×
26.08.2017
217.015.d54d

Способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к биологической химии, а именно к биохимии животных, и может быть использовано для определения выраженности карбонильного стресса при послеродовом эндометрите у коров. Способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров включает определение содержания карбонилированных белков, оценку показателей осуществляют по коэффициенту интенсивности карбонильного стресса, который рассчитывают по формуле: K=С/ С, где С - содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера; С - содержание кетон-динитрофенилгидразонов основного характера, где K=1,5-1,9 свидетельствует о ранней стадии развития карбонильного стресса у коров; K=2,0-3,4 свидетельствует об отсутствии карбонильного стресса у клинически здоровых коров; K=3,5-4,5 свидетельствует о поздней стадии развития карбонильного стресса у коров. Заявляемый способ прост и экономичен в осуществлении. Расчет коэффициента интенсивности карбонильного стресса позволяет выявить глубокие нарушения соотношений производных аминокислот нейтрального и основного характера, что повышает информативную ценность лабораторного исследования.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к биологической химии, а именно к биохимии животных, и может быть использовано для определения выраженности карбонильного стресса при послеродовом эндометрите у коров.

Известен способ комплексной оценки содержания продуктов окислительной модификации белков в тканях и биологических жидкостях, включающий определение количества карбонильных продуктов. Оценку степени окислительной модификации белков (ОМБ) в биологическом материале осуществляют при расчете площади под кривой спектра ОМБ, которая равна сумме площадей альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) нейтрального и основного характера:

-

где

-

-

[Патент №2524667 G01N 33/52, 27.07.2014].

Недостатком известного способа оценки является большой фактический материал, перегруженный числовыми значениями, что затрудняет оценку и анализ полученного материала.

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому способу является способ оценки показателей окислительной модификации белков молока крупного рогатого скота, включающий определение содержания карбонилированных белков по реакции взаимодействия окисленных остатков с 2,4-динитрофенилгидразином (2,4-ДНФГ) и образованием производных 2,4-динитрофенилгидразона. Оптическую плотность образовавшихся динитрофенилгидразонов регистрировали спектрофотометрически при следующих длинах волн: 274, 356, 370, 430 и 530 нм. Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием пакета прикладных программ Statistica 6.0 [Высокогорский В.Е. Сравнительная оценка показателей окислительной модификации белков молока крупного рогатого скота различных эколого-географических зон Омской области / В.Е. Высокогорский, Ю.А. Подольникова, О.Н. Лазарева // Фундаментальные исследования. - 2014. - №12, ч. 4. - С. 760-761].

Недостатком данного способа является высокая трудоемкость оценки.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является снижение трудоемкости оценки.

Технический результат достигается тем, что способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров, включающий определение содержания карбонилированных белков, оценку показателей осуществляют по коэффициенту интенсивности карбонильного стресса, который рассчитывают по формуле:

KcКДНФГ нейтр / СКДНФГ осн, где

Kc - коэффициент интенсивности карбонильного стресса;

СКДНФГ нейтр - содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера е.о.п./мл;

СКДНФГ осн - содержание кетон-динитрофенилгидразонов основного характера е.о.п./мл;

причем Kc=1,5-1,9 свидетельствует о ранней стадии развития карбонильного стресса у коров;

Kc=2,0-3,4 свидетельствует об отсутствии карбонильного стресса у клинически здоровых коров;

Kc=3,5-4,5 свидетельствует о поздней стадии развития карбонильного стресса у коров.

Определение оценки показателей окислительной модификации белков молока коров по коэффициенту интенсивности карбонильного стресса снижает трудоемкость оценки показателей за счет определения меньшего количества показателей.

При остром и хроническом эндометрите увеличивается содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального и основного характера. Однако при остром эндометрите возрастает количество кетон-динитрофенилгидразонов основного характера, при хроническом эндометрите значительно увеличивается содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера. Вышеуказанные изменения влияют на коэффициент интенсивности карбонильного стресса, что позволяет быстро оценить степень окислительной модификации белков молока коров, т.е. снижает трудоемкость при оценке показателей окислительной модификации белков.

Исследовали 3 группы коров по 25 в каждой группе. Первая группа - коровы с острым послеродовым эндометритом; вторая группа - коровы клинически здоровые животные; третья группа - коровы с хроническим послеродовым эндометритом.

В основе способа определения продуктов окислительной модификации белков лежит метод R.L. Levine в модификации Е.Е. Дубининой. Способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров осуществляют следующим образом.

Берут пробы молока у каждой коровы от всех трех групп коров и исследуют следующим образом. Исследуемое молоко от коров первой группы (с острым послеродовым эндометритом) в количестве 0,2 мл вносят в пробирку и разводят добавлением 0,6 мл дистиллированной воды. Затем в 2 другие пробирки вносят по 0,2 мл разведенного молока и добавляют 1,8 мл 20% ТХУ кислоты. В одну из пробирок - опытную, добавляют 2 мл 0,1 М 2,4-ДНФГ, растворенного в 2 М растворе HCl, а в другую - контрольную - 2 мл 2М HCl без 2,4-ДНФГ. Осуществляют инкубацию при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем пробы обеих пробирок центрифугируют 10 мин со скоростью 3000 об/мин.

Надосадочную жидкость сливают, осадок трижды промывают смесью этанол-этилацетат (1:1) для экстракции липидов и остатка 2,4-ДНФГ, который не прореагировал с карбонильными группами окисленных белков. Отмытый осадок подсушивают с целью удаления остатков этанол-этилацетата. К подсушенному осадку добавляют по 5 мл 8М мочевины и выдерживают 5 мин в кипящей бане до полного растворения осадка.

Производят замер оптической плотности опытной пробы против контрольной пробы при длинах волн: 370, 530 нм в кварцевых кюветах с толщиной оптического слоя 1 см. Определяют СКДНФГ нейтр - содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера, е.о.п.; СКДНФГ осн - содержание кетон-динитрофенилгидразонов основного характера, е.о.п.

Рассчитывают коэффициент интенсивности карбонильного стресса по формуле:

KcКДНФГ нейтр / СКДНФГ осн, где

Kc - коэффициент интенсивности карбонильного стресса;

СКДНФГ нейтр - содержание кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера, е.о.п./мл;

СКДНФГ осн - содержание кетон-динитрофенилгидразонов основного характера, е.о.п./мл.

Коэффициент интенсивности карбонильного стресса во всех пробах молока от коров первой группы оказался в диапазоне 1,5-1,9, что свидетельствует о ранней стадии развития карбонильного стресса у коров.

Пробы молока от коров второй группы (клинически здоровые коровы) исследуют аналогично пробам молока первой группы коров. Коэффициент интенсивности карбонильного стресса во всех пробах молока от коров второй группы оказался в диапазоне 2,0-3,4, что свидетельствует об отсутствии карбонильного стресса у клинически здоровых коров.

Пробы молока от коров третьей группы (с хроническим послеродовым эндометритом) исследуют аналогично пробам молока первой группы коров. Коэффициент интенсивности карбонильного стресса во всех пробах молока от коров из второй группы оказался в диапазоне 3,5-4,5, что свидетельствует о поздней стадии развития карбонильного стресса у коров.

Предлагаемый способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров обеспечивает сокращение трудоемкости оценки за счет необходимости для расчета коэффициента интенсивности карбонильного стресса определять меньшее количество показателей. Трудоемкость проведения оценки предлагаемым способом снижается на 60%.

Способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров апробирован в лаборатории кафедры продуктов питания и пищевой биотехнологии ФГБОУ ВО Омский ГАУ.

Заявляемый способ прост и экономичен в осуществлении. Расчет коэффициента интенсивности карбонильного стресса позволяет выявить глубокие нарушения соотношений производных аминокислот нейтрального и основного характера, что повышает информативную ценность лабораторного исследования.

Заявляемый способ оценки показателей окислительной модификации белков молока коров может быть использован в ветеринарной лабораторной диагностике для определения стадии развития карбонильного стресса при послеродовом эндометрите и коррекции лечения и рациона питания коров.

Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-7 из 7.
10.01.2013
№216.012.1a52

Способ коррекции нарушения метаболизма углевод-белковых комплексов соединительной ткани поджелудочной железы в условиях экспериментальной пренатальной алкогольной интоксикации

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для коррекции нарушения метаболизма углевод-белковых комплексов соединительной ткани поджелудочной железы у потомства, алкоголизированного в пренатальном периоде. Для этого проводят моделирование алкогольной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002472230
Дата охранного документа: 10.01.2013
25.08.2017
№217.015.9921

Способ производства мягкого кислотно-сычужного сыра

Изобретение относится к молочной промышленности. Способ предусматривает пастеризацию нормализованного молока, охлаждение до температуры заквашивания, введение закваски, состоящей из Lactococcus lactis subsp. lactis, Lactococcus lactis subsp. cremoris, Lactococcus lactis subsp. diacetilactis,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002609655
Дата охранного документа: 02.02.2017
19.01.2018
№218.016.0a22

Мясо-растительный паштет

Изобретение относится к мясной промышленности и может быть использовано при производстве паштетов. Мясо-растительный паштет содержит печень, мясо, сердце, кожу и жир индейки, масло сливочное несоленое, сливки 10%-ные, фасоль, лук репчатый, перец черный молотый, тмин, куркуму, хлорид натрия,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002632172
Дата охранного документа: 02.10.2017
19.01.2018
№218.016.0daf

Способ определения левомицетина в кормах животного происхождения с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии

Изобретение относится к ветеринарной токсикологии и может быть использовано при определении содержания левомицетина в кормах животного происхождения. Заявленный способ определения левомицетина в кормах животного происхождения с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии включает...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002633013
Дата охранного документа: 11.10.2017
20.01.2018
№218.016.16ef

Способ повышения плодородия почвы

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к земледелию, и может быть использовано при обработке почвы. Способ повышения плодородия почвы включает внесение в почву гранулированной смеси птичьего помета и золошлакового материала от сжигания каменного угля в соотношении 1:1 в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002635697
Дата охранного документа: 15.11.2017
10.05.2018
№218.016.4326

Способ диагностики интерстициального цистита у кошек

Изобретение относится к ветеринарной терапии и может быть использовано для диагностики интерстициального цистита у кошек. Способ диагностики интерстициального цистита у кошек, включающий анализ мочи, отличается тем, что дополнительно вводят в мочевой пузырь физиологический раствор натрия...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002649745
Дата охранного документа: 04.04.2018
11.06.2018
№218.016.60a5

Способ моделирования химического гастрита

Изобретение относится к ветеринарии, медицине и может быть использовано для изучения патогенеза химического гастрита, вызванного введением нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП), и апробации новых методов лечения этой патологии. Для этого моделируют химический гастрит путем...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002657197
Дата охранного документа: 08.06.2018
Показаны записи 1-7 из 7.
25.08.2017
№217.015.9921

Способ производства мягкого кислотно-сычужного сыра

Изобретение относится к молочной промышленности. Способ предусматривает пастеризацию нормализованного молока, охлаждение до температуры заквашивания, введение закваски, состоящей из Lactococcus lactis subsp. lactis, Lactococcus lactis subsp. cremoris, Lactococcus lactis subsp. diacetilactis,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002609655
Дата охранного документа: 02.02.2017
19.01.2018
№218.016.0a22

Мясо-растительный паштет

Изобретение относится к мясной промышленности и может быть использовано при производстве паштетов. Мясо-растительный паштет содержит печень, мясо, сердце, кожу и жир индейки, масло сливочное несоленое, сливки 10%-ные, фасоль, лук репчатый, перец черный молотый, тмин, куркуму, хлорид натрия,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002632172
Дата охранного документа: 02.10.2017
19.01.2018
№218.016.0daf

Способ определения левомицетина в кормах животного происхождения с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии

Изобретение относится к ветеринарной токсикологии и может быть использовано при определении содержания левомицетина в кормах животного происхождения. Заявленный способ определения левомицетина в кормах животного происхождения с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии включает...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002633013
Дата охранного документа: 11.10.2017
20.01.2018
№218.016.16ef

Способ повышения плодородия почвы

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к земледелию, и может быть использовано при обработке почвы. Способ повышения плодородия почвы включает внесение в почву гранулированной смеси птичьего помета и золошлакового материала от сжигания каменного угля в соотношении 1:1 в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002635697
Дата охранного документа: 15.11.2017
10.05.2018
№218.016.462f

Способ приготовления заварных пряников

Изобретение относится к пищевой промышленности. Способ приготовления заварных пряников включает приготовление сахарно-медового сиропа, заваривание муки первого сорта в смеси с порошком, одновременно являющимся обогащающей биологически активными веществами добавкой, естественным красителем,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002650404
Дата охранного документа: 11.04.2018
01.09.2018
№218.016.8221

Ферментированный фруктово-овощной наполнитель

Изобретение относится к пищевой, а именно к кондитерской, хлебопекарной и молочной отраслям промышленности, и может быть использовано при производстве продуктов питания с фруктово-овощными наполнителями. Ферментированный фруктово-овощной наполнитель содержит фруктосодержащий и овощесодержащий...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002665599
Дата охранного документа: 31.08.2018
25.04.2020
№220.018.19aa

Начинка для конфет

Изобретение относится к пищевой промышленности, в частности к производству кондитерских изделий. Предложена начинка для конфет, включающая сахарсодерожащий компонент, наполнитель - стружку топинамбура, сухое молоко, растительный жир, которая дополнительно содержит апельсиновое масло, а в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002719779
Дата охранного документа: 23.04.2020
+ добавить свой РИД