Результат интеллектуальной деятельности: Способ повышения поствакцинального иммунитета против цирковирусной инфекции свиней

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к способам профилактики цирковирусной инфекции у свиней и позволяет повысить поствакцинальный иммунитет против цирковируса у молодняка свиней.

Известен способ повышения напряженности поствакцинального иммунитета у свиней против цирковирусной инфекции, предполагающий подкожное использование препарата Бетулин-ПГ в дозе 0,2 мл/кг массы тела совместно с введением вакцины. Бетулин-ПГ, обладая иммуномодуляторной способностью, увеличивает уровень поствакцинальных антител в организме животных в 4 раза на 15 день после вакцинации. Способ позволяет, по сравнению с реакцией организма свиней после вакцинации, увеличить иммунологическую реактивность за счет прироста количества и активности нейтрофилов. (Земляницына, И.Р. Применение бетулина-ПГ для повышения напряженности поствакцинального иммунитета против рожи и цирковирусной инфекции свиней / И.Р. Земляницына // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2013. - Т. 214. - С. 185-190)

Недостаток данного способа: изменение числа Т- и В-лимфоцитов происходит на фоне снижения общего количества лимфоцитов и Т-киллеров, что не позволяет рассчитывать на длительность положительного эффекта; Бетулин-ПГ обладает только иммуностимулирующим эффектом и не имеет гепатопротекторных свойств, что дополнительно ограничивает возможность пролонгированного влияния препарата на организм животных.

Известен способ профилактики цирковирусной инфекции путем интраперитонеального введения 3-5 мл сыворотки крови забойных свиней, содержащих антитела к цирковирусу, поросятам в 30-дневном возрасте, что приводит к снижению их заболеваемости с 22,2 до 6,40%. Способ обладает высокой специфичностью за счет содержания в сыворотке крови антител к возбудителю заболевания. (Петрова, О.Г. Профилактика цирковирусной инфекции свиней / О.Г. Петрова, И.М. Донник, А.Г. Исаева, Ю.Г. Крысенко // Аграрный вестник Урала. - 2014. - №5(123). - С. 30-35.)

Недостаток данного способа: предназначен для лечения больных животных; высока вероятность заражения неинфицированных животных цирковирусной инфекцией в результате содержания в сыворотке крови забойных животных не только антител, но и вируса.

Известен способ профилактики цирковирусной инфекции свиней с помощью аутотканевой инактивированной гидроксиалюминиевой вакцины, вводимой поросятам двух кратно в 15 и 25-суточном возрасте в дозах 2 и 3 мл соответственно, что позволяет увеличить сохранность на 6,7% по сравнению с не вакцинированными животными, как результат использования при производстве вакцины возбудителя, циркулирующего на предприятии. (Крысенко, Ю.Г. Сравнительная эффективность вакцинации при цирковирусной инфекции свиней / Ю.Г. Крысенко, Е.И. Трошин // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2012. - Т. 209. - С. 183-186.)

Недостаток способа: менее эффективно, чем готовые вакцины ВЕРРЕС-ЦИРКО НПО «Нарвак» (г. Москва) и ЦиркоФЛЕКС «БерингерИнгельхайм» (Германия) влияет на сохранность поголовья свиней, так как высока вероятность появления неконтролируемых аутоиммунных реакций из-за наличия тканевых антигенов в препарате, увеличивающих отход животных.

Наиболее близким аналогом изобретения, выбранным в качестве прототипа, является способ повышения поствакцинального иммунитета против репродуктивно-респираторного синдрома свиней за счет применения препарата «Лигфол». Трехкратная иммунизация, сочетаемая с «Лигфолом», по сравнению с иммунизацией без препарата, позволяет через 27 суток после вакцинации, увеличить титр антител в 2,03 раза и оказать положительное влияние на физиологический статус организма за счет антиоксидантных, иммуностимулирующих и детоксикационных свойств лигфола. (Сафронов Д.И. Применение препарата «Лигфол» для повышения поствакцинального иммунитета против репродуктивно-респираторного синдрома свиней: автореф. дис. … канд. вет. наук: 06.02.02. - Казань: КГАВМ им. Н.Э. Баумана, 2018. - 24 с.)

Недостатком прототипа является то, что он предназначен для повышения поствакцинального иммунитета против репродуктивно-респираторного синдрома свиней и не подходит для применения против цирковирусной инфекции свиней, к тому же не обеспечивает пролонгированной имунно- и метаболической модуляции.

Целью изобретения является повышение сохранности поголовья и скорости роста свиней путем пролонгации иммунного ответа и модулирования метаболических функций печени животного.

Поставленная цель достигается тем, что способ повышения поствакцинального иммунитета против цирковирусной инфекции свиней, включающий совместное внутримышечное введение вакцины и иммунологического и метаболического модулятора, в отличие от прототипа, в качестве вакцины используют Ингельвак ЦиркоФЛЕКС, а в качестве иммунологического и метаболического модулятора применяют препарат, содержащий лейкоцитарные белки и пептиды (ЛБИП), выделенные из крови гипериммунизированных вакциной Ингельвак ЦиркоФЛЕКС доноров крупного рогатого скота, с активностью 100±10 ЭЕА/мл в дозе 0,19-0,21 мл на 1 кг живой массы; введение осуществляют 21-дневным поросятам однократно.

Препарат - лейкоцитарные белки и пептиды (ЛБИП), выделяется из лейкоцитов крови доноров (крупного рогатого скота), подвергнутых гипериммунизации вакциной Ингельвак ЦиркоФЛЕКС (Германия). Для получения препарата из стабилизированной гепарином крови доноров сначала осаждают эритроциты, а затем из супернатанта- лейкоциты. Далее лейкоцитарные клетки подвергают лизису, что сопровождается высвобождением белков и пептидов из внутриклеточных структур. Полученный «лейкоцитарный лизат» очищают методом диализа и консервируют фенолом. Содержание лейкоцитарных белков и пептидов в полученном препарате составляет 100±10 ЭЕА (эмбриональные единицы активности) на 1 мл.

Сопоставительный анализ заявляемого решения с прототипом позволяет сделать вывод, что заявляемый способ повышения поствакцинального иммунитета против цирковирусной инфекции свиней позволяет модулировать иммунную и метаболическую реакцию организма за счет сочетания вакцины Ингельвак ЦиркоФЛЕКС (Германия) с введением ЛБИП, которые стимулируют и пролонгируют иммуногенность вакцины, корректируют биохимические свойства клеток печени, определяя эффективность иммунизации и анаболическую направленность обменных процессов, что приводит к повышению сохранности поголовья и скорости роста свиней

Признаки, отличающие предлагаемое техническое решение от прототипа:

1. Способ основан на повышении иммуногенности вакцины Ингельвак ЦиркоФЛЕКС (Германия) за счет способности лейкоцитарных белков и пептидов (ЛБИП), во-первых, стимулировать иммунный ответ организма и, во-вторых, пролонгировать его иммунореактивность за счет дополнительного поступления «клеток иммунной памяти».

2. Введение лейкоцитарных белков и пептидов (ЛБИП) в организм животных модулирует биохимическую активность гепатоцитов, ориентируя белковый обмен по анаболическому пути.

Пример выполнения. Способ повышения поствакцинального иммунитета против цирковирусной инфекции свиней испытан в Челябинской области в 2022 г. С этой целью из поросят по принципу пар-аналогов было создано 2 группы (контрольная, опытная). Животные содержались в однотипных технологических условиях. Отъем поросят для контрольных проб осуществлялся в 23-24-суточном возрасте.

Поросятам контрольной группы (n=3618) на 21 день жизни была сделана инъекция вакцины Ингельвак ЦиркоФЛЕКС (Германия) в дозе 0,9-1,0 мл внутримышечно; поросятам опытной группы (n=3545) введение вакцины Ингельвак ЦиркоФЛЕКС (Германия) в дозе 0,9-1,0 мл внутримышечно сочетали с инъекцией ЛБИП с активностью 100±10 ЭЕА (эмбриональные единицы активности) на 1 мл в дозе 0,19-0,21 мл/кг внутримышечно.

Мониторинг за животными осуществляли в наиболее «критический» период их выращивания в производственных условиях - период доращивания. Оценку эффективности используемой схемы вакцинации осуществляли по результатам серологических, биохимических и зоотехнических исследований. Для проведения серологических и биохимических анализов из опытной и контрольной группы случайным образом отбирали по 100 образцов крови. Для серологических исследований использовали набор «ЦИРКО-Серотест» (Россия). Биохимические исследования выполнены колориметрическим методом при помощи готовых наборов реактивов «Вектор-Бест» (Россия). Результаты лабораторных исследований подвергнуты общепринятой математической обработке.

Титр антител к цирковирусу в контрольной группе поросят после вакцинации был максимальным в 35-суточном возрасте (табл. 1), а затем планомерно снижался в ходе периода доращивания, свидетельствуя о снижении напряженности поствакцинального иммунитета. Однако в опытной группе наблюдалась противоположная зависимость. Во-первых, титр антител к цирковирусу в 35-суточном возрасте был выше, чем в контроле в 3,51-4,33 раза. Во-вторых, их уровень, хоть и снижался в организме поросят, но, все равно, превышал значения контроля: в 60 суточном возрасте в 3,47-4,11 раза; в 90-суточном - в 3,64-3,75 раза.

Следовательно, сочетание вакцинации с ЛБИП не только повышало иммунореактивность организма свиней к цирковирусу, но и пролонгировало сохранение иммунной памяти к антигену.

При оценке сопряженности способа вакцинации с изменением биохимического статуса организма свиней было установлено, что с возрастом величина показателей крови изменялась, отражая изменение метаболического статуса животных на фоне протекания ростовых процессов (табл. 2).

При сравнительном анализе данных контрольной и опытной групп было выявлено, что поросята, у которых вакцинация сочеталась с введением ЛБИП, превосходили своих аналогов по концентрации общего белка (на 1,24-3,27%), альбуминов (на 11,01-35,68%)), активности АлАТ (на 8,66- 13,47%) и АсАТ (на 9,02-17,87%), но имели меньшую концентрацию мочевины (на 24,36-52,82%), что определяло соотношение между общим белком и мочевиной, характеризующим степень «задержки» белкового азота в организме животных (табл. 2). Следовательно, в организме поросят опытной группы возрастная ориентация белкового обмена по анаболическому пути была выражена более ярко, чем в контроле, что обеспечивалось альбуминсинтезирующей и мочевинобразующими функциями печени в организме свиней. Соответственно, это отразилось на величине зоотехническихпоказателей, которые сравнивались в конце периода доращивания (табл. 3).

Данные таблицы 3 свидетельствуют, что совместное применение вакцины и ЛБИП у свиней позволило значительно увеличить сохранность животных - на 9,02% по сравнению с контролем, получить больше на 12,88 кг валового привеса из расчета на одну голову, а также увеличить среднесуточный прирост на 90 граммов.

В наших исследованиях сочетанное введение вакцины Ингельвак ЦиркоФЛЕКС (Германия) с лейкоцитарными белками и пептидами (ЛБИП), по сравнению с использованием только вакцины, позволило повысить титр антител к вирусу в 3,47-4,33 раза и поддерживать его в организме в течение периода доращивания (90 дней) поросят, являющегося наиболее «критичным» по уровню сохранности поголовья; активизировать анаболическую направленность белкового обмена за счет коррекции альбуминсинтезирующей и мочевинобразующей функции клеток печени, что увеличило уровень среднесуточных приростов живой массы на 90 г, валовый привес из расчета на одну голову - на 12,88 кг и сохранность поголовья на 9,02%.

Таким образом, использование предлагаемого способа повышения поствакцинального иммунитета против цирковирусной инфекции свиней позволяет усилить иммуногенность вакцины Ингельвак ЦиркоФЛЕКС, сформировать пролонгированную иммунореактивность к инфекции у животных, стимулировать анаболическую направленность обмена белков за счет влияния на альбумин-синтезирующую и мочевинобразующую функции печени. При этом данный способ обеспечивает, по сравнению с существующим методом, не только повышение сохранности поголовья, но и их продуктивности.

Предлагаемый способ позволяет повысить титр антител к вирусу в 3,47-4,33 раза, сформировать анаболическую направленность белкового обмена, повысить сохранность поголовья на 9,02%, увеличить валовый привес из расчета на одну голову на 12,88 кг и среднесуточный прирост на 90 г.

Технический результат, достигаемый при использовании заявляемого способа, заключается в повышении сохранности поголовья и скорости роста свиней путем пролонгации иммунного ответа и модулирования метаболических функций печени животного.