СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ ПРИ АССОЦИАТИВНОЙ КИШЕЧНОЙ ИНФЕКЦИИ

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к способам лечения цыплят-бройлеров при ассоциативной кишечной инфекции.

В птицеводстве широко распространены кишечные инфекции, в этиологии которых ведущую роль играют условно-патогенные микроорганизмы. Часто они представляют собой инфекционные процессы, в которых принимают участие несколько возбудителей, формирующие разнообразные ассоциации. При ассоциативной кишечной инфекции птиц затруднена диагностика, снижается эффективность лечебных мероприятий, возникают большие экономические потери.

Известен способ лечения животных при кишечной инфекции пробиотиками, содержащих живые микроорганизмы. Механизм действия пробиотиков направлен на заселение кишечника конкурентоспособными штампами бактерий-пробионтов, которые осуществляют не специфический контроль над численностью условно-патогенной микрофлоры путем вытеснения ее из состава кишечного микробиоценоза см. Манжурина О.А., Жмуров Н.Г., Ролдугина А.А. Профилактика и лечение смешанной кишечной инфекции у поросят с использованием Ветом 1.1 // Вестник Воронежского ГАУ. 2010. №1. С. 49-53.

Однако, пробиотики это препараты, состоящие из живых микроорганизмов и веществ микробного происхождения и стремительный рост их применения, расширение спектра применяемых живых микроорганизмов, получили возможность свободного распространения в окружающей среде и могут быть не безопасны. Кроме того, многие пробиотические микроорганизмы гибнут, преодолевая естественные барьеры желудочно-кишечного тракта, и до толстой кишки доходит лишь десятитысячная доля процента от их исходной численности. Остаточные количества пробиотических микроорганизмов, которые достигли толстой кишки в жизнеспособном состоянии, являются чужеродными для естественной микрофлоры, не приживаются в кишечнике и отторгаются. В связи с этим лечебный эффект пробиотиков носит транзиторный характер, а порой и полностью отсутствует. Одной из главных причин является чужеродность для организма входящих в их состав микроорганизмов, высокую видовую, индивидуальную и анатомическую специфичность автохтонной микрофлоры. Учитывая, что пробиотики содержат живые микроорганизмы, не исключено, что они могут приводить к иммунологическим расстройствам, а также существует риск развития инфицирования этими бактериями см. Дармов И.В., Погорельский И.П., Чичерин И.Ю. Кишечная микрофлора. Взгляд изнутри: сборник научных статей. 2012. №1. 104 с.

Известны препараты с широким спектром действия, в состав которых входят антибиотики см. Комплексный антибактериальный препарат для животных: пат. №2554797 РФ / В.В. Михайлов [и др.]; №2014109031/15, заявл. 11.03.2014, опубл. 27.06.2015; Бюл. №18.

Однако антибиотики оказывают на организм множество побочных действий. Применение их приводит к развитию лекарственной устойчивости у возбудителей и оправдано только после определения чувствительности возбудителя к антибиотику, что возможно только после проведения бактериологического исследования (выделения чистой культуры) в ветеринарной лаборатории. Кроме того, антибиотики уничтожают полезную микрофлору в организме и способствуют развитию дисбактериоза, снижают иммунную защиту организма, нарушают всасывание питательных веществ см. Дисбиоз (дисбактериоз) кишечника:современное состояние проблемы, комплексная диагностика и лечебная коррекция / М.Д. Ардатская [и др.] // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2015. №5 (117) С. 13-50.

В качестве прототипа выбран Способ профилактики кишечных инфекций цыплят-бройлеров см. Способ профилактики кишечных инфекций цыплят-бройлеров: пат. №2602303 РФ / А.Б. Дымков [и др.]; №2015147974/15 заявл. 06.11.2015, опубл. 21.10.2016; Бюл. №32. Задачей изобретения являлось повышение эффективности профилактики кишечных инфекций цыплят-бройлеров, которая решается путем использования 1%-ного раствора «Пепидол Пэг» выпаиванием в возрастной период с 1 по 3 сутки в дозе 1 мл на голову 2 раза в день, далее в возрастные периоды с 14 по 16 сутки и с 26 по 28 сутки в дозе 2 мл на голову 2 раза в день.

Способ профилактики кишечных инфекций цыплят-бройлеров снижает количество патогенных, условно-патогенных микроорганизмов и стимулирует рост полезной микрофлоры в желудочно-кишечном тракте птиц, активизирует иммунную систему, обмен веществ, повышает сохранность на 1,0%, живую массу на 3,1%, рентабельность на 10,3%, прибыль на 27,7%, обеспечивает получение безопасной продукции птицеводства.

Задачей изобретения является повышение эффективности лечения цыплят-бройлеров при ассоциативной кишечной инфекции, которая решается путем использования 1%-ного раствора препарата «Пепидол Пэг» выпаиванием в течение пяти дней 2 раза в день в дозе 2 мл на голову в возрастной период с 1-го по 13-й день, 4 мл на голову - с 14-го дня и старше.

«Пепидол Пэг» 1%-ный представляет собой мутноватую жидкость слабовязкой консистенции без запаха с кисловатым вкусом. Он оказывает антимикробное, сорбционное, антиокислительное, пребиотическое и иммуномодулирующее действия. Механизм антимикробного действия пектинов объясняется способностью закислять среду до рН 3,0, вызывая кислотное повреждение структур и белков бактериальной клетки, но при этом стимулирует рост полезной микрофлоры кишечника. Попадая в желудочно-кишечный тракт, препарат «Пепидол Пэг» образует гели, которые обволакивают бактерии, нарушая тем самым процесс адгезии возбудителей к эпителию кишечника. Он связывает токсины в просвете кишечника, оказывает положительное влияние на основные показатели иммунного статуса больных, способствует нормализации обменных процессов см. Пектиновый препарат для лечения диарейных инфекций человека и животных: пат. №2108106 РФ, Потиевский Э.Г., №96121781/14, заявл. 06.11.1996, опубл. 10.04.1998; Бюл. №10.

Как известно в разных количествах одно и то же вещество оказывает на организм неодинаковое влияние. В зависимости от степени проявления действия на организм различают дозы: профилактические (предотвращают нарушение физиологических процессов) и лечебные (терапевтические - восстанавливают нарушенные физиологические процессы). Существует относительное соотношение доз препаратов: профилактическая составляет 1-3 единицы, терапевтическая 5-8 единиц см. Фармакология. Ростов-на-дону: из-во «Феникс», 2001. 320 с. В связи с чем, для лечения цыплят-бройлеров при ассоциативной кишечной инфекции лечебную дозу препарата получили путем увеличения профилактической дозы в 2 раза.

Предлагаемый способ лечения сокращает длительность болезни на 1-2 дня, увеличивает сохранность на 6-30%, живую массу на 123,7-230,3 г (28,7-42,7%), предотвращенный экономический ущерб от заболевания на 1929,8-2833,2 руб. (60,2-68,0%о), обеспечивает получение безопасной мясной продукции.

Предлагаемый способ подтвержден опытом in vitro, экспериментальным и производственным опытами на цыплятах-бройлерах кросса «Росс-308», выполненных в птицеводческом хозяйстве и в отделе ветеринарии ФГБНУ СибНИИП.

Пример 1. Изучение антимикробной активности препарата «Пепидол Пэг»

Для этого испытали 0,5-, 1- и 2%-ные растворы препарата «Пепидол Пэг» in vitro на полевых культурах микроорганизмов, выделенных от погибших бройлеров с клиническими и патологоанатомическими признаками кишечных инфекций: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Salmonella enteritidis, Enterobacter cloacae, Citrobacter diversus, Citrobacter amalonaticus, Enterococcus faecalis, Proteus mirabilis, Esherihia coli. Использовали 1-миллиардную взвесь микробных тел в 1 мл препарата соответствующей концентрации. Определение жизнеспособности микроорганизмов проводили через 1, 3, 5, 7 и 24 часа инкубации в термостате путем высева на плотные дифференциальные среды. Исследование с каждой культурой проводили в пятикратной повторности.

Из таблицы 1 видим, что антимикробное действие 0,5%-ного раствора препарата «Пепидол Пэг» регистрировали через 1 час взаимодействия с культурой Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus; 3 часа - Salmonella enteritidis; через 5 часов - Enterobacter cloacae; 7 часов - Proteus mirabilis и Enterococcus faecalis. Отсутствие роста в 100% случаев отмечали у Pseudomonas aeruginosa через 1 час взаимодействия с препаратом, у Staphylococcus aureus - 5 часов, у Enterobacter cloacae, Salmonella enteritidis, Citrobacter diversus, Citrobacter amalonaticus, Enterococcus faecalis, Esherihia coli, Proteus mirabilis - 24 часа.

Бактерицидные свойства 1%-ного раствора препарата проявлялись через 1 час взаимодействия с культурой Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus; 3 часа - Enterobacter cloacae, Salmonella enteritidis и Citrobacter diversus; 5 часов - Citrobacter amalonaticus; 7 часов - Proteus mirabilis и Enterococcus faecalis. Гибель в 100% проб наблюдали у Pseudomonas aeruginosa после экспозиции 1 час, у Staphylococcus aureus и Enterobacter cloacae - 3 часа, у Salmonella enteritidis - 7 часов, у Citrobacter diversus, Citrobacter amalonaticus, Enterococcus faecalis, Esherihia coli, Proteus mirabilis - 24 часа.

Антимикробная активность 2%-ного раствора препарата проявлялась через 1 час контакта с культурой Pseudomonas aeruginosa и Staphylococcus aureus; 3 часа - Enterobacter cloacae, Salmonella enteritidis и Citrobacter diversus; 5 часов - Esherihia coli, Enterococcus faecalis и Citrobacter amalonaticus; 7 часов - Proteus mirabilis. Полностью препарат устранял рост (100%) культуры Pseudomonas aeruginosa после экспозиции 1 час, Staphylococcus aureus и Enterobacter cloacae - 3 часа, Esherihia coli - 5 часов, Salmonella enteritidis, Citrobacter diversus, Citrobacter amalonaticus, Enterococcus faecalis, Proteus mirabilis - 24 часа.

Таким образом, 0,5-, 1-й 2%-ные растворы «Пепидол Пэг» обладают антимикробной активностью на возбудителей кишечных инфекций птиц и полностью подавляют их рост в течение 24 часов.

Пример 2. Определение терапевтической эффективности препарата «Пепидол Пэг» и антибиотика Польодоксин в экспериментальном опыте.

Для опытов отбирали цыплят, больных ассоциативной кишечной инфекцией. Диагноз устанавливали комплексно, с учетом эпизоотической ситуации в птицехозяйстве (неблагополучное по ассоциативной кишечной инфекции), на основании клинического обследования цыплят, патологоанатомического вскрытия. При проведении бактериологических исследований патматериала были выделены ассоциации патогенных культур Escherichia coli + Staphylococcus aureus + Enterococcus faecalis.

Терапевтическую эффективность препаратов оценивали по клиническому состоянию цыплят, длительности болезни, сохранности и живой массе, проводили бактериологическое исследование содержимого кишечника, гематологические (количество лейкоцитов, эритроцитов, гемоглобина); биохимические (содержание общего белка, альбуминов, глобулинов), иммунологические (бактерицидная активность сыворотки крови - БАСК) исследования крови.

В экспериментальном опыте по принципу аналогов были скомплектованы 8 групп из 3-дневных цыплят по 20 голов в каждой. Цыплят контрольной группы содержали без лечения. Бройлеры 1-й группы получали антибиотик Польодоксин в дозе 1 мл/л воды в течение пяти дней. Птице 2-, 3-и 4-й групп применяли 0,5-, 1-й 2%-ные растворы препарата «Пепидол Пэг» в течение пяти дней. Цыплята 5-, 6- и 7-й групп получали в первые пять дней лечения антибиотик Польодоксин, с шестого по десятый день лечения - «Пепидол Пэг» в концентрациях 0,5-, 1- и 2%-ные в дозе 2 мл на голову 2 раза в день. Наблюдение за птицей проводили в течение пятнадцати дней от начала лечения.

Данные таблицы 2 показывают, что при бактериологическом исследовании содержимого кишечника цыплят через 5 дней от начала лечения количество энтеробактерий и энтерококков в опытных группах находилось на одном уровне, что указывало на антимикробное действие антибиотика и препарата «Пепидол Пэг» на условно-патогенную микрофлору желудочно-кишечного тракта птиц.

Примечание: *Р<0,05; **Р<0,01; ***Р<0,01; «-» - отсутствовали.

В содержимом кишечника цыплят контрольной группы по сравнению со всеми опытными энтеробактерий было больше на 2,4-2,9 lg КОЕ/г (23,3-28,2%), стафилококков - на 1,7-2,9 lg КОЕ/г (19,1-32,6%) и энтерококков - на 2,1-2,4 lg КОЕ/г (22,1-25,3%). Во 2-, 3-, 4-й группах гемолитические бактерии в содержимом кишечника цыплят не обнаруживали. Количество лактобактерий в этих группах было больше на 0,5-0,7 lg КОЕ/г (5,7-8,0%) и бифидобактерий - на 1,5-1,7 lg КОЕ/г (13,8-15,6%)), по сравнению с контрольной группой. В кишечнике цыплят 1-, 5-, 6- и 7-й групп количество полезной микрофлоры находилось на уровне с контрольной.

У цыплят во 2-й по 7-ю группах в содержимом кишечника через 10 дней от начала лечения отсутствовали гемолитические бактерии и уменьшилось количество энтеробактерий - на 2,7-3,2 lg КОЕ/г (25,5-30,2%), стафилококков - на 2,0-2,8 lg КОЕ/г (21,3-29,8%)), энтерококков - на 2,1-2,6 lg КОЕ/г (21,9-27,1%), по сравнению с контрольной группой, что свидетельствовало об антимикробном действии препарата «Пепидол Пэг» на патогенную и условно-патогенную микрофлору желудочно-кишечного тракта бройлеров. Лактобактерий и бифидобактерий в содержимом кишечника во 2-й по 7-ю группах отмечали больше на 0,4-0,8 lg КОЕ/г (4,5-9,0%)) и 1,2-1,8 lg КОЕ/г (11,2-16,6%), чем в контрольной, 1-я группа по этим показателям не отличалась от контрольной. У цыплят 3-й 6-й групп (при применении 1%-ного раствора препарата «Пепидол Пэг») отмечали наибольшее количество бифидобактерий. В 5-й по 7-ю группах, которым дополнительно применяли «Пепидол Пэг» после антибиотика к 10-му дню лечения наблюдалось снижение условно-патогенных микроорганизмов, увеличение полезной микрофлоры. Во 2-й по 4-ю группах отмечали пролонгированное действие препарата «Пепидол Пэг» на микрофлору кишечника, т.е. через 10 дней от начала лечения.

Из таблицы 3 видно, что в опытных группах во 2-й по 7-ю, в которых применяли «Пепидол Пэг» через 10 дней от начала лечения в крови наблюдали снижение лейкоцитов на 4,9-5,6×10⁹/л (33,1-37,8%), по сравнению с контрольной, что указывало на выздоровление цыплят-бройлеров. У цыплят 1-й группы при применении антибиотика так же наблюдали снижение лейкоцитов на 2,4×10⁹/л (16,2%) по сравнению с контрольной группой, но по сравнению с другими опытными группами их было выше на 2,5-3,2×10⁹/л (20,2-25,8%; Р<0,01).

Исследование БАСК показывает антимикробную активность неспецифических активных веществ крови и уровень неспецифической резистентности организма птиц. У цыплят-бройлеров во 2-й по 7-ю группах данный показатель превышал контрольную на 20,4-28,6%, что указывало на повышение общей резистентности организма птицы; однако в 1-й группе этот показатель ниже, чем во 2-й по 7-ю группах на 10,7-18,9% (Р<0,01), что свидетельствовало об угнетающем действие антибиотика на естественную резистентность птиц. В 3-й группе БАСК у цыплят-бройлеров была выше на 5,5 и 7,1%, чем во 2- и 4-й группах, а в 6-й группе этот показатель на 7,1 и 1,6%, по сравнению с 5- и 7-й группами, что указывало на эффективность применения 1%-ного раствора препарата «Пепидол Пэг».

Примечание: *Р<0,05; **Р<0,01; ***Р<0,001

Содержание гемоглобина в крови во 2-й по 7-ю группах было выше контрольной на 13,7-24,9 г\л (18,9-34,3%) и 1-й группы на 5,4-16,6 г/л (6,7-20,5%), что свидетельствовало об улучшении насыщения крови кислородом и организма в целом, способствуя ускорению обменных процессов. Отмечали увеличение содержания гемоглобина в крови цыплят при применении 1%-ного раствора препарата «Пепидол Пэг», по сравнению с 0,5- и 2%-ными растворами. Так, в 3-й группе содержание гемоглобина было выше на 9,8 и 10,7 г/л (10,0 и 10,1%; Р<0,05), чем во 2- и 4-й группах; а в 6-й соответственно на 1,1 и 5,7 г/л (1,2 и 6,2%), по сравнению с 5- и 7-й группами.

Увеличение количества эритроцитов в крови цыплят во 2-й по 7-ю группах по сравнению с контрольной было выше на 0,4-0,×10¹²/л (20,0-35,0%) и 1-й группой на 0,3-0,6×10¹²/л (14,3-28,6%), что свидетельствовало об улучшении эритропоэза. Наибольшее количество эритроцитов в крови цыплят-бройлеров наблюдали в 3- и 6-й группах при применении 1%-ного раствора препарата «Пепидол Пэг».

Содержание общего белка, альбумина и глобулина в сыворотке крови цыплят во 2-й по 7-ю группах превышало контрольную соответственно на 8,2-10,9 г\л (26,5-35,3%), 4,7-6,8 г/л (36,2-52,3%), 2,4-4,8 г/л (13,4-26,8%); 1-ю группу соответственно на 5,9-8,7 г/л (17,8-26,2%; Р<0,05), 4,3-6,4 г\л (32,1-47,8%; Р<0,05), 0,5-2,9 г\л (2,5-14,6%), что свидетельствовало об активизации обменных процессов в организме. Наибольшее количество общего белка в сыворотке крови было у цыплят 3- и 6-й групп.

Примечание: ***Р<0,01

Из таблицы 4 делаем вывод, что у цыплят во 2-й по 4-ю группах клиническое состояние улучшилось раньше на 2 дня, сохранность была выше на 30% по сравнению с контрольной группой и на 10% по сравнению с 1-й группой. В 5- и 6-й группах сохранность на 25% превышала контрольную группу и на 5% 1-ю группу, что указывало на положительное влияние препарата «Пепидол Пэг» после применения антибиотика. У погибших цыплят отмечали катарально-геморагический энтерит, точечные кровоизлияния на слизистой оболочке кишечника, дистрофию печени и почек. Из патологического материала выделяли ассоциации патогенных культур Escherichia coli + Staphylococcus aureus + Enterococcus faecalis.

Живая масса цыплят-бройлеров во 2-й по 7-ю группах была выше контрольной группы на 85,0-123,7 г (29,3-42,7%) и 1-й группы на 70,6-109,3 (23,2-35,9%; Р<0,01). В 1-й группе живая масса превышала контрольную на 14,4 г (5,0%). В 3-й группе живая масса выше на 32,0 (7,7%) и 27,6 г (6,7%) и превосходила цыплят 2- и 4-й групп, живая масса в 6-й группе выше на 3,0 (0,8%) и 8,1 г (2,1%), чем в 5- и 7-й группах, что свидетельствовало об эффективности применения 1%-ного раствора препарата «Пепидол Пэг».

Пример 3. Производственный опыт.

В производственном опыте по принципу аналогов были скомплектованы группы из больных 18-дневных цыплят по 100 голов в каждой. Цыплята контрольной группы получали антибиотик Польодоксин в дозе 1 мл/л воды в течение пяти дней. Бройлерам 1-й группы применяли 1%-ный раствор препарата «Пепидол Пэг» в течение пяти дней. Цыплята 2-й группы получали в первые пять дней лечения антибиотик Польодоксин, с шестого по десятый день лечения - 1%-ный раствор «Пепидол Пэг», в дозе 4 мл на голову 2 раза в день. Наблюдение за птицей проводили в течение пятнадцати дней от начала лечения.

Примечание: ***Р<0,001

Из таблицы 5 видно, что наибольшая сохранность отмечалась у цыплят 1-й группы, которая на 6% превышала контрольную, при этом длительность болезни была меньше на 2 дня. Применение препарата «Пепидол Пэг» после антибиотика (2-я группа) снижало токсическое действие последнего на организм птиц и повышало сохранность на 4% по сравнению с контрольной группой. Живая масса цыплят в 1- и 2-й группах была больше на 230,3 и 158,6 г (28,7 и 19,8%), чем в контрольной, что связано со свойством пектинов восстанавливать микробиоценоз кишечника бройлеров и нормализовать пищеварение. Предотвращенный экономический ущерб от заболевания в 1- и 2-й группах превышал контрольную соответственно на 2833,2 руб., и 1929,8 руб. и эффективность ветеринарных мероприятий на рубль затрат на 84,3 руб. и 26,7 руб.

При этом применение «Пепидол Пэг» экономически выгоднее, чем его использование после антибиотика, и обеспечивает получение мясной продукции, не содержащей остатков антибиотиков. Так, предотвращенный экономический ущерб от заболевания в 1-й группе превышал на 903,4 руб. и эффективность ветеринарных мероприятий на рубль затрат на 57,6 руб. по сравнению со 2-й группой.

Таким образом, предлагаемый способ лечения цыплят-бройлеров при ассоциативной кишечной инфекции сокращает длительность болезни на 1-2 дня, увеличивает сохранность на 6-30%, живую массу на 123,7-230,3 г (28,7-42,7%), предотвращенный экономический ущерб от заболевания на 1929,8-2833,2 руб. (60,2-68,0%), обеспечивает получение безопасной мясной продукции.