Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ БИФУРКАЦИОННОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ СОСУДОВ АРТЕРИАЛЬНОГО КРУГА БОЛЬШОГО МОЗГА

Изобретение относится к области медицины, а именно патологической анатомии, и может быть использовано при постановке диагноза бифуркационной недостаточности сосудов артериального круга большого мозга на патологоанатомическом материале.

Клинико-морфологический синдром бифуркационной недостаточности лежит в основе формирования аневризм артерий головного мозга.

Наиболее близким к заявляемому является способ диагностики бифуркационной недостаточности (Сивцова Е.В. Сравнительная морфологическая характеристика бифуркационной недостаточности у больных с дизэмбриопластическим и инволюционно-гипертоническим вариантом аневризматической болезни мозга: Автореф.  дисс. канд. мед. наук - СПб., 2013. - 22 с.), принятый за прототип. Осуществляют микроскопическое и морфометрическое исследование продольных гистологических срезов бифуркаций в области сочленения и прилегающих к нему участков сосудов. Измеряют длину сочленения, окрашивают срез толуидиновым синим и альциановым синим и оценивают проявление метахромазии (изменение цвета красителя) основного вещества соединительной ткани. Окрашивают срез методом Маллори и пикрофуксином по Ван-Гизону и оценивают структуру коллагеновых волокон, окрашивают срез орсеином и оценивают структуру внутренней эластической мембраны. При комплексной патоморфологической оценке при наличии не менее трех из ниже перечисленных признаков: увеличении длины сочленения, положительной метахроматической реакции, нарушении структурной организации коллагеновых и эластических волокон, диагностируют бифуркационную недостаточность сосудов артериального круга большого мозга.

Однако прототип недостаточно точен, так как не позволяет четко выделить изменения, относящиеся к бифуркационной недостаточности, на фоне схожих признаков других болезней и патологических состояний, в частности гипертонической артериопатии, ревматических болезней и прочих, протекающих с дистрофическими изменениями сосудистой стенки, проявляющимися метахромазией при гистохимических окрасках; нет точной характеристики изменений волокнистого субстрата (коллагеновых и эластических волокон), обнаруживаемых при бифуркационной недостаточности.

Изобретение направлено на создание способа патоморфологической диагностики бифуркационной недостаточности сосудов артериального круга большого мозга, обеспечивающего повышение точности диагностики за счет определения локализации и характера изменений волокнистого субстрата в структурных компонентах бифуркации артерий.

Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается тем, что в известном способе патоморфологической диагностики бифуркационной недостаточности сосудов артериального круга большого мозга, включающем микроскопическое морфометрическое и гистохимическое исследование продольных гистологических срезов бифуркации артерии, выявление увеличения длины сочленения более 370 мкм, метахромазии, структурных изменений коллагеновых и эластических волокон, особенность заключается в том, что при выявлении не менее трех признаков: увеличении длины сочленения, наличии метахромазии основного вещества в сочленении и адвентиции артерии, декомплексации и неравномерной толщины коллагеновых волокон сочленения, фрагментации и лизиса внутренней эластической мембраны и эластических волокон адвентиции, диагностируют бифуркационную недостаточность сосудов артериального круга большого мозга.

Способ осуществляется следующим образом.

Приготавливают продольные гистологические срезы бифуркации в области сочленения сосудов артериального круга большого мозга толщиной 5-7 микрон.

На срезах под микроскопом с помощью окуляр-микрометра либо систем визуализации измеряют расстояние между краями соединяющихся мышечных сегментов артерий. Оценивают длину сочленения. Считают увеличением длины сочленения при размерах более 370 мкм (Сивцова Е.В. Сравнительная морфологическая характеристика бифуркационной недостаточности у больных с дизэмбриопластическим и инволюционно-гипертоническим вариантом аневризматической болезни мозга: Автореф.  дисс. канд. мед. наук - СПб., 2013. - 22 с.).

Оценивают изменения гистохимического окрашивания основного вещества соединительной ткани бифуркации при использовании треххромных окрасок и реактивом Шифа, основанные на трансформации тинкториальных свойств красителей распадающимися гликозаминогликанами, приводящие к окрашиванию основного вещества в цвет, отличный от красителя (метахромазия), в частности в сиреневый. Наличие диффузной метахромазии непосредственно в соединительнотканном сочленении, а также в адвентиции артерий, является признаком бифуркационной недостаточности.

Оценивают структурную организацию коллагеновых волокон сочленения. Состояние коллагена определяют с помощью окраски срезов по методу Маллори и пикрофуксином. Неизмененные волокна выглядят в виде упорядоченных равнонаправленных структур. Нарушения, характерные для бифуркационной недостаточности, проявляются в виде декомплексации (разнонаправленности и разволокнения) и неравномерной толщины волокон.

Оценивают структурную организацию внутренней эластической мембраны, а также и эластических волокон адвентиции. Используют окрашивание гистологических препаратов орсеином, по Маллори и пикрофуксином по Ван-Гизону. Неизмененные эластические волокна и внутренняя эластическая мембрана имеют компактное упорядоченное строение без разрывов и лизиса. В поврежденном эластическом каркасе сочленения и прилежащим к нему (сочленению) участкам адвентиции обнаруживают деструктивные изменения внутренней эластической мембраны и эластических волокон в виде фрагментации, а в части случаев и их лизис с полным отсутствием на всем протяжении сочленения.

При выявлении не менее трех признаков из перечисленных: увеличения длины сочленения более 370 мкм, диффузной метахромазии основного вещества в сочленении и адвентиции бифуркации артерии, изменения волокнистого субстрата в виде декомплексации и неравномерной толщины коллагеновых волокон, фрагментации и лизиса внутренней эластической мембраны и эластических волокон адвентиции диагностируют бифуркационную недостаточность одной развилки артериального круга большого мозга.

Заявляемый способ разработан в РНХИ им. А.Л. Поленова в патологоанатомической лаборатории на 298 объектах исследования.

Пример. Пациентка П., 51 год (и.б. №822/11, РНХИ).

Патологоанатомический диагноз

Основное заболевание. Аневризматическая болезнь головного мозга, множественные аневризмы: разорвавшаяся аневризма развилки основной артерии (0,5×0,5 см), мешотчатая аневризма правой средней мозговой артерии (0,3×0,4 см), клипированная аневризма левой средней мозговой артерии. Массивное субарахноидальное кровоизлияние с прорывом крови и тампонадой желудочковой системы мозга. Гипертоническая болезнь.

Осложнение. Тотальный ишемический инфаркт мозга.

Артериальный круг большого мозга препарировался на отдельные бифуркации, путем пересечения их на расстоянии 3 мм, от углов ветвлений внутренней сонной артерии (ВСА) на заднюю соединительную (ЗСА) и переднею мозговую артерии (ПМА), переднюю соединительную артерию (ПСА) с примыкающей к ней ПМА, среднюю мозговую артерию (СМА) в местах ветвлений, основную артерию OA в месте ветвления на заднюю мозговую артерию (ЗМА), ЗМА в месте отхождения задней соединительной артерии (ЗСА), ЗМА в месте ветвления - всего 8 бифуркаций. После фиксации в 10%-ном формалине проводилось изготовление гистологических препаратов бифуркаций артерий с проводкой по спиртам повышающейся концентрации с последующей заливкой материала в парафин.

Согласно заявляемому способу из парафиновых блоков с фрагментами бифуркаций артерий изготовлялись продольные серийные срезы толщиной 5-7 микрон. Препараты были окрашены гематоксилином и эозином, пикрофуксином по методу Ван Гизон, орсеином, альциановым синим, толуидиновым синим, реактивом Шифа, по Маллори. На микрофотографии (см. чертеж) гистологического препарата бифуркации ВСА в области ЗСА при увеличении 100, окрашенного альциановым синим, показаны: мышечная оболочка артерий бифуркации 1, сочленение артерий 2, адвентиция артерий бифуркации 3.

Проведены измерения ширины соединительнотканного кольца - собственно сочленения, и оценка локализации и характера гистохимических изменений структур бифуркаций. Результаты исследования приведены в таблице.

Из таблицы видно, что в 5 бифуркациях встречаются по 3 признака бифуркационной недостаточности: удлинение сочленения, диффузная метахромазия соединительнотканного остова сочленения и адвентиции артерии, нарушение структуры волокон коллагена и эластики внутренней эластической мембраны и адвентиции артерий, в 3 бифуркациях - по 1 признаку.

Таким образом, диагностирована бифуркационная недостаточность в 5 из 8 исследованных бифуркаций (ПМА-ПСА, правой и левой ВСА-ПМА, левой ВСА-ЗСА, развилки OA).

Способ обеспечивает повышение точности диагностики бифуркационной недостаточности сосудов артериального круга большого мозга за счет комплексной оценки изменений гистологических признаков с учетом локализации и характера изменений волокнистого субстрата (коллагеновых и эластических волокон) в структурных компонентах бифуркации артерии.