Результат интеллектуальной деятельности: Способ определения резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии у пациентов с ишемической болезнью сердца

Способ определения резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии у пациентов с ишемической болезнью сердца.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, клинической лабораторной диагностике и гематологии, и может быть использовано для определения резистентности к двойной антитромбоцитарной терапии у пациентов с ишемической болезнью сердца, принимающих кардиомагнил и клопидогрель в течение 6 месяцев

Сердечно-сосудистые заболевания остаются основной причиной смерти и инвалидности в большинстве европейских стран. Выявление у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС) склонности к повышенному тромбообразованию имеет важное прогностическое значение при подборе лекарственных средств, направленных на достижение стойкого антитромботического эффекта [8,9,12]. На сегодняшний день лекарственные средства группы антиагрегантов занимают одно из ведущих мест в профилактике ИБС [1,6,7]. Наиболее часто используемым препаратом данной группы является кардиомагнил, эффективность которого доказана в многочисленных исследованиях [3,4,5]. Однако повторные сердечно-сосудистые события, ухудшение состояния пациентов, показания к оперативному лечению заставляют врачей назначать двойную антитромботическую терапию [1]. Согласно рекомендациям комитета по разработке практических рекомендаций и Европейского общества кардиологов, ежегодно увеличивается количество пациентов, которые имеют показания к назначению двойной антитромбоцитарной терапии (ДАТТ), включающей комбинацию ацетилсалициловой кислоты и перорального ингибитора P2Y12 рецепторов тромбоцитов к аденозин 5'-дифосфату [11,12]. Однако до сих пор нет единого мнения насчет выбора оптимальной схемы и длительности ДАТТ у пациентов с ИБС, которые получают лекарственные средства группы антиагрегантов [2,5,10,11,13]. Высокая реактивность тромбоцитов при приеме ингибиторов P2Y12 рецепторов ассоциирована с риском ишемических событий [10,12]. Эти данные способствуют обоснованию индивидуальной антитромбоцитарной терапии на основе мониторинга функции тромбоцитов, с целью выявления пациентов с недостаточным ответом, но даже двойная терапия в ряде случаев приводит к развитию индивидуальной резистентности тромбоцитов к антитромбоцитарной терапии.

Роль тромбоцитов в развитии артериального тромбоза установлена в эксперименте и доказана клиническими исследованиями, показавшими эффективность антитромбоцитарных препаратов в отношении риска развития инфарктов и инсультов у больных с различными формами ИБС [2,10,12]. Исследования по изучению функции тромбоцитов у больных ИБС проводятся более 50 лет и большинство из них имеют ограничения, связанные с отсутствием стандартизации. Известно, что классическим методом для оценки агрегации тромбоцитов является световая трансмиссионная агрегометрия [7]. В качестве индуктора агрегации используется аденозин дифосфат (АДФ). АДФ, высвобождающийся из поврежденных клеток в сосудистое русло, относится к наиболее важным физиологическим стимулам тромбоцитов. Рецепторы к АДФ на тромбоцитах отличаются от пуриновых рецепторов других клеток, прежде всего тем, что для них АТФ является антагонистом, а не агонистом, как в случае других клеток. О тромбоцитарной активности, на фоне индуктора агрегации АДФ, свидетельствует возрастающая степень прохождения световых лучей через суспензию тромбоцитов [2]. При этом у больных с ИБС, принимающих аспирин и клопидогрель в течение 6 месяцев, наличие повышенной активности тромбоцитов является признаком индивидуальной резистентности тромбоцитов к проводимой двойной антитромбоцитарной терапии.

Известен способ [5] выделения суспензии тромбоцитов из периферической венозной крови, забранной из локтевой вены утром, натощак в пластиковые пробирки, содержащие антикоагулянт (цитрат натрия 3,8%) в соотношении 1 часть антикоагулянта на 9 частей крови. Кровь тщательно перемешивают с антикоагулянтом путем плавного покачивания. Для получения обогащенной тромбоцитами плазмы, забранную кровь подвергают центрифугированию при 1500 об/мин в течение 7 минут и собирают надосадочный слой. Для получения бедной тромбоцитами плазмы, оставшуюся в пробирке кровь подвергают центрифугированию еще при 3000 об/мин в течение 15 минут и собирают надосадок. Для каждого образца крови пациента определяют экспериментальные значения светопропускания, что приводит к индивидуальной калибровке прибора, где богатая тромбоцитами плазма принимается за 0%, а бедная тромбоцитами плазма за 100% агрегации у данного пациента. Затем кювету с богатой тромбоцитами плазмой помещают в прибор, 2 мин прогревают при 37°С, опускают мешалку и начинают графическую регистрацию кривой светопропускания на лазерном агрегометре в течение 5 мин, на 10 сек исследования, вносят индуктор агрегации коллаген в концентрации 2 мкмоль/л, в соотношении плазмы с индуктором 10:1. Затем берут другую кювету с богатой тромбоцитами плазмой помещают в прибор, 2 мин прогревают при 37°С, опускают мешалку и начинают графическую регистрацию кривой светопропускания на лазерном агрегометре в течение 5 мин, добавляют к суспензии тромбоцитов коллаген дополнительно в соотношении 2:1 по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах графической регистрации агрегации тромбоцитов на лазерном агрегометре и получают графически-зарегистрированную кривую светопропускания, а по максимальной величине светопропускания судят о величине агрегации тромбоцитов в %.

Данный способ является наиболее близким к заявленному по технической сущности и достигнутому результату и выбран в качестве прототипа.

Недостатком способа-прототипа является его невысокая чувствительность в выявлении резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии, в случае если пациенты с ишемической болезнью сердца, принимают кардиомагнил и клопидогрель в течение 6 месяцев.

Цель предлагаемого изобретения - повышение точности АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов пациентов с ишемической болезнью сердца, принимающих кардиомагнил (75 мг) и клопидогрель (75 мг) в течение 6 месяцев.

Поставленная цель достигается тем, что для выявления резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии у больных с ИБС, принимающих кардиомагнил (75 мг) и клопидогрель (75 мг) в течение 6 месяцев, проводят забор крови в пробирку с 3,8% цитратом натрия в соотношении 9:1, разделяют на плазму и эритроциты с получением богатой и бедной тромбоцитами плазмы путем центрифугирования при 1500 об/мин в течение 7 минут и центрифугирования оставшейся в пробирке крови при 3000 об/мин в течение 15 минут, собирают надосадок и определяют индивидуально пациенту значения светопропускания, с графической регистрацией в течение 5 мин и постоянным перемешиванием при 37°С, на 10 с исследования вносят индуктор агрегации АДФ в концентрации 2 мкмоль/л и в соотношении богатой тромбоцитами плазмой с индуктором 10:1, затем добавляют к суспензии тромбоцитов индуктор агрегации тромбоцитов АДФ дополнительно в соотношении 2:1 по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах графической регистрации агрегации тромбоцитов на лазерном агрегометре и получают значения агрегации тромбоцитов в диапазоне от 50 до 100%.

Новым в предлагаемом способе является то, что в качестве индуктора агрегации при однократном и дополнительном внесении используется аденозин дифосфат и при значениях агрегации в диапазоне 50-100% выявляют резистентность тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии у пациентов с ишемической болезнью сердца, принимающих кардиомагнил (75 мг) и клопидогрель (75 мг) в течение 6 месяцев.

Преимуществом предлагаемого в качестве изобретения способа является то, что анализ показателей агрегации тромбоцитов под влиянием неоднократного и дополнительного внесения индуктора агрегации АДФ позволяет с высокой точность и специфичностью выявить предрасположенность к повышенной агрегации тромбоцитов у пациентов с ИБС, развивающейся, несмотря на непрерывный прием кардиомагнила и клопидогреля в течение 6 месяцев. Выявление у пациентов с ИБС повышенной АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов имеет важное значение при подборе и коррекции антитромбоцитарной терапии, направленной на снижение тромбообразования. В свою очередь, выявление резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии, позволяет персонифицировать подбор терапии.

Существенные признаки изобретения проявляют в заявленной совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и не являющиеся очевидными для специалиста.

Идентичной совокупности признаков не обнаружено в проанализированной патентной и научно-медицинской литературе.

Предлагаемый в качестве изобретения способ может быть использован в практическом здравоохранении для повышения точности диагностики.

Исходя из вышеизложенного, следует считать предлагаемый в качестве изобретения способ соответствующим условиям охраноспособности «новизна», «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».

Способ осуществляется следующим образом.

Пациенту с основным диагнозом ишемическая болезнь сердца, находящемуся на регулярной кардиоактивной и непрерывной двойной антитромбоцитарной терапии в течение 6 месяцев (кардиомагнил 75 мг и клопидогрель 75 мг в сутки), забирают кровь из локтевой вены утром, натощак в пластиковые вакуумные пробирки, содержащие антикоагулянт (цитрат натрия 3,8%) в соотношении 1 часть антикоагулянта на 9 частей крови. Кровь тщательно перемешивают с антикоагулянтом путем плавного покачивания. Разделяют центрифугированием на плазму и эритроциты с получением богатой и бедной тромбоцитами плазмы. Для получения обогащенной тромбоцитами плазмы, забранную кровь подвергают центрифугированию при 1500 об/мин в течение 7 минут и собирают надосадочный слой. Для получения бедной тромбоцитами плазмы, оставшуюся в пробирке кровь подвергают центрифугированию еще при 3000 об/мин в течение 15 минут и собирают надосадочный слой. Определяют индивидуальные значения светопропускания, где богатую тромбоцитами плазму принимают за 0%, а бедную тромбоцитами плазму за 100% агрегации у данного пациента и проводят калибровку прибора. Затем кювету с богатой тромбоцитами плазмой помещают в прибор, 2 мин прогревают при 37°С, опускают мешалку и начинают графическую регистрацию кривой светопропускания на лазерном агрегометре в течение 5 минут и на 10 с исследования вносят индуктор агрегации АДФ в концентрации 2 мкмоль/л и в соотношении богатой тромбоцитами плазмы с индуктором 10:1, по кривой светопропускания фиксируют максимальное значение величины агрегации, если значение находятся в диапазоне от 0 до 50%, то новую кювету с богатой тромбоцитами плазмой помещают в прибор, 2 мин прогревают при 37°С, опускают мешалку и начинают графическую регистрацию кривой светопропускания в течение 5 мин, а АДФ вносят дополнительно к богатой тромбоцитами плазме в соотношении 2:1 по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах исследования регистрации агрегации тромбоцитов, затем по кривой светопропускания фиксируют максимальные значения величины агрегации и при значениях агрегации в диапазоне 50-100% выявляют резистентность тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии у пациентов с ИБС.У пациентов с ИБС, принимающих кардиомагнил и клопидогрель в течение 6 месяцев, агрегация тромбоцитов снижалась до 5-35% (р<0,005) по сравнения с нормативными значениями, которые составляют 50-60%. При этом значения агрегации тромбоцитов при дополнительном внесении индуктора агрегации АДФ в соотношении 2:1 по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах регистрации агрегации тромбоцитов, приводило к повышению показателя агрегации от 50% до 75% (р<0,001), что свидетельствует о развитии резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии (кардиомагнил 75 мг и клопидогрель 75 мг в сутки).

Наличие резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии у пациентов с ИБС принимающих кардиомагнил и клопидогрель в течение 6 месяцев, не выявляется с помощью общепринятого метода определения агрегации тромбоцитов и способом-прототипом с индуктором коллагеном, а выявляется только в условиях дополнительного и неоднократного внесения индуктора АДФ в соотношении 2:1 по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах.

Пример 1.

Больная Л., 78 лет, находящая на стационарном лечении в отделении атеросклероза и хронической ишемической болезни сердца НИИ кардиологии, Томский НИМЦ.

Основной диагноз: ИБС. Стенокардия напряжения, ФК III. Атеросклероз коронарных артерий (стеноз задне-боковой артерии 70%, проксимальный сегмент огибающей артерии 40%, изгиб ствола левой коронарной артерии 50%). Критический стеноз аортального клапана с трансклапанным градиентом 116/60 мм рт. ст.

Фоновое: Гипертоническая болезнь III ст, достигнутый целевой уровень АГ, риск 4. Гипертрофия левого желудочка. Атеросклероз сонных (слева в бифуркации общей сонной артерии 40%, в устье внутренней сонной артерии до 45%), бедренных артерий (справа по ходу подколенной артерии до 50%, слева по ходу общей бедренной артерии 20%, по ходу поверхностной бедренной артерии 20-23%). Хроническая ишемия головного мозга II ст. Дислипидемия.

Непрерывно принимала двойную антитромбоцитарную терапию (кардиомагнил 75 мг и клопидогрель 75 мг в сутки) в течение 6 месяцев.

Пациентка поступила в плановом порядке для обследования. При поступлении жалобы: ↑ АД до 170-180/ мм рт. ст., больше в ночное время или под утро; одышка при ходьбе по ровному месту > 100 м, > 1 пролета лестницы; тупая, ноющая боль в левой половине грудной клетки, появляется в покое

По результатам КВГ №588 от 21.02.2019 г (0,7 мЗв): Стенозирующий атеросклероз коронарных артерий: стеноз задне-боковой артерии 70%. Атеросклеротическое поражение: проксимального сегмента OA - стеноз 40%. Изгиб ствола ЛКА со стенозированием 50% (визуализация затруднена). При катетеризации ствола ЛКА отмечается реакция в виде преходящей ишемии миокарда по кардиомонитору.

Кардиохирургом рекомендовано протезирование Ао кл + АКШ.

При исследовании агрегации тромбоцитов на фоне АДФ в концентрации 2 мкмоль/л, внесенного на 10 секунде исследования в соотношении с богатой тромбоцитами плазмой 1:10, получено значение агрегации равное 5,5% и выявлено снижение степени агрегации тромбоцитов. С целью определения чувствительности к проводимой терапии было выполнено исследование агрегации тромбоцитов на фоне дополнительного внесения АДФ к суспензии тромбоцитов по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах в соотношении 1:2. В таких условиях значение агрегации тромбоцитов на фоне индукции АДФ повысилось и составило 68,7%, что превышает нормативные значения АДФ-индуцированной агрегации, которые находятся в диапазоне 50-60%. Данные показатели позволили выявить наличие резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии.

При исследовании агрегации тромбоцитов на фоне коллагена в концентрации 2 мкмоль/л, внесенного на 10 секунде исследования в соотношении с богатой тромбоцитами плазмой 1:10, получено значение агрегации равное 11,4% и выявлено снижение степени агрегации тромбоцитов. С целью определения чувствительности к проводимой терапии было выполнено исследование агрегации тромбоцитов на фоне дополнительного внесения коллагена к суспензии тромбоцитов по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах в соотношении 1:2. В таких условиях значение агрегации тромбоцитов на фоне индукции коллагеном повысилось и составило 37,5%, что не позволило выявить наличие резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии.

Пример 2.

Больная Л., 73 года, находящая на стационарном лечении в отделения ишемической болезни сердца НИИ кардиологии, Томский НИМЦ.

Основное заболевание: ИБС. Стенокардия напряжения, ФК II. Атеросклероз коронарных артерий (ветвь тупого края 75%). Стентирование 75% стеноза ветви тупого края стентом с лекарственным покрытием Калипсо 3,0×15 мм от 7.08.2017 г. Пароксизмальная форма фибрилляций предсердий.

Фоновое: Гипертоническая болезнь III стадия, достигнут целевой уровень артериального давления, риск 4. Ожирение II степени. Дислипидемия. Атеросклероз сонных артерий: справа в бифуркации общей сонной артерии 30% и устье внутренней сонной артерии 25%, дистальнее во внутренней сонной артерии 35%, слева в стволе общей сонной артерии перед бифуркацией 34%, в бифуркации общей сонной артерии 45%, в устье внутренней сонной артерии 29%. Хроническая ишемия головного мозга I-II ст. Атеросклероз бедренных артерий: стеноз общей бедренной и поверхностной бедренной артерии справа 20-28%), стеноз общей бедренной артерии слева 30-35%, поверхностной бедренной артерии слева 20%. Атеросклероз подколенных артерий справа 40-45%, слева до 55%.

Непрерывно принимала двойную антитромбоцитарную терапию (кардиомагнил 75 мг и клопидогрель 75 мг в сутки) в течение 6 месяцев.

Пациентка поступила для обследования в динамике. При поступлении основные жалобы на: одышка при ФН (выше 2 этажа, в гору, когда несет тяжесть); лабильность АД (снижение до 82/43 мм рт ст, повышение до 155/70 мм рт ст), при этом одышка, головокружения, болят виски, затылок, нарушение зрения; сухой кашель; тяжесть за грудиной, с иррадиацией под левую лопатку при ФН (выше 2 этажа, в гору, при повышении или снижении АД), купируется самостоятельно в покое; перебоев в работе сердца не было с 08.2017 г (после стентирования).

По данным однофотонной эмиссионной компьютерной томографии миокарда с 99 мТс-технетрилом выявлено наличие стресс-индуцированной ишемии апикальных и средних отделов передней стенки левого желудочка.

При исследовании агрегации тромбоцитов на фоне АДФ в концентрации 2 мкмоль/л и соотношении с богатой тромбоцитами плазмой 1:10, внесенного на 10 секунде исследования, получено значение агрегации равное 36,2% и выявлено снижение степени агрегации тромбоцитов. С целью определения чувствительности к проводимой терапии было выполнено исследование агрегации тромбоцитов на фоне дополнительного внесения АДФ к суспензии тромбоцитов по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах и в соотношении 1:2. В таких условиях агрегация тромбоцитов на фоне индуктора АДФ повысилась и составила 78,4%, что превышает нормативные значения АДФ-индуцированной агрегации, которые находятся в диапазоне 50-60%). Данные показатели позволили выявить наличие резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии.

При исследовании агрегации тромбоцитов на фоне коллагена в концентрации 2 мкмоль/л, внесенного на 10 секунде исследования в соотношении с богатой тромбоцитами плазмой 1:10, получено значение агрегации равное 41,2% и выявлено снижение степени агрегации тромбоцитов. С целью определения чувствительности к проводимой терапии было выполнено исследование агрегации тромбоцитов на фоне дополнительного внесения коллагена к суспензии тромбоцитов по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах в соотношении 1:2. В таких условиях значение агрегации тромбоцитов на фоне индукции коллагеном повысилось и составило 46,5%, что не позволило выявить наличие резистентности тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии.

Пример 3.

Больной К., 58 лет, находящая на стационарном лечении в отделения ишемической болезни сердца НИИ кардиологии, Томский НИМЦ.

Основное заболевание: ИБС. Стенокардия напряжения II ФК. Атеросклероз коронарных артерий (стеноз среднего сегмента правой коронарной артерии 75%, окклюзия дистального сегмента правой коронарной артерии). Постинфарктный кардиосклероз (неизвестной давности). Реканализация окклюзии правой коронарной артерии, стентирование среднего сегмента правой коронарной артерии стентом Biomime 3*29 мм, стентирование дистального сегмента правой коронарной артерии стентом Biomime 3*29 мм от 18.07.17. Пароксизмальная форма наджелудочковой тахикардии.

Фоновое: Гипертоническая болезнь III стадия, достигнутый целевой уровень АД, риск 4. Ожирение 1. Гиперлипидемия. Атеросклероз сонных артерий (справа в стволе общей сонной артерии менее 20% просвета, в бифуркации общей сонной артерии и устье внутренней сонной артерии 30%, слева в стволе общей сонной артерии 30%, в бифуркации общей сонной артерии 35%, в устье внутренней сонной артерии слева до 55%), бедренных артерий (справа в общей бедренной артерии и проксимальном сегменте поверхностной бедренной артерии 20%, слева в общей бедренной артерии 20%).

Непрерывно принимала двойную антитромбоцитарную терапию (кардиомагнил 75 мг и клопидогрель 100 мг в сутки) в течение 6 месяцев.

Настоящая госпитализация с целью обследования в динамике. При поступлении предъявлял жалобы на повышение АД до 180-200/130-160 мм рт. ст (однократно, на фоне стресса), в основном 120-130/75-80 мм рт. ст (на фоне приема препаратов), в утренние часы до 140-150/90-100 мм рт. ст.; «чувство страха» периодически; одышки, болей в сердце не ощущает.

По данным однофотонной эмиссионной компьютерной томографии миокарда с 99 мТс-технетрилом выявлены сцинтиграфические признаки рубцовых изменений средних отделов передне-перегородочной области, средних и базальных отделов задне-перегородочной области ЛЖ.

При исследовании агрегации тромбоцитов на фоне индуктора АДФ в концентрации 2 мкмоль/л и соотношении с богатой тромбоцитами плазмой 1:10, внесенного на 10 секунде исследования, получено значение агрегации равное 10,4%, и выявлено снижение степени агрегации тромбоцитов. С целью определения чувствительности к проводимой терапии было выполнено исследование агрегации тромбоцитов на фоне дополнительного внесения АДФ к суспензии тромбоцитов по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах и в соотношении 1:2. В условиях повышенных концентраций индуктора АДФ агрегация тромбоцитов повысилась незначительно и составила 48,7%, что не превышает нормативные значения АДФ-индуцированной агрегации. Полученные значения агрегации указывают на эффективную двойную антитромбоцитарную терапию.

При исследовании агрегации тромбоцитов на фоне коллагена в концентрации 2 мкмоль/л, внесенного на 10 секунде исследования в соотношении с богатой тромбоцитами плазмой 1:10, получено значение агрегации равное 5,45% и выявлено снижение степени агрегации тромбоцитов. С целью определения чувствительности к проводимой терапии было выполнено исследование агрегации тромбоцитов на фоне дополнительного внесения коллагена к суспензии тромбоцитов по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах в соотношении 1:2. В таких условиях значение агрегации тромбоцитов на фоне индукции коллагеном повысилось и составило 15,7%. Данные показатели указывают на эффективную антиагрегантную терапию.

Предлагаемый способ апробирован на 48 пациентах с ИБС и позволяет с высокой точностью выявлять резистентность тромбоцитов к двойной антитромбоцитарной терапии (кардиомагнил и клопидогрель). Повышенные значения агрегации тромбоцитов у пациентов с ИБС имеют важное значение при подборе терапии, направленной на снижение тромбообразования и предупреждение сердечно-сосудистых событий, что позволяет оптимизировать индивидуальный подбор терапии.

Список использованных источников:

1. Антритромботическая терапия у больных со стабильными проявлениями атеротромбоза. Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2009;8(6). С. 163-188.

2. Гуськова Е. В., Панченко Е. П., Комаров А. Л., Добровольский А. Б., Самко А. Н. Остаточная реактивность тромбоцитов к АДФ и риск кровотечений у больных стабильной ИБС, получающих двойную антиромбоцитарную терапию в связи с плановым чрескожным коронарным вмешательством. Российский кардиологический журнал. 2015. №3 (119). С. 35-42.

3. Комаров, А.Л., Панченко Е.П. Ацетилсалициловая кислота основа антитромботической терапии у больных атеротромбозом. Российский медицинский журнал. 2006;4: С. 201-207.

4. Оганов, Р.Г. Профилактика сердечно-сосудистых заболеваний - реальный путь улучшения демографической ситуации в России. Кардиология. 2007; 1. С. 4-7.

5. Трубачева О.А. и соавт. «Способ определения резистентности тромбоцитов к антиагрегатным препаратам у пациентов с ишемической болезнью сердца», патент России RU 2 686 700 С1.

6. Antithrombotic Trialists' Collaboration. Collaborative meta-analysis of randomised trials of antiplatelet therapy for the prevention of death, myocardial infarction, and stroke in high risk patients. BMJ 2002; 324: 71-86.

7. Born GV. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal. Nature. 1962; 194. P.927-9.

8. Gachet C, Aleil B. Testing antiplatelet therapy., Eur Heart Jour. Supplements. 2008; 10 (Suppi A):P28-34.

9. Craft R.M., Chavez J.J., Bresee S.J. et al. A novel modification of the thrombelastograph assay, isolating platelet function, correlates with optical platelet aggregation. J Lab Clin Med 2004; 143: 301-9.

10. Jastrzebska M., Marcinowska Z., Oledzki S. et al. Variable gender-dependent platelet responses to combined antiplatelet therapy in patients with stable coronary-artery disease. Journal of physiology and pharmacology. 2018. №69, 4. P. 595-605.

11. Piepoli M. F., H oes A. W., Agewall S. et al. европейские рекомендации по профилактике сердечно-сосудистых заболеваний в клинической практике. Российский кардиологический журнал 2017. №6 -85(146). С. 7-85

12. Tantry U.S., Navarese Е.Р., Bliden K.P., Gurbel P. A. Acetylsalicylic acid and clopidogrel hyporesponsiveness following acute coronary syndromes. Kardiologia Polska. 2018. №76, 8: C. 1312-1319.

13. Valgimigli M., Bueno H., Byrne R. et al. Двойная антритромбоцитарная терапия при ишемической болезни сердца: обновленная версия. Российский кардиологический журнал 2018; 23 (8). С. 113-163.