×
27.03.2016
216.014.c910

СОСТАВ СРЕДЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ РАСТЕНИЯ СЕМЕЙСТВА РЯСКОВЫЕ (Lemna minor) В УСЛОВИЯХ in vitro

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к биотехнологии. Состав среды для культивирования растения семейства Рясковые (Lemna minor) в условиях in vitro включает фосфат калия монозамещенный - KHPO, четырехводный нитрат кальция - Ca(NO)×4HO, нитрат калия - KNO, семиводный сульфат магния - MgSO×7HO, двуводный молибдат натрия - NaMoO×2HO, семиводный сульфат цинка - ZnSO×7HO, двунатриевый дигидрат этилендиаминтетрауксусной кислоты - NаЭДТА×2HO и борную кислоту - HBO, дополнительно содержит калия йодид - KI, кобальта хлорид - CoCl×6HO, глицин, глутамин, тиамин, пиридоксин, фолиевую кислоту, семиводный сульфат железа - FeSO×7HO, пятиводный сульфат марганца - MnSO×5HO, фруктозу и пятиводный сульфат меди - CuSO×5HO. Все компоненты взяты при определенном соотношении. Изобретение позволяет повысить биологическую продуктивность Lemna minor за счет оптимизации содержания элементов питания в культивационной среде. 2 табл.
Основные результаты: Состав среды для культивирования растений семейства Рясковые (Lemna minor) в условиях in vitro, включающий фосфат калия монозамещенный - KHPO, четырехводный нитрат кальция - Ca(NO)×4HO, нитрат калия - KNO, семиводный сульфат магния - MgSO×7HO, двуводный молибдат натрия - NaMoO×2HO, семиводный сульфат цинка - ZnSO×7HO, двунатриевый дигидрат этилендиаминтетрауксусной кислоты - NаЭДТА×2HO и борную кислоту - HBO, дополнительно содержит калия йодид - KI, кобальта хлорид - CoCl×6HO, глицин, глутамин, тиамин, пиридоксин, фолиевую кислоту, семиводный сульфат железа - FeSO×7HO, пятиводный сульфат марганца - MnSO×5HO, фруктозу и пятиводный сульфат меди - CuSO×5HO при следующем содержании компонентов, мас.%:
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для производства как высокобелковых кормов в отраслях кормопроизводства, так и разнообразных белковых препаратов в фармацевтике и ветеринарии.

При культивировании растений семейства рясковых (разные виды Lemna, Wolffia, Spirodela) в условиях in vitro рядом исследователей рекомендованы среды, составленные по прописям Мурасиге-Скуга (наиболее универсальная среда) (Войнов Н.А. и др., 2009), Гамборга, Шенка-Хильдебрандта (Schenk and Hildebrandt, 1972; Gamborg et al., 1968; Boehm et al., 2001; Kruse et al., 2001; Li J. et al., 2004; Friedrich A.S., 2005).

Наиболее распространенными средами для водных и песчаных культур являются среды, составленные по прописям Кнопа, Стейнберга и Хогланда-Арнона (Гродзинский А.М., Гродзинский Д.М., 1973; Steinberg, R., 1946; Knop, 1865; Hoagland and Arnon., 1938) и имеющие более низкое, по сравнению с вышеупомянутыми, содержание минеральных веществ. Все указанные среды разработаны для культивирования широкого круга растений, поэтому не в полной мере удовлетворяют индивидуальным потребностям в элементах питания отдельно взятого объекта, что не позволяет максимально реализовать его потенциальную биологическую продуктивность.

Наиболее близкой по биологической сущности к изобретению является среда Стейнберга (Steinberg, R., 1946), включающая в свой состав следующие компоненты, мас.%:

КН2РO4 0,43
К2НРO4 0,060
Ca(NO3)2×4H2O 1,41
KNO3 1,67
MgSO4×7H2O 0,48
FeCl3×6H2O 0,004
2ЭДТА×2Н2O 0,007
Na2MoO4×2H2O 0,0002
ZnSO4×7H2O 0,0008
MnCl2×4H2O 0,004
H3BO3 0,0006
Сахароза Остальное

К недостаткам указанной среды для культивирования водных растений относятся несбалансированность минерального питания для индивидуальных потребностей Lemna minor и практически полное отсутствие органических элементов питания за исключением сахарозы.

Задача изобретения - повышение биологической продуктивности Lemna minor за счет оптимизации содержания элементов питания в культивационной среде.

Поставленная задача достигается изменением баланса минеральных элементов в питательном растворе, заменой некоторых минеральных элементов и включением в раствор дополнительных как минеральных, так и органических компонентов. Для этого среда, включающая фосфат калия монозамещенный - КН2РO4, четырехводный нитрат кальция - Ca(NO3)2×4Н2O, нитрат калия - KNO3, семиводный сульфат магния - MgSO4×7H2O, двуводный молибдат натрия - Na2MoO4×2H2O, семиводный сульфат цинка - ZnSO4×7H2O, двунатриевый дигидрат этилендиаминтетрауксусной кислоты - Na2ЭДТА×2H2O и борную кислоту - Н3ВO3, дополнительно содержит калия йодид - KJ, кобальта хлорид - СоСl2×6Н2O, глицин, глутамин, тиамин, пиридоксин, фолиевую кислоту, семиводный сульфат железа - FeSO4×7H2O, пятиводный сульфат марганца - MnSO4×5H2O, фруктозу и пятиводный сульфат меди - CuSO4×5H2O при следующем содержании компонентов, мас.%:

КН2РO4 1,31-1,44
Ca(NO3)2×4H2O 1,89-2,09
KNO3 2,23-2,46
MgSO4×7H2O 1,14-1,26
FeSO4×7H2O 0,13-0,15
Na2ЭДТА×2H2O 0,18-0,20
KJ 0,0018-0,0020
Na2MoO4×2H2O 0,00021-0,00023
ZnSO4×7H2O 0,00096-0,00106
CuSO4×5H2O 0,00015-0,00017
MnSO4×5H2O 0,0015-0,0016
H3BO3 0,00086-0,00095
CoCl2×6H2O 0,00036-0,00040
Глицин 0,46-0,51
Глутамин 0,49-0,54
Тиамин 0,045-0,050
Пиридоксин 0,0044-0,0048
Фолиевая кислота 0,065-0,072
Фруктоза Остальное

Сопоставительный анализ с прототипом позволяет сделать вывод, что заявляемый состав раствора отличается от известных по содержанию всех компонентов ионной формой ряда компонентов и введением новых компонентов. Таким образом, заявляемое решение соответствует критерию «новизна». Разработанная среда обеспечила многократное повышение продуктивности Lemna minor по целому комплексу показателей, таких как прирост биомассы популяции, содержание тотального белка в 100 мг сырой массы и процентное содержание белка в сухой массе, обеспечивая при этом достаточно высокий показатель содержания сухого вещества, и не вызывая видимых физиологических отклонений в архитектонике растения. Наиболее важный показатель - выход тотального белка с популяции - также превосходит аналогичный показатель при культивировании Lemna minor на ранее известных аналогах сред. Таким образом, данный состав компонентов среды действительно увеличивает продуктивность объекта, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого решения критерию «существенные отличия».

Для экспериментальной проверки заявляемого состава были подготовлены четыре варианта: прототип (среда Стейнберга (St)) и три варианта заявляемой среды (L4M«1» - среда составлена по наименьшей границе заявляемых допустимых интервалов масс компонентов, L4M«2» - среда составлена по средним величинам из заявляемых допустимых интервалов масс компонентов, L4M«3» - среда составлена по наибольшей границе заявляемых допустимых интервалов масс компонентов).

Смеси получили простым смешиванием. Среды готовили из концентрированных маточных растворов стандартной компоновки (Войнов Н.А. и др., 1998) (табл.1):

Растения помещали на жидкие питательные среды в количестве 10 растений в одну банку общим объемом 300 мл в трехкратной повторности для каждого из вариантов. Объем среды в каждой банке составлял 50 мл. Учетный период - 1 месяц со дня посадки (табл.2).

Приведенные в табл.2 данные по результатам дисперсионного анализа показали наличие достоверных различий фактора на 95% уровне значимости.

Из табл.2 следует, что заявляемая среда существенно превосходит по всем показателям продуктивности прототип. Так же полученные данные свидетельствуют о том, что при использовании граничных значений заявляемых допустимых интервалов масс компонентов происходит снижение продуктивности Lemna minor по всем показателям в связи с дефицитом либо избытком элементов питания в среде.

Источники информации

1. Войнов Н.А., Волова Т.Г., Зобова Н.В., Маркова С.В., Франк Л.А., Шишацкая Е.И. Современные проблемы и методы биотехнологии / Учеб. пособие. - Красноярск, ИПК СФУ, 2009. - 418 с.

2. Гродзинский А.М, Гродзинский Д.М. (1973). Краткий справочник по физиологии растений. Изд. 2, испр., доп. - Киев: Наукова думка. - 590 с.

3. Boehm, R., Kruse, С., Voeste, D., Barth, S. and Schnabl, H. (2001) A transient transformation system for duckweed (Wolffia columbiana) using Agrobacterium-mediated gene transfer. J Appl Bot 75:107-111.

4. Friedrich A.S. (2005) Untersuchungen zu Kultivierung, Transformation und Fermentation von Wolffia spec. - Inaugural - Dissertation. - 177 s.

5. Gamborg, O.L., Miller, R.A. and Ojima, K. (1968) Nutrient requirements of suspension cultures of soybean root cells. Experimental Cell Research 50, 151-158.

6. Gamborg, O.L., Constabel, F., La Rue, T.A. G., Miller R.A. & Steck, W. (1971). The influence of hormones on secondary metabolite formation in plant cell cultures. In Les Cultures de Tissas de Plantes, pp. 335-44. Paris: Centre National de la Recherche Scientifique.

7. Hoagland, D.R., and Arnon, D.I., (1938) The water-culture method for growing plants without soil Univ. Calif. Coll. Agric. Exp. Sta. Circ. Berkeley, CA 347-353

8. Knop, W. (1865) Quantitative Utersuchungen Über den Ernährungensprozeβ der Pflanze. Landw. Versuchssat. 7:93.

9. Knop, W. (1865) Arbeiten aus dem Laboratorio der Versuchs-Station zu Moecern. Die Landwirtschaftlichen Versuchs-Stationen 7: 436-450.

10. Kruse, C., Boehm, R., Voeste, D., Barth, S. and Schnabl, H. (2001) Transient transformation of Wolffia columbiana by particle bombardment. Aquatic Bot 72:175-181.

11. Li. J, Jain. M, Vunsh. R, Vishnevetsky. J, Hanania. U, Flaishman M., Perl. A, Edelman. M. Callus induction and regeneration in Spirodela and Lemna // Plant Cell Rep (2004) 22:457-464.

12. Steinberg, R., 1946: Mineral requirement of Lemna minor. Plant Physiology, 21, 42-48.

Состав среды для культивирования растений семейства Рясковые (Lemna minor) в условиях in vitro, включающий фосфат калия монозамещенный - KHPO, четырехводный нитрат кальция - Ca(NO)×4HO, нитрат калия - KNO, семиводный сульфат магния - MgSO×7HO, двуводный молибдат натрия - NaMoO×2HO, семиводный сульфат цинка - ZnSO×7HO, двунатриевый дигидрат этилендиаминтетрауксусной кислоты - NаЭДТА×2HO и борную кислоту - HBO, дополнительно содержит калия йодид - KI, кобальта хлорид - CoCl×6HO, глицин, глутамин, тиамин, пиридоксин, фолиевую кислоту, семиводный сульфат железа - FeSO×7HO, пятиводный сульфат марганца - MnSO×5HO, фруктозу и пятиводный сульфат меди - CuSO×5HO при следующем содержании компонентов, мас.%:
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 114.
20.01.2013
№216.012.1abc

Состав среды для культивирования растений семейства рясковые (wolffia arrhiza) в условиях in vitro

Изобретение относится к области сельского хозяйства и может быть использовано для культивирования растений семейства Рясковые (Wolffia arrhiza) в условиях in vitro. Состав среды для культивирования растений семейства Рясковые состоит из: фосфата калия монозамещенного, четырехводного нитрата...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002472338
Дата охранного документа: 20.01.2013
20.02.2013
№216.012.26f9

Полипептид из морской анемоны heteractis crispa, обладающий анальгетическим действием

Изобретение относится к области биохимии, а именно к биологически активным полипептидам, обладающим анальгетическим действием. Предложен полипептид π-AnmTX Her 1b-1, обладающий анальгетическим действием и имеющий следующую аминокислотную последовательность:...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002475497
Дата охранного документа: 20.02.2013
10.09.2013
№216.012.66bf

Лигнан, обладающий анальгетическим действием

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к биологически активному соединению, обладающему анальгетическим действием. Лигнан, обладающий анальгетическим действием, структура которого описывается как...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491950
Дата охранного документа: 10.09.2013
27.02.2014
№216.012.a425

Способ создания трансгенных растений с высоким уровнем экспрессии трансгенного белка

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу создания трансгенных линий растений, продуцирующих белок с высоким уровнем экспрессии, включающему трансформацию растений экспрессирующим вектором, включающим плазмиду, содержащую ген, кодирующий β-глюкуронидазу, 35S промотор, nos...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002507736
Дата охранного документа: 27.02.2014
10.03.2014
№216.012.a94e

Способ включения квантовых точек методом соосаждения в пористые частицы карбоната кальция

Изобретение может быть использовано в биологических и медицинских исследованиях. Пористые частицы карбоната кальция формируют в результате реакции CaCl+2NaHCO→CaCO↓+2NaCl+2H, причем водный раствор квантовых точек, модифицированных избыточным количеством меркаптоуксусной кислоты, имеющей...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002509057
Дата охранного документа: 10.03.2014
27.05.2014
№216.012.cb0c

Флуоресцентный зонд и тест-система для определения активности фосфолипазы а2

Настоящее изобретение относится к области генной инженерии, конкретно к созданию тест-систем на основе флуоресцентных зондов, которые могут быть использованы в качестве субстратов для фосфолипаз А1 и А2. Зонд с наименованием...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002517746
Дата охранного документа: 27.05.2014
10.06.2014
№216.012.ccfe

Способ определения неспецифической устойчивости патогенных микроогранизмов к антибиотикам на основании измерения каталитической активности фосфодиэстераз, расщепляющих циклический дигуанозинмонофосфат

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ определения неспецифической устойчивости патогенных микроорганизмов к антибиотикам и факта присутствия бактериальных биопленок на основании измерения каталитической активности фосфодиэстераз, расщепляющих циклический...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002518249
Дата охранного документа: 10.06.2014
20.07.2014
№216.012.decd

Способ длительного хранения in vitro растений осины

Изобретение относится к области биотехнологии растений. Изобретение представляет собой способ хранения растений осины в условиях in vitro, включающий культивирование микропобегов осины на питательной среде WPM с добавлением сахарозы 10-20 г/л, агар-агара 9 г/л и витаминов MS 1 мл/л, сорбитола...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002522823
Дата охранного документа: 20.07.2014
27.08.2014
№216.012.efa8

Рекомбинантные плазмидные днк, кодирующие гибридные полипептиды со свойствами красного флуоресцентного белка mcherry, для продуцирования гибридных флуоресцентных белков в escherichia coli

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой рекомбинантные плазмидные ДНК, кодирующие гибридные полипептиды со свойствами красного флуоресцентного белка mCherry. Рекомбинантная плазмидная ДНК pChFN3 кодирует гибридный белок ChFN3, который имеет свойства красного флуоресцентного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002527171
Дата охранного документа: 27.08.2014
10.09.2014
№216.012.f3d8

Способ оценки чувствительности клеток рака легкого к доксорубицину на основании уровней экспрессии маркерных генов и набор для его осуществления

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ оценки чувствительности клеток рака легкого к доксорубицину (IC50), а также набор для осуществления данного способа. Способ основан на сравнении уровней экспрессии маркерных генов АВСС1, ERCC1, FTL, GSTP1, МТ2А, RRM1, TUBB3 в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002528247
Дата охранного документа: 10.09.2014
Показаны записи 1-10 из 69.
20.01.2013
№216.012.1abc

Состав среды для культивирования растений семейства рясковые (wolffia arrhiza) в условиях in vitro

Изобретение относится к области сельского хозяйства и может быть использовано для культивирования растений семейства Рясковые (Wolffia arrhiza) в условиях in vitro. Состав среды для культивирования растений семейства Рясковые состоит из: фосфата калия монозамещенного, четырехводного нитрата...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002472338
Дата охранного документа: 20.01.2013
20.02.2013
№216.012.26f9

Полипептид из морской анемоны heteractis crispa, обладающий анальгетическим действием

Изобретение относится к области биохимии, а именно к биологически активным полипептидам, обладающим анальгетическим действием. Предложен полипептид π-AnmTX Her 1b-1, обладающий анальгетическим действием и имеющий следующую аминокислотную последовательность:...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002475497
Дата охранного документа: 20.02.2013
10.09.2013
№216.012.66bf

Лигнан, обладающий анальгетическим действием

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к биологически активному соединению, обладающему анальгетическим действием. Лигнан, обладающий анальгетическим действием, структура которого описывается как...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002491950
Дата охранного документа: 10.09.2013
27.02.2014
№216.012.a425

Способ создания трансгенных растений с высоким уровнем экспрессии трансгенного белка

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу создания трансгенных линий растений, продуцирующих белок с высоким уровнем экспрессии, включающему трансформацию растений экспрессирующим вектором, включающим плазмиду, содержащую ген, кодирующий β-глюкуронидазу, 35S промотор, nos...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002507736
Дата охранного документа: 27.02.2014
10.03.2014
№216.012.a94e

Способ включения квантовых точек методом соосаждения в пористые частицы карбоната кальция

Изобретение может быть использовано в биологических и медицинских исследованиях. Пористые частицы карбоната кальция формируют в результате реакции CaCl+2NaHCO→CaCO↓+2NaCl+2H, причем водный раствор квантовых точек, модифицированных избыточным количеством меркаптоуксусной кислоты, имеющей...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002509057
Дата охранного документа: 10.03.2014
27.05.2014
№216.012.cb0c

Флуоресцентный зонд и тест-система для определения активности фосфолипазы а2

Настоящее изобретение относится к области генной инженерии, конкретно к созданию тест-систем на основе флуоресцентных зондов, которые могут быть использованы в качестве субстратов для фосфолипаз А1 и А2. Зонд с наименованием...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002517746
Дата охранного документа: 27.05.2014
10.06.2014
№216.012.ccfe

Способ определения неспецифической устойчивости патогенных микроогранизмов к антибиотикам на основании измерения каталитической активности фосфодиэстераз, расщепляющих циклический дигуанозинмонофосфат

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ определения неспецифической устойчивости патогенных микроорганизмов к антибиотикам и факта присутствия бактериальных биопленок на основании измерения каталитической активности фосфодиэстераз, расщепляющих циклический...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002518249
Дата охранного документа: 10.06.2014
20.07.2014
№216.012.decd

Способ длительного хранения in vitro растений осины

Изобретение относится к области биотехнологии растений. Изобретение представляет собой способ хранения растений осины в условиях in vitro, включающий культивирование микропобегов осины на питательной среде WPM с добавлением сахарозы 10-20 г/л, агар-агара 9 г/л и витаминов MS 1 мл/л, сорбитола...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002522823
Дата охранного документа: 20.07.2014
27.08.2014
№216.012.efa8

Рекомбинантные плазмидные днк, кодирующие гибридные полипептиды со свойствами красного флуоресцентного белка mcherry, для продуцирования гибридных флуоресцентных белков в escherichia coli

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой рекомбинантные плазмидные ДНК, кодирующие гибридные полипептиды со свойствами красного флуоресцентного белка mCherry. Рекомбинантная плазмидная ДНК pChFN3 кодирует гибридный белок ChFN3, который имеет свойства красного флуоресцентного...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002527171
Дата охранного документа: 27.08.2014
10.09.2014
№216.012.f3d8

Способ оценки чувствительности клеток рака легкого к доксорубицину на основании уровней экспрессии маркерных генов и набор для его осуществления

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ оценки чувствительности клеток рака легкого к доксорубицину (IC50), а также набор для осуществления данного способа. Способ основан на сравнении уровней экспрессии маркерных генов АВСС1, ERCC1, FTL, GSTP1, МТ2А, RRM1, TUBB3 в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002528247
Дата охранного документа: 10.09.2014
+ добавить свой РИД