Результат интеллектуальной деятельности: Способ коррекции активности микробиоты кишечника при жировой дистрофии печени в эксперименте

Изобретение относится к медицине, а именно к способам коррекции активности микробиоты кишечника при жировой дистрофии печени в эксперименте.

Известен способ коррекции активности микробиоты кишечника, включающий применение пробиотиков (1. Смирнова Г.И. Микробиота кишечника и использование пробиотиков в профилактике и лечении атопического дерматита у детей. Леч врач. 2016; 1: 6-10) - аналог.

Известен способ коррекции активности микробиоты кишечника, включающий применение пробиотиков и пребиотиков (2. Ливзан М.А. Пробиотики: новые грани хорошо знакомых средств. Леч. врач. 2010; 2: 35-39) - прототип. Данный способ применим при СРК, но недостаточно эффективен при жировой дистрофии печени.

Цель - повышение эффективности коррекции микробиоты кишечника при жировой дистрофии печени.

Технический результат достигается тем, что в способе коррекции активности микробиоты кишечника при жировой дистрофии печени в эксперименте, включающем моделирование патологии у крыс путем добавления в стандартный рацион питания белково-жировой смеси в соотношении 70:30 в количестве 12-15 г в течение 3-3,5 месяцев и ежедневного, интраперитонеального введения на протяжении этого времени серотонина в дозе 50-100 мкг/кг.

Способ реализуется следующим образом.

Животные были разделены на 3 группы. 1-я группа - с изолированной моделью жировой дистрофии печени (15 животных), 2-я - группа с моделью жировой дистрофии печени на фоне хронического введения серотонина (15 животных), 3-я группа - контрольная (5 животных). Исходная масса крыс составляла 200-210 г.

Животным первой группы жировую дистрофию печени у крыс моделировали добавлением белково-жировой смеси в соотношении 70:30 в количестве 12-15 г в течение 3-3,5 месяцев к стандартному сбалансированному рациону питания.

Животным второй группы наряду с моделированием жировой дистрофии печени добавлением к стандартному сбалансированному рациону питания белково-жировой смеси в соотношении 70:30 в количестве 12-15 г в течение 3-3,5 месяцев одновременно ежедневно в течение 3-3,5 месяцев внутриперитонеально вводили серотонин в дозе 50-100 мкг/кг.

Далее животным обеих групп в щадящих условиях проводили срединную лапаротомию, выделяли слепую кишку, проводили отбор ее содержимого с последующим определением содержания короткоцепочечных жирных кислот методом газожидкостной хроматографии (3. Иконников Н.С. и др., 2000). Биоптаты краевой и центральной зоны печени фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и окрашивали гематоксилином и эозином и на коллаген.

У животных 1-й группы масса тела через 3 месяца составила 225-230 г. Развитие жировой дистрофии печени без введения серотонина сопровождается уменьшением суммарной концентрации короткоцепочечных жирных кислот в слепой кишке с 3,4-4,0 мг/г до 2,8-3,2 мг/г ткани, что свидетельствует о нарушении микробиоценоза кишечника.

Жировую дистрофию печени у животных 1 группы отличает мелко-крупнокапельный стеатоз с оттеснением ядер гепатоцитов на периферию клетки, ядра гиперхромны и уплощены. При окраске на коллаген выявляется перивенулярный и перицеллюлярный фиброз, выраженный фиброз портальных трактов с формированием септ в краевой зоне печени.

У животных 2-й группы масса тела через 3-3,5 месяца составила 215-218 г.

Развитие жировой дистрофии печени было менее выраженным и сопровождалось увеличением суммарной концентрации короткоцепочечных жирных кислот в слепой кишке до 4,6-5,1 мг/г ткани, увеличившись на 62,4% по сравнению со значением в 1-й группе и даже превышало контроль на 17,1%.

Морфологически выраженность стеатоза печени меньше, чем в 1-й группе, и затрагивала 30-50% гепатоцитов. При окраске на коллаген в отдельных полях зрения отмечался слабый перипортальный фиброз без образования септ.

Способ далее поясняют примеры его реализации.

Пример 1.

Крысе линии Вистар с массой тела 200 г моделировали жировую дистрофию печени добавлением в стандартный рацион питания белково-жировой смеси в соотношении 70:30 в количестве 12 г в течение 3 месяцев ежедневно. Также ежедневно в течение 3 месяцев интраперитонеально крысе вводили серотонин в дозе 50 мкг/кг. Спустя 3 месяца от начала эксперимента в щадящих условиях проводили срединную лапаротомию, выделяли слепую кишку, проводили отбор содержимого с последующим определением содержания короткоцепочечных жирных кислот методом газожидкостной хроматографии. Биоптаты краевой и центральной зоны печени фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и окрашивали гематоксилином и эозином и на коллаген.

Морфологически выраженность стеатоза печени незначительная и затрагивает 50% гепатоцитов. При окраске на коллаген в отдельных полях зрения отмечается слабый перипортальный фиброз без образования септ.

Развитие жировой дистрофии печени в условиях хронического введения серотонина сопровождается увеличением суммарной концентрации короткоцепочечных жирных кислот в слепой кишке до 4,6 мг/г ткани, что свидетельствует о восстановлении микробиоценоза кишки.

Пример 2.

Крысе линии Вистар с массой тела 210 г моделировали жировую дистрофию печени добавлением в стандартный рацион питания белково-жировой смеси в соотношении 70:30 в количестве 15 г в течение 3,5 месяцев ежедневно. Также ежедневно в течение 3,5 месяцев интраперитонеально крысе вводили серотонин в дозе 100 мкг/кг. Спустя 3,5 месяца от начала эксперимента в щадящих условиях проводили срединную лапаротомию, выделяли слепую кишку, проводили отбор содержимого с последующим определением содержания короткоцепочечных жирных кислот методом газожидкостной хроматографии. Биоптаты краевой и центральной зоны печени фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и окрашивали гематоксилином и эозином.

Развитие жировой дистрофии печени на фон хронического введения серотонина сопровождается увеличением суммарной концентрации короткоцепочечных жирных кислот в слепой кишке до 5,1 мг/г ткани, что свидетельствует о восстановлении микробиоценоза кишки.

Морфологически выраженность стеатоза печени незначительная и затрагивает 30% гепатоцитов. При окраске на коллаген в отдельных полях зрения отмечается слабый перипортальный фиброз без образования септ.

Пример 3.

Крысе линии Вистар с массой тела 205 г моделировали жировую дистрофию печени добавлением в стандартный рацион питания белково-жировой смеси в соотношении 70:30 в количестве 13 г в течение 100 дней ежедневно. Также ежедневно в течение 100 дней интраперитонеально крысе вводили серотонин в дозе 75 мкг/кг. Спустя 100 дней от начала эксперимента в щадящих условиях проводили срединную лапаротомию, выделяли слепую кишку, проводили отбор содержимого с последующим определением содержания короткоцепочечных жирных кислот методом газожидкостной хроматографии. Биоптаты краевой и центральной зоны печени фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и окрашивали гематоксилином и эозином и на коллаген.

Развитие жировой дистрофии печени сопровождается увеличением суммарной концентрации короткоцепочечных жирных кислот в слепой кишке до 4,9 мг/г ткани, что свидетельствует о восстановлении микробиоценоза кишки.

Морфологически выраженность стеатоза печени незначительная и затрагивает 45% гепатоцитов. При окраске на коллаген в отдельных полях зрения отмечается слабый перипортальный фиброз без образования септ.

Пример 4.

Крысе линии Вистар с массой тела 206 г моделировали жировую дистрофию печени добавлением в стандартный рацион питания белково-жировой смеси в соотношении 70:30 в количестве 14 г в течение 100 дней ежедневно. Спустя 100 дней от начала эксперимента в щадящих условиях проводили срединную лапаротомию, выделяли слепую кишку, проводили отбор содержимого с последующим определением содержания короткоцепочечных жирных кислот методом газожидкостной хроматографии. Биоптаты краевой и центральной зоны печени фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и окрашивали гематоксилином и эозином.

Развитие жировой дистрофии печени сопровождается уменьшением суммарной концентрации короткоцепочечных жирных кислот в слепой кишке до 3,0 мг/г ткани. что свидетельствует о нарушении микробиоценоза кишки в условиях отсутствия серотонина.

Морфологически выраженность стеатоза печени значительная и затрагивает 85% гепатоцитов. При окраске на коллаген отмечается выраженный перипортальный, перицентральный фиброз с образованием септ.

По заявляемому способу проведено моделирование жировой дистрофии печени с введением серотонина на 15 животных, у которых получено восстановление микробиоценоза кишки. Испытания подтвердили достижение цели изобретения - повышение эффективности коррекции микробиоты кишечника при жировой дистрофии печени.

Источники информации

1. Смирнова Г.И. Микробиота кишечника и использование пробиотиков в профилактике и лечении атопического дерматита у детей. Леч. врач. 2016; 1: 6-10.

2. Ливзан М.А. Пробиотики: новые грани хорошо знакомых средств. Леч. врач. 2010; 2: 35-39.

3. Иконников Н.С., Ардатская М.Д., Дубинин А.В., Бабин В.Н., Минушкин О.Н., Кондракова О.А., Алешкин В.А. Патент на изобретение. «Способ разделения смеси жирных кислот фракции С2-С7 методом газожидкостной хроматографии». N 2145511, 2000.