Результат интеллектуальной деятельности: Способ коррекции эндотелиальной дисфункции субстанцией 3-гидрокси-2-этил-6-метилпиридиния никотинат при ADMA-подобной модели преэклампсии

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и может быть использовано для коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных.

Наиболее близким к заявленному решению является Способ коррекции нарушения микроциркуляции в плаценте триметазидином при ADMA-подобной модели преэклампсии (RU № 2696196 опубл. 31.07.2019.), включающий воспроизводение модели преэклампсии у крыс линии Wistar в течение 7 дней ежедневным с 14 по 20 день беременности внутрибрюшинным введением L-нитро-аргинин-метилового эфира в дозе 25 мг/кг. На фоне моделируемой патологии вводят внутрижелудочно через зонд триметазидин ежедневно однократно в дозе 6 мг/кг с 14 по 20 сутки беременности.

Недостатком указанного способа является то, что селективно ингибируя фермент 3-кетоацил-КоА-тиолазу, триметазидин не оказывает стимулирующего влияния на более значимые ферментативные антиоксиданты, такие как супероксиддисмутаза (СОД) и глутатионпероксидаза (ГП), а следовательно, его антиоксидантные эффекты стоит считать неудовлетворительными.

Соответственно, перспективным направлением является использование веществ, способных вызывать гиперэкспрессию ферментов (СОД и ГП), обеспечивающих первую линию обороны от действия свободных радикалов О2.*-и *ОН [Kofler J., Hurn P. D., Traystman R. J. SOD1 overexpression and

female sex exhibit region-specific neuroprotection after global erebral ischemia due to cardiac arrest. J. Cereb. Blood Flow Metab. 2005; 25 (9): 1130–1137.].

Одним из таких веществ является производное группы 3-оксипиридина субстанция, а именно 3-гидрокси-2-этил-6-метилпиридиния никотинат под лабораторным шифром ЛХТ-21-16 (ВНЦ БАВ, г. Старая Купавна). Оно обладает:

Ретинопротективным действием (Peresypkina, A.; Pazhinsky, A.; Danilenko, L.; Lugovskoy, S.; Pokrovskii, M.; Beskhmelnitsyna, E.; Solovev, N.; Pobeda, A.; Korokin, M.; Levkova, E.; Gubareva, V.; Korokina, L.; Martynova, O.; Soldatov, V.; Pokrovskii, V. Retinoprotective Effect of 2-Ethyl-3-hydroxy-6-methylpyridine Nicotinate. Biology 2020, 9, 45.)

Антигипоксической активностью, кардиопротективной активностью (Даниленко Л.М. Фармакологическая коррекция токсических, ишемических, реперфузионных повреждений миокарда и эндотелиальной дисфункции производными 3-(2,2,2-триметилгидразиния) пропионата, 5-гидроксиникотиновой кислоты и 3-оксипиридина. Дисс. д.ф.н. Белгород. 2018).

Задачей изобретения является создание способа коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели преэклампсии, включающей использование субстанции ЛХТ-21-16, обладающей антиоксидантными свойствами.

Задача достигается тем, что на фоне моделирования преэклампсии в эксперименте внутрибрюшинным введением беременным самкам крыс линии Wistar в течение 7 суток ADMA-подобного блокатора эндотелиальной NO-синтазы - N-нитро-L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг проводится коррекция эндотелиальной дисфункции внутрибрюшинным введением 3-гидрокси-2-этил-6-метилпиридиния никотинат (ЛХТ-21-16) в дозировке 260 мг/кг с 14 по 20 сутки беременности. Это приводит к выраженной коррекции эндотелиальной дисфункции при моделируемой патологии. Данный эффект связан с выраженным антиоксидантным действием.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводят на белых беременных крысах самках линии Wistar массой 250-300 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут в течение 7 дней (с 14 по 20 день беременности). Субстанция ЛХТ-21-16 вводится внутибрюшинно за 30 минут до введения L-NAME также в течение 7 дней (с 14 по 20 день беременности) в дозировке 260 мг/кг.

На 21 день беременности под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг) вводят катетер в правую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Проводят сосудистые пробы на эндотелийзависимую вазодилатацию (ЭЗВ)- внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, и эндотелийнезависимую вазодилатацию (ЭНЗВ) – внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг с расчетом коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД) [патент №2301015 от 20.06.2007 г. (Бюл. №17)].

Для всех данных была применена описательная статистика: данные проверены на нормальность распределения. Тип распределения определялся критерием Шапиро-Уилка. В случае нормального распределения были подсчитаны среднее значение (M) и стандартная ошибка среднего (m). Межгрупповые различия анализировались параметрическими (t-критерий Стьюдента) или непараметрическими (критерий Манна-Уитни) методами, в зависимости от типа распределения. Статистическую значимость различий между морфологическими изменениями после их ранжирования оценивали с помощью метода анализа непараметрических данных Манна-Уитни. Различия считаются достоверными при p<0,05.Расчеты выполнены с помощью статистических программ Microsoft Excel 7.0.

РИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ.

Блокада NO-синтазы, вызванная 7-дневным введением L-NAME беременным крысам, приводила к нарушению взаимоотношений вазодилатирующих и вазоконстрикторных механизмов регуляции сосудистого тонуса, о чем свидетельствуют результаты сосудистых проб на эндотелийзависимое расслабление (ацетилхолин) и эндотелийнезависимое (нитропруссид натрия) и увеличение КЭД с 1,20±0,07 у интактных беременных животных до 2,93±0,25 (р<0,05). Кроме этого, наблюдался значительный подъем систолического и диастолического артериального давления с 132,3±3,46 и 92,4±3,87 до 194,9±8,26 и 141,1±3,5 мм рт.ст. соответственно. Внутрибрюшинное введение ЛХТ-21-16 (260 мг/кг) с 14 по 20 сутки беременности сутки беременности приводило к достоверному снижению КЭД до 1,8±0,2, что более чем в два раза меньше, в сравнении с группой животных с введением L-NAME (р<0,05), а так же к значимой коррекции систолического и диастолического артериального давления - 158,3±3,4 и 116,3±4,7 мм рт.ст. соответственно.

Действие исследуемого соединения представлено в таблице № 1.

Таблица 1

Таким образом, полученные результаты убедительно свидетельствуют о выраженной коррекции эндотелиальной дисфункции в условиях воспроизводимой нами ADMA подобной модели преэклампсии у беременных крыс субстанцией 3-гидрокси-2-этил-6-метилпиридиния никотинат ЛХТ-21-16 которая может быть использована для коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных.