Результат интеллектуальной деятельности: СРЕДСТВО ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ МАСТИТА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Предлагаемое изобретение относится к ветеринарной биотехнологии, а именно к средствам профилактики мастита у коров.

Мастит коров - широко распространенное инфекционное заболевание молочной железы, вызываемое в основном стафилококками и стрептококками и сопровождающееся воспалением, приводящим к гипогалактии, с последующей атрофией пораженной четверти вымени и выбраковкой животного.

По имеющимся литературным данным экономический ущерб от заболеваемости коров маститом занимает в животноводстве первое место среди других болезней сельскохозяйственных животных.

Широкомасштабное использование машинного доения в молочном животноводстве привело к резкому увеличению количества заболевших высокопродуктивных коров субклиническим маститом, этому способствовали такие отрицательные факторы как механическое воздействие различных по конструкции доильных аппаратов, приводящее к нарушению целостности и деструктивным изменениям кожи на сосках вымени. К отрицательным моментам машинного доения следует причислить также повышенный вакуум в доильных стаканах, частота пульсаций и, особенно опасным является холостое доение коров. Основными естественными воротами маститной инфекции кроме травмированной кожи являются также сосковые канальцы, которые находятся открытыми в первые два часа после доения коров.

Учитывая повсеместное распространение стафилококков и стрептококков во внешней среде, их выраженный тропизм к тканям молочной железы, проведение профилактических мероприятий, с использованием новых фармакологических средств в общем комплексе мер борьбы с этим заболеванием, имеет первостепенное значение.

Уровень техники.

В комплексной профилактике и терапии маститов у коров одно из главных мест отводится применению противомикробных средств. Лечебная эффективность использованного препарата зависит от ряда факторов - чувствительности к нему возбудителя мастита, характера воспаления, способа и кратности введения. При часто практикуемом методе внутривымянного введения антибиотиков не происходит равномерного распределения лекарственного вещества в молочной железе, из-за сужения и непроходимости молочных ходов и протоков, вызванных отекам слизистой оболочки и закупоркой просвета сгустками казеина, фибрина, в результате этого действующее вещество не может достигнуть центра воспаления и выполнить свою функцию.

Для профилактики маститов у коров широко используется интрацистернальная обработка вымени антимикробными средствами - антибиотикиами, сульфаниламидными, нитрофурановыми и другими средствами. Интрацистернальный способ введения очень трудоемок и чреват травматическим повреждением слизистой оболочки канала соска и цистерны вымени. Длительное используемые антибиотики для интрацистернального введения (пенициллин, стрептомицин, эритромицин, левомицетин, тетрациклин цефкином и др.) формирует у возбудителей мастита резистентность, т.е. их адаптацию к применяемым антибиотикам. Кроме того, значительная часть антибиотиков попадает в молоко, что снижает его диетические и потребительские свойства, а у сенсибилизированных людей могут вызывать аллергию и анафилаксию (1, 2).

Другим способом профилактики маститов у коров является обработка вымени и соска мазями, способствующими умягчению кожи, ускорению заживления различных повреждений, обладающими противовоспалительным эффектом.

Наиболее близким аналогом, который можно взять за прототип, является крем для доения «Зорька с Флорализином» (3).

Крем «Зорька с Флорализином» применяют для профилактика и лечения заболеваний кожи сосков вымени (сухости, трещин, ссадин, эрозий и т.д.). Крем обладает противовоспалительным эффектом, придает коже вымени эластичность и упругость, ускоряет заживление мелких ран, ожогов, ссадин, усиливает регенеративные процессы в тканях, однако он не обладает бактерицидной активностью, что важно для предотвращения инфицирования вымени и дальнейшего развития инфекционного мастита.

В состав крема входит: флорализин, вазелин ветеринарный, вода дистиллированная, консервант, эмульгатор. Действие крема обусловлено флорализином. Флорализин содержит комплекс биологически активных веществ, экстрагированных из природного сырья: фосфолипиды, полиненасыщенные жирные кислоты, витамины А и Е и др.

Раскрытие изобретения.

Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что средство содержит в составе следующие компоненты (мас. %): азотнокислый церий - 2,0-2,5%, триэтиленгликоль - 50-55%, глицерин - 6-7%, этиловый спирт - 4,0-6,0%, гидроксид калия - 0,5-0,6%, полиэтиленгликоль - 5-25%, фурацилин (нитрафурол) - 0,2-0,4%, масло расторопши - 1-2%, масло облепихи 2,0-4,0%, вода очищенная - остальное. При нанесении на кожу вымени, мазь, состоящая из указанных компонентов, защищает кожу от инфекции и профилактирует мастит у коров. Используемая мазь защищает также сосковые канальцы от проникновения микробов.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является то, что профилактическое средство с указанной композицией обладает уникальным свойством проникать через роговой слой эпидермиса кожи и в зернистом слое, образуя барьер, задерживаться на длительный срок, оказывая защиту кожи от проникновения патогенной микрофлоры в паренхиму вымени. Средство обладает регенерирующими свойствами, предохраняет и лечит кожу вымени от царапин, микротрещин и других повреждений, делает ее упругой и эластичной, что является важным фактором профилактики мастита у коров при машинном доении.

Осуществление изобретения с последующей реализацией его в производственных условиях иллюстрируется следующими примерами:

Для определения оптимального соотношения компонентов и экспериментальной проверки заявляемого состава приготовили средство с различным содержанием компонентов.

Для получения защитного средства в реактор заливают триэтиленгликоль, нагревают до температуры 60-40°C и растворяют в нем в течение 1,5-2,0 часов азотнокислый церий. После растворения церия в раствор вносят глицерин и продолжают интенсивно перемешивать до получения однородной смеси. Гидроокисью калия доводят pH до нейтрального значения 6,8-7,2 и вносят загуститель полиэтиленгликоль. После равномерного размешивания вносят этиловый спирт, масло расторопши и облепихи интенсивно перемешивают в течение 3-4 часов до получения однородной массы и вносят фурацилин (нитрафурол), всю массу перемешивают, медленно охлаждают до 20-25°С и хранят при температуре от 0 до +20°С.

Пример 1. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 1,0, триэтиленгликоль - 55%, глицерин - 6%, масло расторопши - 2%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 20%, фурацилин - 0,3%, вода очищенная - 7,2%.

Пример 2. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,5, триэтиленгликоль - 55%, глицерин - 7%, масло расторопши - 2%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 5,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 20%, фурацилин - 0,3%, вода очищенная - 5,7%.

Пример 3. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 4,0, триэтиленгликоль - 55%, глицерин - 6%, масло расторопши - 2%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 20%, фурацилин - 0,3%, вода очищенная - 4,2%.

Пример 4. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,0, триэтиленгликоль - 55%, глицерин - 6%, масло расторопши - 2%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 20%, вода очищенная - 6,5%.

Пример 5. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,0, триэтиленгликоль - 55%, глицерин - 6%, масло расторопши - 2%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 20%, фурацилин - 0,6%, вода очищенная - 5,9%.

Пример 6. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,0, триэтиленгликоль - 55%, глицерин - 7%, масло расторопши - 2%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,6%, полиэтиленгликоль - 22%, фурацилин - 0,4%, вода очищенная - 5,0%.

Пример 7. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,0, триэтиленгликоль - 54%, глицерин - 6%, масло расторопши - 1%, масло облепихи - 8%, этиловый спирт - 4,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 20%, фурацилин - 0,2%, вода очищенная - 4,3%.

Пример 8. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,5, триэтиленгликоль - 55%, глицерин - 7%, масло расторопши - 2%, масло облепихи - 4%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,5%, фурацилин - 0,4%, вода очищенная - 22,6%.

Пример 9. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,5, триэтиленгликоль - 55%, глицерин - 7%, масло расторопши - 4%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 5%, фурацилин - 0,4%, вода очищенная - 17,6%.

Пример 10. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,0, триэтиленгликоль - 50%, глицерин - 7%, масло расторопши - 1%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 4,0%, гидроксид калия - 0,6%, полиэтиленгликоль - 30%, фурацилин - 0,2%, вода очищенная - 3,2%.

Пример 11. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,0, триэтиленгликоль - 55%, глицерин - 6%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 25%, фурацилин - 0,3%, вода очищенная - 3,2%.

Пример 12. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,5, триэтиленгликоль - 50%, глицерин - 6%, масло расторопши - 5%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 20%, фурацилин - 0,3%, вода очищенная - 3,2%.

Пример 13. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,5, триэтиленгликоль - 55%, масло расторопши - 2%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 25%, фурацилин - 0,3%, вода очищенная - 6,7%.

Пример 14. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,5, триэтиленгликоль - 50%, глицерин - 10%, масло расторопши - 1%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 20%, фурацилин - 0,3%, вода очищенная - 7,7%.

Пример 15. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,5 триэтиленгликоль - 40%, глицерин - 7%, масло расторопши - 2%, масло облепихи - 4%, этиловый спирт - 6,0%, гидроксид калия - 0,6%, полиэтиленгликоль - 25%, фурацилин - 0,4%, вода очищенная - 12,5%.

Пример 16. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,0, триэтиленгликоль - 70%, глицерин - 6%, масло расторопши - 1%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 4,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 12%, фурацилин - 0,2%, вода очищенная - 2,3%.

Пример 17. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,5, триэтиленгликоль - 55%, глицерин - 7%, масло расторопши - 2%, масло облепихи - 4%, этиловый спирт - 1,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 20%, фурацилин - 0,3%, вода очищенная - 7,7%.

Пример 18. Приготовлено средство со следующим составом компонентов: азотнокислый церий - 2,5, триэтиленгликоль - 50%, глицерин - 6%, масло расторопши - 2%, масло облепихи - 2%, этиловый спирт - 10,0%, гидроксид калия - 0,5%, полиэтиленгликоль - 20%, фурацилин - 0,3%, вода очищенная - 6,7%.

Средства, полученные по вышеописанным рецептам, различались между собой по органолептическим свойствам, так, например, полученное по примеру 10 и 15 было крошковатое сухое и не пригодно для накожного нанесения, составы 8, 9, 12, 14, 16 жидкие.

Дальнейшее изучение полученных составов провели на морских свинках. Определяли всасываемость в кожу, регенерирующие свойства, антимикробные свойства.

Пример 19. У морских свинок на боках выбривали шерсть и наносили полученные средства. За животными наблюдали в течение суток. В результате установлено, что средства, полученные по примеру 8, 12, 14, 16, стекали с кожной поверхности или были липкими, плохо впитывающимися в кожу, средство по примеру 9, стекая с кожи, впитывалось и не оставляло липких следов. Средства, полученные по примерам 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 11, 13, 17, 18, хорошо втирались в кожу, не оставляя следов на поверхности.

Пример 20. У морских свинок выбривали шерсть на боках и скарифицировали, после чего опытной группе свинок наносили средство путем втирания в кожу. Контрольная группа для оценки скорости заживления скарифицированных участков оставалась без нанесения средства. Поврежденные участки кожи в течение 3 дней после нанесения средств, полученных по примерам №2, 3, 4, 5, 6, 9, 11, 13, 17, 18, 19, полностью восстанавливались. Средство, полученное по примеру 3 и 18, вызывало раздражение поврежденной кожи, проявлявшееся в болезненных реакциях при нанесении. Средство по примеру 6 обладало меньшей регенерирующей способностью, а средство №13 плохо смягчало кожу, в результате участок восстановленной кожи был не эластичным. В данном опыте оптимальными оказались средства, полученные по примеру 2, 4, 5, 9, 11, 17, 19

Пример 21. У кроликов весом 2-3 кг выбривали поверхность кожи в области спины и скальпелем делали 9 надрезов длиной 1,5-2 см, глубиной до 1 мм. Каждую ранку 1 раз в день в течение 2 дней смазывали одним из предлагаемых средств (№2, 4, 5, 9, 11, 17, 19). Часть ранок обрабатывали левомеколевой мазью и часть ранок служила контролем заживания, они ничем не обрабатывались. На ранках, обработанных средством по примеру №2, 5, 9, 19, к 2 суткам начал образовываться струп, на 4 сутки отмечалось полное заживление, эластичность кожи восстановилась к 8 суткам. На ранках, обработанных средством по прописи №4, 11, 17, струп образовывался на 3 день, полное заживление на 6 день и восстановление эластичности на 12 день. У ранок, обработанных левомеколем, струп образовывался на 3 день, полное заживление на 8 день, а восстановление эластичности на 16 день.

Заживление контрольных ранок у животных наблюдалось на 12-13-е сутки, восстановление эластичности на 40-45 сутки.

Таким образом, средство по прописи 2, 5, 9, 19 обладало выраженными регенерирующими свойствами.

Пример 22. Определение бактериостатической активность заявляемого средства на твердой питательной среде.

Заявляемое средство последовательно разводили физиологическим раствором и вносили в разогретый мясопептонный агар, который разливали в чашки Петри. На чашки с твердой питательной средой высевали тест-культуры микроорганизмов (Staphyloccus aureus АТСС 6538, Streptococcus agalactia АТСС 12386, Escherichia coli АТСС 25922) в концентрации 500 микробных клеток. Через 48 часов инкубации культур при температуре 37°С подсчитывали число выросших колоний. Результаты представлены в таблице №1

Пример 23. Определение бактерицидных свойств заявляемого средства.

Заявляемое средство последовательно разводили питательной средой в 10 и 100 раз, в которую вносили тест-культуры (Staphyloccus aureus АТСС 6538, Streptococcus agalactia АТСС 12386) микроорганизмов до конечной концентрации 1000 микробных клеток в мл. После 24 часов инкубации при температуре 37°С из каждого разведения отбирали пробу в объеме 0,5 мл и высевали на чашки с мясопептонным агаром. Чашки инкубировали при температуре 37°С в течение 10 суток, отмечая количество колоний на питательной среде. Результаты представлены в таблице №2

Пример 24. Определение бактерицидной активности заявляемого средства на лактирующих коровах. Провели сравнительную оценку защитных свойств заявляемого средства на лактирующих коровах. Сформировали пять групп, по 50 голов: вымя животных первой группы обрабатывали двукратно после доения в течение недели, у животных второй группы проводилась разовая обработка вымени после доения, у коров третьей группы вымя после доения обрабатывали двукратно кремом «Зорька с Флорализином» в течение недели, у животных четвертой группы после доения проводили разовую обработку вымени кремом «Зорька с Флорализином»; вымя животных из пятой группы до и после доения обмывалось теплой кипяченой водой. Смывы проводили с поверхности сосков вымени утром перед доением.

Пример 24. В хозяйстве животных одной фермы в количестве 134 голов после доения дважды в день обрабатывали заявляемым средством в течение 6 месяцев, у животных другой фермы этого же хозяйства после доения вымя обмывали водой. В результате за 6 месяцев у животных, которых обрабатывали защитным средством, не было выявлено случаев заболевания маститом. В контрольной группе у 6 коров было отмечено начало развития серозного воспаления вымени у одного животного, несмотря на лечение серозное воспаление перешло в катаральную стадию.

Таким образом, предлагаемое средство для профилактики мастита у крупного рогатого скота в отличие от применяемых в настоящее время средств хорошо впитывается в поверхностные слои эпидермиса, не образует поверхностной пленки, улучшает трофику тканей, стимулирует рост и развитие эпителиальных клеток, ускоряя заживление повреждений кожи, нормализует рН кожи, обладает антимикробным действием, не содержит антибиотиков, влияющих на качество молока. Средство не обладает сенсибилизирующими свойствами, не вызывает раздражения, не содержит антибиотики, показано к многократному и длительному применению, безопасно.

Предложенное средство для профилактики мастита у крупного рогатого скота апробировано с положительным результатом на лабораторных и сельскохозяйственных животных в период с 2012 по 2015 год на опытной базе ФГБНУ ВИЭВа в Вышнем Волочке, в хозяйствах Нижегородской области.

Предлагаемое средство для профилактики мастита у крупного рогатого скота может быть использовано для профилактики маститов у крупного рогатого скота в хозяйствах и частных подворьях при машинном и ручном типе доения и позволит снизить уровень заболеваемости маститами.

Источники информации

1. Кн. Профилактика и лечение маститов у животных. Гончаров В.П., Карпов В.А., Якимчук И.Л. М. Россельхозиздат 1980, стр. 35-44.

2. Справочник. Видаль ветеринар М:, АстраФармСервис 2013 г., стр. 205-206.

3. Справочник Ветеринарные препараты в России. 1 т. Кленова И.Ф., Мальцев К.Л., Яременко Н.А., Архипов И.А. Сельхозиздат 2004 г., стр. 499.