×
17.02.2020
220.018.033c

Результат интеллектуальной деятельности: Способ определения ДНК ткани дятла (Picidae) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах

Вид РИД

Изобретение

Аннотация: Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к методам определения видовой принадлежности мяса с помощью полимеразной цепной реакции. Выделяют ДНК из ткани птиц семейства дятловых (Picidae). Осуществляют постановку полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией с проведением 45 циклов амплификации в реальном времени с использованием специфичных для участка генома ДНК птиц семейства дятловых (Picidae) олигонуклеотидных праймеров, зондов, флуоресцентных красителей. Для положительного контрольного образца используют смесь, содержащую фрагменты геномов ДНК ткани птиц семейства дятловых и бактериофага Т4 со следующими нуклеотидными последовательностями: T4F TACATATAAATCACGCAAAGC - прямой праймер T4R TAGTATGGCTAATCTTATTGG - обратный праймер Т4Р CY5 ACATTGGCACTGACCGAGTTC - зонд Pic F: 5'-GTCACAACATTTCATAGTATC-3' - прямой праймер Pic R: 5'-TTCAGCATACTTGCTTCTTAC-3' - обратный праймер Pic Р: FAM-5'-GAGCAGCACTAACCTCATATGCAG-3-BHQ1 - зонд. Измеряют накопление флуоресцентных сигналов по каналам соответствующих флуоресцентных красителей, проводят интерпретацию результатов на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считается положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции – отрицательный. Способ позволяет повысить точность идентификации видовой принадлежности, упростить процесс подготовки и уменьшить его стоимость. 5 табл.

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к методам определения видовой принадлежности мяса с помощью полимеразной цепной реакции.

Известно использование ПЦР в реальном времени для определения ДНК следующих животных - лошади, коровы, свиньи, осла, птицы, кошки, собаки и кролика (https://stylab.ru/netcat_files/userfiles/Files/Articles/Meat/Meat_1_04_2013.pdf.).

Наиболее близким по технической сущности является способ идентификации видовой принадлежности тканей животного в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах (патент РФ №№2694713, кл. C12Q 1/68, 2019 г. ), включающий выделение ДНК из ткани животного сорбционным методом, постановку полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией с проведением 45 циклов амплификации в реальном времени с использованием специфичных для участка генома ДНК животного олигонуклеотидных праймеров, зондов, флуоресцентных красителей: JOE/Yellow для специфического сигнала для животного и Cy5/Red - для внутреннего контрольного образца в виде суспензии бактериофага Т4 с концентрацией 5×103 фаговых частиц на 1 мкл, положительного контрольного образца в виде смеси, содержащую фрагменты геномов животного и бактериофага Т4 с нуклеотидной последовательностью:

T4F TACATATAAATCACGCAAAGC - прямой праймер

T4R TAGTATGGCTAATCTTATTGG - обратный праймер

Т4Р CY5 ACATTGGCACTGACCGAGTTC - зонд, взятых в соотношении 1:1 и измерение накопления флуоресцентных сигналов по каналам соответствующих флуоресцентных красителей, проводение интерпретации результатов на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считается положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции - отрицательный.

Недостатком известного технического решения является отсутствие возможности идентифицировать ткани дятла в кормах и продуктах, недостаточная точность из-за использования суспензии бактериофага, которая требует предварительную обработку, включая центрифугирование, концентрирование и перевод в определенный буферный раствор, что влечет за собой значительную трудоемкость и финансовые затраты.

Техническим результатом является расширение функциональных возможностей, повышение точности идентификации видовой принадлежности, упрощение процесса подготовки внутреннего контроля и уменьшение его стоимости.

Технический результат достигается тем, что в способе определения ДНК ткани дятла (Picidae) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах, включающем выделение ДНК из ткани животного сорбционным методом, постановку полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией с проведением 45 циклов амплификации в реальном времени с использованием специфичных для участка генома ДНК животного олигонуклеотидных праймеров, зондов, флуоресцентных красителей: для специфического сигнала для животного - JOE/Yellow и Cy5/Red - для внутреннего контрольного образца в виде суспензии бактериофага Т4 с концентрацией 5×103 фаговых частиц на 1 мкл, положительного контрольного образца в виде смеси, содержащую фрагменты геномов животного и бактериофага Т4 с нуклеотидной последовательностью:

T4F TACATATAAATCACGCAAAGC - прямой праймер

T4R TAGTATGGCTAATCTTATTGG - обратный праймер

Т4Р CY5 ACATTGGCACTGACCGAGTTC - зонд, взятых в соотношении 1:1 и измерение накопления флуоресцентных сигналов по каналам соответствующих флуоресцентных красителей, проведение интерпретации результатов на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считается положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции - отрицательный, согласно изобретению выделяют ДНК из ткани птиц семейства дятловых (Picidae) и для внутреннего контрольного образца используют фаголизат бактериофага Т4, а для положительного контрольного образца - фрагменты геномов нативного бактериофага Т4 и ткани дятла (Picidae) со следующей нуклеотидной последовательностью:

Pic F: 5'-GTCACAACATTTCATAGTATC-3' - прямой праймер

Pic R: 5'-TTCAGCATACTTGCTTCTTAC-3' - обратный праймер

Pic Р: FAM-5'-GAGCAGCACTAACCTCATATGCAG-3-BHQ1 - зонд.

Новизна заявляемого способа состоит в идентификации видовой принадлежности ткани птиц семейства дятловых с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени, что в свою очередь позволяет с высокой точностью определить наличие их ингредиентов в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».

Заявляемый способ рекомендовано использовать в специализированных ветеринарных, санитарно-эпидемиологических, животноводческих, сельскохозяйственных предприятиях, что соответствует критерию «промышленная применимость».

Способ определения ДНК ткани дятла (Picidae) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах осуществляется следующим образом.

Для исследования сухих кормов и мясных полуфабрикатов на содержание ДНК ткани дятла проводят полимеразную цепную реакцию с флуоресцентной детекцией с применением термоциклера типа Rotor-Gene Q при соответствующих температурно-временных режимах амплификации и измеряют накопление флуоресцентных сигналов по каналам соответствующих флуоресцентных красителей: JOE/Yellow для специфического сигнала для ДНК ткани дятла (Picidae) и Cy5/Red - для внутреннего контрольного образца. Интерпретацию результатов проводят на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией, если кривые накопления флуоресцентного сигнала выходят до 35 цикла, то результат реакции считается положительным, а если кривые не пересекают пороговую линию или пересекают ее после 35 цикла, то результат реакции - отрицательный.

Для повышения точности идентификации ткани дятла для внутреннего контрольного образца используют фаголизат бактериофага Т4 с концентрацией 5×103 фаговых частиц на 1 мкл, если концентрация фаговых частиц отклоняется в большую или меньшую сторону, то наблюдаются повторности сомнительных образцов. Для положительного контрольного образца используют смесь содержащую фрагменты геномов ДНК ткани птиц семейства дятловых (Picidae) и бактериофага Т4 взятых в соотношении 1:1 со следующими нуклеотидными последовательностями:

Pic F: 5'-GTCACAACATTTCATAGTATC-3' - прямой праймер

Pic R: 5'-TTCAGCATACTTGCTTCTTAC-3' - обратный праймер

Pic Р: FAM-5'-GAGCAGCACTAACCTCATATGCAG-3 -BHQ1 - зонд

T4F TACATATAAATCACGCAAAGC - прямой праймер

T4R TAGTATGGCTAATCTTATTGG - обратный праймер

Т4Р CY5 ACATTGGCACTGACCGAGTTC - зонд.

Использование для разных видов контроля различные формы материала бактериофага Т4: фаголизата и фрагмента генома нативного бактериофага Т4 со специфическими к нему праймерами и зондом обусловлено тем, что это позволяет контролировать корректное прохождение реакции в каждой пробирки, а также контролируется этап выделения ДНК из образцов. Кроме того, использование фаголизата бактериофага Т4, представляющего собой суспензию бактериофага, полученную после лизиса зараженных фагом клеток ткани, повышает чувствительность и упрощает процесс идентификации ткани птиц семейства дятловых в продуктах. Использование нативного бактериофага, т.е. неповрежденного при исследовании, улучшает синтез ДНК, что также улучшает качество процесса идентификации.

При конструировании праймеров и зонда основными требованиями были: степень гомологии (комплементарность) с выбранным участком гена; отсутствие самокоплементарных участков внутри олигонуклеотидов и комплементарности друг другу, чтобы не допускать возникновения устойчивых вторичных структур (димеров); близость значений температуры отжига праймеров.

Конструирование специфических праймеров и зонда осуществляли с помощью компьютерных программ на основании анализа нуклеотидных последовательностей референтных штаммов и изолятов, опубликованных на ресурсе GenBank и подбора условий для проведения ПЦР в реальном времени с применением разработанных праймеров и зонда, несущего флуорофор и тушитель, и комплементарного части амплифицируемого со специфическими праймерами фрагмента.

Праймеры, специфичные для ДНК птиц семейства дятловых (Picidae) были отобраны на основе нуклеотидной последовательности фибриногена пестрого (Picoides major isolate PMAJ51755 beta fibrinogen (Bfib) gene, intron 7, Length: 868) на уастке между 50 и 250 нуклеотидами. Код доступа нуклеотидной последовательности в GeneBank NCBI: AF394320.1.

Праймеры были спроектированы с использованием Primer Express Software v3.0 (Applied Biosystems) и исследованы на специфичность с использованием программы BLAST на сервере NCBI. Для детекции продуктов амплификации был подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченный зонд Pic Р (комплементарный участку нуклеотидной последовательности, фланкированной позициями для праймеров Pic F и Pic R). На 5'-конец зонда Pic Р добавлен флуоресцентный краситель карбоксифлуоресцеин (FAM).

Pic F: 5'-GTCACAACATTTCATAGTATC-3' - прямой праймер

Pic R: 5'-TTCAGCATACTTGCTTCTTAC-3' - обратный праймер

Pic Р: FAM-5'-GAGCAGCACTAACCTCATATGCAG-3'-BHQ1 - зонд.

Используя программу "Oligo 6.0", описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР. Ни одна из выбранных последовательностей не обнаружена в геномах каких либо животных и птиц (исключая представителей семейства Picidae) и любых видов растений, которые потенциально могут быть использованы при производстве кормов и пищевых продуктов.

В качестве внутреннего контроля использовался бактериофаг Т4, имеющий геномную ДНК порядка 170 тысяч пар нуклеотидов (Enterobacteria phage Т4Т, complete genome GenBank: HM137666.1). В результате анализа был выбран участок между 400 и 600 нуклеотидами, содержащий уникальные нуклеотидные последовательности, рассчитаны первичные структуры олигонуклеотидных праймеров, фланкирующих выбранный участок генома. Праймеры были спроектированы с использованием Primer Express Software v3.0 (Applied Biosystems) и исследованы на специфичность с использованием программы BLAST на сервере NCBI.

T4F: 5'-TACATATAAATCACGCAAAGC-3' - прямой праймер

T4R: 5'-TAGTATGGCTAATCTTATTGG-3' - обратный праймер

Т4Р: НЕХ-5'-ACATTGGCACTGACCGAGTTC-3'-BHQ1 - зонд

Для детекции продуктов амплификации подобран олигонуклеотидный флуоресцентно-меченный зонд Т4Р, комплементарный участку нуклеотидной последовательности, ограниченной позициями отжига праймеров T4F и T4R. Зонд был помечен красителем HEX. Используя программу "Oligo 6.0" описаны основные свойства рассчитанных олигонуклеотидов, определившие возможность их использования в ПЦР.

Пример конкретного осуществления способа определения ДНК ткани дятла в сухих кормах и мясных продуктах

Для подтверждения эффективности способа были использованы сухие корма в виде рыбной и мясной муки; сырые и термически обработанные мясные продукты, т.е. мясные полуфабрикаты.

От пробы плотной консистенции отбирают на исследование общую пробу весом 10-50 г. Гранулированную или консервированную продукцию перед исследованием (10-20 г) растирают в ступке до гомогенного состояния.

Лабораторные пробы (20-40 мг) отбирают на исследование в одноразовые микропробирки вместимостью 1,5 мл в двух повторах. Отобранные лабораторные пробы направляют на выделения ДНК.

Исследование проводят с помощью набора реагентов «ПЦР-ДЯТЕЛ-ФАКТОР». Набор состоит из комплекта реагентов для проведения мультиплексной ПЦР (комплект №1) и комплекта контрольных образцов (комплект №2). Набор выпускается в двух вариантах: 1) Для анализа 55 образцов (включая контрольные образцы)

2) Для анализа 110 образцов (включая контрольные образцы).

Наборы используют в соответствии с инструкцией по применению набора реагентов «ПЦР-ДЯТЕЛ-ФАКТОР» для определения ДНК ткани птиц дятлах (Picidae) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в РВ ТУ 21.10.60-163-51062356-2018, для диагностики in vitro, http://www.vetfaktor.ru/.

Состав набора приведен в Таблицах 1 и 2.

Исследования состоит из трех этапов:

• экстракция нуклеиновая кислота (НК);

• проведение реакции ПЦР РВ;

• учет результатов анализа.

Для экстракции (выделение) НК из исследуемых проб отбирают необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл, включая отрицательный контроль выделения. Во все пробирки с исследуемыми образцами, включая пробирку для отрицательного контрольного образца (ОКО), вносят по 10 мкл внутреннего контрольного образца (ВКО) для ткани птиц семейства дятловых, в качестве которого, используют фаголизат бактериофага Т4 с концентрацией 5×103 фаговых частиц на 1 мкл.

Следующий этап это подготовка образцов к проведению ПЦР.

Общий объем реакционной смеси - 25 мкл, объем ДНК-пробы - 10 мкл.

Успешное прохождение реакции контролируют использованием положительного контрольного образца (ПКО) ДЯТЕЛ, ВКО ДЯТЕЛ и ДНК буфера. В качестве ПКО используют смесь содержащую фрагменты геномов ткани птиц семейства дятловых и нативного бактериофага Т4 взятых в соотношении 1:1.

В отдельной пробирке смешивают компоненты набора из расчета на каждую реакцию:

5 мкл ПЦР СМЕСЬ ДЯТЕЛ;

10 мкл ПЦР БУФЕР ДЯТЕЛ;

0,5 мкл TAQ POLYMERASE

Перемешивают смесь на вортексе и сбросывают капли кратковременным центрифугированием.

Отбирают необходимое количество пробирок для амплификации ДНК исследуемых и контрольных проб. Вносят по 15 мкл приготовленной реакционной смеси.

Помещают подготовленные для проведения ПЦР пробирки в ячейки амплификатора и используют программное обеспечение прибора. Далее проводят ПЦР РВ с флуоресцентной детекцией.

Параметры температурно-временного режима амплификации на приборе «Rotor-Gene Q» представлены в таблице 3.

Интерпретация результатов анализа.

Полученные данные - кривые накопления флуоресцентного сигнала анализируются с помощью программного обеспечения используемого прибора для проведения ПЦР в соответствии с инструкцией производителя к прибору.

Учет результатов ПЦР РВ проводится по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией (что соответствует наличию или отсутствию значения порогового цикла «Ct» для исследуемого образца).

Результат считается достоверным в случае корректного прохождения положительных и отрицательных контролей амплификации и экстракции ДНК в соответствии с таблицей 4.

Появление любого значения Ct в таблице 4 результатов для отрицательного контроля этапа экстракции ВК- на канале JOE/Yellow и для отрицательного контроля этапа ПЦР К- на любом из каналов свидетельствует о наличии контаминации реактивов или образцов. В этом случае результаты анализа для всех проб считаются недействительными. Требуется повторить анализ всех проб, а также предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации.

Образцы, для которых значение Ct по каналу Cy5/Red отсутствует или превышает 35 цикл (и при этом не получен положительный результат на канале JOE/Yellow) требуют повторного проведения исследования с этапа экстракции ДНК. Задержка в значениях пороговых циклов для исследуемых образцов указывает на присутствие ингибиторов в пробе(ах) или на ошибки при экстракции ДНК или при постановке реакции ПНР РВ.

В образце обнаружена ДНК ткани птиц семейства дятловых (Picidae), если наблюдается экспоненциальный рост сигнала на канале JOE/Yellow, при этом значения Ct контрольных образцов находятся в пределах нормы (Табл. 4).

Если для исследуемого образца по каналам JOE/Yellow значение Ct определяется позднее 37 цикла при корректном прохождении положительных и отрицательных контролей, образец исследуется повторно с этапа экстракция ДНК. Если при повторной постановке Ct более 37 результат считается отрицательным.

Образец считается отрицательным ДНК (Picidae) не обнаружена), если не определяется значение Ct (не наблюдается рост специфического сигнала) на канале JOE/Yellow при этом значения Ct контрольных образцов находятся в пределах нормы (Табл. 4), а значение Ct по каналу Cy5/Red менее 35.

Для исследуемых образцов (сухой корм и мясные полуфабрикаты) предел точности содержания ткани птиц семейства дятловых представлен в таблице 5.

Для доказательства эффективности использования ПЦР с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени проводился сравнительный анализ чувствительности заявляемого с прототипом, в котором использовался метод ПЦР с использованием внутреннего контроля в виде суспензии бактериофага, а в заявляемом - использовался фаголизат бактериофага и геном нативного бактериофага. Оказалось чувствительность ПЦР при обнаружении примеси ткани птиц семейства дятловых в кормах и в мясных фаршах примерно в 1,5 раза выше. Трудоемкость и стоимость процесса определения ДНК ткани птиц семейства дятловых в кормах и фаршах снизилась на 3-5%.

Источник поступления информации: Роспатент

Showing 131-140 of 465 items.
13.02.2019
№219.016.b9aa

Способ синхронизации вывода цыплят

Изобретение относится к птицеводству, а именно к инкубации яиц сельскохозяйственной птицы. Осуществляют посуточное изменение температуры в инкубаторе на протяжении всего цикла инкубации. Ежесуточно со смещением времени на 45 минут изменяют температуру нагрева инкубатора согласно биологическим...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002679511
Дата охранного документа: 11.02.2019
13.02.2019
№219.016.b9c3

Способ защиты вегетирующих растений подсолнечника от повреждающего действия 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты

Изобретение относится к сельскому хозяйству. Способ защиты вегетирующих растений подсолнечника от повреждающего действия 2,4-Д предусматривает обработку N-замещенными амидами 5,7-диметил-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин-2-сульфокислоты в количестве 40 г/га через 1 сутки после использования...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002679493
Дата охранного документа: 11.02.2019
14.02.2019
№219.016.ba4d

Устройство для шлифования семян

Изобретение относится к сельскому хозяйству. Предложено устройство для шлифования семян, содержащее контейнер, смонтированный из соединенных в единую технологическую цепочку двух или более винтовых шлифовальных барабанов, внутренняя поверхность которых покрыта слоем резины, поярусно, жестко...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002679743
Дата охранного документа: 12.02.2019
14.02.2019
№219.016.ba5a

Способ изучения резания стеблей сельскохозяйственных культур

Изобретение относится к области сельскохозяйственного машиностроения. Способ изучения резания стеблей сельскохозяйственных культур включает размещение стеблей в держателях, захват и срез их режущим инструментом, измерение высоты среза. Держатели жестко устанавливают на транспортере в виде...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002679728
Дата охранного документа: 12.02.2019
14.02.2019
№219.016.ba61

Способ получения мороженого функционального назначения

Изобретение относится к получению мороженого. Способ предусматривает приготовление смеси исходных компонентов, фильтрацию, пастеризацию, гомогенизацию, охлаждение, фризерование, фасовку и закаливание мороженого. Перед пастеризацией в смесь исходных компонентов вносят стабилизатор – желатин....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002679731
Дата охранного документа: 12.02.2019
16.02.2019
№219.016.bb2d

Станок подготовки соляного раствора для очистки питьевой воды на водозаборах

Изобретение относится к устройствам для очистки воды и может быть использовано для очистки питьевой воды на водозаборах. Станок подготовки соляного раствора для очистки питьевой воды на водозаборах содержит вращающийся барабан 1 и корпус 8. Барабан 1 выполнен по периметру в виде многозаходной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002680049
Дата охранного документа: 14.02.2019
16.02.2019
№219.016.bb34

Установка для изучения резания стеблей сельскохозяйственных культур

Изобретение относится к области сельскохозяйственного машиностроения и может использоваться для изучения резания стеблей сельскохозяйственных культур. Установка состоит из режущей системы (1), включающей вращающийся режущий элемент в виде шнека (2) и неподвижный нож (4). К торцам витков шнека...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002680005
Дата охранного документа: 14.02.2019
17.02.2019
№219.016.bbda

Тест-система для выявления днк возбудителя лептоспироза (leptospira spp.) у сельскохозяйственных животных

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к лабораторной диагностике возбудителей инфекционных заболеваний, а именно к средствам диагностики инфекции у животных. Описан тест-система для выявления ДНК возбудителя лептоспироза (Leptospira spp.) у сельскохозяйственных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002680094
Дата охранного документа: 15.02.2019
17.02.2019
№219.016.bbde

Средство для лечения уролитиаза у плотоядных

Изобретение относится к области ветеринарии и представляет собой средство для лечения уролитиаза у плотоядных, содержащее фурагин в количестве 100 мг, дистилированную воду в количестве 100 мл и 3,3 мл 3% раствора гиалуроновой кислоты. Изобретение обеспечивает расширение функциональных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002680087
Дата охранного документа: 15.02.2019
20.02.2019
№219.016.bc19

Автономный асинхронный генератор с полюсопереключаемой двухслойной обмоткой статора на 12/10 полюсов

Изобретение относится к асинхронному генератору с полюсопереключаемой двухслойной обмоткой статора на 12/10 полюсов. Обмотка для 72 пазов из катушечных групп с выводами состоит из 1 по 36 катушечных групп с первыми выводами на десять полюсов 37, 38, 39, взятыми соответственно от объединенных...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002680152
Дата охранного документа: 18.02.2019
Showing 131-140 of 199 items.
29.05.2019
№219.017.6274

Способ получения пробиотической добавки для перепелов

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству. Предложен способ получения пробиотической добавки для перепелов, включающий культивирование микроорганизмов Lactobacillus agilis в среде, состоящей из мелассы кормовой - 45,0 г, КНРО - 2,0 г и дрожжевого экстракта - 0,02 г из расчета...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002688429
Дата охранного документа: 21.05.2019
31.05.2019
№219.017.7102

Способ производства пробиотической добавки

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству, а конкретно к способу производства пробиотической добавки на основе молочнокислых бактерий для кормления перепелов. Способ производства пробиотической добавки включает культивирование микроорганизмов Lactobacillus salivarius в среде,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002689680
Дата охранного документа: 28.05.2019
31.05.2019
№219.017.7116

Способ выращивания перепелов

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к птицеводству, а конкретно к способу выращивания перепелов. Способ выращивания перепелов включает использование пробиотической добавки, состоящей из молочнокислых бактерий Lactobacillus agilis, которые культивируют в среде, включающей...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002689701
Дата охранного документа: 28.05.2019
31.05.2019
№219.017.7149

Способ кормления перепелов

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к птицеводству. Способ кормления перепелов включает использование пробиотической добавки, состоящей из молочнокислых бактерий, при этом используют молочнокислые бактерии Lactobacillus salivarius, которые культивируют в среде, включающей...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002689730
Дата охранного документа: 28.05.2019
31.05.2019
№219.017.7197

Способ выявления генома возбудителя ротовирусной инфекции у сельскохозяйственных животных

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной вирусологии. Предложен способ выявления генома возбудителя ротавируса типа А у сельскохозяйственных животных. Выделяют РНК из биологического материала от инфицированных животных сорбционным методом. Затем синтезируют кДНК на матрице...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002689718
Дата охранного документа: 28.05.2019
02.07.2019
№219.017.a358

Способ выращивания поросят

Изобретение относится к сельскохозяйственному производству, в частности, к ветеринарной медицине, и может быть использовано для активизации и коррекции иммунной системы поросят, нормализации обменных процессов, устранения гормонального дисбаланса, повышения прироста живой массы. Сущностью...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002692918
Дата охранного документа: 28.06.2019
17.07.2019
№219.017.b4f7

Тест-система для обнаружения генома возбудителя коронавирусной инфекции у крупного рогатого скота с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана тест-система для обнаружения генома возбудителя коронавирусной инфекции у крупного рогатого скота при помощи мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в реальном времени. Тест–система включает буфер для...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694499
Дата охранного документа: 15.07.2019
17.07.2019
№219.017.b511

Тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа а у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана тест-система для обнаружения генома возбудителя ротовируса типа А у сельскохозяйственных животных с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Тест-система включает в себя буфер...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694501
Дата охранного документа: 15.07.2019
17.07.2019
№219.017.b577

Способ выявления генома возбудителя коронавирусной инфекции у крупного рогатого скота

Изобретение относится к области биотехнологии. Описан способ выявления генома возбудителя коронавирусной инфекции у крупного рогатого скота. Способ включает в себя выделение РНК из биологического материала в виде экстракта фекалий или фрагментов органов брюшной полости сорбционным методом,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694558
Дата охранного документа: 16.07.2019
19.07.2019
№219.017.b64f

Способ идентификации видовой принадлежности баранины и говядины в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ идентификации видовой принадлежности баранины и говядины в продовольственном сырье, кормах и пищевых продуктах, включающий выделение ДНК из баранины (Ovis) и говядины (Bos) сорбционным методом, постановку...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002694713
Дата охранного документа: 16.07.2019
+ добавить свой РИД