СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАБИЛИЗИРОВАННОЙ ФОРМЫ АНТИСЕПТИКА-СТИМУЛЯТОРА ДОРОГОВА - ФРАКЦИИ 2 (АСД-2)

Способ получения стабилизированной формы антисептика-стимулятора Дорогова - фракции 2 (АСД-2).

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промашленности, а именно к способу получения стабилизированной формы антисептика-стимулятора Дорогова - фракции 2 (далее - АСД-2).

АСД-2 - тканевый лекарственный препарат, являющийся оригинальной отечественной разработкой. Препарат представляет собой уникальный природный комплекс веществ, воздействующих практически на все системы живого организма. Препарат получают сухой возгонкой мясокостной муки в виде интенсивно окрашенной жидкости, содержащей до 75% воды.

АСД-2 не имеет ни видовой, ни органной специфичности, т.к. возгонка обеспечивает постепенное расщепление органических веществ до низкомолекулярных компонентов, которые по своей структуре подобны метаболитам клеточного обмена.

АСД-2 оказывает многостороннее влияние на организм. Он интенсифицирует обмен веществ, ускоряет окислительные процессы, повышает резервную щелочность в крови, чем способствует нормализации обмена в тканях, улучшает процессы пищеварения, всасывания питательных веществ. Препарат вызывает улучшение функционального состояния механизмов естественной резистентности, усиливает процессы регенерации тканей, стимулирует иммуногенез, вследствие чего повышается сопротивляемость к неблагоприятным воздействиям, в том числе и к возбудителям инфекционных заболеваний (SU 1729505 А1, 30.04.1992, RU 2005135207 А, 10.05.2007, RU 2159116 С, 20.11.2000).

АСД-2 оказывает стимулирующее действие на биохимические процессы, сопряженные с биологической функцией активных сульфгидрильных групп, и способен интенсифицировать обмен углеводов, липидов, белков (Кирюткин Г. и др., Возрождение препарата АСД. Животноводство России, 2004, №10, с.46 или Кирюткин Г.В. и др., Возрождение препарата АСД - адрес в Интернете - http://www.areal-medical.ru/?action=stati).

В 1951 году Фармакологическим комитетом Ученого Совета Министерства Здравоохранения СССР АСД-2 был разрешен для медицинского применения в качестве средства для наружного использования при лечении ряда кожных заболеваний человека (экзема, нейродермит, сикоз и др.), а также как противовоспалительный препарат (Торопова Н.П., Синявская О.А. Экзема и нейродермит у детей. Экспериментальная терапия, М., 1993, с.336-339).

В настоящее время известно экспериментальное использование АСД-2 в качестве средства активационной терапии (иммуномодулятора), противоопухолевого, антиаллергического средства, при лечении заболеваний сердца, печени, нервной системы, а также в качестве антибактериального препарата широкого спектра действия (SU 1729505 А1, 30.04.1992, RU 2099068 С1, 20.12.1997, RU 2159116 С1, 20.11.2000, RU 2308956 С2, 27.10. 2007. Антисептик - стимулятор Дорогова - адрес в Интернете - http://otherreferats.allbest.ru/medicine/00050099).

Препарат широко и успешно применяется в ветеринарии уже более 50 лет.

Впервые АСД-2 был получен А.В.Дороговым (ВИЭВ) в 1948 году, и известен как антисептик - стимулятор Дорогова.

Суть способа получения препарата АСД заключается в термическом разложении мясокостной муки при температуре от 300 до 500°С. При этом летучие фракции улавливают и охлаждают. После чего образовавшиеся два слоя жидкости разделяют. Верхний слой (масляный) является фракцией АСД-3, нижний слой (водный) - фракцией АСД-2. Фракцию АСД-2 затем очищают от нежелательных примесей путем фильтрации через асбестовый фильтр (см. SU 130857 А, 28.08.1962).

Однако полученный известным способом АСД-2 содержит большое количество воды - до 80%, и поэтому при применении необходимо использовать повышенные дозы препарата

Известны способы получения различных модификаций антисептика-стимулятора Дорогова - АСДК -1-7, заключающиеся в том, что:

- фракцию АСД-2 обрабатывают неорганической или органической кислотой (RU 98109868 А, 10.03.2000);

- фракцию АСД-2 ионизируют в катодной зоне ионизатора или отрицательными зарядами через промежуточный носитель заряда (RU 98109721 А, 10.03.2000);

- в качестве исходного сырья берут одноименные органы животных или смесь одноименных органов животных с мясокостной мукой (RU 98110208 А, 10.03.2000);

- в качестве исходного сырья берут или личинок, и/или куколок мух, или не менее чем один из компонентов вышеуказанного сырья в смеси с мясокостной мукой (RU 98109867 А, 10.03.2000);

- в качестве исходного сырья берут или хищных животных, или одноименные органы хищных животных (RU 98110207 А, 10.03.2000);

- в качестве исходного сырья используют или акул, или измельченных акул, или измельченные одноименные органы акул с мясокостной мукой (RU 98110206 А, 10.03.2000);

- в качестве исходного используют мясокостную муку с содержанием протеина не менее шестидесяти процентов, к которой добавляют или одноименные органы животных, или измельченные одноименные органы животных (RU 98110205 А, 10.03.2000).

Однако указанные выше источники информации не содержат сведений о качестве получаемого продукта, его составе и свойствах.

Известен способ получения АСД-2 из мясокостной муки, содержащей не менее 55% протеина. Разложение мясокостной муки проводят при температуре от 150 до 450°С с шаговым диапазоном 100°С и выдержкой не менее 3 часов при температурах 250, 350 и 450°С (Абрамов В.Е. и др., Определение показателей качества препарата АСД-2, Ветеринария, 2004, №9, с.13-16 или Препарат АСД. История и современное состояние, 12.12.2008 - адрес в Интернете: http://www.novorossia.org/obshestvo/383-preparat-asd.-istoriia-i-sovremenrioe-sostoj...).

АСД-2, полученный известным способом, содержит большое количество воды - до 75%, и поэтому при его применении также необходимо использовать повышенные дозы препарата.

Кроме того, в процессе хранения в ряде случаев в АСД-2 появляется осадок, который затрудняет использование препарата в качестве полноценного раствора в ветеринарной и медицинской практике.

Задачей изобретения является значительное уменьшение количества воды в препарате без изменения состава продукта, а также создание условий, способных предотвратить образование осадка в АСД-2. Уменьшение количества воды в АСД-2 позволит значительно снизить лечебные дозы препарата.

Поставленная задача решается тем, что, согласно изобретению, АСД-2 смешивают со спиртом, а затем полученную азеотропную смесь упаривают под вакуумом.

Поставленная задача решается также тем, что АСД-2 смешивают со спиртом в соотношении 1:2-1:2,25.

При этом в качестве спирта используют изопропиловый или этиловый, или бутиловый спирты.

Полученную азеотропную смесь упаривают при температуре 40°С и остаточном давлении 10-20 мм рт. ст. в течение 20-40 минут.

Техническим результатом заявленного изобретения является то, что полученный заявленным способом антисептик-стимулятор Дорогова фракция-2 (АСД - 2) содержит 65-66% воды. При этом небольшое количество спирта (0,18-0,25%), которое остается в препарате после проведения азеотропной отгонки воды, позволяет не создавать центров кристаллизации для веществ, плохо растворимых в воде, и тем самым предотвратить их выпадение в осадок. Полученный АСД-2, несмотря на увеличение концентрации действующих веществ, не образует осадков при хранении в течение всего срока годности, что позволяет уменьшить лечебные дозы препарата, и тем самым повысить экономическую целесообразность производства.

Способ иллюстрируется следующими примерами выполнения, которые не ограничивают объем притязаний заявителя.

Пример 1.

В колбу объемом 50 мл, снабженную магнитом, загружают 20 мл АСД-2 с содержанием воды 75%. АСД-2 получен из мясокостной муки, содержащей не менее 55% протеина. Добавляют 40 мл изопропилового спирта, тщательно перемешивают на магнитной мешалке, переносят колбу на роторный испаритель и упаривают при температуре 40°С и остаточном давлении 20 мм рт. ст. в течение 20 минут.

Получают 18 мл АСД-2 - в виде прозрачной жидкости желто-коричневого цвета со специфическим запахом, массовой долей воды 65% и содержанием остаточного органического растворителя - изопропилового спирта 0,2%

Пример 2.

Следуя методике, описанной в примере 1, добавляют 45 мл этилового спирта и получают 18,5 мл целевого продукта - прозрачной жидкости темно-красного цвета со специфическим запахом и с содержанием воды 66% и этилового спирта - 0,18%.

Пример 3.

В колбу объемом 50 мл, снабженную магнитом, загружают 20 мл АСД-2 с содержанием воды 75% и 40 мл бутилового спирта, тщательно перемешивают на магнитной мешалке, переносят колбу на роторный испаритель и упаривают при температуре 40°С и остаточном давлении 10-12 мм рт. ст. в течение 40 минут.

Получают 18 мл прозрачной жидкости красного цвета со специфическим запахом и содержанием воды 65%, а бутилового спирта - 0,25%

В течение всего срока хранения стабилизированной формы препарата (2 года), полученного по предлагаемому способу, не было отмечено образования осадка (см. табл.1).

Для подтверждения неизменности состава вещества до и после азеотропной перегонки необходимо было изучить состав АСД-2.

Уникальность ситуации, связанной с АСД, состоит в том, что его состав не был до конца изучен и определялся косвенным путем (в основном по биологическому действию препарата). До настоящего времени состав АСД-2 достоверно не определен и не описан в литературе. Основные результаты изучения химического строения АСД-2 были получены более 40 лет назад, что обусловило необходимость исследования состава препарата, исходя из возможностей современной химии. Считается, что в его состав входят азотистые вещества неорганического и органического происхождения, такие, как первичные и вторичные амины, карбоновые кислоты жирного ряда, их амиды и аммониевые соли. Недавно опубликованы сведения об аминокислотном составе АСД-2. Изучение препарата проводилось методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с постколоночной дериватизацией нингидрином и спектрофотометрическим детектированием (Абрамов В.Е. и др., Показатели качества субстанции АСД 2-Ф, Ветеринария, 2010, №2, с.42-44.).

Для определения основных групп веществ, входящих в состав АСД-2, мы воспользовались методом ЯМР спектроскопии.

ПМР спектр АСД-2 представлен на фиг.1.

При этом было показано, что в состав препарата входят несколько основных групп соединений, а именно:

Затем нами впервые была проведена идентификация компонентов, входящих в состав каждой из основных групп соединений, образующих препарат АСД-2, комбинированным методом - газовой хроматографии и масс-спектрометрии на хроматомасс-спектрометре, позволяющем не только разделить весьма сложную смесь, но и достоверно определить качественные и количественные показатели состава анализируемого продукта.

На фиг.2 представлена хроматограмма органических соединений в исходном образце, полученная с помощью хроматомасс-спектрометра.

В таблице 2 указаны состав и количество органических соединений в исходном образце, хроматограмма которых представлена на фиг.2.

На фиг.3 представлена хроматограмма органических соединений в образце стабилизированной формы АСД-2 (т.е. после обработки спиртом), полученная с помощью хроматомасс-спектрометра.

В таблице 3 указаны состав и количество органических соединений в образце стабилизированной формы АСД-2, хроматограмма которых представлена на фиг.3.

Совокупность полученных данных позволяет сделать вывод о неизменности состава препарата до и после проведенной обработки спиртами: изопропиловым или этиловым, или бутиловым.

Полученные после обработки спиртом образцы АСД-2 (стабилизированная форма) содержат остаточные органические растворители - спирты - в допустимых для фармацевтической субстанции количествах - 0,18-0,25%.

Таким образом, поставленная задача решена: получена стабилизированная форма АСД-2, содержащая не более 66% воды, в которой в течение всего срока хранения не наблюдалось образования осадка.