СПОСОБ ОЦЕНКИ ВОЗДЕЙСТВИЯ ПРОИЗВОДСТВЕННОГО МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ФАКТОРА НА МЕДИЦИНСКИХ СЕСТЕР КРУПНЫХ МНОГОПРОФИЛЬНЫХ ДЕТСКИХ БОЛЬНИЦ

Изобретение относится к медицине, в частности к медицине труда, и может быть использовано для диагностики воздействия производственного микробиологического фактора на медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц, не работающих с инфицированным материалом, зараженным материалом или материалом подозрительным на заражение микроорганизмами 3-4 группы патогенности, и грибами.

Среди почти 40 тыс. существующих в настоящее время профессий особую социальную нишу занимают более 4 млн. медицинских работников. В системе здравоохранения работает более 1336,1 тыс. специалистов со средним медицинским образованием [Программа развития сестринского дела в Российской Федерации на 2010-2020 годы].

Известно, что медицинские работники подвергаются воздействию различных неблагоприятных факторов производственной среды. Таковыми являются и биологические агенты [Генеративное здоровье женщин медицинских работников Потапенко А.А., Шепарев А.А., Лучанинова В.Н., Транковская Л.В., Бурмистрова Т.И., Ишпахтин Ю.И. Тихоокеанский медицинский журнал. 2006. №3. С.55-57.]. По данным гигиенической оценки условий труда медицинских работников, биологический фактор, в т.ч. микробиологический, оценивается как вредный и опасный [К вопросу о состоянии неспецифической резистентности женщин - медицинских работников / Овчинникова М.Г. Тихоокеанский медицинский журнал. 2004. №4. С.61-62]. Своеобразие экологических условий лечебных учреждений, большая концентрация ослабленных лиц на ограниченных территориях, своеобразный микробный пейзаж в стационарах, наличие большого числа источников инфекции среди пациентов, нарастающий «вал» агрессии инвазивных вмешательств, широкое применение антибиотиков и цитостатиков - все это отражается на микробиоцинозах различных биотопов медицинских работников [Особенности микробиоцинозов различных биотопов у медицинских работников / Захарова Ю.В. Медицина в Кузбассе. 2006. №3. С.35-37].

Вместе с тем, сами медицинские работники, в т.ч. медицинские сестры, могут являться носителями инфекции и создавать опасность распространения инфекции среди больных [Социально-гигиенические факторы заболеваемости медицинских работников с временной утратой трудоспособности Лушникова P.M., Тимофеев С.П. Казанский медицинский журнал. 2002. Т. 83. №6. С.462-463]. По мнению ряда авторов, медицинские работники могут являться и источниками различных госпитальных внутрибольничных инфекций [Эпидемиологические аспекты микробиоценозов медицинских работников Захарова Ю.В., Леванова Л.А. Медицина в Кузбассе. 2006. №4. С.13-18].

Медицинские сестры, занятые в условиях детских многопрофильных стационаров, могут являться источниками инфекции для детей, контактирующих с ними.

Известен способ определения общей микробной обсемененности воздуха [МУК 4.2.2942-11. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Методы санитарно-бактериологических исследований объектов окружающей среды, воздуха и контроля стерильности в лечебных организациях. Методические указания (утв. Роспотребнадзором 15.07.2011)]. Однако данный способ не учитывает определение количества микроорганизмов, выделенных у медицинских сестер крупных многопрофильных учреждений.

Известен способ определения профпригодности лиц к работе в условиях хронических химических нагрузок малой интенсивности, заключающийся в том, что изучают показатели иммуноглобулинов А, М, G и секреторного иммуноглобулина А в слюне. На основании полученных данных вычисляют коэффициент местного иммунитета (К min), исходя из которого, определяют степень пригодности обследуемого к работе [патент RU №2354973, 2009 г.]. Недостатком способа является то, что данный метод не является прямым методом выявления носителей бактериальной инфекции, а лишь учитывает показатели местного иммунитета работника без количественного учета преобладающей у него микрофлоры.

Известен способ оценки профессионального риска у работников, подвергающихся воздействию производственного фактора, включающий расчет относительного риска (RR, ед.) и этиологической доли (EF,%) по Miettinen (1978) по формуле: RR=P1/P2, ед.; где: Р1 - распространенность патологии у работников, подвергающихся воздействию того или иного производственного фактора; Р2 - распространенность патологии у лиц, не работающих в контакте с данными производственными факторами; EF=(RR-1)/RR, %, причем связь выявленных нарушений с работой рассчитывают по таблице [«Методология выявления профессиональных заболеваний и заболеваний, связанных с условиями труда». Н.Ф. Измеров, Э.И. Денисов, Методические рекомендации. Москва. - 2010 г.]. Недостатком данного способа является то, что он учитывает профессиональные риски для работников по результатам ретроспективных эпидемиологических исследований.

Прототипом изобретения является способ оценки воздействия микробиологического фактора, заключающийся в том, что производят посев мазка со слизистой оболочки носа на питательную среду, инкубируют при температуре 37°C в течение 24 часов, определяют общее количество микроорганизмов путем подсчета выросших колоний [Приказ МЗ СССР №535 от 22.04.1985 г. «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений»].

Задачей изобретения является разработка способа, позволяющего с высокой достоверностью проводить оценку воздействия патогенных и условно-патогенных микроорганизмов при отсутствии других факторов риска на медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц при проведении предварительных и периодических медицинских осмотров для медсестер, не работающих с инфицированным материалом, зараженным материалом или материалом подозрительным на заражение микроорганизмами 3-4 группы патогенности, и грибами.

Технический результат при использовании изобретения - повышение точности оценки за счет получения критериев воздействия микробиологического фактора на медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц, не работающих с инфицированным материалом, зараженным материалом или материалом подозрительным на заражение микроорганизмами 3-4 группы патогенности, и грибами.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе оценки воздействия производственного микробиологического фактора на медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц, не работающих с инфицированным материалом, зараженным материалом или материалом подозрительным на заражение микроорганизмами 3-4 группы патогенности, и грибами, включающем посев мазка со слизистой оболочки носа на питательную среду, инкубацию при 37°C в течение 24 часов, определение общего количества микроорганизмов путем подсчета выросших колоний, согласно изобретению посев производят на мясопептонный агар, определяют общую микробную обсемененность микроорганизмами, растущими на мясопептонном агаре, путем выражения в КОЕ/мл, при ее значении более 10*3 КОЕ/мл воздействие производственного микробиологического фактора на медицинскую сестру оценивают как вредное, 10*3 КОЕ/мл и менее - как допустимое.

Предлагаемый способ оценки воздействия производственного микробиологического фактора на медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц осуществляют следующим образом:

- Материал из носовой полости у медицинской сестры собирают с соблюдением правил асептики в предварительно простерилизованные пробирки. Интервал между взятием материала и его посевом не должен превышать 1-2 часа. Материал берут натощак или через 2 часа после еды стерильным ватным тампоном со слизистой оболочки носа.

- В пробирку с тампоном с исследуемым материалом наливают с помощью стерильной пипетки 1 мл питательного бульона (аккуратно встряхивая, перемешивают) - получают 1-е разведение. 0,5 мл полученной суспензии с помощью стерильной пипетки приливают в стерильную пробирку, добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой), - получают 2-е разведение. Из полученной суспензии 2-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 3-е разведение. Из полученной суспензии 3-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 4-е разведение.

Последовательно производят посев клинического материала на плотную среду - мясопептонный агар (МПА). Сначала сеют 4-е, затем 3-е, затем 2-е разведения, затем 1-е разведение. Материал из каждого разведения сеют в отдельную чашку с плотной средой МПА. Засевают по 0,1 мл из разведенной суспензии в каждую чашку с плотной средой. При посеве стерильным шпателем материал втирают штрихами по всей поверхности питательной среды. Чашки с засеянным материалом инкубируют при температуре 37°C - 24 часа. На 2-е сутки чашки просматривают. После чего подсчитывают количество колоний. Количество микроорганизмов определяют в максимальном разведении, в котором еще удалось обнаружить микроорганизмы. Если микроорганизмы обнаруживают лишь в 1-м разведении, то общая микробная обсемененность будет соответствовать 10*1 КОЕ/мл; если микроорганизмы обнаруживают в 1-м и 2-м разведении, то общая микробная обсемененность будет соответствовать 10*2 КОЕ/мл; если микроорганизмы обнаруживают в 1-м, 2-м и 3-м разведении, то общая микробная обсемененность будет соответствовать 10*3 КОЕ/мл; если микроорганизмы обнаруживают в 1-м, 2-м, 3-м 4-м разведении, то общая микробная обсемененность будет соответствовать 10*4 КОЕ/мл; если микроорганизмы не обнаруживают ни в 1-м, ни во 2-м, ни в 3-м разведении, то общая микробная обсемененность будет соответствовать менее 10*1 КОЕ/мл.

За норму обсемененности слизистой носа у медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц, не работающих с инфицированным материалом, зараженным материалом или материалом подозрительным на заражение микроорганизмами 3-4 группы патогенности, и грибами, растущими на мясопептонном агаре (без добавления сыворотки крови и других добавок), принимают - 10*3 КОЕ/мл и менее для микроорганизмов семейства Enterobacteriacea, бактерии рода Staphylococcus, дрожжеподобных грибов рода Candida, - в указанном случае воздействие производственного микробиологического фактора на медицинскую сестру оценивают как допустимое.

При количестве микроорганизмов более 10*3 КОЕ/мл имеет место вредное воздействие производственного микробиологического фактора на медицинскую сестру. Данной медицинской сестре необходимо определение состава микрофлоры верхних дыхательных путей с определением чувствительности к антимикробным препаратам с целью назначения амбулаторного лечения.

Было проведено бактериологическое исследование мазков, взятых из носовой полости у медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц с признаками ринита (отечность слизистой носа, фибринозные налеты слизистой полости носа, кровоизлияния и т.д.). Результаты проведенного исследования показали, что у медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц с наличием клинических признаков ринита чаще, по сравнению с медицинскими сестрами крупных многопрофильных тех же детских больниц без клинических признаков ринита, обнаруживались микроорганизмы в количестве, превышающем 10*3 КОЕ/мл (p<0,001; OR=4,32). При этом у медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц с наличием клинических признаков ринита были выделены растущие на мясопептонном агаре микроорганизмы: грамотрицательные бактерии 3-4 групп патогенности (семейства Enterobacteriacea - в количестве 10*4 КОЕ/мл и более, бактерии рода Псевдомонас в количестве - 10*4 КОЕ/мл и более, и другие в количестве - 10*4 КОЕ/мл и более,) и/или бактерии рода Staphylococcus в количестве 10*4 КОЕ/мл и более (Staphylococcus aureus 10*4 КОЕ/мл и более (Staphylococcus epidermidis 10*4 КОЕ/мл и более, Staphylococcus saprophytics 10*4 КОЕ/мл и более), дрожжеподобных грибов рода Candida в количестве 10*4 КОЕ/мл и другие в количестве - 10*4 КОЕ/мл и более. У медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц с наличием клинических признаков ринита условия труда по микробиологическому фактору, согласно санитарно-гигиеническим исследованиям, соответствовали вредному классу (класс 3 согласно Руководству P 2.2.2006-05 «Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда»). У медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц без клинических признаков ринита микроорганизмы в количестве, превышающем 10*3 КОЕ/мл, не обнаруживались.). При этом у медицинских сестер без клинических признаков ринита, были выделены растущие на мясопептонном агаре микроорганизмы: грамотрицательные 3-4 групп патогенности (семейства Enterobacteriacea в количестве 10*1 КОЕ/мл - 10*3 КОЕ/мл, бактерии рода Псевдомонас в количестве 10*1 КОЕ/мл - 10*3 КОЕ/мл и другие в количестве 10*1 КОЕ/мл - 10*3 КОЕ/мл), и/или бактерии рода Staphylococcus в количестве 10*1 КОЕ/мл -10*3 КОЕ/мл (Staphylococcus aureus 10*1 КОЕ/мл - 10*3 КОЕ/мл, Staphylococcus epidermidis 10*1 КОЕ/мл - 10*3 КОЕ/мл, Staphylococcus saprophyticus 10*1 КОЕ/мл - 10*3 КОЕ/мл), дрожжеподобных грибов рода Candida в количестве 10*1 КОЕ/мл - 10*3 КОЕ/мл и другие в количестве - 10*4 КОЕ/мл и более. У медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц без клинических признаков ринита условия труда по микробиологическому фактору, согласно санитарно-гигиеническим исследованиям, соответствовали допустимому классу (класс 2 согласно Руководству P 2.2.2006-05 «Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда»). Другие факторы условий труда у медицинских сестер крупных многопрофильных детских больниц соответствовали допустимому классу условий труда (класс 2).

Предлагаемый способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Медицинская сестра А., стаж работы в физиотерапевтическом отделении - 2 года. При обследовании на слизистой полости рта обнаружена отечность, кровоизлияния. Материал из полости носа у медицинской сестры собирают в стерильную пробирку натощак стерильным ватным тампоном со слизистой оболочки носа.

- В пробирку с тампоном с исследуемым материалом наливают с помощью стерильной пипетки 1 мл питательного бульона (аккуратно встряхивая, перемешивают) - получают 1-е разведение. 0,5 мл полученной суспензии с помощью стерильной пипетки приливают в стерильную пробирку, добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой), - получают 2-е разведение. Из полученной суспензии 2-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 3-е разведение. Из полученной суспензии 3-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 4-е разведение.

- В чашку с плотной средой МПА с помощью стерильной пипетки наливают 0,1 мл суспензии 4-го разведения, затем в другую чашку с плотной средой МПА наливают 0,1 мл суспензии 3-го разведения, затем в другую чашку с плотной средой МПА той же пипеткой наливают 0,1 мл суспензии 2-го разведения, в 3-ю чашку с плотной средой МПА той же пипеткой наливают 0,1 мл суспензии 1-го разведения. Суспензию с материалом 4-го, затем 3-го, затем отдельно 2-го, и затем отдельно 1-го разведения втирают штрихами по всей поверхности питательной среды одним стерильным шпателем. Чашки с засеянным материалом помещают в термостат и инкубируют при температуре 37°C 24 часа.

Подсчитывают количество микроорганизмов. В чашке с 1-м разведением - рост бактерий обнаружен (100 колоний), в чашке со 2-м разведением рост бактерий обнаружен (50 колоний), в чашке с 3-м разведением - рост бактерий обнаружен (23 колоний) в чашке с 4-м разведением - рост бактерий обнаружен (5 колоний). Общая микробная обсемененность составляет 10*4 КОЕ/мл. Воздействие производственного микробиологического фактора на медицинскую сестру оценивают как вредное. Данной медицинской сестре необходимо определение состава микрофлоры верхних дыхательных путей с определением чувствительности к антимикробным препаратам с целью назначения амбулаторного лечения.

Пример 2. Медицинская сестра Б., стаж работы в отделении ультразвуковой диагностики - 5 лет. При обследовании на слизистой полости носа обнаружены кровоизлияния.

Материал из полости носа у медицинской сестры собирают в стерильную пробирку натощак стерильным ватным тампоном со слизистой оболочки носа с поверхности слизистой в зоне кровоизлияния.

В пробирку с тампоном с исследуемым материалом наливают с помощью стерильной пипетки 1 мл питательного бульона (аккуратно встряхивая, перемешивают) - получают 1-е разведение. 0,5 мл полученной суспензии с помощью стерильной пипетки приливают в стерильную пробирку, добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой), - получают 2-е разведение. Из полученной суспензии 2ого разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 3-е разведение. Из полученной суспензии 3-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 4-е разведение.

- В чашку с плотной средой МПА с помощью стерильной пипетки наливают 0,1 мл суспензии 4-го разведения, затем в другую чашку с плотной средой МПА наливают 0,1 мл суспензии 3-го разведения, затем в другую чашку с плотной средой МПА той же пипеткой наливают 0,1 мл суспензии 2-го разведения, в 3-ю чашку с плотной средой МПА той же пипеткой наливают 0,1 мл суспензии 1-го разведения. Суспензию с материалом 4-го, затем 3-го, затем отдельно 2-го, и затем отдельно 1-го разведения втирают штрихами по всей поверхности питательной среды одним стерильным шпателем. Чашки с засеянным материалом помещают в термостат и инкубируют при температуре 37°C 24 часа.

- Подсчитывают количество микроорганизмов. В чашке с 1-м разведением - рост бактерий обнаружен (120 колоний), в чашке со 2-м разведением рост бактерий обнаружен (75 колоний), в чашке со 3-м разведением рост бактерий обнаружен (30 колоний), в чашке с 4-м разведением - рост бактерий не обнаружен. Общая микробная обсемененность составляет 10*3 КОЕ/мл. Воздействие производственного микробиологического фактора на медицинскую сестру оценивают как допустимое.

Пример 3. Медицинская сестра В., стаж работы в рентгенологическом отделении - 11 лет. При обследовании отмечена отечность слизистой оболочки полости носа.

Материал из полости носа у медицинской сестры собирают в стерильную пробирку натощак стерильным ватным тампоном со слизистой оболочки носа с поверхности слизистой в зоне кровоизлияния.

В пробирку с тампоном с исследуемым материалом наливают с помощью стерильной пипетки 1 мл питательного бульона (аккуратно встряхивая, перемешивают) - получают 1-е разведение. 0,5 мл полученной суспензии с помощью стерильной пипетки приливают в стерильную пробирку, добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой), - получают 2-е разведение. Из полученной суспензии 2-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 3-е разведение. Из полученной суспензии 3-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 4-е разведение.

- В чашку с плотной средой МПА с помощью стерильной пипетки наливают 0,1 мл суспензии 4-го разведения, затем в другую чашку с плотной средой МПА наливают 0,1 мл суспензии 3-го разведения, затем в другую чашку с плотной средой МПА той же пипеткой наливают 0,1 мл суспензии 2-го разведения, в 3-ю чашку с плотной средой МПА той же пипеткой наливают 0,1 мл суспензии 1-го разведения. Суспензию с материалом 4-го, затем 3-го, затем отдельно 2-го, и затем отдельно 1-го разведения втирают штрихами по всей поверхности питательной среды одним стерильным шпателем. Чашки с засеянным материалом помещают в термостат и инкубируют при температуре 37°C 24 часа.

- Подсчитывают количество микроорганизмов. В чашке с 1-м разведением - рост бактерий обнаружен (75 колоний), в чашке со 2-м разведением рост бактерий обнаружен (100 колоний), в чашке с 3-м разведением - рост бактерий не обнаружен, в чашке с 4-м разведением - рост бактерий не обнаружен. Общая микробная обсемененность составляет 10*2 КОЕ/мл. Воздействие производственного микробиологического фактора на медицинскую сестру оценивают как допустимое.

Пример 4. Медицинская сестра Г., стаж работы в отделении физиотерапии - 14 лет. При обследовании отмечена отечность слизистой оболочки полости носа.

Материал из полости носа у медицинской сестры собирают в стерильную пробирку натощак стерильным ватным тампоном со слизистой оболочки носа с поверхности слизистой в зоне кровоизлияния.

В пробирку с тампоном с исследуемым материалом наливают с помощью стерильной пипетки 1 мл питательного бульона (аккуратно встряхивая, перемешивают) - получают 1-е разведение. 0,5 мл полученной суспензии с помощью стерильной пипетки приливают в стерильную пробирку, добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой), - получают 2-е разведение. Из полученной суспензии 2-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 3-е разведение. Из полученной суспензии 3-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 4-е разведение.

- В чашку с плотной средой МПА с помощью стерильной пипетки наливают 0,1 мл суспензии 4-го разведения, затем в другую чашку с плотной средой МПА наливают 0,1 мл суспензии 3-го разведения, затем в другую чашку с плотной средой МПА той же пипеткой наливают 0,1 мл суспензии 2-го разведения, в 3-ю чашку с плотной средой МПА той же пипеткой наливают 0,1 мл суспензии 1-го разведения. Суспензию с материалом 4-го, затем 3-го, затем отдельно 2-го, и затем отдельно 1-го разведения втирают штрихами по всей поверхности питательной среды одним стерильным шпателем. Чашки с засеянным материалом помещают в термостат и инкубируют при температуре 37°C - 24 часа.

- Подсчитывают количество микроорганизмов. В чашке с 1-м разведением - рост бактерий обнаружен (10 колоний), в чашке со 2-м разведением рост бактерий не обнаружен, в чашке с 3-м разведением - рост бактерий не обнаружен в чашке с 4-м разведением - рост бактерий не обнаружен. Общая микробная обсемененность составляет 10*1 КОЕ/мл.

Воздействие производственного микробиологического фактора на медицинскую сестру оценивают как допустимое.

Пример 5. Медицинская сестра Д., стаж работы в рентгенологическом отделении - 4 года. При обследовании отмечена отечность слизистой оболочки полости носа.

Материал из полости носа у медицинской сестры собирают в стерильную пробирку натощак стерильным ватным тампоном со слизистой оболочки носа с поверхности слизистой в зоне кровоизлияния.

В пробирку с тампоном с исследуемым материалом наливают с помощью стерильной пипетки 1 мл питательного бульона (аккуратно встряхивая, перемешивают) - получают 1-е разведение. 0,5 мл полученной суспензии с помощью стерильной пипетки приливают в стерильную пробирку, добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой), - получают 2-е разведение. Из полученной суспензии 2-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 3-е разведение. Из полученной суспензии 3-го разведения также берут 0,5 мл с помощью стерильной пипетки, приливают в стерильную пробирку и добавляют 4,5 мл питательного бульона (перемешивают стерильной стеклянной палочкой) - получают 4-е разведение.

- В чашку с плотной средой МПА с помощью стерильной пипетки наливают 0,1 мл суспензии 4-го разведения, затем в другую чашку с плотной средой МПА наливают 0,1 мл суспензии 3-го разведения, затем в другую чашку с плотной средой МПА той же пипеткой наливают 0,1 мл суспензии 2-го разведения, в 3-ю чашку с плотной средой МПА той же пипеткой наливают 0,1 мл суспензии 1-го разведения. Суспензию с материалом 4-го, затем 3-го, затем отдельно 2-го, и затем отдельно 1-го разведения втирают штрихами по всей поверхности питательной среды одним стерильным шпателем. Чашки с засеянным материалом помещают в термостат и инкубируют при температуре 37°C 24 часа. - Подсчитывают количество микроорганизмов. В чашке с 1-м разведением - рост бактерий не обнаружен, в чашке со 2-м разведением рост бактерий не обнаружен, в чашке с 3-м разведением - рост бактерий не обнаружен в чашке с 4-м разведением - рост бактерий не обнаружен. Общая микробная обсемененность составляет менее 10*1 КОЕ/мл. Воздействие производственного микробиологического фактора на медицинскую сестру оценивают как допустимое.