Результат интеллектуальной деятельности: 2-ГИДРОКСИ-4-ОКСО-4-(4'-ХЛОРФЕНИЛ)-БУТ-2-ЕНОАТ 4-МЕТИЛ-2-ПИРИДИЛАММОНИЯ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРЯМЫМ АНТИКОАГУЛЯНТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ

Изобретение относится к области органической химии, к производным ацилпировиноградных кислот, а именно к новому биологически активному 2-гидрокси-4-оксо-4-(4'-хлорфенил)-бут-2-еноат 4-метил-2-пиридиламмонию (I) формулы:

обладающему прямым антикоагулянтным действием, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве антикоагулянта прямого действия.

Известен структурный аналог заявляемого соединения, получаемый взаимодействием ароилпировиноградой кислоты с гетариламином [Патент №2461550 «2-гидрокси-4-оксо-4-(4'-хлорфенил)-бут-2-еноат тиазолиламмония, обладающий антикоагулянтной активностью» Пулина Н.А. Сыропятов Б.Я. Собин Ф.В. Ковалева М.Ю. Антонов С.Г. Вахрин М.И.]

формула структурного аналога

В качестве эталона сравнения нами взят антикоагулянтный препарат - гепарин [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - Т. 2. - С. 475], широко применяемый в лечебной практике.

Целью предлагаемого изобретения является синтез нового неописанного ранее 2-гидрокси-4-оксо-4-(4'-хлорфенил)-бут-2-еноат 4-метил-2-пиридиламмония, обладающего прямым антикоагулянтным действием.

Поставленная цель достигается взаимодействием 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)бут-2-еновой кислоты с 2-амино-4-метилпиридином в растворе спирта по схеме:

Синтез 2-гидрокси-4-(4-хлорфенил)-4-оксобут-2-еновой кислоты (III) осуществлен по аналогии с ранее описанной методикой [Софьина О.А., Игидов Н.М., Козьминых Е.Н., Трапезникова Н.Н., Касаткина Ю.С., Козьминых В.О. Взаимодействие ацилпировиноградных кислот и их производных 2,3-дигидро-2,3-фурандионов - с 2,3-диаминопиримидином// Журнал органической химии. 2001. Т. 37. Вып 7. - С. 1067-1075].

Пример получения соединения (I)

К раствору 2,26 г.(0.01 моля) 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)бут-2-еновой кислоты (II), растворенному в 50 мл этилового спирта, при перемешивании добавляли раствор 1.08 г (0.01 моля) 2-амино-4-метилпиридина. Смесь продолжали перемешивать при температуре 50-60°C в течение 5 минут. Выпавший после охлаждения осадок отфильтровали и перекристаллизовывали из 2-пропанола. Получали 2.72 г (85%) кристаллического вещества (I) с T_пл 174-176°C (разл). C₁₅H₁₃ClN₂O₄. Найдено: С 56.28; Н 4.11; Сl 11.01; N 8.69. Вычислено: С 56.17; Н 4.09; Сl 11.05; N 8.73 ИК спектр, ν, см^-1 (кристаллы): 3288 (CONH), 1680 (CONH), 1596 (С=С, СО хел.). Спектр ПМР, δ, м.д., ДМСО-d₆: 2,05 с (6Н, 2 СН₃), 2,22 с (3Н, СН₃), 4,55 с (2Н, СН₂), 6,83 с (2Н, С₆Н₂) 7,08 с (1Н, СН), 7,56, 7,94 два д (4Н, С₆Н₄,), 10,02 уш. с (1Н, NH).

Заявляемое соединение представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в воде, ДМСО, ДМФА, трудно растворимое в спирте, бензоле, не растворимое в гексане.

Исследование биологической активности

Острую токсичность при внутрибрюшинном введении определяли на белых нелинейных мышах-самцах массой 18-24 г. Исследуемое вещество вводили в брюшную полость в возрастающих дозах. Результаты обрабатывали по Прозоровскому с вычислением средней смертельной дозы (ЛД₅₀) при Р<0,05 [Прозоровский В.В., Прозоровская М.П., Демченко В.М. Фармакология и токсикология., Т41, №4, С. 497-502 (1978)].

Соединение 1 исследовали на наличие прямой антикоагулянтной активности. Исследования проведены с помощью коагулометра «Минилаб 701». Для исследования использовали цитратную (3,8%) кровь (9:1) кроликов. Активность заявляемого соединения и аналога по структуре испытывалась в концентрации 1 мг/мл крови. В качестве эталона сравнения использовали гепарин в концентрации 1 ЕД /мл крови.

Как видно из таблицы, заявляемое соединение достоверно увеличивает время свертывания цитратной крови на 290,7% и по активности близко к эталону сравнения гепарину.

Острая токсичность заявляемого соединения при внутрибрюшинном способе введения составляет: ЛД₅₀=224 (144-285) мг/кг.

Таким образом, заявляемое соединение 4-(4'-хлорфенил)-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноат 4-метил-2-пиридиламмония проявляет прямое антикоагулянтное действие, по уровню активности близкое к эталону сравнения.