×
25.08.2017
217.015.b5bd

Способ определения концентрации пероксида водорода в выдыхаемом воздухе у животных

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к области ветеринарии и касается способа определения концентрации пероксида водорода в выдыхаемом воздухе у животных. Способ включает конденсирование и охлаждение выдыхаемого воздуха с помощью устройства для сбора конденсата выдыхаемого воздуха (КВВ) с последующей оценкой концентрации пероксида водорода. Для определения концентрации пероксида водорода используют флуорометрическое измерение концентрации HO с волной облучения 568 нм и волной эмиссии 581 нм в растворе на основе флуоресцентного красителя Amplex Red Ultra, где 1 мл раствора содержит следующие реагенты: 20 мМ HEPES (pH 7,4); 1 мМ ЭДТА; 10 мкм Amplex Red Ultra; 4 ед. пероксидазы хрена. Заявленный способ является чувствительным методом определения низких концентраций пероксида водорода. 1 табл.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к области ветеринарии и касается способа определения концентрации пероксида водорода в выдыхаемом воздухе у животных и может быть использовано при определении их заболевания. Выдыхаемый воздух у животных насыщен водяными парами, которые могут быть конденсированы при охлаждении. Помимо водяных паров, в выдыхаемом воздухе у животных содержится более 200 летучих и нелетучих веществ, в том числе и малые количества пероксида водорода. Известно, что иммунные клетки, принимающие участие в развитии воспалительного процесса (эозинофилы, макрофаги, нейтрофилы), продуцируют активные формы кислорода, в том числе и пероксид водорода (Н2О2). Установлено, что концентрация Н2О2 в конденсате выдыхаемого воздуха (КВВ) у человека и животных при воспалительных заболеваниях органов дыхания (хронический бронхит, бронхиальная астма, пневмония и др.) существенно повышается и может использоваться для диагностики и контроля эффективности их лечения (Hydrogen peroxide in exhaled breath condensate: A clinical study / Nagaraja C. [et al.] // Lung India. - 2012. - V. 29 N.2. - P. 123-127).

Из источников информации известно, что спектрофотометрические методы измерения Н2О2 имеют сравнительно низкую чувствительность к пероксиду водорода, минимальная концентрация пероксида водорода в растворе для точного определения его количества должна составлять не менее 100 нмоль Н2О2 (A Novel Method for the Determination of Hydrogen Peroxide in Bleaching Effluents by Spectroscopy / Q. Zhang [et al.] // BioResources. - 2013. - V. 8. N 3. - P. 3699-3705; Reinhold P. Exhaled breath condensate: lessons learned from veterinary medicine / P. Reinhold, H. Knobloch // J. Breath. Res. - 2010. - V. 4. P. 1-15). Также известен способ оценки концентрации пероксида водорода с помощью электрода на основе берлинской лазури (ферроцианид трехвалентного железа), являющейся высокоэффективным электрокатализатором восстановления пероксида водорода. Недостатком данного метода является сложность анализа и низкий (по отношению к флуорометрическим методам) порог чувствительности к Н2О2 (Ricci F. Sensor and biosensor preparation, optimisation and applications of Prussian Blue modified electrodes / F. Ricci, G. Palleschi // Biosens. Bioelectron. - 2005. - V. 21. N. 3. - P. 389-407; Reinhold P. Exhaled breath condensate: lessons learned from veterinary medicine / P. Reinhold, H. Knobloch // J. Breath. Res. - 2010. - V. 4. P. 1-15).

В качестве прототипа выбран способ, реализуемый с помощью устройства для сбора конденсата выдыхаемого воздуха у животных (патент RU 134772 U1; МПК А61В 5/00, 2013). Устройство содержит сменный контейнер-накопитель, выполненный из полипропилена, снабженный крышкой, имеющей отверстия для прохода трубок. Трубки соединяют полость сменного контейнера-накопителя со спирометром, а также полость сменного контейнера-накопителя с передней камерой дыхательной маски. Маска дыхательная в составе устройства включает переднюю камеру, клапан вдоха и клапан выдоха. Контейнер-накопитель установлен в холодильную камеру, заполненную льдом или охлаждающей смесью. Маска дыхательная позволяет герметично фиксировать устройство на морде животного, причем клапаны вдоха и выдоха в ее составе не дают смешиваться вдыхаемому и выдыхаемому воздуху при спонтанном дыхании и направляют поток выдыхаемого воздуха через силиконовую трубку в сменный контейнер-накопитель КВВ, помещенный в холодильную камеру, закрытую снаружи теплоизоляционным кожухом. Недостатком является то, что в описании к устройству отсутствуют методики непосредственной оценки концентрации пероксида водорода в КВВ после его сбора.

Измерение концентрации пероксида водорода в КВВ в описываемом способе осуществляется флуорометрическим методом с помощью зонда Amplex Red Ultra. Технический результат - упрощение сложности анализа и повышение порога чувствительности к Н2О2 способа достигается тем, что определение концентрации пероксида водорода в выдыхаемом воздухе у животных осуществляется путем флуорометрического измерения концентрации Н2О2 с использованием красителя Amplex Red Ultra в 1 мл среды следующего состава: 20 мМ HEPES (рН 7,4); 1 мМ ЭДТА; 10 мкм Amplex Red Ultra; 4 ед. пероксидазы хрена.

Способ определения концентрации пероксида водорода в выдыхаемом воздухе у животных реализуется следующим образом. Для анализа содержания пероксида водорода в выдыхаемом воздухе у животных вначале проводят его конденсирование и охлаждение с помощью устройства для сбора конденсата выдыхаемого воздуха у животных (патент RU 134772 U1; МПК А61В 5/00, 2013), учитывают объем КВВ, образующийся из 100 литров выдыхаемого воздуха. Сразу после процедуры сбора пробы КВВ замораживают в жидком азоте и хранят при -196°С до проведения исследований. Для измерения концентрации пероксида водорода отбирают 50 мкл КВВ и добавляют во флуорометрическую кювету, содержащую 1 мл раствора, который содержит следующие реагенты: 20 мМ HEPES (рН 7,4), 1 мМ ЭДТА, 10 мкм Amplex Red Ultra и 4 ед. пероксидазы хрена. Amplex Red Ultra способен улавливать пероксид водорода в концентрации 10 нмоль. Данный флуоресцентный краситель широко применяется для оценки скорости продукции H2O2 электрон-транспортной цепью митохондрий. Реагент Amplex Red Ultra (Invitrogen USA) - бесцветное вещество, активно вступающее в реакцию с пероксидом водорода в соотношении 1:1 с образованием устойчивого флуоресцентного комплекса резоруфина. Далее измерение проводится на спектрофлуориметре с волной облучения 568 нм и волной эмиссии 581 нм. До начала измерения либо после измерения проводится калибровочный анализ с использованием раствора пероксида водорода известной концентрации. В кювету добавляют порции Н2О2 от 10 до 100 нмоль (5-7 добавок) и регистрируют соответствующие уровни флуоресценции. Далее строят калибровочную прямую (на оси абсцисс откладывают концентрацию пероксида водорода, на оси ординат - интенсивность флуоресценции) и, учитывая разбавление КВВ в кювете с раствором, находят искомые концентрации пероксида водорода в КВВ. Зная объем КВВ, образующийся из 100 л выдыхаемого воздуха, и концентрацию пероксида водорода в КВВ, рассчитывают содержание пероксида водорода в 100 л выдыхаемого воздуха. Способ поясняется примером (Таблица 1).

В зависимости от вида животного, его физиологических параметров, а также условия содержания животного пределы нормальных концентраций Н2О2 в КВВ могут варьировать в широких пределах. Предлагаемый способ определения концентраций Н2О2 в КВВ является высокочувствительным и легко воспроизводимым. Его можно использовать для диагностики и контроля эффективности лечения животных с легочными заболеваниями.

Источники информации

1. Патент RU 134772 U1; МПК А61В 5/00. Устройство для сбора конденсата выдыхаемого воздуха у животных / Черницкий А.Е., Рецкий М.И., Золотарев А.И.; заявитель и патентообладатель Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИВИПФиТ Россельхозакадемии); заявл. 30.07.2013, опубл. 27.11.2013. Бюл. №33.

2. A Novel Method for the Determination of Hydrogen Peroxide in Bleaching Effluents by Spectroscopy / Q. Zhang [et al.] // BioResources. - 2013. - V. 8 N 3. - P. 3699-3705.

3. Hydrogen peroxide in exhaled breath condensate: A clinical study / Nagaraja C. [et al.] // Lung India. - 2012. - V. 29. N.2. - P. 123-127.

4. Reinhold P. Exhaled breath condensate: lessons learned from veterinary medicine / P. Reinhold, H. Knobloch // J. Breath. Res. - 2010. - V. 4. P. 1-15.

5. Ricci F. Sensor and biosensor preparation, optimisation and applications of Prussian Blue modified electrodes / F. Ricci, G. Palleschi // Biosens. Bioelectron. - 2005. - V. 21 N. 3. - P. 389-407.

Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 71.
10.01.2013
№216.012.1761

Композиция комплекса сукцината хитозана и диоксидина с хлоргексидином, обладающая антибактериальным и ранозаживляющим эффектом

Изобретение относится к медицине. Описан комплекс сукцината хитозана и диоксидина с хлоргексидином при массовом соотношении сукцината хитозана с диоксидином 4,25-6:1 и хлоргексидином 60-85,0:1 соответственно. Комплекс проявляет выраженный ранозаживляющий эффект, который проявляется в быстром...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002471477
Дата охранного документа: 10.01.2013
20.03.2013
№216.012.3026

Способ ранней диагностики послеродового эндометрита

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ ранней диагностики послеродового эндометрита, включающий выделение РНК из эпителиальных клеток цервикального канала у женщин на поздних сроках беременности или на 3-4 сутки после родов, проведение обратной транскрипции с получением кДНК...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002477861
Дата охранного документа: 20.03.2013
20.06.2013
№216.012.4c2d

Способ получения замещенных пиримидин-5-илкарбоновых кислот

Изобретение относится к способу получения замещенных пиримидин-5-илкарбоновых кислот формулы I и может быть использовано в области органической химии. Способ осуществляют путем взаимодействия N-замещенных гуанидинов и гетариламидинов с этоксиметиленпроизводными 1,3-кетоэфиров согласно схеме,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002485083
Дата охранного документа: 20.06.2013
20.06.2013
№216.012.4e16

Способ оптимизации управления компьютером

Изобретение относится к области информационных технологий. Техническим результатом является оптимизация работы компьютера. Способ оптимизации управления компьютером заключается в анализе используемых каждой программой (процессом) ресурсов: загрузка центрального процессора, объем используемой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002485572
Дата охранного документа: 20.06.2013
27.06.2013
№216.012.4ece

Способ контроля опыления шмелями и медоносными пчелами цветков огурца

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к пчеловодству. В способе на цветки огурца наносят кистью или распылителем проявляющую жидкость и затем оценивают число и расположение темных пятен, образовавшихся на месте контакта ног насекомых с цветком. В качестве проявляющей...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002485767
Дата охранного документа: 27.06.2013
27.08.2013
№216.012.62a6

Способ использования соединений хинолинового ряда в качестве стимулятора роста для однолетника сальвия блестящая

Изобретение относится к цветоводству. В качестве стимулятора роста однолетника сальвия блестящая (Salvia splendens Ker Gawl.) используют одно из соединений хинолинового ряда 6-гидроксил-2,2,4-триметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин при концентрации 0,01-0,05% или...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002490891
Дата охранного документа: 27.08.2013
27.08.2013
№216.012.62a7

Стимулятор роста для видов рода rhododendron l.

Изобретение относится к сельскому хозяйству. Применение в качестве стимулятора роста для видов рода Rhododendron L. (семейство Ericaceae D.C.) одного из соединений 2,2,4-триметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин и 2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолин при концентрации 0,1%. Изобретение позволяет повысить...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002490892
Дата охранного документа: 27.08.2013
27.08.2013
№216.012.62a8

Способ использования соединений ряда пиримидин-карбоновых кислот в качестве стимулятора роста для однолетника бархатца отклоненного

Изобретение относится к цветоводству. В качестве стимулятора роста однолетника бархатца отклоненного (Tagetes patula L.) используют одно из соединений ряда пиримидин-карбоновых кислот 2-бензиламино-4-метилпиримидин-5-илкарбоновую кислоту в концентрации 0,05% и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002490893
Дата охранного документа: 27.08.2013
27.08.2013
№216.012.6539

Способ прогнозирования развития респираторных болезней у новорожденных телят

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для прогнозирования развития респираторных болезней у новорожденных телят. Способ предусматривает взятие крови у телят в течение 24 часов после рождения, определение в сыворотке крови содержания кальция и магния, проведение расчета...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491550
Дата охранного документа: 27.08.2013
10.09.2013
№216.012.66e6

Способ получения мезопористого сорбента

Изобретение относится к способам получения сорбентов с высокоупорядоченной структурой типа MCM-41. Предложен способ получения мезопористых материалов с добавкой кверцетина и (+)-катехина в процессе синтеза. Способ включает в себя приготовление реакционной смеси на основе Ludox-HS-40, CTABr,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491989
Дата охранного документа: 10.09.2013
Показаны записи 1-10 из 84.
10.01.2013
№216.012.1761

Композиция комплекса сукцината хитозана и диоксидина с хлоргексидином, обладающая антибактериальным и ранозаживляющим эффектом

Изобретение относится к медицине. Описан комплекс сукцината хитозана и диоксидина с хлоргексидином при массовом соотношении сукцината хитозана с диоксидином 4,25-6:1 и хлоргексидином 60-85,0:1 соответственно. Комплекс проявляет выраженный ранозаживляющий эффект, который проявляется в быстром...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002471477
Дата охранного документа: 10.01.2013
20.03.2013
№216.012.3026

Способ ранней диагностики послеродового эндометрита

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ ранней диагностики послеродового эндометрита, включающий выделение РНК из эпителиальных клеток цервикального канала у женщин на поздних сроках беременности или на 3-4 сутки после родов, проведение обратной транскрипции с получением кДНК...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002477861
Дата охранного документа: 20.03.2013
20.04.2013
№216.012.36d5

Способ получения водорастворимых олигомерных гомологов хитозана в гетерогенной системе

Изобретение относится к области химии биополимеров и может быть использовано в медицине, ветеринарии и космецевтике. Способ предусматривает деполимеризацию высокомолекулярного хитозана перекисью водорода. Процесс деполимеризации хитозана проводят в двухфазной системе. Твердой фазой является...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002479590
Дата охранного документа: 20.04.2013
20.06.2013
№216.012.4c2d

Способ получения замещенных пиримидин-5-илкарбоновых кислот

Изобретение относится к способу получения замещенных пиримидин-5-илкарбоновых кислот формулы I и может быть использовано в области органической химии. Способ осуществляют путем взаимодействия N-замещенных гуанидинов и гетариламидинов с этоксиметиленпроизводными 1,3-кетоэфиров согласно схеме,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002485083
Дата охранного документа: 20.06.2013
20.06.2013
№216.012.4e16

Способ оптимизации управления компьютером

Изобретение относится к области информационных технологий. Техническим результатом является оптимизация работы компьютера. Способ оптимизации управления компьютером заключается в анализе используемых каждой программой (процессом) ресурсов: загрузка центрального процессора, объем используемой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002485572
Дата охранного документа: 20.06.2013
27.08.2013
№216.012.62a6

Способ использования соединений хинолинового ряда в качестве стимулятора роста для однолетника сальвия блестящая

Изобретение относится к цветоводству. В качестве стимулятора роста однолетника сальвия блестящая (Salvia splendens Ker Gawl.) используют одно из соединений хинолинового ряда 6-гидроксил-2,2,4-триметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин при концентрации 0,01-0,05% или...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002490891
Дата охранного документа: 27.08.2013
27.08.2013
№216.012.62a7

Стимулятор роста для видов рода rhododendron l.

Изобретение относится к сельскому хозяйству. Применение в качестве стимулятора роста для видов рода Rhododendron L. (семейство Ericaceae D.C.) одного из соединений 2,2,4-триметил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин и 2,2,4-триметил-1,2-дигидрохинолин при концентрации 0,1%. Изобретение позволяет повысить...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002490892
Дата охранного документа: 27.08.2013
27.08.2013
№216.012.62a8

Способ использования соединений ряда пиримидин-карбоновых кислот в качестве стимулятора роста для однолетника бархатца отклоненного

Изобретение относится к цветоводству. В качестве стимулятора роста однолетника бархатца отклоненного (Tagetes patula L.) используют одно из соединений ряда пиримидин-карбоновых кислот 2-бензиламино-4-метилпиримидин-5-илкарбоновую кислоту в концентрации 0,05% и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002490893
Дата охранного документа: 27.08.2013
27.08.2013
№216.012.6539

Способ прогнозирования развития респираторных болезней у новорожденных телят

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для прогнозирования развития респираторных болезней у новорожденных телят. Способ предусматривает взятие крови у телят в течение 24 часов после рождения, определение в сыворотке крови содержания кальция и магния, проведение расчета...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491550
Дата охранного документа: 27.08.2013
10.09.2013
№216.012.66e6

Способ получения мезопористого сорбента

Изобретение относится к способам получения сорбентов с высокоупорядоченной структурой типа MCM-41. Предложен способ получения мезопористых материалов с добавкой кверцетина и (+)-катехина в процессе синтеза. Способ включает в себя приготовление реакционной смеси на основе Ludox-HS-40, CTABr,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491989
Дата охранного документа: 10.09.2013
+ добавить свой РИД