Результат интеллектуальной деятельности: Способ оценки распространенности внутрисосудистой агрегации эритроцитов у человека in vivo

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и функциональной диагностике, и может быть использовано для объективной оценки нарушений микроциркуляции.

Среди патологических феноменов, возникающих в системе микроциркуляции, внутрисосудистая агрегация эритроцитов является одним из наиболее важных. Это обусловливает актуальность ее правильной интерпретации и количественного описания.

Известен фотометрический способ количественного определения агрегации эритроцитов in vitro (силлектометрия), основанный на графической регистрации уменьшения интенсивности света, рассеиваемого кровью после прекращения перемешивания исследуемого образца в специальных кюветах (С.А. Селезнев, Г.И. Назаренко, В.С. Зайцев. Клинические аспекты микрогемоциркуляции. Л.: Медицина, 1985, с. 103-106). Как видно, данный способ требует специальной аппаратуры, сложных подсчетов, проводится in vitro, т.е. является инвазивным, требует контакта с кровью пациента. Все это не позволяет врачу быстро оценить выраженность нарушений микроциркуляции пациента и соответственно внести коррективы в лечение.

Существуют способы оценки агрегации эритроцитов in vivo, являющиеся более близкими, к предлагаемому способу. Один из ранних способов, основанный на прижизненной биомикроскопии микрососудов бульбарной конъюнктивы глаза человека с последующей количественной оценкой выявленных нарушений конечного кровотока предложен Волковым B.C. с соавторами (B.C. Волков, Н.Н. Высоцкий, В.В. Троцюк и др. Оценка состояния микроциркуляции методом конъюнктивальной биомикроскопии. Клиническая медицина, 1976, N 7, с. 115-119). Признаки изменений микроциркуляции имеют градацию в два балла при нулевой оценке в случае отсутствия признаков. Сумма баллов представляет собой общий конъюнктивальный индекс. Способ предусматривает возможность расчета парциальных конъюнктивальных индексов, раздельно характеризующих изменения формы сосудов, периваскулярные и внутрисосудистые нарушения. Внутрисосудистые микроциркуляторные нарушения представлены обнаружением в микрососудах бульбарной конъюнктивы глаза феномена агрегации эритроцитов или «сладжирования».

Однако данный способ имеет следующие недостатки: отсутствие стандартизации и субъективизм в оценке степени агрегации эритроцитов в процессе биомикроскопии микрососудов бульбарной конъюнктивы, что может быть связано с различиями в технических возможностях щелевых ламп, различиями в уровне подготовки исследователей, также не учитывается распространенность выявленных нарушений.

Следующий способ, близкий к предлагаемому, - способ диагностики внутрисосудистых нарушений микроциркуляции (Патент на изобретение №: 2147416, авторы: Абрамович С.Г., Федотченко А.А.). Используя данный способ, авторы выделяют функциональную и органическую агрегацию эритроцитов. При биомикроскопии бульбарной конъюнктивы глаза находят участки сосудистой сети, которые имеют эритроцитарные агрегаты. Затем на конъюнктиву капают 1% раствор папаверина гидрохлорида. Проводят повторную микроскопию. Через 2 мин оценивают реакцию микрососудов. При их расширении, сопровождающемся исчезновением внутрисосудистой агрегации, определяют функциональную внутрисосудистую агрегацию эритроцитов (ВСАЭ). При отсутствии или незначительном расширении микрососудов без исчезновения сладж-феномена и нормализации кровотока определяют органическую внутрисосудистую агрегацию эритроцитов. Другие авторы: Жмеренецкий К.В., Кузьмин И.Н., Сиротин Б.З. и др. (Жмеренецкий К.В., Кузьмин И.Н., Сиротин Б.З., Каплиева Е.В., Сиротина З.В. Внутрисосудистая агрегация эритроцитов (sludge-phenomen) в сосудах микроциркуляторного русла подростков с лабильной артериальной гипертензией // «Доказательная медицина - основа современного здравоохранения»: Материалы XII Международного конгресса, 29-31 мая 2013 г., Хабаровск: Ред.изд. центр ИПКСЗ, 2013. - С. 137-138) предлагают оценивать внутрисосудистую агрегацию эритроцитов визуально полуколичественным способом в относительных единицах (отн. ед.) по характеру кровотока в сосудистом объекте: при гомогенном кровотоке степень ВСАЭ принимается за 0; при кровотоке по типу «просо» степень ВСАЭ принимается за 1 отн. ед.; по типу «горох» - 2 отн. ед.; по типу «фасоль» - 3 отн. ед.; по типу «сосиски» - 4 отн. ед.

Однако при всех преимуществах данных способов оценки степени ВСАЭ не учитывается распространенность (масштабы) внутрисосудистой агрегации при биомикроскопии бульбарной конъюнктивы. Используя указанные способы, исследователь, врач не получают всей полноценной информации о нарушениях в микроциркуляторном русле. Наличие внутрисосудистой агрегации эритроцитов, даже органического характера и выраженной в 3-4 относительных единицах, может присутствовать у одного пациента лишь в единичных сосудах, а у другого - в большинстве или во всех, визуализируемых при биомикроскопии сосудах. Следовательно, степень микроциркуляторных нарушений в данных случаях будет различна.

Все указанные ограничения не позволяют полноценно оценить выраженность микроциркуляторных нарушений у конкретного больного и соответственно определить прогноз, тактику и объем медикаментозного лечения, а также более точно следить за динамикой выявленных нарушений.

Целью предлагаемого способа является повышение объективности диагностики масштабов внутрисосудистой агрегации эритроцитов.

Технический результат достигается следующим образом. При биомикроскопии бульбарной конъюнктивы глаза регистрируют четыре участка темпорального сектора бульбарной конъюнктивы: угловой, центральный, переходный и перилимбальный, с помощью щелевой лампы и смонтированной видеокамеры регистрируют видеофрагменты сосудистого русла. Полученные видеоролики вводят в программу для просмотра видеоизображений. Далее при просмотре видеоизображения делают остановки видео, демонстрирующие последовательно каждую из указанных зон, таким образом, чтобы четко визуализировались сосуды, попавшие в область просмотра. Далее, в этой области производят подсчет количества сосудов с наличием агрегации и общее количество сосудов в этой же области. Путем решения простой пропорции определяют процентное соотношение сосудов с выявленной агрегацией в данной зоне к общему числу сосудов в этой же зоне. Если просматриваемая зона полностью не помещается в экран, подсчет сосудов производят с нескольких стоп-кадров, затем из полученных процентных значений высчитывают среднее значение. Кроме полученных числовых значений, характеризующих распространенность (масштабы) внутрисосудистой агрегации эритроцитов в каждой области, оценивается количество зон с выявленной агрегацией, что также указывает на распространенность процесса. Полученные числовые значения легко подвергаются статистической обработке.

Для подтверждения объективности способа нами обследована группа практически здоровых молодых людей (n=80) в возрасте от 17 до 29 лет. Нарушение микрогемоциркуляции оценивали двумя способами: определяли степень внутрисосудистой агрегации эритроцитов (ВСАЭ) по 5 градациям (способ, предложенный Жмеренецким К.В.) и распространенность ВСАЭ в 4 зонах конъюнктивы. Все обследуемые были разделены на 3 группы: прекратившие курить (n=35), курящие (n=16) и некурящие (n=29).

Результаты исследования показали невысокую специфичность и чувствительность метода оценки степени ВСАЭ. Различия между группами выявлены только по степени ВСАЭ в артериолах (р=0,044 по критерию Ван дер Вардена). В то время как оценка распространенности ВСАЭ в различных зонах конъюнктивы продемонстрировала значимые и показательные результаты. Данные таблицы 1 демонстрируют статистически значимые различия между группами прекративших курить и курящих по распространенности ВСАЭ во всех четырех исследуемых зонах глаза. Также среди курящих ВСАЭ была распространена в достоверно большем количестве исследуемых зон конъюнктивы в сравнение с прекратившими курить. С группой некурящих прекратившие курить различий не имели. Для наглядности приводим данные таблицы 1 с указанием достоверности по двум непараметрическим критериям, т.к. во всех сравниваемых группах не было получено нормального распределения и равенства всех групповых генеральных дисперсий, (значимость р<0,05).

Данные таблицы 1 демонстрируют высокую специфичность предлагаемого способа по оценке распространенности ВСАЭ у человека in vivo. Согласно таблице также видно, что наиболее чувствительные зоны конъюнктивы, где при воздействии патологического фактора появляется распространенная агрегация эритроцитов, - это центральная, переходная зоны и перилимб.

Преимущества предлагаемого способа:

- неинвазивность;

- быстрота - способ позволяет проводить исследование в предельно сжатые сроки (до 10-15 минут);

- простота использования - способ не требует специальных условий и аппаратуры, достаточно любого современного вычислительного устройства с дисплеем;

- возможность количественно измерять распространенность (масштабы) внутрисосудистой агрегации эритроцитов;

- мобильность, что позволяет «у постели больного» оперативно определить распространенность и оценить степень выраженности микроциркуляторных расстройств;

- любой исследователь способен видеть внутрисосудистую агрегацию эритроцитов по принципу «Есть» - «Нет», т.е. без специальной сложной подготовки врачи любой специальности могут воспроизводить полученные результаты и качественно их оценивать.

Кроме того, способ обладает дополнительными преимуществами:

- позволяет объективно оценивать микроциркуляторные изменения в динамике для контроля эффективности проводимой терапии;

- возможность использования в клинических и исследовательских лабораториях для изучения распространенности внутрисосудистой агрегации эритроцитов.