×
27.04.2013
216.012.3940

ПРИМЕНЕНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ ИЗОТИОЦИАНАТА В КАЧЕСТВЕ ПРОТИВОМИЕЛОМНЫХ СРЕДСТВ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
№ охранного документа
0002480217
Дата охранного документа
27.04.2013
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Предложено применение глюкоморингина и его дезтиогликозида формул (I, II), соответственно, для получения лекарственного средства для лечения миеломы. Показана высокая цитотоксическая активность GMG, GMG-ITC против опухоли миеломы по сравнению с клеточными линиями другого типа опухолей, также активность подтверждена на экспериментальных моделях in vivo. 3 з.п. ф-лы, 4 табл.
Реферат Свернуть Развернуть

Настоящее изобретение относится к применению глюкоморингина или соответствующего производного изотиоцианата в качестве противомиеломных средств.

Предыдущий уровень техники

Овощи являются наиболее важным источником соединений с хемозащитными свойствами, среди них изотиоцианаты (ITC), вырабатываемые в крестоцветных (например, в брокколи, брюссельской капусте, цветной капусте и прочее), в последнее время вызывают большой интерес в связи с первым исследованием Sidransky о ITC- индуцируемом ингибировании роста опухоли [1].

В овощах изотиоцианаты сохраняются в форме неактивных предшественников, называемых глюкозинолатами (GL), и могут быть выделены после разрушения тканей под действием ферментативного гидролиза с участием мирозиназы (MYR, E.C. 1.2.1.147), тиогликозид глюкогидролазы, которая в нормальных условиях физически отделена от GL [2, 3].

Поскольку микрофлора кишечника млекопитающих, включая человека, обладает активностью, схожей с мирозиназной, GL также могут быть превращены в изотиоцианаты в пищеварительном тракте [4, 5].

Изотиоцианаты, как сообщалось, являются ингибиторами роста опухолей в различных предклинических испытаниях, проведенных in vivo [6-8], и, более того, эпидемиологические исследования показали обратную зависимость между употреблением в пищу крестоцветных и риском развития рака легких, груди и кишечника [9-11].

Изотиоцианаты обладают множеством эффектов, посредством которых они проявляют свое защитное действие против прогрессирования рака: они могут i) индуцировать ферменты фазы 2, такие как глутатион-S-трансферазу (GST) и хинон-редуктазу (QR) [12-15] через Nrf-2 путь, ii) вызывать приостановку клеточного цикла и апоптоз [16-18], iii) ингибировать ферменты фазы 1 и NF-kB связанные гены [19, 20].

В последние годы интенсивно изучается сульфорафан из-за его роли, как хемозащитного средства, и различные исследования продемонстрировали его потенциальное применение в качестве нового химиотерапевтического соединения [7, 11, 20].

Глюкоморингин (GMG) является необычным представителем семейства гликозинолатов (GL) и обладает уникальным свойством, заключающимся в наличии второго сахаридного остатка в боковой цепи. Этот GL является обычным вторичным метаболитом, присутствующим в овощах, принадлежащих роду Моринга (моринговые, Moringaceae), который состоит из 14 видов, среди которых наиболее широко распространена моринга масличная (М. oleifera), которая является деревом многостороннего использования, которое произрастает во многих тропических и экваториальных областях. Лечебная ценность семян и других частей растения давно признана в народной медицине [21]. Гликозилированные изотиоцианаты (GMG-ITC), представляющие собой результат гидролиза GMG мирозиназой, как было показано, обладают широкой биологической активностью, и также, как было показано, проявляют промотирующую противоопухолевую активность [22]. GMG-ITC можно очистить в большом количестве, начиная с чистого GMG. GMG-ITC является твердым соединением без запаха и стабилен при комнатной температуре, в отличие от других природных биологически активных ITC, которые являются жидкими, летучими, с острым запахом.

Множественная миелома является злокачественным заболеванием клеток плазмы, которая характеризуется разрушением скелета, почечной недостаточностью, анемией и гиперкальцемией [23]. Средний возраст при диагнозе составляет 68 лет. Миелома насчитывает 1% от всех злокачественных заболеваний у белого населения и 2% у чернокожего населения и 13% и 33%, соответственно, от числа раковых заболеваний в гематологии [24].

Лечение миеломы включает поддерживающую терапию и инфузионную химиотерапию, за которой для более молодых пациентов следует химиотерапия высокими дозами и аутогенная трансплантация [25]. Развитие понимания биологии миелом ведет к разработке новых терапевтических подходов [26]. Несмотря на то что с этими новыми способами лечения был достигнут основной прогресс в лечении миеломы, в настоящее время не существует претендента на замещение основного метода лечения. Таким образом, в настоящее время существует потребность в новых, более активных и/или альтернативных средствах.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Было обнаружено, что глюкоморингин (GMG), его дезтиогликозид (GMG-ITC), имеющие следующие формулы:

наделены значительной цитотоксической активностью против миеломных клеточных линий. Активность также была подтверждена in vivo на экспериментальных моделях.

Изобретение, соответственно, касается применения либо GMG, либо GMG-ITC для изготовления лекарственного препарата для лечения миелом, в особенности для лечения множественной миеломы. Для рассматриваемого терапевтического применения GMG или GMG-ITC будет подходящим образом включен в состав рецептур лекарственных форм, в частности для энтерального или парентерального применения в соответствии с известными способами.

Примеры подходящих композиций включают таблетки, капсулы, стерильные растворы или суспензии для внутримышечной или внутривенной инъекции и т.п. Фактические дозы и терапевтические протоколы будут, как обычно, зависеть от нескольких факторов, а именно: фармакокинетических и токсикологических свойств, состояния пациента (вес, пол и возраст), стадии заболевания. Практикующие специалисты в данной области легко определят наиболее эффективную схему приема лекарственного средства в соответствии с устоявшимися методами. Полагают, что эффективные терапевтические дозы для человека будут меняться в интервале между 1 мг/кг/в день и 30 мг/кг/в день, хотя, с точки зрения ограничений по токсичности, нельзя исключать и более высокие дозы как GMG, так и GMG-ITC.

GMG и GMG-ITC можно применять в качестве монотерапии или в комбинации с другими известными химиотерапевтическими средствами, уже доступными для лечения миеломы.

Теперь изобретение будет описано более подробно в следующих примерах.

Пример 1: Выделение и очистка соединений

GMG и GRA выделяли, соответственно, из семян моринги масличной (Moringa oleifera L.) (семейство моринговые) и капусты белокочанной (Brassica oleracea L.) (семейство крестоцветные; вид acephala; подвид laciniata). Оба GL очищали в двух последовательных стадиях, анионообменной хроматографией и эксклюзионной хроматографией размеров, в соответствии с описанными ранее методами [27, 28]. Отдельные GL характеризовали 1H и 13C-ЯМР спектроскопией и чистоту анализировали ВЭЖХ анализом десульфопроизводного согласно методу ISO 9167-1 [29], с выходом примерно 99% на основании величины площади пика, но примерно 90-92% по массе из-за их высокой гигроскопичности. Фермент MYR выделяли из семян горчицы белой (Sinapis alba L.) в соответствии с описанным методом [30] с некоторыми модификациями. Используемый для данного исследования запасный раствор обладал специфической активностью 60 ед./мг растворимого белка и хранился при 4°C после разбавления Н2О до 34 ед./мл. Одну единицу активности MYR определяли как количество фермента, способное гидролизовать 1 мкмоль/мин синигрина при pH 6,5 и 37°C. Раствор MYR хранили при 4°C в стерильной воде до использования. GMG-ITC получали посредством катализируемого мирозиназой гидролиза GMG, проводимого в 0,1 M фосфатном буфере pH 6,5 при 37°C. Реакционную смесь готовили растворением 7,0 граммов чистого GMG в 350 мкл буфера, и, после того как добавляли 40 ед. мирозиназы, раствор выдерживали при 37°C в течение 4-6 часов. Полную конверсию чистого GMG в GMG-ITC подтверждали ВЭЖХ анализом десульфопроизводного [29], что позволяло следить за реакцией до полного исчезновения GMG из реакционной смеси. К смеси затем добавляли ацетонитрил до конечной концентрации 10% и очищали GMG-ITC хроматографией с обращенной фазой, которую проводили, используя HR 16/10 колонку, заполненную LiChrospher RP-C18 (MERCK) или SOURCE 15 RPC (Amersham Biosciences), подсоединенную к жидкостному хроматографу высокого разрешения AKTA-FPLC, с подсоединенным к нему коллектором фракций Frac-900 и УФ-монитором UPC-900 (Amersham Bioscences). После промывки 10% ацетонитрилом проводили элюирование в градиенте до 60% ацетонитрила. Фракции собирали и анализировали, используя ВЭЖХ систему Hewlett-Packard Model 1100 с lnertsil ODS3 колонкой (250×3 мм, 5 мм). Хроматографию проводили при скорости протока 1 мл/мин при 30°C путем элюирования в линейном градиенте воды (A) и ацетонитрила (B) от 30% B до 80% за 20 мин. Элюирование GMG-ITC детектировали диодной матрицей, регистрируя поглощение при 229 нм. Фракции, содержащие GMG-ITC (чистота пика >99%), собирали, растворитель удаляли концентрированием на роторном испарителе и конечный раствор лиофильно высушивали. GMG-ITC характеризовали и однозначно идентифицировали методами 1H- и 13C-ЯМР и масспектрометрией.

Пример 2: Биологические результаты

Данные in vitro:

В таблице 1 представлена чувствительность клеточной линии H460 опухоли легкого человека к глюкоморингину. Возрастание концентрации GMG в присутствии мирозиназы приводит к цитотоксическому эффекту.

Таблица 1
% клеточного роста по отношению к контролю
0 24 ч обработки 24 ч восстановления 48 ч восстановления
Контроли 100 100 100 100
GMS (100 мкл) 100 98 100 100
GMS (7,5 мкл)+ MYR (0,19 ед.) 100 75 72 80
GMS (10 мкл) + MYR (0,19 ед.) 100 63 51 69
GMS (15 мкл) + MYR (0,19 ед.) 100 33 20 24
GMS (20 мкл) + MYR (0,19 ед.) 100 28 17 8

Цитотоксическая активность выделенного из моринги изотиоцианата (GMG-ITC) на панель клеточных линий опухолей человека. В той же таблице 2 приведены величины, полученные с ITC сульфораном (GRA) в качестве референсного стандарта.

Таблица 2
Клеточные линии Количество клеток (24 ч)
IC50 (мкМ)
GMG-ITC GRA
H460 wt 29±0,8 29±0,5
H460 S5 18±6,7 19±1
MCF7 п 21±5,7 27±4
MCF7 NEO 20±4,4 26±4
HL60 15±1 16±1
HCT116 p53 +/+ 12±0,3 17±2,3
HCT116 p53 -/- 13±0,25 18±5,3
A2780 15±3 18±1
PRMI-8226 6±1 8±0,2

Данные, представленные в таблице, ясно показывают, что ITC является более цитотоксичным к миеломным клеточным линиям, по сравнению с другими клеточными линиями другого типа опухолей.

Исследования in vivo

В таблице 3 представлена противоопухолевая активность GMG-ITC, вводимого in vivo мышам с синдромом тяжелого комбинированного иммунодефицита (SCID mice) с трансплантированными подкожно клеточными линиями миеломы человека.

Таблица 3
Соединение Курс лечения Доза (мг/кг/инъекц.) TWI %
GMG p.o. q5d×2 400 62
GMG-ITC i.p. q5d×2w 20 70

Когда GMG-ITC тестировали на клеточной линии A2780 рака яичника человека, противоопухолевая активность была низкой, как показано в таблице 4 ниже.

Таблица 4
Соединение Курс лечения Доза (мг/кг/инъекц.) TWI %
GMG-ITC i.p. q5d×2w 20 46

Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 62.
10.04.2013
№216.012.3227

Комбинации вазоактивных веществ с эстрогенами и их применение для лечения сексуальных дисфункций у женщин

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции для лечения сексуальных дисфункций у женщин. Композиция для лечения сексуальных дисфункций у женщин, содержащая вазокинетические природные кумарины или содержащие их экстракты; антифосфодиэстеразные агенты,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002478382
Дата охранного документа: 10.04.2013
27.04.2013
№216.012.394c

Комбинации вазоактивных веществ и их применение в лечении сексуальных дисфункций

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству для местного лечения сексуальных дисфункций. Композиция для местного применения для лечения сексуальных дисфункций, содержащая виснадин, очищенный экстракт Coleus forskolii, этиловый эфир ксимениновой кислоты,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002480229
Дата охранного документа: 27.04.2013
20.05.2013
№216.012.3f9a

Комбинации вазоактивных агентов, их применение в фармацевтической и косметической отраслях и содержащие их композиции

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции и комбинации для лечения панникулопатии и проблем, связанных с венозной недостаточностью нижних конечностей. Композиция для лечения панникулопатии и проблем, связанных с венозной недостаточностью нижних...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481852
Дата охранного документа: 20.05.2013
10.07.2013
№216.012.532f

Составы с сангвинарином, хелеритрином или хелидонином для лечения бородавок, папиллом и псориатических бляшек

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к составу для лечения обычных кожных бородавок и папиллом, анальных и вульварных бородавок и псориатических бляшек. Состав для лечения обычных кожных бородавок и папиллом, анальных и вульварных бородавок и псориатических...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002486898
Дата охранного документа: 10.07.2013
27.07.2013
№216.012.59b5

Твердые формы ортатаксела

Настоящее изобретение относится к твердым формам 1,14-карбонат 13-(N-Boc-β-изобутилсеринил)-14-в-гидроксибаккатина III (Ортатаксела)фомулы Представлены аморфная Форма A, кристаллическая Форма B, их смеси и способы их получения. Аморфную Форму A получают путем быстрого осаждения Ортатаксела из...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002488586
Дата охранного документа: 27.07.2013
27.07.2013
№216.012.59b8

Способ гликозидирования колхицина и тиоколхицина

В настоящем изобретении раскрыт способ получения соединений, имеющих формулу I, в которой R является метокси или метилтиогруппой; R является О-гликозилокси остатком. Соединения формулы I получают посредством взаимодействия перацетилированной гликозы с соединением, имеющим формулу II, с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002488589
Дата охранного документа: 27.07.2013
20.08.2013
№216.012.5ed3

Комбинации вазопротекторных агентов и препаративные формы, содержащие такие комбинации

Изобретение относится к фармацевтической композиции и к применению комбинации, содержащей один или несколько поликозанолов, токотриенол и/или ликопен, один или несколько олигомеров процианидола и растительное масло, обогащенное ω-3, ω-6 ненасыщенными жирными кислотами для приготовления таких...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002489907
Дата охранного документа: 20.08.2013
20.09.2013
№216.012.6a4b

Противоопухолевые средства с бензофенантридиновой структурой и содержащие их препараты

Предложены: применение солей бензофенантридиновых алкалоидов для получения лекарственных средств для лечения опухолей, где алкалоид находится в форме соли лютеовой, гиалуроновой или фосфатидной кислоты, соль бензофенантридиновых алкалоидов с фосфатидной кислотой или гиалуроновой кислотой и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002492862
Дата охранного документа: 20.09.2013
20.01.2014
№216.012.9717

Композиции для лечения и предупреждения инфекций полости рта

Изобретение относится к композиции для гигиены полости рта и для лечения и предупреждения патологических состояний, связанных с зубочелюстной системой, имплантатами или осложнениями после хирургических операций полости рта. Указанная композиция содержит бензофенантридиновые алкалоиды,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002504378
Дата охранного документа: 20.01.2014
20.01.2014
№216.012.9718

Композиции для лечения вагинальных инфекций с хроническим воспалением

Изобретение относится к композиции для местного применения для лечения вагинита различного происхождения и связанных с этим воспалительных осложнений. Указанная композиция содержит бензофенантридиновые алкалоиды, соединения бензофурана и необязательно экстракт Zanthoxylum bungeanum или...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002504379
Дата охранного документа: 20.01.2014
Показаны записи 1-10 из 39.
10.04.2013
№216.012.3227

Комбинации вазоактивных веществ с эстрогенами и их применение для лечения сексуальных дисфункций у женщин

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции для лечения сексуальных дисфункций у женщин. Композиция для лечения сексуальных дисфункций у женщин, содержащая вазокинетические природные кумарины или содержащие их экстракты; антифосфодиэстеразные агенты,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002478382
Дата охранного документа: 10.04.2013
27.04.2013
№216.012.394c

Комбинации вазоактивных веществ и их применение в лечении сексуальных дисфункций

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству для местного лечения сексуальных дисфункций. Композиция для местного применения для лечения сексуальных дисфункций, содержащая виснадин, очищенный экстракт Coleus forskolii, этиловый эфир ксимениновой кислоты,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002480229
Дата охранного документа: 27.04.2013
20.05.2013
№216.012.3f9a

Комбинации вазоактивных агентов, их применение в фармацевтической и косметической отраслях и содержащие их композиции

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции и комбинации для лечения панникулопатии и проблем, связанных с венозной недостаточностью нижних конечностей. Композиция для лечения панникулопатии и проблем, связанных с венозной недостаточностью нижних...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002481852
Дата охранного документа: 20.05.2013
10.07.2013
№216.012.532f

Составы с сангвинарином, хелеритрином или хелидонином для лечения бородавок, папиллом и псориатических бляшек

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к составу для лечения обычных кожных бородавок и папиллом, анальных и вульварных бородавок и псориатических бляшек. Состав для лечения обычных кожных бородавок и папиллом, анальных и вульварных бородавок и псориатических...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002486898
Дата охранного документа: 10.07.2013
27.07.2013
№216.012.59b5

Твердые формы ортатаксела

Настоящее изобретение относится к твердым формам 1,14-карбонат 13-(N-Boc-β-изобутилсеринил)-14-в-гидроксибаккатина III (Ортатаксела)фомулы Представлены аморфная Форма A, кристаллическая Форма B, их смеси и способы их получения. Аморфную Форму A получают путем быстрого осаждения Ортатаксела из...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002488586
Дата охранного документа: 27.07.2013
27.07.2013
№216.012.59b8

Способ гликозидирования колхицина и тиоколхицина

В настоящем изобретении раскрыт способ получения соединений, имеющих формулу I, в которой R является метокси или метилтиогруппой; R является О-гликозилокси остатком. Соединения формулы I получают посредством взаимодействия перацетилированной гликозы с соединением, имеющим формулу II, с...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002488589
Дата охранного документа: 27.07.2013
20.08.2013
№216.012.5ed3

Комбинации вазопротекторных агентов и препаративные формы, содержащие такие комбинации

Изобретение относится к фармацевтической композиции и к применению комбинации, содержащей один или несколько поликозанолов, токотриенол и/или ликопен, один или несколько олигомеров процианидола и растительное масло, обогащенное ω-3, ω-6 ненасыщенными жирными кислотами для приготовления таких...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002489907
Дата охранного документа: 20.08.2013
20.09.2013
№216.012.6a4b

Противоопухолевые средства с бензофенантридиновой структурой и содержащие их препараты

Предложены: применение солей бензофенантридиновых алкалоидов для получения лекарственных средств для лечения опухолей, где алкалоид находится в форме соли лютеовой, гиалуроновой или фосфатидной кислоты, соль бензофенантридиновых алкалоидов с фосфатидной кислотой или гиалуроновой кислотой и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002492862
Дата охранного документа: 20.09.2013
20.01.2014
№216.012.9717

Композиции для лечения и предупреждения инфекций полости рта

Изобретение относится к композиции для гигиены полости рта и для лечения и предупреждения патологических состояний, связанных с зубочелюстной системой, имплантатами или осложнениями после хирургических операций полости рта. Указанная композиция содержит бензофенантридиновые алкалоиды,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002504378
Дата охранного документа: 20.01.2014
20.01.2014
№216.012.9718

Композиции для лечения вагинальных инфекций с хроническим воспалением

Изобретение относится к композиции для местного применения для лечения вагинита различного происхождения и связанных с этим воспалительных осложнений. Указанная композиция содержит бензофенантридиновые алкалоиды, соединения бензофурана и необязательно экстракт Zanthoxylum bungeanum или...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002504379
Дата охранного документа: 20.01.2014
+ добавить свой РИД