СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПРЕЭКЛАМПСИИ

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, акушерству и гинекологии.

Наиболее близким к заявленному решению является способ моделирования преэклампсии, согласно описанию: A model of preeclampsia in rats: the reduced uterine perfusion pressure (RUPP) model /Jing Li, Babbette LaMarca and Jane F. Reckelhoff //Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2012 Jul 1; 303(1): H1–H8. Published online 2012 Apr 20. doi:  10.1152/ajpheart. 00117.2012.

Он заключается в том, что моделирование преэклампсии происходит у крыс на 14 сутки беременности путем наложения серебряных клипс на обе яичниковые артерии (0,1 мм) и бифуркацию аорты (0,203 мм) (фиг. 1).

Основными недостатками данной модели являются:

1. Нарушение кровотока возникает в магистральных сосудах, кровоснабжающих матку. В связи с этим нарушение кровоснабжения возникает не только в плаценте, но во всех слоях матки, чего нет у беременных женщин.

2. На данной модели не представляется возможным исследовать влияние гуморальных факторов, выделяемых ишемизированной плацентой, на интактную плаценту.

Задачей изобретения является способ моделирования преэклампсии, при котором нарушение кровообращения в плаценте левого рога матки возникает из-за гуморальных факторов ишемического генеза, выделяемых плацентой правого рога матки при наложении клипс на магистральные сосуды, участвующие в его кровоснабжении (правые яичниковая и подвздошная артерии).

Задача достигается тем, что в способе моделирования преэклампсии лабораторным крысам на 14 сутки беременности накладывают клипсы с просветом 0,1 мм на сосуды, кровоснабжающие матку, причем одну клипсу накладывают только на правую яичниковую артерию, а вторую только на правую подвздошную артерию с просветом 0,1 мм.

Техническим результатом изобретения является нарушение кровотока в плаценте левого рога матки за счет гуморальных факторов ишемического генеза, выделяемых плацентой правого рога матки, что позволяет исследовать не только роль гуморальных факторов в нарушении кровообращения в плаценте, но и возможности коррекции возникающих морфофункциональных нарушений.

Суть изобретения поясняется рисунками.

На фиг. 1 изображено моделирование преэклампсии с нарушением кровоснабжения в обоих рогах матки.

На фиг. 2 изображено моделирование преэклампсии с нарушением кровоснабжения правого рога матки.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводят на белых беременных крысах самках линии Wistar массой 250-300 г, сроком беременности 14 дней. Под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг) проводят лапаротомию на уровне средней и нижней трети передней брюшной стенки. Наложение серебряных клипс с просветом 0,1 мм производят на правые яичниковую и подвздошную артерии (фиг. 2). После чего производят послойное ушивание раны.

На 8 день от начала эксперимента (21 день беременности) под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг) вводят катетер в правую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД).

Исследование микроциркуляции в плаценте проводили с помощью оборудования компании Biopac systems: полиграф MP100 с модулем лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) LDf100C и датчиком TSD144. Регистрация результатов ЛДФ производилась программой Acqknowledge версии 3.8.1, значения микроциркуляции выражались в перфузионных единицах (ПЕ).

Исследование плодов проводят согласно: Руководству по проведению доклинических исследований лекарственных средств (Миронов А.Н. 2012) с определением веса, роста (длины).

Пример конкретного выполнения

Наложение серебренных клипс выше бифуркации аорты и на 2 яичниковые артерии приводило к подъему артериального давления с 134,5±2,3 и 92,0±2,1 (у интактных) до 155,4±3,6 и 109,3±5,6 мм рт.ст. (табл.1). Кроме этого происходило снижение микроциркуляции в плаценте обоих рогов матки до 229,7±9,86 при 446,3±27,5 ПЕд у интактных беременных самок. Наложение клипс на правую подвздошную артерию и правую яичниковую артерию не приводило к статистически выраженному изменению артериального давления. Наблюдалось снижение микроциркуляции в плаценте правого рога до 204,4±14,30 и до 309,0±15,80 ПЕд в левом роге матке (p<0,05). Как видно из представленных данных наблюдается нарушение микроциркуляции в плаценте примерно в равной степени в обеих рогах при наложении клипс на обе яичниковые артерии и на бифуркацию аорты и в правом роге матке при наложении клипсы на правые яичниковую и подвздошную артерии, что является вполне ожидаемо. Наиболее важным моментом является ухудшение микроциркуляции, в левом роге матки, сосуды которого не подвергались манипуляциям.

Сравнительная оценка состояния плодов выявила уменьшение массы, длинны плодов и их гибель примерно в равной степени в обеих рогах при наложении клипс на обе яичниковые артерии и на бифуркацию аорты и в правом роге матке при наложении клипсы на правые яичниковую и подвздошную артерии, что является вполне ожидаемо. Наиболее важным моментом является уменьшение массы и длинны плодов, а также их гибель в левом роге матки, сосуды которого не подвергались манипуляциям.

Значения морфофункциональных показателей у беременных крыс при моделировании редуцированного кровообращения в матке (M±m; n=10) приведены в таблице 1 (фиг. 3).

Таким образом, в предложенной модели ухудшение морфофункционального состояния в левом роге матки происходит не путем искусственного снижения кровотока, а опосредовано, за счет выделения ишемизированной плацентой большого количества гуморальных факторов: провосполительные цитокины, интерлейкин 1, ангиогенные факторы, ренин, свободные радикалы и др., которые вызывют нарушение функции эндотелия в здоровой плаценте, приводят к спазму сосудов с последующими морфофункциональными нарушениями (Pathophysiology of hypertension during preeclampsia: linking placental ischemia with endothelial dysfunction /Jeffrey S. Gilbert, Michael J. Ryan, Babbette B. LaMarca, Mona Sedeek, Sydney R. Murphy and Joey P. Granger /Am J Physiol Heart Circ Physiol 294: H541–H550, 2008. FirstpublishedNovember 30, 2007; doi:10.1152/ajpheart.01113.2007).

Проводя аналогию с клиникой заболевания у человека, данная модель позволяет сказать, что отдельные участки ишемизированной плаценты способны ухудшать морфофункциональное состояние здоровых ее участков, что не позволяет сделать прототип. Кроме этого предложенная модель позволяет исследовать новые лекарственные препараты в данном аспекте для лечения и профилактики гестоза у людей, в отличие от прототипа.