27.07.2014
216.012.e5fd

СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ В ТКАНЯХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к медицине, в частности к биологической химии, и предназначено для более полной оценки окислительной модификации белков (ОМБ) и анализа соотношения альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) основного и нейтрального характера в плазме и клетках крови, а также в тканях животных с целью определения степени выраженности и стадии окислительного стресса. Способ основывается на том, что спектр ОМБ делится на отдельные геометрические фигуры, представляющие собой прямоугольные трапеции. Площадь под кривой спектра окислительной модификации белков складывается из площадей под кривой АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера и определяется по формуле. Предложенный способ позволяет не только оценить общее значение ОМБ, определить количество АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера, но и сопоставить первичные и вторичные маркеры ОМБ и в результате этого выявить путь нарушения нативной конформации белков. 3 ил., 2 пр.
Основные результаты: Способ комплексной оценки содержания продуктов окислительной модификации белков в тканях и биологических жидкостях, включающий определение количества карбонильных продуктов, отличающийся тем, что оценку степени окислительной модификации белков (ОМБ) в биологическом материале осуществляют при расчете площади под кривой спектра ОМБ, которая равна сумме площадей альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) нейтрального и основного характера: где
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к медицине, в частности, к биологической химии, и предназначено для более полной оценки окислительной модификации белков (ОМБ) и анализа соотношения альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) основного и нейтрального характера в плазме и клетках крови, а также в тканях животных с целью определения степени выраженности и стадии окислительного стресса.

На сегодняшний день окислительная модификация белков признана одним из наиболее ранних показателей поражения различных тканей организма при свободнорадикальной патологии [1, 4]. Следует отметить, что окислительная деструкция белков рассматривается как один из ранних и стабильных признаков окислительного стресса (ОС). В ранних стадиях окислительного стресса преобладают альдегид-динитрофенилгидразоны (АДНФГ), в поздних стадиях - кетон-динитрофенилгидразоны (КДНФГ) [6].

Определение окисленных групп белков как маркеров ОС имеет ряд преимуществ. Так, карбонильные группы являются химически стабильными соединениями и циркулируют в крови более продолжительный промежуток времени, чем конечные продукты свободнорадикального окисления липидов, например малоновый диальдегид. Окисленные белки подвергаются разрушению в течение часов и дней, в то время как продукты окисления липидов нейтрализуются за считанные минуты [7, 8].

Одним из перспективных направлений в науке стало практическое исследование ОМБ в биологическом материале при патологических состояниях. Результатом окислительной деструкции белков является нарушение нативной структуры белков [4]. Под действием АФК могут происходить два процесса - фрагментация белков, маркерами которой являются АДНФГ, и агрегация белков, маркерами которой являются КДНФГ [5, 6].

Для определения продуктов ОМБ обычно используется метод R.L.Levine в модификации Е.Е.Дубининой, основанный на регистрации 2,4-динитрофенилгидразонов основного и нейтрального характера. Содержание окисленных белков определяют не только в плазме и клетках крови, но и в тканях.

Из данных литературы известно, что для алифатических альдегид-динитрофенилгидразонов нейтрального характера спектр поглощения зарегистрирован в диапазоне 230-558 нм, основного характера - в диапазоне 258-264 и 428-520 нм. Для алифатических кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера спектр поглощения 363-367 нм, основного характера - 430-434 и 524-535 нм [3].

Анализ ОМБ производится путем сравнения отдельных значений на соответствующих длинах волн. В результате такой оценки накапливается большой фактический материал, демонстрирующий изменение карбонильных производных. Однако полученный материал перегружен числовыми значениями, что затрудняет оценку и анализ полученного материала. Известно, что одним из способов комплексной оценки может быть подсчет площади под кривой, так например, Малаховой М.Я. оценивались результаты содержания в плазме и эритроцитах крови веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНиСММ) [2].

Из всего вышеперечисленного следует, что для корректной интерпретации полученных результатов ОМБ требуется разработка метода, позволяющего комплексно оценить и проанализировать значения ОМБ, учитывая стадию окислительного стресса и нарушения конформации белков.

Сущность изобретения заключается в том, что график спектра ОМБ делится на УФ-спектр (100-400 нм) и область видимого света (380-790 нм). В свою очередь, в УФ-спектре регистрируются АДНФГ и КДНФГ нейтрального характера. Следовательно, длины волн 230, 254, 270, 280, 356 нм характеризуют АДНФГ нейтрального характера, а λ=363 нм и λ=370 нм характеризуют КДНФГ также нейтрального характера. Немаловажно отметить, что в области видимого света регистрируются АДНФГ (428 и 430 нм) и КДНФГ (430, 434 нм и 524, 535 нм) основного характера («Характеристика регистрации динитрофенилгидразонов в световом спектре», рис.1).

Поставленная цель достигается тем, что график спектра ОМБ разделяется на сегменты, одни из которых характеризуют первичные маркеры ОС - АДНФГ, а другие характеризуют вторичные маркеры ОС - КДНФГ.

Результат, который может быть получен при осуществлении изобретения, состоит в более полном анализе фактического материала, используя комплексную оценку содержания окисленных продуктов белка.

Это достигается тем, что оценка осуществляется при подсчете площади под кривой спектра окислительной модификации белков.

Учитывая, что «шаг» между длинами волн является величиной непостоянной, то вычислить площадь плоской фигуры с помощью определенного интеграла не представляется возможным. В результате этого возникает необходимость разбить площадь под кривой на отдельные фигуры, которые представляют собой прямоугольные трапеции (рис 1), высота которых будет равна разнице между длинами волн (h=λ21), а основания равны значениям экстинкции на определенной длине волны, например Extλ1 и Extλ2, выраженные в единицах оптической плотности. Далее полученное значение можно выразить в е.о.п. на мл плазмы, ед.опт.пл. на грамм ткани, ед.опт.пл. на грамм белка для плазмы и тканей органов.

Таким образом, площадь под кривой спектра окислительной модификации белков, которая складывается из площадей под кривой АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера, определяется формулой:

где

Таким образом, предложенный метод позволяет не только оценить общее значение ОМБ, определить количество АДНФГ и КДНФГ основного и нейтрального характера, но и сопоставить первичные и вторичные маркеры ОМБ и в результате этого выявить путь нарушения нативной конформации белков.

Пример 1

Исследование проводилось на крысе линии Wistar массой 350 г. Животному в течение 10 дней перорально вводили L-аргинин в дозе 500 мг/кг. Содержание и выведение животных из эксперимента осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приказ Минздрава СССР №755 от 12.08.1977 г.). После выведения животного из эксперимента из навески ткани почки готовили гомогенат лизосомальной и внелизосомальной фракции. Окислительную модификацию белков определяли во внелизосомальной фракции по методу R.L.Levine в модификации Е.Е.Дубининой.

По полученным значениям экстинкции строится график («Спектр ОМБ под действием L-аргинина в почке крыс», рис.2), далее рассчитывается площадь под полученной кривой.

Sомб=0,6925+0,322+0,865+0,125=2,0045

Полученное значение площади под кривой делится на содержание белка (3,7044 г/л) и окончательное значение выражается в е.о.п./грамм белка.

Общая площадь под кривой ОМБ почки составила 2,0045/3,7044=0,541 е.о.п./грамм белка, из них площадь АДНФГнейтр.=0,187, АДНФГосн=0,087, КДНФГнейтр=0,234, КДНФГосн=0,034 е.о.п./грамм белка.

Содержание первичных маркеров окислительного стресса составило 50,3%, из них на долю АДНФГнеитр приходится 68%, а на долю АДНФГосн - 32%. Из общего количества ОМБ содержание вторичных маркеров составило 49,7%, из них на долю КДНФГнейтр приходится 86%, а на долю КДНФГосн - 14%.

Таким образом, под действием L-аргинина в дозе 500 мг/кг содержание вторичных и первичных маркеров окислительного стресса почти равны.

Пример 2.

Пациентке С.Т.И., 64 года, поставлен диагноз тромбофлебит вен нижних конечностей. Забор крови у пациентки производился утром из локтевой вены натощак в количестве 10 мл. В качестве антикоагулянта использовали ЭДТА. Кровь центрифугировали, плазму снимали и использовали для проведения определения ОМБ по методике Levine R. в модификации Дубининой Е.Е. По полученным значениям экстинкции строится график («Спектр ОМБ в плазме пациента с диагнозом тромбофлебит нижних конечностей», рис.3), далее рассчитывается площадь под полученной кривой.

Sомб=26,71+21,62+13,9925+3,975=66,2975

Полученное значение площади под кривой ОМБ рассчитано на 0,1 мл плазмы, соответственно на 1 мл плазмы составит 662,975 е.о.п./мл плазмы, из них

Содержание первичных маркеров окислительного стресса плазмы пациентки с диагнозом тромбофлебит нижних конечностей составило 73%, из них на долю АДНФГнейтр приходится 55%, а на долю АДНФГосн - 45%. Из общего количества ОМБ содержание вторичных маркеров составило 27%, из них на долю КДНФГнейтр приходится 78%, а на долю КДНФГосн - 22%.

Таким образом, в плазме пациентки с диагнозом тромбофлебит нижних конечностей значительно преобладают первичные маркеры окислительного стресса, что свидетельствует о фрагментации белковых молекул.

Источники информации

1. Зенков Н.К. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты / Н.К.Зенков, В.З.Ланкин, Е.Б.Меньшикова. - М.: МАИК, 2001. - 343 с.

2. Малахова М.Я. Эндогенная интоксикация. Методы биохимической регистрации эндогенной интоксикации / М.Я.Малахова // Эфферентная терапия. - Т. 1, №1. - 1995. - С.61-64

3. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека. Метод ее определения / Е.Е.Дубинина [и др.] // Вопросы мед. химии, т.41, №1. - 1995. - с.24-26.

4. Окислительная модификация белков: проблемы и перспективы исследования / Л.Е.Муравлева [и др.] // Фундаментальные исследования - 2010. - №1. - С.74-78.

5. Токсикологические последствия окислительной модификации белков при различных патологических состояниях / Ю.И.Губский [и др.] // Современные проблемы токсикологии, т.8, №3. - 2005. - с.20-27.

6. Толочко З.С. Окислительная модификация белков в крови крыс при повреждении капсаицин-чувствительных нервов и изменении уровня оксида азота / 3.С.Толочко, В.К.Спиридонов // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. - Т.96, №1. - 2010. - с.77-84.

7. Protein carbonyl groups as biomarkers of oxidative stress / I. Dalle - Donne [et al.] // Pubmed - 2003. - URL:

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12589963.

8. Stadtman E.R. Protein oxidation / E.R.Stadtman, R.L.Levine // Annals of N.Y.Academy of Sciences. - Vol.899. - 2000. - P.191-208.

Способ комплексной оценки содержания продуктов окислительной модификации белков в тканях и биологических жидкостях, включающий определение количества карбонильных продуктов, отличающийся тем, что оценку степени окислительной модификации белков (ОМБ) в биологическом материале осуществляют при расчете площади под кривой спектра ОМБ, которая равна сумме площадей альдегид-динитрофенилгидразонов (АДНФГ) и кетон-динитрофенилгидразонов (КДНФГ) нейтрального и основного характера: где
СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ В ТКАНЯХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ В ТКАНЯХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ В ТКАНЯХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ В ТКАНЯХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ В ТКАНЯХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ В ТКАНЯХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ В ТКАНЯХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ БЕЛКОВ В ТКАНЯХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 26.
20.09.2014
№216.012.f567

Инструмент для определения пусковых зон повышенного рвотного рефлекса в полости рта

Изобретение относится к медицине, а именно к ортопедической стоматологии, и предназначено для определения локализации пусковых участков повышенного рвотного рефлекса на поверхности слизистой оболочки полости рта (СОПР). Инструмент состоит из ручки, тела инструмента и рабочей части. Ручка...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002528656
Дата охранного документа: 20.09.2014
10.01.2015
№216.013.1d0a

Меченные тритием наноалмазы и способ их получения

Изобретение может использоваться для получения биологических радиоактивных меток. Способ получения меченных тритием наноалмазов методом термической активации трития включает приготовление водной суспензии наноалмазов со средним размером частиц не более 125 нм и содержанием дисперсной фазы от...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002538862
Дата охранного документа: 10.01.2015
10.02.2015
№216.013.22d0

Способ определения локализации непальпируемых рентгеносонографически негативных внутрипротоковых опухолей молочных желез

Изобретение относится к медицине, онкологии, лучевой диагностике непальпируемых внутрипротоковых доброкачественных опухолей и внутрипротокового рака молочной железы, проявляющихся выделениями из соска и не отображающихся при маммографии и ультразвуковом исследовании. Проводят стереотаксическую...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002540365
Дата охранного документа: 10.02.2015
10.05.2015
№216.013.496c

Способ чрескожной чреспеченочной холангиостомии

Заявленное изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и предназначено для чрескожного чреспеченочного дренирования желчных протоков с последующей санацией желчных путей растворами антисептиков. Цель изобретения - повышение эффективности чрескожной чреспеченочной холангиостомии и,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002550303
Дата охранного документа: 10.05.2015
10.06.2015
№216.013.5551

Способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-р линестренолом в эксперименте

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-Р линестренолом в организме. Для этого при проведении эксперимента in vivo вводят препарат-ингибитор линестренол кроликам...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002553362
Дата охранного документа: 10.06.2015
20.06.2015
№216.013.564e

Способ прогнозирования гестозов у беременных

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии. Способ позволяет прогнозировать вероятность развития гестоза беременных. Задачей представленного изобретения является комплексная оценка белковых факторов риска с учетом клинической картины и значимости каждого фактора в числовом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002553624
Дата охранного документа: 20.06.2015
10.08.2015
№216.013.6929

Антидемпинговый вариант выполнения гастрошунтирования для лечения морбидного ожирения

Изобретение относится к медицине. Формируют малый «желудочек» объемом 30 мл. В 325 см от илеоцекального угла пересекают тощую кишку. Замыкают ее еюноилеоанастомозом на расстоянии 75 см от илеоцекального угла. Проксимальный отрезок тощей кишки анастомозируют с малым «желудочком». Анастомозом бок...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002558474
Дата охранного документа: 10.08.2015
20.01.2016
№216.013.a07b

Способ прогнозирования скорости рубцевания язв у больных неосложненной язвенной болезнью желудка

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования скорости рубцевания язв у больных неосложненной язвенной болезнью желудка, включающий определение отношения произведения процента жировой массы тела, скорости оседания эритроцитов и процентного содержания моноцитов к...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002572725
Дата охранного документа: 20.01.2016
10.02.2016
№216.014.c316

Способ хирургического лечения эректильной дисфункции, обусловленной патологическим венозным дренажом по глубокой дорсальной вене полового члена

Изобретение относится к медицине, а именно к оперативной урологии и андрологии. Выделяют глубокую дорсальную вену на небольшом участке. Лигируют и катетеризируют вену дистально по направлению к головке полового члена. Вводят склерозант, затем перевязывают и пересекают вену между лигатурами....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002574577
Дата охранного документа: 10.02.2016
10.05.2016
№216.015.3a5b

Использование тиосалицилоилгидразонов ароилуксусных альдегидов в качестве веществ, обладающих антистафилококковой активностью

Изобретение относится к области использования тиосалицилоилгидразонов ароилуксусных альдегидов в качестве антистафилококковых агентов. Предложено применение производных 1,3,4-бензотиадиазепин-5(2Н)-она формулы (I) против штаммов рода Staphylococcus. Технический результат состоит в подавлении...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002583142
Дата охранного документа: 10.05.2016
Показаны записи 1-10 из 33.
20.03.2014
№216.012.ab24

Способ тренировки подсчета частоты пульса при тахикардии

Изобретение относится к медицине, а именно к физиологии, спортивной медицине, терапии. Испытуемый считает количество звуковых сигналов, издаваемых прибором, который располагают таким образом, чтобы испытуемый не видел цифр, которые высвечиваются на его экране и соответствуют количеству звуковых...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002509527
Дата охранного документа: 20.03.2014
20.09.2014
№216.012.f567

Инструмент для определения пусковых зон повышенного рвотного рефлекса в полости рта

Изобретение относится к медицине, а именно к ортопедической стоматологии, и предназначено для определения локализации пусковых участков повышенного рвотного рефлекса на поверхности слизистой оболочки полости рта (СОПР). Инструмент состоит из ручки, тела инструмента и рабочей части. Ручка...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002528656
Дата охранного документа: 20.09.2014
10.01.2015
№216.013.1d0a

Меченные тритием наноалмазы и способ их получения

Изобретение может использоваться для получения биологических радиоактивных меток. Способ получения меченных тритием наноалмазов методом термической активации трития включает приготовление водной суспензии наноалмазов со средним размером частиц не более 125 нм и содержанием дисперсной фазы от...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002538862
Дата охранного документа: 10.01.2015
10.02.2015
№216.013.22d0

Способ определения локализации непальпируемых рентгеносонографически негативных внутрипротоковых опухолей молочных желез

Изобретение относится к медицине, онкологии, лучевой диагностике непальпируемых внутрипротоковых доброкачественных опухолей и внутрипротокового рака молочной железы, проявляющихся выделениями из соска и не отображающихся при маммографии и ультразвуковом исследовании. Проводят стереотаксическую...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002540365
Дата охранного документа: 10.02.2015
10.05.2015
№216.013.496c

Способ чрескожной чреспеченочной холангиостомии

Заявленное изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и предназначено для чрескожного чреспеченочного дренирования желчных протоков с последующей санацией желчных путей растворами антисептиков. Цель изобретения - повышение эффективности чрескожной чреспеченочной холангиостомии и,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002550303
Дата охранного документа: 10.05.2015
10.06.2015
№216.013.5551

Способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-р линестренолом в эксперименте

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-Р линестренолом в организме. Для этого при проведении эксперимента in vivo вводят препарат-ингибитор линестренол кроликам...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002553362
Дата охранного документа: 10.06.2015
20.06.2015
№216.013.564e

Способ прогнозирования гестозов у беременных

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии. Способ позволяет прогнозировать вероятность развития гестоза беременных. Задачей представленного изобретения является комплексная оценка белковых факторов риска с учетом клинической картины и значимости каждого фактора в числовом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002553624
Дата охранного документа: 20.06.2015
10.08.2015
№216.013.6929

Антидемпинговый вариант выполнения гастрошунтирования для лечения морбидного ожирения

Изобретение относится к медицине. Формируют малый «желудочек» объемом 30 мл. В 325 см от илеоцекального угла пересекают тощую кишку. Замыкают ее еюноилеоанастомозом на расстоянии 75 см от илеоцекального угла. Проксимальный отрезок тощей кишки анастомозируют с малым «желудочком». Анастомозом бок...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002558474
Дата охранного документа: 10.08.2015
20.09.2015
№216.013.7c1a

Способ пластики альвеолярного отростка верхней челюсти при его атрофии

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургической стоматологии, и предназначено для использования в дентальной имплантологии для увеличения размеров атрофированного альвеолярного отростка верхней челюсти. Выполняют разрез по гребню альвеолярного отростка и два вертикальных разреза,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002563367
Дата охранного документа: 20.09.2015
20.01.2016
№216.013.a07b

Способ прогнозирования скорости рубцевания язв у больных неосложненной язвенной болезнью желудка

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования скорости рубцевания язв у больных неосложненной язвенной болезнью желудка, включающий определение отношения произведения процента жировой массы тела, скорости оседания эритроцитов и процентного содержания моноцитов к...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002572725
Дата охранного документа: 20.01.2016

Похожие РИД в системе

+ добавить свой РИД