении извне.

Штамм бактериофага Staphylococcus aureus SA18 выделен из клинического материала, то есть бактериальный вирус приспособлен к функционированию в данной экологической нише, и депонирован в Государственной Коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур (ГКПМ - ОБОЛЕНСК) Государственного научного центра прикладной микробиологии и биотехнологии (ФБУН ГНЦ ПМБ) под регистрационным номером Ph 62.

Отличием предлагаемого штамма бактериофага Staphylococcus aureus SA18 является высокая антимикробная активность, широкий спектр лизируемых штаммов Staphylococcus aureus, низкая частота образования фагорезистентных форм у чувствительных штаммов.

Предлагаемое изобретение иллюстрируется следующими фигурами:

Фиг.1 - фагочувствительность клинического изолята Staphylococcus aureus ГКПМ-Оболенск 75/41

Доза - 1RTD SA18 (титр бактериофага - 106 БОЕ/мл)

Доза - 10RTD SA18 (титр бактериофага- 107 БОЕ/мл)

Доза -100 RTD SA18 (титр бактериофага-108 БОЕ/мл)

Бактериофаг стафилококковый - препарат коммерческого бактериофага производства НПО «Микроген» в исходной концентрации (видны фагорезистентные колонии).

Фиг.2 - электронная микрофотография бактериофага Staphylococcus aureus SA18. Масштаб 50 нм.

Фиг.3 - гидролиз ДНК бактериофага Staphylococcus aureus SA18 рестрикционными эндонуклеазами: (1) маркер молекулярных масс Lambda/Hindlll, (2) EcoRI, (3) EcoRV, (4) AcII, (5) PstI, (6) маркер молекулярных масс Lambda Mix 19 (#SM0231 Fermentas).

Бактериофаг Staphylococcus aureus SA18 относится к семейству Myoviridae и характеризуется следующими свойствами:

Морфология фаговой частицы: головка икосаэдрической формы диаметром 90-95 нм, сокращающийся хвостовой отросток длиной 250-270 нм (Фиг.2).

Морфология негативных колоний: на чувствительном бактериальном штамме формирует круглые прозрачные негативные колонии диаметром ~ 0,5 мм.

Частота образования фагорезистентных форм Staphylococcus aureus на одну клетку менее 10-9.

Спектр литического действия: бактериофаг лизирует 98,6% выбранных для проведения исследования штаммов Staphylococcus aureus (n=148), выделенных от больных ожоговых отделений, отделений плановой и экстренной хирургии, терапевтического отделения, отделения реанимации и интенсивной терапии, а также отделения урологии; не проявляет литической активности к штаммам Staphylococcus epidermidis и представителям других родов и семейств (Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Enterococcus spp., Streptococcus spp).

Фаг-ассоциированный литический фермент бактериофага Staphylococcus aureus SA18 эффективно лизирует 100% выбранные для проведения исследования клинические изоляты Staphylococcus aureus (n=148), в том числе и штаммы, резистентные к бактериофагу SA18 (Таблица).

Геном бактериофага Staphylococcus aureus SA18 представлен двунитевой ДНК размером около 120 тысяч пар оснований. ДНК фага расщепляется рестрикционными эндонуклеазами: AccI, DraIII, AluI, SpeI, EcoRI, EcoRV, AvaI, AvaII, HinfI, HincII, HphI, MwoI, Hindlll, KpnI, MboII, NcoI, NdeI, NheI, AcII, PstI, RsaI, SacI, PleI, SmaI, TaiI, XbaI, XhoI, и не гидролизуется ферментами Aatll, BamHI, Bell, BgUI, NruI, MboI, ClaI, SacII, PvuII, SalI, BcII (фиг.3).

Бактериофаг Staphylococcus aureus SA18 хранится в виде фаголизата либо в лиофильно высушенном состоянии.

Бактериофаг Staphylococcus aureus SA18 может быть использован для разработки комплексных лечебных и дезинфекционных препаратов против клинических штаммов S. aureus, включая мультирезистентные штаммы, а также препаратов для санации продуктов питания от золотистого стафилококка.

Пример 1. Получение фаголизата бактериофага Staphylococcus aureus SA18

К 0,5 мл ночной бульонной культуры чувствительного штамма Staphylococcus aureus добавляют 4,5 мл бульона (Brain Heart Infusion Broth с добавлением 1 мМ сернокислого магния и 11 мМ хлористого кальция), подращивают культуру до 109 м.к./мл и вносят 10 мкл суспензии штамма бактериофага SA18 с концентрацией 5×109 БОЕ/мл. Смесь инкубируют в стационарных условиях при 25 °С до наступления полного просветления бактериальной культуры. Добавляют 0,25 мл хлороформа, перемешивают, выдерживают в холодильнике в течение 2 ч. Низкоскоростным центрифугированием (10000 g, 15 мин) удаляют обломки бактериальных клеток и титруют фаголизат. Он содержит 5×109-1010 частиц фага в 1 мл.

Пример 2. Получение неочищенного фаг-ассоциированного литического фермента бактериофага Staphylococcus aureus SA18

В 90 мл бульона (Brain Heart Infusion Broth с добавлением 1 мМ сернокислого магния и 1 мМ хлористого кальция) вносят 5 мл ночной бульонной культуры чувствительного штамма Staphylococcus aureus, подращивают культуру до значения OD650, равного 0.7, вносят 2 мл суспензии штамма бактериофага SA18 с концентрацией 5×109 БОЕ/мл. Смесь инкубируют в стационарных условиях при 25 °С до выявления лизиса бактериальной культуры. Затем лизат быстро охлаждают на льду. Неразрушенные бактериальные клетки и клеточный дебрис удаляют с помощью центрифугирования и фильтрации через 0.45 мкм мембрану. Супернатант концентрируют в 50 раз ультрафильтрацией через Millipore YM-100 мембрану. Экстракт с неочищенным литическим ферментом хранят при температуре -18 °С до использования.

Пример 3. Проверка специфичности и спектра антибактериального действия бактериофага Staphylococcus aureus SA18

Специфичность штамма бактериофага проверяют методом спот-тестов. Для этого бульонные бактериальные культуры, находящиеся в фазе логарифмического роста, мутностью 109 м.к./мл наносят на поверхность агара в чашках Петри с помощью стерильного ватного тампона. Инокуляцию проводят штриховыми движениями в трех направлениях, поворачивая чашку Петри на 60°. Наносят по 10 мкл фага в дозах 1, 10 и 100 RTD (титр фага - 106, 107 и 108 БОЕ/мл), инкубируют чашки при комнатной температуре в течение 1-2 сут.

Специфичность штамма бактериофага и неочищенного фаг-ассоциированного литического фермента (спот-тесты)
Представители вида * Наличие (+) или отсутствие (-) лизиса**
Бактериофаг SA18 Неочищенный литический фермент бактериофага SA18
Staphylococcus aureus MSSA (99) +(97)
-(2)
+(99)
Staphylococcus aureus MRSA (49)
Все штаммы MRSA мультирезистентны, т.к. устойчивы к различным комбинациям тетрациклинов, аминогликозидов, макролидов и фторхиналонов
+(49) +(49)
Staphylococcus epidermidis (3) - -
Streptococcus spp. (3) - -
Enterococcus spp. (2) - -
Escherichia coli (3) - -
Salmonella enteritidis (3) - -
Pseudomonas aeruginosa (3) - -
* - в скобках - количество штаммов данного вида, используемых при проверке
** - специфичность штамма бактериофага Staphylococcus aureus SA18 не зависит от дозы в пределах исследованных концентраций (106, 107и 108 БОЕ/мл)

Пример 4. Проверка специфичности и спектра антибактериального действия неочищенного фаг-ассоциированного литического фермента бактериофага Staphylococcus aureus SA18

Специфичность неочищенного фаг-ассоциированного литического фермента бактериофага Staphylococcus aureus SA18 проверяют методом спот-тестов. Для этого по 0,05 мл бульонных бактериальных культур, находящихся в фазе логарифмического роста (109 м.к./мл), наносят на поверхность плотных питательных сред (содержащих 1% агарозы, 1 мМ сернокислого магния и 1 мМ хлористого кальция) в чашках Петри. Затем капают по 10 мкл неочищенного фаг-ассоциированного литического фермента стафилококкового бактериофага SA18, инкубируют чашки при комнатной температуре в течение 1-2 сут (Таблица).

Пример 5. Получение электронно-микроскопических данных о бактериофаге Staphylococcus aureus SA18, наработанном по примеру 1

Заключение о принадлежности фага к тому или иному морфотипу делают на основании электронно-микроскопического исследования морфологии фаговой частицы. Исследование проводят методом негативного контрастирования. Образцы фаголизата, полученного по примеру 1, дополнительно очищают методом дифференциального центрифугирования, фиксируют 1%-ным раствором глутарового альдегида, приготовленного на 0,1 М фосфатном буфере (рН 7,0), и наносят на коллодиевые пленки-подложки, укрепленные на никелевых сетках. Нанесенные на подложки образцы контрастируют 1%-ным водным раствором уранилацетата и изучают на электронном микроскопе.

Электронная микрофотография бактериофага Staphylococcus aureus SA18 представлена на фиг.2.

Пример 6. Рестрикционный анализ ДНК штамма бактериофага Staphylococcus aureus SA18

Составляют рестрикционную смесь, содержащую 0,2 мкг/мкл ДНК бактериофага SA18, 2 мкл 10-кратного рестрикционного буфера, 1 единицу соответствующего фермента, деионизованную воду до общего объема 20 мкл. Смесь инкубируют при 37 °С в течение 16 ч. Электрофорез проводят в горизонтальном электрофорезном аппарате в 0,6%-ном агарозном геле при напряжении 90 В в течение 4 ч. После 15 мин окрашивания в растворе 0,4 мкг бромистого этидия гель визуализируют под УФ-лампой.

Таким образом, штамм бактериофага Staphylococcus aureus SA18 относится к семейству Myoviridae, является специфичным и вирулентным для Staphylococcus aureus и кодирует фаг-ассоциированный литический фермент с высокой лизирующей активностью против стафилококков при применении извне. Широкий спектр литической активности бактериофага Staphylococcus aureus SA18, как и фаг-ассоциированного литического фермента бактериофага Staphylococcus aureus SA18, позволяет использовать бактериофаг SA18 для разработки комплексных лечебных и дезинфекционных препаратов против инфекций, вызванных золотистым стафилококком, а также для препаратов для санации продуктов питания от Staphylococcus aureus. При проверке фагочувствительности клинических изолятов золотистого стафилококка отмечено наличие единичных фагорезистентных колоний у всех штаммов при использовании коммерческого препарата бактериофага стафилококкового жидкого и у 19% исследованных штаммов при использовании бактериофага Staphylococcus aureus SA18 (титр 106-108 БОЕ/мл или 1-100 RTD).

Видоспецифический вирулентный штамм бактериофага, обладающий литической активностью в отношении Staphylococcus aureus, включая мультирезистентные штаммы, депонированный в Государственной Коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур (ГКПМ - ОБОЛЕНСК) Федерального бюджетного учреждения науки Государственного научного центра прикладной микробиологии и биотехнологии (ФБУН ГНЦ ПМБ) под регистрационным номером Ph 62.
ВИДОСПЕЦИФИЧЕСКИЙ ВИРУЛЕНТНЫЙ ШТАММ БАКТЕРИОФАГА, ОБЛАДАЮЩИЙ ЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ Staphylococcus aureus, ВКЛЮЧАЯ МУЛЬТИРЕЗИСТЕНТНЫЕ ШТАММЫ
ВИДОСПЕЦИФИЧЕСКИЙ ВИРУЛЕНТНЫЙ ШТАММ БАКТЕРИОФАГА, ОБЛАДАЮЩИЙ ЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ Staphylococcus aureus, ВКЛЮЧАЯ МУЛЬТИРЕЗИСТЕНТНЫЕ ШТАММЫ
ВИДОСПЕЦИФИЧЕСКИЙ ВИРУЛЕНТНЫЙ ШТАММ БАКТЕРИОФАГА, ОБЛАДАЮЩИЙ ЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ Staphylococcus aureus, ВКЛЮЧАЯ МУЛЬТИРЕЗИСТЕНТНЫЕ ШТАММЫ
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 1-10 of 49 items.
10.01.2013
№216.012.18e5

Питательная среда для культивирования и выделения возбудителей гнойных бактериальных менингитов, сухая (варианты)

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к клинической микробиологии. Питательная среда содержит панкреатический гидролизат казеина, пептон ферментативный, ферментативный гидролизат черного альбумина, дрожжевой экстракт, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002471865
Дата охранного документа: 10.01.2013
10.04.2013
№216.012.3368

Штамм гибридных клеток животных mus musculus 5g6 - продуцент моноклональных антител, специфичных к v антигену yersinia pestis

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения моноклональных антител (МКА) к V антигену Yersinia pestis. Штамм гибридных клеток животных Mus musculus 5G6 получают путем иммунизации мышей линии BALB/c. Мышей иммунизируют 4-х кратным введением рекомбинантного V...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002478703
Дата охранного документа: 10.04.2013
10.04.2013
№216.012.3473

Способ иммунофлуоресцентного определения протективного антигена возбудителя сибирской язвы

Разработан способ иммунофлуоресцентного высокочувствительного определения протективного антигена (ПА) возбудителя сибирской язвы на основе моноклональных антител, специфичных к различным эпитопам протективного антигена, одно из которых, специфичное к III домену ПА, иммобилизовано на твердой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002478970
Дата охранного документа: 10.04.2013
27.06.2013
№216.012.51c3

Способ определения летального фактора сибирской язвы на основе иммунодетекции, сопряженной с полимеразной цепной реакцией

Изобретению предусматривает определение летального фактора (LF) сибирской язвы методом иммунодетекции, сопряженной с ПЦР. Белок LF адсорбируют на микропланшетах или микрострипах с использованием предварительно адсорбированного специфического моноклонального антитела (МКАТ). Далее...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002486524
Дата охранного документа: 27.06.2013
27.10.2013
№216.012.79ec

Штамм бактериофага escherichia coli ecd4, обладающий литической активностью по отношению к бактериям escherichia coli серотипа о104:н4

Изобретение относится к области медицинской микробиологии и касается штамма бактериофага Escherichia coli ECD4. Штамм бактериофага Escherichia coli ECD4 выделен из фекалий бройлерных кур на культуре бактерий штамма Escherichia coli О104:Н4 RKI№112027 и депонирован в Государственной коллекции...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002496874
Дата охранного документа: 27.10.2013
27.02.2014
№216.012.a6bc

Сухая дифференциально-диагностическая питательная среда для обнаружения и учета e.coli и колиформных бактерий

Изобретение относится к санитарной и клинической микробиологии и может быть использовано для обнаружения и учета Е.coli и колиформных бактерий в воде, пищевых продуктах, клиническом материале и т.д. Питательная среда содержит панкреатический гидролизат рыбной муки, высушенный с тергитолом 7 из...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002508399
Дата охранного документа: 27.02.2014
27.02.2014
№216.012.a6bd

Сухая хромогенная питательная среда для обнаружения колиформных бактерий и e.coli (варианты)

Изобретение относится к медицинской микробиологии и микробиологической промышленности и может быть использовано для обнаружения колиформных бактерий и Е.coli в образцах пищевых продуктов и воды при проведении бактериологических исследований. Питательная среда содержит в качестве источника азота...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002508400
Дата охранного документа: 27.02.2014
20.04.2014
№216.012.bb64

Способ специфического отбора высокоаффинных молекул днк (днк-аптамеров) к рекомбинантному белку-мишени

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу специфического отбора высокоаффинных молекул ДНК (ДНК-аптамеров) к рекомбинантному белку-мишени. Указанный способ включает синтез единой полипептидной цепи рекомбинантного белка, содержащего в своем составе фрагмент...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002513700
Дата охранного документа: 20.04.2014
10.06.2014
№216.012.cd34

Композиция антибактериальная, штамм бактериофага escherichia coli, используемый для получения такой композиции.

Изобретение относится к области пищевой промышленности, биотехнологии и касается композиции антибактериальной и штамма бактериофага Escherichia coli, используемого для получения такой композиции. Охарактеризованная композиция антибактериальная включает фильтрат фаголизата Escherichia coli,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002518303
Дата охранного документа: 10.06.2014
10.08.2014
№216.012.e7d4

Способ получения бактериофага

Представленный способ получения бактериофага включает: засев бактериальной культуры штамма-хозяина в титре 10-10 КОЕ/мл в сосуд для культивирования на скошенную плотную питательную среду с толщиной слоя от 10 мм до 25 мм, культивирование в течение 3-3,5 часов при оптимальной температуре для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002525141
Дата охранного документа: 10.08.2014
Showing 1-10 of 66 items.
10.01.2013
№216.012.18e5

Питательная среда для культивирования и выделения возбудителей гнойных бактериальных менингитов, сухая (варианты)

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к клинической микробиологии. Питательная среда содержит панкреатический гидролизат казеина, пептон ферментативный, ферментативный гидролизат черного альбумина, дрожжевой экстракт, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002471865
Дата охранного документа: 10.01.2013
10.04.2013
№216.012.3368

Штамм гибридных клеток животных mus musculus 5g6 - продуцент моноклональных антител, специфичных к v антигену yersinia pestis

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения моноклональных антител (МКА) к V антигену Yersinia pestis. Штамм гибридных клеток животных Mus musculus 5G6 получают путем иммунизации мышей линии BALB/c. Мышей иммунизируют 4-х кратным введением рекомбинантного V...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002478703
Дата охранного документа: 10.04.2013
10.04.2013
№216.012.3473

Способ иммунофлуоресцентного определения протективного антигена возбудителя сибирской язвы

Разработан способ иммунофлуоресцентного высокочувствительного определения протективного антигена (ПА) возбудителя сибирской язвы на основе моноклональных антител, специфичных к различным эпитопам протективного антигена, одно из которых, специфичное к III домену ПА, иммобилизовано на твердой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002478970
Дата охранного документа: 10.04.2013
27.06.2013
№216.012.51c3

Способ определения летального фактора сибирской язвы на основе иммунодетекции, сопряженной с полимеразной цепной реакцией

Изобретению предусматривает определение летального фактора (LF) сибирской язвы методом иммунодетекции, сопряженной с ПЦР. Белок LF адсорбируют на микропланшетах или микрострипах с использованием предварительно адсорбированного специфического моноклонального антитела (МКАТ). Далее...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002486524
Дата охранного документа: 27.06.2013
10.09.2013
№216.012.67d8

Способ выделения бактериоцинов

Культуральную жидкость штамма-продуцента концентрируют на полых волокнах, отсекающих макромолекулы с молекулярной массой более 15 кДа. К концентрату клеток добавляют сухой NaCl в конечной концентрации 0,5 М. Перемешивают на качалке в течение 20 мин. Суспензию центрифугируют при 10000g 15 мин и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002492231
Дата охранного документа: 10.09.2013
27.10.2013
№216.012.79ec

Штамм бактериофага escherichia coli ecd4, обладающий литической активностью по отношению к бактериям escherichia coli серотипа о104:н4

Изобретение относится к области медицинской микробиологии и касается штамма бактериофага Escherichia coli ECD4. Штамм бактериофага Escherichia coli ECD4 выделен из фекалий бройлерных кур на культуре бактерий штамма Escherichia coli О104:Н4 RKI№112027 и депонирован в Государственной коллекции...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002496874
Дата охранного документа: 27.10.2013
10.02.2014
№216.012.9fa0

Способ определения содержания твердого жира по данным ямр-релаксации, прямой метод

Использование: для определения содержания твердого жира по данным ЯМР-релаксации. Сущность: заключается в том, что осуществляют помещение исследуемого образца в ампулу для ЯМР измерений, проведение стандартной процедуры темперирования, помещение ампулы в датчик ЯМР-анализатора, поляризацию...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002506572
Дата охранного документа: 10.02.2014
10.02.2014
№216.012.9fa1

Способ определения содержания твердого жира по данным ямр-релаксации

Использование: для определения содержания твердого жира по данным ЯМР-релаксации. Сущность заключается в том, что осуществляют помещение исследуемого образца в ампулу для ЯМР измерений, проведение стандартной процедуры темперирования, помещение ампулы в датчик ЯМР-анализатора, поляризацию...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002506573
Дата охранного документа: 10.02.2014
27.02.2014
№216.012.a6bc

Сухая дифференциально-диагностическая питательная среда для обнаружения и учета e.coli и колиформных бактерий

Изобретение относится к санитарной и клинической микробиологии и может быть использовано для обнаружения и учета Е.coli и колиформных бактерий в воде, пищевых продуктах, клиническом материале и т.д. Питательная среда содержит панкреатический гидролизат рыбной муки, высушенный с тергитолом 7 из...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002508399
Дата охранного документа: 27.02.2014
27.02.2014
№216.012.a6bd

Сухая хромогенная питательная среда для обнаружения колиформных бактерий и e.coli (варианты)

Изобретение относится к медицинской микробиологии и микробиологической промышленности и может быть использовано для обнаружения колиформных бактерий и Е.coli в образцах пищевых продуктов и воды при проведении бактериологических исследований. Питательная среда содержит в качестве источника азота...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002508400
Дата охранного документа: 27.02.2014
+ добавить свой РИД