×
10.05.2018
218.016.4b17

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ ТИОРЕДОКСИНА

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к области медицины, к биохимической лабораторной диагностике, а именно к способу определения карбонилированного тиоредоксина. Способ включает инкубацию 0,25 мл лизированных 1% раствором тритона Х-100 клеток с 0,5 мл 10 мМ раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М НСl, связывающегося с карбонильными группами белков, инкубацию пробы при комнатной температуре в течение 1 ч, добавление 0,5 мл 20% ТХУ и центрифугирование при 11000 g 10 минут, промывание осадка 3 раза 1 мл раствора этанол: этилацетат (1:1) для экстракции избытка 2,4-динитрофенилгидразина, не прореагировавшего с карбонильными группами окисленных белков, высушивание осадка и ресуспендирование, дальнейшее инкубирование клеточного лизата с 0,5 мл магнитных частиц, нагруженных антителами к 2,4-динитрофенолу, в течение 3 ч при 25°С и непрерывном перемешивании. Магнитные частицы со связавшимся комплексом антиген-антитело собирают с помощью магнитного штатива и трижды отмывают 0,5 мл 0,01 М натрий-фосфатным буфером, инкубируют в термостате 10 мин при 95°С, после чего перемешивают, далее магнитные частицы собирают в магнитном штативе, а надосадок используют для проведения вестерн-блоттинга с антителами к тиоредоксину.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к области медицины, к клинической лабораторной диагностике, а именно к молекулярным методам определения модифицированных белков, и предназначается для селективного количественного определения степени окисления тиоредоксина в клетках по содержанию карбонилированного тиоредоксина.

В настоящее время имеются многочисленные данные о важной роли процесса перекисного окисления липидов, являющегося неотъемлемой частью окислительного стресса, в этиологии и патогенезе многих заболеваний, в частности сердечно-сосудистых, нейро-дегенеративных, воспалительных, онкологических. Однако активные формы кислорода, наряду с продуктами окислительной модификации липидов, вызывают и окислительную модификацию белков, приводящую к патологическим изменениям их структуры, свойств и функций [Stadtman E.R., Levine R.L. Protein oxidation. // Annals of N.Y. Academy of Sciences, 2000, 899: 191-208]. Окислительная модификация белков в клетках рассматривается как одна из возможных причин нарушения функций ферментов и изменения структуры некоторых важных белковых молекул при окислительном стрессе. При окислительной модификации белков в них образуются карбонильные группы - альдегидные и кетоновые группы аминокислотных остатков, повышенный уровень которых, наряду с гидроперекисями липидов, является показателем-маркером окислительного стресса [Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты. // М: МАИК «Наука/Интерпериодика», 2001, 343 с.; Дубинина Е.Е. Продукты метаболизма кислорода в функциональной активности клеток (жизнь и смерть, созидание и разрушение). Физиологические и клинико-биохимические аспекты. // Спб.: Медицинская пресса, 2006, 400 с.].

Согласно современным представлениям окислительной модификации могут подвергаться все остатки аминокислот в белках, но наиболее чувствительными являются остатки триптофана, тирозина, гистидина и цистеина [Дубинина Е.Е. Продукты метаболизма кислорода в функциональной активности клеток (жизнь и смерть, созидание и разрушение). Физиологические и клинико-биохимические аспекты. // Спб.: Медицинская пресса, 2006, 400 с.]. Поскольку тиоредоксин содержит несколько аминокислотных остатков цистеина, он способен подвергаться окислительной модификации с образованием карбонилированных форм белка.

Процессы окислительной модификации белков имеют место при различных свободнорадикальных патологиях, в частности злокачественных новообразованиях. Поскольку тиоредоксин является одним из внутриклеточных антиоксидантов, защищающих клетки от повреждения активными формами кислорода, в то же время выступает коферментом для работы рибонуклеотидредуктазы, необходимой для синтеза ДНК, а следовательно, деления клеток, принимает участие в восстановлении других антиоксидантных молекул, то большой интерес на сегодняшний день представляет определение окислительной модификации тиоредоксина в клетках. Поскольку концентрация тиоредоксина является диагностически значимым маркером состояния антиоксидантной системы клеток при условиях окислительного стресса при различных патологиях, сопровождающихся свободнорадикальным окислением [Калинина Е.В., Чернов Н.Н., Саприн А.Н. Участие тио-, перокси- и глутаредоксинов в клеточных редокс-зависимых процессах // Успехи биологической химии, 2008, 48, 319-358.; Shan W., Zhong W., Zhao R., Oberley T.D. Thioredoxin 1 as a subcellular biomarker of redox imbalance in human prostate cancer progression // Free Radic. Biol. Med., 2010, 49(12), 2078-2087.; Lu J., Holmgren A. The thioredoxin antioxidant system // Free Radic. Biol. Med., 2014, (66), 75-87], то его окислительная модификация еще в большей степени может способствовать развитию и усугублению окислительного стресса, нарушению внутриклеточных процессов.

На сегодняшний день исследования и разработки в области рассматриваемой научной проблемы носят приоритетный характер и входят в перечень приоритетных направлений развития науки, технологий и техники Российской Федерации - науки о жизни, относятся к критической технологии Российской Федерации - биомедицинские и ветеринарные технологии и поддержаны грантом президента Российской Федерации для государственной поддержки молодых российских ученых «Карбонилирование редокс-белков как способ управления пролиферацией при персонифицированном подходе к диагностике и терапии опухолей молочной железы» (Договор №14.W 01.17.1742-MK от 22.02.17). В рамках указанного научного исследования и на основании имеющегося научного задела проведена разработка заявляемого изобретения.

Известны способы определения окислительной модификации белков тканей и биологических жидкостей (патенты RU 2298189 С2 от 27.04.2007 «Способ определения окислительной модификации фибриногена плазмы крови», RU 2595806 С2 от 27.08.2016 «Способ определения окислительной модификации фибриногена плазмы крови по содержанию карбонильных групп в фибриновом сгустке»).

Недостатком данных способов оценки окислительной модификации белков является невозможность их использования для оценки модификации отдельного от других внутриклеточного белка, играющего важную роль в патогенезе различных патологий, сопровождающихся развитием окислительного стресса.

Способ прототип определения окислительной модификации белков гомогената клеток [Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма // Методические рекомендации, СПб.: ИКФ «Фолиат», 2000, 104 с.] осуществляется следующим образом: к 0,25 мл лизированного биологического материала добавляют 0,5 мл 10 мМ раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М растворе НСl, связывающегося с карбонильными группами белков, инкубируют пробу при комнатной температуре в течение 1 ч, добавляют 0,5 мл 20% ТХУ и центрифугируют при 11000 g 10 минут, осадок промывают 3 раза 1 мл раствора этанол:этилацетат (1:1) для экстракции избытка 2,4-динитрофенилгидразина, не прореагировавшего с карбонильными группами окисленных белков, осадок высушивают и далее растворяют в 0,6 мл 6 М раствора гуанидина. В контрольную пробу добавляют вместо 2,4-динитрофенилгидразина 0,5 мл 2 М раствора НСl. Степень окислительной модификации белков определяют измерением оптической плотности образовавшихся динитрофенилгидразонов спектрофотометрическим методом при длине волны 360-390 нм. Результаты выражают в условных единицах/мг белка.

Недостатком данного способа является отсутствие информации об окислительной модификации отдельных белков, поскольку оценивается степень окисления общей (суммарной) фракции всех белков клеточного гомогената. В связи с этим невозможно объективно и точно оценить подверженность белков, относящихся к разным классам и звеньям метаболизма, к окислению при различных заболеваниях, сопряженных с окислительным стрессом.

Новый технический результат - повышение точности определения уровня карбонилированного тироредоксина за счет возможности его избирательного выделения.

Для достижения нового технического результата в способе определения окислительной модификации тиоредоксина, включающем инкубацию 0,25 мл лизированных 1% раствором тритона Х-100 клеток с 0,5 мл 10 мМ раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М НСl, связывающегося с карбонильными группами белков, инкубируют пробу при комнатной температуре в течение 1 ч, добавляют 0,5 мл 20% ТХУ и центрифугируют при 11000 g 10 минут, осадок промывают 3 раза 1 мл раствора этанол:этилацетат (1:1) для экстракции избытка 2,4-динитрофенилгидразина, не прореагировавшего с карбонильными группами окисленных белков, осадок высушивают и ресуспендируют, клеточный лизат 0,25 мл, содержащий карбонилированные белки, связанные с 2,4-динитрофенилгидразином, инкубируют с 0,5 мл магнитных частиц, нагруженных антителами к 2,4-динитрофенолу, в течение 3 ч при 25°С и непрерывном перемешивании, далее магнитные частицы со связавшимся комплексом антиген-антитело собирают с помощью магнитного штатива и трижды отмывают 0,5 мл 0,01 М натрий-фосфатным буфером, после этого инкубируют в термостате в течение 10 мин при 95°С, после чего перемешивали, далее, освободившиеся от карбонилированных белков магнитные частицы собирают в магнитном штативе, а из надосадка, содержащего карбонилированные белки, с помощью вестерн-блоттинга с антителами к тиоредоксину, обеспечивающими выделение из суммарного количества модифицированных белков только карбонилированного тиоредоксина и количественную оценку его содержания.

Способ осуществляют следующим образом. На первом этапе проводят инкубацию 0,25 мл лизированных 1% раствором тритона Х-100 клеток с 0,5 мл 10 мМ раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М НСl, связывающегося с карбонильными группами белков, инкубируют пробу при комнатной температуре в течение 1 ч, добавляют 0,5 мл 20% ТХУ и центрифугируют при 11000 g 10 минут, осадок промывают 3 раза 1 мл раствора этанол:этилацетат (1:1) для экстракции избытка 2,4-динитрофенилгидразина, не прореагировавшего с карбонильными группами окисленных белков, осадок высушивают и ресуспендируют. Затем клеточный лизат 0,25 мл, содержащий карбонилированные белки, связанные с 2,4-динитрофенилгидразином, инкубируют с 0,5 мл магнитных частиц («Силекс», Россия), нагруженных антителами к 2,4-динитрофенолу («Sigma-Aldrich», США), в течение 3 ч при 25°С и непрерывном перемешивании. Используемое количество магнитных частиц, длительность инкубации и температура нами были определены после серии экспериментов как оптимальные для возможности использования полученных белков для последующей количественной оценки модифицированного белка методом вестерн-блоттинга. Связывание антител с молекулами 2,4-динитрофенилгидразина, соединенного с карбонильными группами белков, является специфичным и обеспечивает присутствие в растворе окисленных модифицированных суммарных белков. Магнитные частицы со связавшимся комплексом антиген-антитело собирают с помощью магнитного штатива и трижды отмывают 0,5 мл 0,01 М натрий-фосфатным буфером, инкубируют в термостате 10 мин при 95°С, после чего перемешивали. Эта процедура необходима для отделения карбонилированных белков от магнитных частиц. На втором этапе освободившиеся от карбонилированных белков магнитные частицы собирают в магнитном штативе, а белковый надосадок используют для проведения вестерн-блоттинга [Protocol Western Blotting Transfer and Detection Procedure MitoSciences http://www.mitosciences.com/PDF/western.pdf] с антителами к тиоредоксину («Thermo Scientific», США), обеспечивающими выделение из суммарного количества модифицированных белков только карбонилированного тиоредоксина и количественную его оценку. Содержание модифицированного тиоредоксина выражали в условных единицах.

Преимуществом данного способа является определение уровня окислительной модификации отдельного белка - тиоредоксина и его количественная оценка. Каждый вновь введенный в формулу изобретения признак выполняет функцию повышения точности и эффективности способа: взаимодействие 0,25 мл лизата с 0,5 мл магнитных частиц, нагруженных антителами к 2,4-динитрофенолу, инкубируемых в течение 3 ч при 25°С и непрерывном перемешивании; сбор магнитных частиц со связавшимся комплексом антиген-антитело с помощью магнитного штатива и трехкратная отмывка 0,5 мл 0,01 М натрий-фосфатным буфером, инкубация в термостате 10 мин при 95°С, с последующим перемешиванием; удаление освободившихся магнитных частиц и использование белкового надосадка для проведения вестерн-блоттинга с антителами к тиоредоксину.

Кроме того, предлагаемый способ является высокоинформативным и диагностически значимым в отношении окислительной модификации тиоредоксина, которая усугубляет снижение резерва антиоксидантной защиты, компонентом которой является тиоредоксин, и сопровождается утратой этим белком способности участвовать в пролиферации клеток, что является важным аспектом патогенеза опухолевого роста и других свободнорадикальных патологий. Выявление повышенной окислительной модификации тиоредоксина позволит комплексно, в дополнение к оценке интенсивности процессов перекисного окисления липидов и продукции активных форм кислорода, оценить степень выраженности окислительного стресса в организме.

Проведено сравнительное исследование между показателями известного способа прототипа [Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма // Методические рекомендации, СПб.: ИКФ «Фолиат», 2000, 104 с] определения окислительной модификации белков гомогената клеточных культур линий MCF-7 и HBL-100 и предлагаемого способа определения окислительной модификации тиоредоксина в лизатах клеток линий MCF-7 и HBL-100. Сравнительные исследования проводили 10 раз для предлагаемого и известного способов. Результаты исследования подвергали статистической обработке с использованием пакета программ SPSS v11.0 с определением медианы (Me), первого и третьего квартилей (Q1-Q3). Достоверность различий независимых выборок оценивали с помощью непараметрических критериев для малых групп Манна-Уитни.

При проведении исследования по способу прототипу уровень окислительной модификации белков в гомогенате опухолевых клеток линии MCF-7 составил 5,48 (5,01-6,28) условных единиц/мг белка, в гомогенате клеток эпителия молочной железы линии HBL-100 - 1,85 (1,48-1,97) условных единиц/мг белка. При оценке окислительной модификации тиоредоксина по предлагаемому способу содержание карбонилированного тиоредоксина в лизатах клеток линии MCF-7 составило 0,27 (0,19-0,29) условных единиц, в лизированных клетках эпителия молочной железы линии HBL-100 - 0,18 (0,09-0,14) условных единиц.

Подтверждение наличия в растворе модифицированных суммарных белков обеспечивалось специфической реакцией взаимодействия окисленных аминокислотных остатков (карбонильных групп) белков с 2,4-динитрофенилгидразином с образованием производных 2,4-динитрофенилгидразона. Присутствие в растворе только модифицированных суммарных белков (отделенных от белков, не содержащих карбонильных групп) достигалось путем высоко аффинного связывания антител к 2,4-динитрофенолу с белковыми производными 2,4-динитрофенилгидразона. Наличие в растворе среди модифицированных белков карбонилированного тиоредоксина достигалось путем высокоселективного связывания антител к тиоредоксину с этим белком.

При использовании способа-прототипа в опухолевых клетках отмечалось увеличение в 3,0 раза (р<0,01) уровня окислительной модификации белков по сравнению с этим показателем в клетках эпителия молочной железы. При оценке окислительной модификации тиоредоксина по предлагаемому способу содержание карбонилированного тиоредоксина в лизатах опухолевых клеток в 1,5 раза (р<0,01) было выше значений показателя в клетках эпителия молочной железы. Полученные данные свидетельствуют о том, что 50% от всех внутриклеточных белков подвергающихся окислению в опухолевых клетках линии MCF-7 приходится на тиоредоксин. Кроме того, все внутриклеточные белки могли содержать карбонильные группы, характерные для их структуры, образовавшиеся без участия окислительных процессов. В отличие от результатов известного способа прототипа полученные результаты заявляемого способа объективно отражают повышенную окислительную модификацию тиоредоксина при опухолевых новообразованиях по сравнению с клетками эпителия молочной железы, потенцирующую дальнейшее развитие патологического процесса и прогрессирование повреждения внутриклеточных структур при окислительном стрессе.

Существенные признаки, характеризующие изобретение, проявили в заявляемой совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области, и не являются очевидными для специалиста.

Идентичной совокупности признаков не обнаружено при изучении патентной и научно-медицинской литературы.

Данное изобретение может быть использовано в медицинской практике для оценки степени окисления внутриклеточных белков, ключевых компонентов антиоксидантной системы и пролиферации при патологиях, сопровождающихся развитием окислительного стресса. Следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентоспособности: «новизна», «изобретательский уровень», «промышленная применимость».

Таким образом, заявляемый способ является высокоинформативным и диагностически значимым, так как позволяет количественно оценить степень окислительной модификации отдельного белка тиоредоксина - одного из ключевых белков антиоксидантной системы клеток и пролиферативной активности в условиях окислительного стресса при различных патологиях, сопровождающихся свободнорадикальным окислением.

Предлагаемое изобретение в техническом исполнении достаточно простое и работа осуществляется одним врачом-лаборантом, для его выполнения требуется ограниченный набор недорогостоящего оборудования: камера для вестерн-блоттинга с источником питания, шейкер, термостат и необходимые реактивы. В связи с этим заявляемое изобретение может использоваться в условиях клинических биохимических лабораторий для оценки степени окисления тиоредоксина.

Способ определения окислительной модификации тиоредоксина, включающий инкубацию 0,25 мл лизированных 1% раствором тритона Х-100 клеток с 0,5 мл 10 мМ раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М НСl, связывающегося с карбонильными группами белков, инкубацию пробы при комнатной температуре в течение 1 ч, добавление 0,5 мл 20% ТХУ и центрифугирование при 11000 g 10 минут, промывание осадка 3 раза 1 мл раствора этанол:этилацетат (1:1) для экстракции избытка 2,4-динитрофенилгидразина, не прореагировавшего с карбонильными группами окисленных белков, высушивание осадка и ресуспендирование, отличающийся тем, что клеточный лизат 0,25 мл, содержащий карбонилированные белки, связанные с 2,4-динитрофенилгидразином, инкубируют с 0,5 мл магнитных частиц, нагруженных антителами к 2,4-динитрофенолу, в течение 3 ч при 25°C и непрерывном перемешивании, далее магнитные частицы со связавшимся комплексом антиген-антитело собирают с помощью магнитного штатива и трижды отмывают 0,5 мл 0,01 М натрий-фосфатным буфером, после этого инкубируют в термостате в течение 10 мин при 95°C, после чего перемешивают, далее освободившиеся от карбонилированных белков магнитные частицы собирают в магнитном штативе, а из надосадка, содержащего карбонилированные белки, с помощью вестерн-блоттинга с антителами к тиоредоксину обеспечивают выделение из суммарного количества модифицированных белков только карбонилированного тиоредоксина и количественную оценку его содержания.
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 32.
25.08.2017
№217.015.bcba

Способ комплексного лечения метаболического синдрома

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, эндокринологии и кардиологии, и может быть использовано для комплексного лечения метаболического синдрома. Для этого проводят диетотерапию пониженной калорийности 1200 ккал для женщин и 1500 ккал для мужчин с ограничением углеводсодержащих...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002616125
Дата охранного документа: 12.04.2017
26.08.2017
№217.015.e46f

Способ моделирования асептического некроза головки бедренной кости

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к модели асептического некроза головки бедренной кости (АНГБК), которая может быть использована для испытания различных способов лечения и средств профилактики остеонекроза. Способ моделирования включает введение в периартикулярные...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002626567
Дата охранного документа: 28.07.2017
29.12.2017
№217.015.f1da

Способ реконструкции пищеварительного тракта после панкреатодуоденальной резекции и экстирпации желудка с восстановлением физиологической и анатомической целостности

Изобретение относится к медицине, хирургии. После панкреатодуоденальной резекции с экстирпацией желудка накладывают погружной свисающий пищеводно-тощекишечный анастомоз. Анастомозируют культю поджелудочной железы с тощей кишкой с муфтообразной перитонезацией анастомоза. Между приводящей петлей...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002636881
Дата охранного документа: 28.11.2017
29.12.2017
№217.015.f1fa

Способ комбинированного лечения немелкоклеточного рака легких ii-iii стадии

Изобретение относится к медицине, онкологии, предназначено для комбинированного лечения немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) II-III стадии. Проводят 2 курса химиотерапии по схеме паклитаксел 175 мг/м и карбоплатин AUC 6 в 1-й и 20-й дни. При этом лучевую терапию начинают с 4 дня по 2 Гр × 1...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002636869
Дата охранного документа: 28.11.2017
20.01.2018
№218.016.13d8

Средство для коррекции нарушений в эритроидном ростке кроветворения, вызванных цитостатическим воздействием

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, к области медицины, конкретно к гематологии, а именно к средству для фармакологической коррекции нарушений эритропоэза, развивающихся при цитостатических воздействиях. Применение жидкого спиртового экстракта плодов рябины обыкновенной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002634572
Дата охранного документа: 31.10.2017
13.02.2018
№218.016.1f24

Способ реконструкции панкреатоеюнального соустья в условиях экстирпации желудка

Изобретение относится к медицине, хирургии. Формируют панкреаторезервуарное соустье в условиях экстирпации желудка и панкреатодуоденальной резекции. Резервуар, выполняющий функцию желудка, подводят к культе пищевода и накладывают анастомоз. В левой половине резервуара препарируют...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002641167
Дата охранного документа: 16.01.2018
13.02.2018
№218.016.21c6

Способ скрининга дисплазии соединительной ткани у подростков

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для скрининга дисплазии соединительной ткани (ДСТ) у подростков. Проводят тестирование подростка и выявление признаков, отражающих наличие или отсутствие ДСТ. Определяют гипермобильность суставов, изменения кожи,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002641839
Дата охранного документа: 22.01.2018
04.04.2018
№218.016.2f74

Способ лечения больных с клиническими проявлениями синдрома раздраженного кишечника

Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения синдрома раздраженного кишечника. На фоне щадяще-тренирующего режима и лечебного питания по диете №3, 4 по Певзнеру принимают минеральную хлоридно-гидрокарбонатную натриевую воду общей минерализацией до 3 г/дм «Карачинская»,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002644634
Дата охранного документа: 13.02.2018
04.04.2018
№218.016.345e

Резекционно-дренирующий способ хирургического лечения хронического кальцифицирующего панкреатита при нерасширенном главном панкреатическом протоке

Изобретение относится к медицине, хирургии. Осуществляют хирургическое лечение хронического кальцифицирующего панкреатита при нерасширенном панкреатическом протоке. После мобилизации поджелудочной железы вскрывают главный панкреатический проток, выполняют его ревизию, удаляют конкременты....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002646129
Дата охранного документа: 01.03.2018
10.05.2018
№218.016.4cbc

Способ оценки степени окислительного стресса по содержанию карбонилированного тиоредоксина в клетках

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для количественной оценки степени окислительного стресса в клетках. Для этого на первом этапе проводят инкубацию 0,25 мл лизированных 1% раствором тритона Х-100 клеток с 0,5 мл 10 мМ раствора 2,4-динитрофенилгидразина в 2 М НСl,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002652336
Дата охранного документа: 25.04.2018
Показаны записи 1-10 из 12.
27.07.2013
№216.012.5903

Средство и способ индукции апоптоза опухолевых клеток

Группа изобретений относится к области медицины и предназначена для индукции апоптоза опухолевых клеток линии Jurkat. Заявлено применение донора монооксида углерода - CORM-2 для индукции апоптоза опухолевых клеток линии Jurkat. Способ включает культивирование опухолевых клеток линии Jurkat в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002488408
Дата охранного документа: 27.07.2013
20.01.2014
№216.012.98ad

Способ диагностики вторичной иммунологической недостаточности при туберкулезе легких

Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики вторичной иммунологической недостаточности при туберкулезе легких. До назначения специфической химиотерапии проводят иммунологическое исследование периферической крови больных туберкулезом легких и определяют клеточные,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002504784
Дата охранного документа: 20.01.2014
20.05.2014
№216.012.c7de

Способ оценки эффективности стимуляции антиоксидантной активности

Изобретение относится к медицине и описывает способ оценки эффективности стимуляции антиоксидантной активности путем определения концентрации восстановленного глутатиона, при этом дополнительно в инкубационную среду добавляют 1,4-дитиоэритритол и аскорбиновую кислоту и при увеличении уровня...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002516925
Дата охранного документа: 20.05.2014
10.08.2014
№216.012.e7fe

Способ прогнозирования эффективности защиты лимфоцитов от переокисления

Изобретение относится к медицине и описывает способ прогнозирования эффективности защиты лимфоцитов от переокисления путем определения концентрации гидроксирадикалов, в котором при комплексном внесении в среду инкубации лимфоцитов 1,4-дитиоэритритола и аскорбиновой кислоты в конечной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002525183
Дата охранного документа: 10.08.2014
10.02.2015
№216.013.2357

Способ прогнозирования ранней стадии апоптоза

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования ранней стадии апоптоза лимфоцитов. Для этого выделяют клетки, инкубируют их 48 часов при температуре 37°C и 5% содержании CO с добавлением индуктора апоптоза дексаметазона в концентрации 10 моль/мл. Жизнеспособность...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002540500
Дата охранного документа: 10.02.2015
20.02.2015
№216.013.284a

Способ создания модели перекисного окисления лимфоцитов

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки эффективности модели перекисного окисления липидов мембран лимфоцитов. Для этого предварительно обрабатывают лимфоциты перекисью водорода в конечной концентрации 0,5 мМ и определяют белково-связанный глутатион. При увеличении...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002541771
Дата охранного документа: 20.02.2015
20.02.2015
№216.013.284d

Способ защиты клеток от апоптоза

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для защиты лимфоцитов от апоптоза. Для этого в инкубационную среду, содержащую лимфоциты, вводят 1,4-дитиоэритритол и аскорбиновую кислоту в конечной концентрации 3,0 ммоль и 0,1 ммоль соответственно. Изобретение позволяет защитить...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002541774
Дата охранного документа: 20.02.2015
20.02.2015
№216.013.2ae1

Способ прогнозирования степени риска развития гемолитических осложнений после операции коронарного шунтирования в условиях искусственного кровообращения

Изобретение относится медицине, а именно к кардиохирургии, и может быть использовано для прогнозирования степени риска развития гемолитических осложнений после операции коронарного шунтирования в условиях искусственного кровообращения. Для этого оценивают содержание гемопоэтинов в крови до...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002542434
Дата охранного документа: 20.02.2015
10.04.2015
№216.013.384c

Способ диагностики апоптоза лимфоцитов

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики апоптоза лимфоцитов. Для этого клетки выделяют, инкубируют 48 часов при температуре 37°С и с 5% содержанием СО, с добавлением индуктора апоптоза дексаметазона в концентрации 10 моль/мл. Количественно определяют...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002545900
Дата охранного документа: 10.04.2015
10.06.2015
№216.013.539c

Способ прогнозирования умеренного и выраженного гемолиза после операции коронарного шунтирования в условиях искусственного кровообращения

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования умеренного и выраженного гемолиза у больных ишемической болезнью сердца после операции коронарного шунтирования. Проводят оценку состояния здоровья пациента до операции, причем, учитывают наличие/отсутствие заболеваний легких...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002552925
Дата охранного документа: 10.06.2015
+ добавить свой РИД