Результат интеллектуальной деятельности: ПРОТИВОГРИБКОВОЕ СРЕДСТВО "БРАМИЗИЛ"

Изобретение относится к области медицины и касается средства на основе тербинафина, которое обладает противогрибковым действием.

Тербинафин, представляющий собой аллиламин, обладает широким спектром действия в отношении грибов, вызывающих заболевания кожи, волос и ногтей, в том числе дерматофитов, таких как Trichophyton (например, Т. rubrum, Т. mentagrophytes, Т. verrucosum, Т. tonswans, Т. violaceum), Microsporum (например, М. canis) Epidermophyton floccosum, a также дрожжевых грибов рода Candida (например, С. albicans) и Pityrospomm.

Активность в отношении дрожжевых грибов в зависимости от их вида может быть фунгицидной или фунгистатической.

Тербинафин специфически подавляет на раннем этапе биосинтез стеринов в клетке гриба. Это ведет к дефициту эргостерина и к внутриклеточному накоплению сквалена, что вызывает гибель клетки гриба. Действие тербинафина осуществляется путем ингибирования фермента скваленэпоксидазы в клеточной мембране гриба. Этот фермент не относится к системе цитохрома P₄₅₀. Тербинафин не оказывает влияния на метаболизм гормонов или других лекарственных препаратов.

Известны противогрибковые средства "Ламизил", "Экзифин", содержащие в одной таблетке 250 мг тербинафина гидрохлорида (Справочник Видаль "Лекарственные препараты в России, изд. 8, М., 2002).

Наиболее близкими по технической сущности и достигаемому результату являются содержащие тербинафина гидрохлорид фармацевтические композиции, описанные в международной заявке WO 01/52895, А 61 К 47/02, 2001 г. Таблетки представляют собой многокомпонентные системы с содержанием активного вещества 37-68%.

Целью настоящего изобретения является создание на основе тербинафина гидрохлорида противогрибкового средства в форме таблеток с распадаемостью и растворимостью, улучшенными за счет подбора вспомогательных ингредиентов и их количественного соотношения.

Для решения поставленной задачи предложено противогрибковое средство, названное "Брамизил". Оно содержит активное вещество - тербинафина гидрохлорид в количестве 60-80% от массы таблетки. В качестве вспомогательных веществ "Брамизил" включает микрокристаллическую целлюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, натрия крахмал гликолят, аэросил или лактозу, магния стеарат.

Пример. Получение таблеток "Брамизил"
Состав на 1 таблетку, г:
Тербинафина гидрохлорид - 0,28125
Микрокристаллическая целлюлоза - 0,05026
Гидроксипропилметилцеллюлоза - 0,00452
Натрия крахмала гликолят - 0,05007
Аэросил - 0,00195
Магния стеарат - 0,00195
Компоненты смешивают и проводят влажную грануляцию. Полученные гранулы сушат в установке с псевдоожиженным слоем. Затем проводят сухую грануляцию, опудривание натрия крахмала гликолятом, аэросилом, магния стеаратом. Далее опудренную смесь таблетируют на таблеточном прессе, используя пуансоны диаметром 11 мм с полуглубокой сферой. Полученные таблетки "Брамизил" имеют массу 0,39 г.

Проведено изучение опытного препарата - таблеток "Брамизил" в сравнении с таблетками "Ламизил" фирмы "Новартис Фарма", Швейцария.

Провели определение спектра поглощения изучаемых таблеток. На фиг. 1 и 2 представлены обзорные спектры поглощения растворов таблеток "Брамизил" и "Ламизил". Как видно на чертежах, спектры поглощения обоих препаратов полностью совпадают. Оптическая активность наблюдается в интервалах длинах волн от 200 до 300 нм. Наблюдаются три пика поглощения при длине волны 222, 240 и 283 нм. Имеется выраженный минимум поглощения при длине волны 255 нм. С увеличением длины волны в области от 300 до 320 нм оптическая плотность монотонно снижается до нулевого значения.

Полученные данные говорят о спектрофотометрической идентичности опытного препарата и препарата сравнения.

Определение распадаемости таблеток провели в соответствии с требованиями ГФ XI (статья "Таблетки" и приложение 3 к ней). Полученные результаты представлены в табл.1. Как показали исследования, таблетки "Брамизил" распадались за 6 мин 52 с ± 42 с, а таблетки "Ламизил" - за 7 мин 31 с ± 39 с. Во всех случаях время распадаемости таблеток составляло от 6 до 8 мин, что существенно меньше нормы ГФ (15 мин).

Определение растворения провели на приборе типа "вращающаяся корзинка" фирмы Erweka. Через 45 мин в раствор перешло (90±2,2)% активного вещества из таблеток "Брамизил" и (89±3,1)% из таблеток "Ламизил".

Для определения острой токсичности использовали беспородных белых мышей массой по 17-23 г каждая. Суспензию препаратов, приготовленную на основе 3% крахмального раствора, вводили мышам per os через зонд в объеме 1 мл.

Всего было использовано 48 нелинейных мышей, поделенных на шесть групп по шесть животных в каждой. Опытный препарат и препарат сравнения вводили в дозах 2, 3, 4 и 5 г/кг.

Оба испытуемых препарата не вызывали гибель лабораторных животных в течение 12 суток после однократного введения даже максимальной дозы в 5 г/кг, то есть оказались малотоксичными. Доза в 5 г/кг оказалась абсолютно переносимой, она больше терапевтической (25 мг/кг) в 200 раз.

Таким образом, на обоих препаратах LD₅₀ не была достигнута даже при дозе 5 г/кг. Статистически значимых отличий по величине LD₅₀ между опытным препаратом и препаратом сравнения не обнаружено.

Подострую токсичность препаратов изучали на беспородных белых крысах массой по 180-220 г каждая. Препараты вводили внутрижелудочно в объемах и разведениях, указанных в табл. 2. Исходя из того, что терапевтическая доза составляет 25 мг/кг, а десятикратная терапевтическая доза - 250 мг/кг, лабораторных животных разделили на 5 групп:
группа 1 - 10-кратная терапевтическая доза препарата "Брамизил";
группа 2 - терапевтическая доза препарата "Брамизил";
группа 3 - 10-кратная терапевтическая доза препарата "Ламизил";
группа 4 - терапевтическая доза препарата "Ламизил";
группа 5 - интактные животные, физиологический раствор.

Длительность введения препаратов составила 14 суток. В процессе проведения эксперимента степень интоксикации оценивали по общему состоянию животных, состоянию шерстного покрова, изменению количества уриаций, дефекаций, саливации, наступлению тремора, судорог, изменению частоты и ритма дыхания.

После окончания введения препаратов провели забой животных и их патологоанатомическое вскрытие с последующим взвешиванием органов брюшной полости и головного мозга. Для светооптического анализа отобрали образцы почек, печени, селезенки, тимуса и головного мозга. Кроме того, в крови животных были определены такие биохимические и гематологические параметры как общий белок, глюкоза, мочевина, активность аланинтрансаминазы (АЛТ), аспартотрансаминазы (ACT), щелочной фосфатазы, концентрация гемоглобина, содержание тромбоцитов и лейкоцитов.

В продолжение всего времени введения не зарегистрировано ни одного летального случая. Оба препарата как в терапевтической, так и в 10-кратной терапевтической дозах не вызвали статистически значимых отклонений в массе внутренних органов или других видимых признаков интоксикации. Таким образом, при оценке общетоксического действия различия между препаратами "Брамизил" и "Ламизил" выявлено не было.

В табл. 3 представлены результаты определения содержания общего белка, глюкозы, мочевины, активности обеих трансаминаз и щелочной фосфатазы в плазме крови лабораторных животных. Как видно из этих результатов, достоверного отличия данных биохимических параметров между испытуемым препаратом и препаратом сравнения не отмечается ни при использовании терапевтической дозы, ни при использовании 10-кратной терапевтической дозы препаратов. Кроме того, не выявлено статистически значимых отличий этих параметров и от данных для контрольной группы лабораторных животных.

В табл. 4 приведены результаты определения концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов. Из результатов следует, что при сравнении препаратов "Брамизил" и "Ламизил" в обеих дозах интегральные гематологические показатели у лабораторных животных существенно не отличаются. Значения исследуемых биохимических и гематологических параметров в четырех экспериментальных группах животных не имеют заметных отличий от данных для контрольной группы, где крысам вводили вместо препарата физиологический раствор.

Результаты определения лейкоцитарной формулы крови представлены в табл. 5. Из этих данных видно, что в результате введения препаратов в обеих исследованных дозах лейкоцитарная формула крови у лабораторных животных практически не меняется.

Как показали результаты патологоанатомического вскрытия, практически не удалось обнаружить патологических изменений в печени, селезенке, тимусе, почках, тканях головного мозга и в месте введения препаратов. Проведенный сравнительный гистологический анализ показал, что опытный препарат и препарат сравнения при их введении крысам в терапевтической и 10-кратной терапевтической дозах не вызвали цитоморфологических изменений в исследованных органах животных.

Проведено исследование местнораздражающего действия препаратов. Крахмальную суспензию препаратов вводили внутрижелудочно и по состоянию слизистой желудка оценивали местнораздражающее действие. Выявлено, что ни в контрольной группе животных, ни в опытных группах язвенных поражений слизистой не отмечалось. Единичные мелкоочаговые кровоизлияния (петехии) отмечались во всех группах крыс, их количество не зависело от дозы введенного препарата.