ПРИМЕНЕНИЕ ИЗОКСАЗОЛИНОВЫХ СОЕДИНЕНИЙ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДЕМОДЕКОЗА

Описание

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к профилактике или лечению заражения животных паразитарными членистоногими.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Клещи Demodex spp. являются обычными симбионтами кожи ряда животных, паразитирующими внутри сальных желез, соединенных с волосяными фолликулами. Как только их число резко увеличивается, они способны вызывать заболевание, известное как демодекоз или демодектическая чесотка.

Демодекоз представляет собой неконтагиозный воспалительный паразитарный дерматоз, вызываемый избыточной популяцией фолликулярных клещей Demodex. Демодекоз можно классифицировать как локализованный или генерализованный в соответствии со степенью повреждений. Локализованный демодекоз является заболеванием с доброкачественным течением и в большинстве случаев разрешается самопроизвольно в интервале от шести до восьми недель.

Генерализованный демодекоз представляет собой тяжелое заболевание с генерализованными повреждениями, которые обычно осложняются вторичными бактериальными инфекциями (пиодемодекозом). Сопутствующий пододерматит является обычным. Собаки могут переносить системное заболевание с генерализованной лимфоаденопатией, летаргией и лихорадкой, когда наблюдают глубокую пиодермию, фурункулез, или воспаление соединительной ткани. Диагностика не является трудной, так как глубокие кожные соскобы или вырывание волос демонстрируют клещей, яйца и личиночные формы в больших количествах.

Хронический генерализованный демодекоз является разрушающим и трудным для лечения заболеванием кожи. У собак, которые в иных отношениях являются здоровыми, является маловероятным, чтобы генерализованная форма заболевания разрешилась без терапии.

Возможные варианты терапии, которые являются доступными в настоящее время, включают амитраз, ивермектин, мильбемицина оксим, моксидектин перорально и моксидектин местно, в большинстве случаев вводимые множество раз (ежедневно, еженедельно или ежемесячно) в течение трехмесячных периодов или дольше.

Чтобы быть эффективными, эти режимы лечения требуют тщательного их соблюдения владельцами в течение продолжительного периода времени. Соблюдение владельцем режима лечения может быть важным фактором для успеха лечения, когда требуется множество доз лечения, распределяемых на протяжении длительного периода времени, чтобы достичь удовлетворительного результата лечения.

Проблемой, с которой часто сталкиваются при лечении демодекоза у собак, является неспособность гарантировать, что собака является абсолютно свободной от клещей после лечения, и повторное заражение может быть обнаружено месяцы спустя после завершения лечения, которое первоначально считалось успешным.

Следовательно, желательно предоставить способ обработки Demodex spp. и лечения демодекоза у животных, особенно собак, который эффективно уничтожает клещей и является удобным для введения и, следовательно, способствует соблюдению режима лечения владельцем и препятствует повторному заражению и рецидиву заболевания.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Рассматриваемое изобретение предоставляет применение изоксазолинового соединения формулы (I), Формула (I)

в которой

R¹=галоген, CF₃, OCF₃, CN,

n=целое число от 0 до 3, предпочтительно, 1, 2 или 3,

R²=C₁-C₃-галогеналкил, предпочтительно, CF₃ или CF₂Cl,

T=5- или 6-членное кольцо, которое является необязательно замещенным одним или несколькими радикалами Y,

Y=метил, галогенметил, галоген, CN, NO₂, NH₂-C=S, или два соседних радикала Y вместе образуют цепь, особенно трех- или четырехзвенную цепь;

Q=X-NR³R⁴ или 5-членное N-гетероарильное кольцо, которое является необязательно замещенным одним или несколькими радикалами;

X=CH₂, CH(CH₃), CH(CN), CO, CS,

R³=водород, метил, галогенэтил, галогенпропил, галогенбутил, метоксиметил, метоксиэтил, галогенметоксиметил, этоксиметил, галогенэтоксиметил, пропоксиметил, этиламинокарбонилметил, этиламинокарбонилэтил, диметоксиэтил, пропиниламинокарбонилметил, N-фенил-N-метил-амино, галогенэтиламинокарбонилметил, галогенэтиламинокарбонилэтил, тетрагидрофурил, метиламинокарбонилметил, (N,N-диметиламино)-карбонилметил, пропиламинокарбонилметил, циклопропиламинокарбонилметил, пропениламинокарбонилметил, галогенэтиламинокарбонилциклопропил,

R³-1 R³-2

R³-3 R³-4 R³-5 R³-6

R³-7 R³-8 R³-9 R³-10

R³-11 R³-12 R³-13 R³-14 R³-15

где Z^A=водород, галоген, циано, галогенметил (CF₃);

R⁴=водород, этил, метоксиметил, галогенметоксиметил, этоксиметил, галогенэтоксиметил, пропоксиметил, метилкарбонил, этилкарбонил, пропилкарбонил, циклопропилкарбонил, метоксикарбонил, метоксиметилкарбонил, аминокарбонил, этиламинокарбонилметил, этиламинокарбонилэтил, диметоксиэтил, пропиниламинокарбонилметил, галогенэтиламинокарбонилметил, цианометиламинокарбонилметил, или галогенэтиламинокарбонилэтил;

или R³ и R⁴ вместе образуют заместитель, выбранный из группы, состоящей из:

и .

или его соль, сольват или N-оксид для производства лекарственного средства для лечения демодекоза у млекопитающих, особенно домашних питомцев, особенно собак.

Это изобретение также направлено на изоксазолиновое соединение, как изложено в этом описании, или фармацевтическую композицию, включающую в себя такое изоксазолиновое соединение для применения при лечении генерализованного демодекоза у животных, включающую в себя эффективное количество изоксазолинового соединения, как изложено в этом описании, и, в случае фармацевтической лекарственной формы, фармацевтически приемлемый носитель.

Настоящее изобретение дополнительно предоставляет способ уничтожения клещей Demodex spp. у собак, включающий в себя единственное введение изоксазолинового соединения, как изложено в этом описании.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Авторы рассматриваемого изобретения установили, что демодекоз млекопитающих может излечиваться посредством введения эффективного количества изоксазолинового соединения, как описано в этой заявке. Было установлено, что единственное введение такого изоксазолинового соединения приводило к полному акарицидному эффекту против клещей Demodex spp. и высокой эффективности действия против генерализованного демодекоза у собак.

Как было показано в примере, после единственного введения флураланера в виде жевательных таблеток Bravecto® собакам, число клещей в кожных соскобах снижалось на 99,8% в День 28 и на 100% в Дни 56 и 84 после введения. Статистически значимое (P ≤ 0,05) меньшее количество клещей было обнаружено в Дни 56 и 84 на собаках, обработанных Bravecto®, по сравнению с собаками, которым проводили обработку средством Advocate® предшествующего уровня (имидаклоприд/моксидектин) три раза с 28-дневными интервалами.

Все способы предшествующего уровня техники для борьбы с генерализованным демодекозом требуют множества обработок (ежедневного или очень частого введения) либо амитразом или макроциклическими лактонами, таким как мильбемицина оксим, моксидектин, ивермектин, дорамектин или селамектин в течение длительного периода времени.

Такие множественные обработки являются очень обременительными, так как необходимы частые манипуляции, которые требуют взаимодействия с обрабатываемым животным, которое не всегда имеет место.

Дополнительным недостатком способов предшествующего уровня и причиной ограниченного соблюдения владельцем режима лечения является высокая стоимость, ассоциированная с такими режимами лечения.

Введение соединений предшествующего уровня дополнительно привносит высокий риск побочных эффектов от таких обработок, поскольку относительно высокие дозировки акарицидных соединений в течение продолжительного периода времени приводили в нескольких случаях к тяжелым токсическим побочным эффектам у обработанных животных, особенно, в случае чувствительных к ивермектину пород собак, таких как, например, колли.

В особенности, обработка предшествующего уровня амитразом в ванне дополнительно требовала от владельца принимать специальные меры, чтобы избежать контакта с соединением, и обработка в ванне должна была проводиться в хорошо вентилируемом месте. Кроме того, для полной эффективности действия требовалось клипирование волосяного покрова у собак.

Однако, в том случае, когда необходимый распорядок лечения не выполняется вследствие несоблюдения владельцем режима лечения, риск рецидива демодекоза является очень высоким. Одной другой причиной неудачного лечения является то, что применяемые соединения имеют ограниченную эффективность действия, и некоторые клещи Demodex выживают после обработки.

Авторы настоящего изобретения неожиданно установили, что можно предотвратить такие недостатки предшествующего уровня техники, если применяют изоксазолиновое соединение, описанное в этой заявке, особенно флураланер.

Посредством способа настоящего изобретения, который требует введения эффективной дозировки изоксазолинового соединения согласно настоящему изобретению, можно будет избежать преждевременного прерывания лечения владельцами.

Изоксазолиновое соединение для применения в настоящем изобретении может быть описано Формулой (I):

Формула (I)

в которой

R¹=галоген, CF₃, OCF₃, CN,

n=целое число от 0 до 3, предпочтительно 1, 2 или 3,

R²=C₁-C₃-галогеналкил, предпочтительно CF₃ или CF₂Cl,

T=5- или 6-членное кольцо, которое является необязательно замещенным одним или несколькими радикалами Y,

Y=метил, галогенметил, галоген, CN, NO₂, NH₂-C=S, или два соседних радикала Y вместе образуют цепь CH-CH=CH-CH, N-CH=CH-CH, CH-N=CH-CH, CH-CH=N-CH, или CH-CH=CH-N, HC=HC-CH, CH-CH=CH, CH=CH-N, N-CH=CH;

Q=X-NR³R⁴ или 5-членное N-гетероарильное кольцо, которое является необязательно замещенным одним или несколькими радикалами Z^A, Z^B Z^D;

X=CH₂, CH(CH₃), CH(CN), CO, CS,

R³=водород, метил, галогенэтил, галогенпропил, галогенбутил, метоксиметил,метоксиэтил, галогенметоксиметил, этоксиметил, галогенэтоксиметил, пропоксиметил, этиламинокарбонилметил, этиламинокарбонилэтил, диметоксиэтил, пропиниламинокарбонилметил, N-фенил-N-метил-амино, галогенэтиламинокарбонилметил, галогенэтиламинокарбонилэтил, тетрагидрофурил, метиламинокарбонилметил, (N,N-диметиламино)-карбонилметил, пропиламинокарбонилметил, циклопропиламинокарбонилметил, пропениламинокарбонилметил, галогенэтиламинокарбонилциклопропил,

R³-1 R³-2

R³-3 R³-4 R³-5 R³-6

R³-7 R³-8 R³-9 R³-10

R³-11 R³-12 R³-13 R³-14 R³-15

R⁴=водород, этил, метоксиметил, галогенметоксиметил, этоксиметил, галогенэтоксиметил, пропоксиметил, метилкарбонил, этилкарбонил, пропилкарбонил, циклопропилкарбонил, метоксикарбонил, метоксиметилкарбонил, аминокарбонил, этиламинокарбонилметил, этиламинокарбонилэтил, диметоксиэтил, пропиниламинокарбонилметил, галогенэтиламинокарбонилметил, цианометиламинокарбонилметил, или галогенэтиламинокарбонилэтил; или

R³ и R⁴ вместе образуют заместитель выбранный из группы, состоящей из:

и

где Z^A=водород, галоген, циано, галогенметил (CF₃).

В одном предпочтительном варианте осуществления в Формуле (I) T выбирают из

T-1 T-2 T-3 T-4 T-5 T-6 T-7 T-8 T-9 T-10 T-11 T-12 T-13 T-14 T-15 T-16 T-17 T-18 T-19 T-20 T-21 T-22

где в T-1, T-3 и T-4 радикал Y представляет собой водород, галоген, метил, галогенметил, этил, галогенэтил.

В предпочтительном варианте осуществления в Формуле (I) Q выбирают из

Q-1 Q-2 Q-3 Q-4 Q-5 Q-6 Q-7 Q-8 Q-9

где R³, R⁴, X и Z^A являются такими, как определено выше.

Z^B =

Z^B-1 Z^B-2 Z^B-3 Z^B-4 Z^B-5

Z^B-6 Z^B-7 Z^B-8 Z^B-9

Z^D =

Z^D-1 Z^D-2 Z^D-3 Z^D-4

Z^D-5 Z^D-6

Предпочтительные изоксазолиновые соединения формулы (I) для применения в настоящем изобретении представляют собой:

Особенно предпочтительными изоксазолиновыми соединениями для применения в настоящем изобретении являются

Более предпочтительное изоксазолиновое соединение для применения в настоящем изобретении имеет Формулу (II),

Формула II

в которой

R^1a, R^1b, R^1c независимо друг от друга представляют собой водород, Cl или CF₃, предпочтительно R^1a и R^1c являются Cl или CF₃ и R^1b представляет собой водород,

T представляет собой

T-1 T-2 T-3 T-20 T-21

в которых

Y представляет собой метил, бром, Cl, F, CN или C(S)NH₂, и

Q является таким, как описано выше.

В одном другом предпочтительном варианте осуществления в Формуле (II) R³ представляет собой H, и R⁴ представляет собой -CH₂-C(O)-NH-CH₂-CF₃, -CH₂-C(O)-NH-CH₂-CH₃, -CH₂-CH₂-CF₃ или -CH₂-CF₃

В предпочтительном варианте осуществления изоксазолиновое соединение представляет собой 4-[5-(3,5-Дихлорфенил)-5-трифторметил-4,5-дигидроизоксазол-3-ил]-2-метил-N-[(2,2,2-трифтор-этилкарбамоил)-метил]-бензамид (CAS RN 864731-61-3 - USAN флураланер).

В одном другом варианте осуществления изоксазолиновое соединение представляет собой (Z)-4-[5-(3,5-Дихлорфенил)-5-трифторметил-4,5-дигидроизоксазол-3-ил]-N-[(метоксиимино)метил]-2-метилбензамид (CAS RN 928789-76-8).

В одном другом варианте осуществления изоксазолиновое соединение представляет собой 4-[5-(3,5-дихлорфенил)-5-(трифторметил)-4H-изоксазол-3-ил]-2-метил-N-(тиэтан-3-ил)бензамид (CAS RN 1164267-94-0), который был раскрыт в WO2009/0080250.

В одном другом варианте осуществления изоксазолиновое соединение представляет собой Этанон 1-[5'-[(5S)-5-(3,5-дихлор-4-фторфенил)-4,5-дигидро-5-(трифторметил)-3-изоксазолил]спиро[азетидин-3,1'(3'H)-изобензофуран]-1-ил]-2-(метилсульфонил)-(Саролэйнер)(CAS RN-1398609-39-6).

В одном другом варианте осуществления изоксазолиновое соединение представляет собой 2-Тиофенкарбоксамид 5-((5S)-4,5-дигидро-5-(3,4,5-трихлорфенил)-5-(трифторметил)-3-изоксазолил)-3-метил-N-(2-осо-2-((2,2,2-трифторэтил)амино)этил)-(INN Лотилэйнер) (CAS RN-1369852-71-0).

В одном другом предпочтительном варианте осуществления изоксазолиновое соединение представляет собой 4-[5-[3-Хлор-5-(трифторметил)фенил]-4,5-дигидро-5-(трифторметил)-3-изоксазолил]-N-[2-оксо-2-[(2,2,2-трифторэтил)амино]этил]-1-нафталинкарбоксамид (CAS RN 1093861-60-9, USAN-афоксолэйнер), которое было раскрыто в WO2007/079162.

В одном другом варианте осуществления изоксазолиновое соединение представляет собой 5-[5-(3,5-Дихлорфенил)-4,5-дигидро-5-(трифторметил)-3-изоксазолил]-3-метил-N-[2-оксо-2-[(2,2,2-трифторэтил)амино]этил]-2-тиофенкарбоксамид (CAS RN 1231754-09-8), которое было раскрыто в WO2010/070068.

Изоксазолиновые соединения и их применение в качестве противопаразитарных средств, например, описаны в патентной заявке США US 2007/0066617, и Международных патентных заявках WO 2005/085216, WO 2007/079162, WO 2009/002809, WO 2009/024541, WO 2009/003075, WO 2010/070068 и WO 2010/079077.

Способ (или применение) этого изобретения включает в себя применение рацемических смесей, например, равных количеств энантиомеров таких изоксазолиновых соединений, как описано выше. В дополнение, способ этого изобретения включает изоксазолиновые соединения, которые являются обогащенными, в сравнении с рацемической смесью, энантиомером формулы 1. Также включены по существу чистые энантиомеры таких изоксазолиновых соединений.

При энантиомерном обогащении один энантиомер присутствует в более высоких количествах, чем другой, и степень обогащения может быть определена посредством выражения энантиомерного избытка ("ee"), который определяют как (2x-l)-100%, где x является мольной фракцией доминантного энантиомера в смеси (например, ee, равный 20% соответствует отношению энантиомеров, равному 60:40). Предпочтительно, композиции для применения в настоящем изобретении имеют по меньшей мере 50% энантиомерный избыток; более предпочтительно, по меньшей мере 75% энантиомерный избыток; еще более предпочтительно, по меньшей мере 90% энантиомерный избыток; и наиболее предпочтительно, по меньшей мере 94% энантиомерный избыток более активного изомера. Особенно следует отметить энантиомерно чистые варианты осуществления более активного изомера.

Изоксазолиновые соединения, как описано выше, могут содержать дополнительные хиральные центры. Способ этого изобретения включает в себя рацемические смеси, а также обогащенные и по существу чистые стереоконфигурации по этим дополнительным хиральным центрам.

Ссылка на изоксазолиновое соединение в этом описании включает его энантиомеры, соли и сольваты, а также N-оксиды, которые могут быть получены общепринятыми методами.

Под "лечением" или "лечить" или "обработкой" подразумевают нанесение или введение соединения или композиции животному, которое имеет инфестацию паразитами, для уничтожения или снижения числа паразитов, заражающих животное (устранения существующих паразитов). Эффект может быть, например, овицидным, ларвицидным, нимфицидным, или эффектом уничтожения только взрослых особей или их комбинацией. Эффект может проявляться непосредственно, т.е. уничтожая паразитов либо немедленно или протекая через некоторое время, например, когда происходит линька, или посредством уничтожения их яиц, или косвенно, например, уменьшая число отложенных яиц и/или показатель вывода.

"Эффективное количество" представляет собой количество изоксазолинового соединения, описанного выше, которое требуется для обработки инфестаций животных Demodex spp., т.е. для уменьшения или снижения числа паразитов на животном и/или, чтобы ингибировать развитие паразитарных инфекций на животном, в целом или отчасти.

Это количество легко определяют при наблюдении или обнаружении числа паразитов на животном, как до, так и после введения изоксазолинового соединения, описанного выше, таким животным, например, подсчитанное количество паразитов снижается, после первого введения, на от 5% до приблизительно 100%, предпочтительно более, чем на 50%, более, чем на 70%, более, чем на 90%, более, чем на 95%, более, чем на 99%, особенно, на 100%.

Предпочтительно, эффективное количество приводит к микроскопическому излечению, т.е. клещи Demodex spp. отсутствуют в глубоких кожных соскобах пораженной кожи (предпочтительно, трех-пяти соскобах наиболее тяжело пораженных областей), предпочтительно, взятых в нескольких временных отметках.

Эффективное количество для лечения генерализованного демодекоза дополнительно приводит к снижению или устранению клинических признаков демодекоза, как описано в этой заявке.

Обычно эффективное количество (дозировка) изоксазолиновых соединений, находятся между 1 мг/кг массы тела обработанного животного и 50 мг/кг массы тела, или от 5 мг/кг массы тела до 45 мг/кг мт, или от 10 мг/ кг мт до 40 мг/кг мт, или от 20 до 30 мг/кг мт. В одном варианте осуществления эффективная дозировка составляет 25 мг/кг массы тела.

В одном варианте осуществления единственную дозу эффективного количества изоксазолинового соединения вводят млекопитающему, особенно собаке, которое является зараженным клещами Demodex spp.

В одном варианте осуществления единственную дозу эффективного количества изоксазолинового соединения вводят собаке, у которой был диагностирован генерализованный собачий демодекоз.

В одном другом варианте осуществления две дозы эффективного количества изоксазолинового соединения вводят млекопитающему, особенно собаке, которая является зараженной клещами Demodex spp.

В одном варианте осуществления две дозы эффективного количества изоксазолинового соединения вводят собаке, у которой был диагностирован генерализованный собачий демодекоз.

В одном другом варианте осуществления три дозы эффективного количества изоксазолинового соединения вводят млекопитающему, особенно собаке, которая является зараженной клещами Demodex spp.

В одном варианте осуществления три дозы эффективного количества изоксазолинового соединения вводят собаке, у которой был диагностирован генерализованный собачий демодекоз.

Предпочтительным является системное введение изоксазолиновых соединениий. "Системное введение" представляет собой введение на участке, удаленном от участка, на котором обитает по меньшей мере часть целевых паразитов. При системном введении, по меньшей мере часть изоксазолинового соединения достигает целевого паразита через кровоток животного-реципиента, другие жидкие среды организма (лимфатические жидкие среды) и/или ткани (например, кожу или жировую ткань). Это отличается от ʺконтактной активностиʺ, где поверхность организма паразита непосредственно подвергается воздействию изоксазолинового соединения. Обычно, паразит поглощает системно вводимый изоксазолин наряду с кровью животного-реципиента, другими жидкостями организма и/или тканью. Системное введение может достигаться в нескольких формах, например, посредством перорального, парентерального или местного введения, где изоксазолиновое соединение всасывается чрескожно.

В нескольких вариантах осуществления, изоксазолиновое соединение системно вводят посредством перорального пути в стандартной дозированной форме, такой как, например, мягкая или твердая капсула, пилюля, порошок, гранулы, таблетка (например, жевательная таблетка), паста, раствор, суспензия (водная или неводная), эмульсия (масло-в-воде или вода-в-масле), эликсир, сироп, болюс, жидкая лекарственная форма для перорального введения, или через пищу или питьевую воду животного-реципиента. Альтернативно, пероральное введение может выполняться через пищу или питьевую воду животного-реципиента, например, средство может быть тщательно диспергировано в пище животного-реципиента, применяться как подкормка, или в форме мелких гранул или жидкости, которую добавляют в готовый корм.

Одной формой перорального введения является дозированная форма, например, жевательная композиция, такая как жевательная таблетка. Примеры жевательных таблеток, содержащих изоксазолиновые соединения формулы (I), были описаны в WO2013/150052 и WO2013/150055. Композиция жевательных таблеток, которая раскрыта в примерах этих документов, включена посредством ссылки. Альтернативные жевательные таблетки описаны в WO2013/119442.

Пероральные ветеринарные композиции в форме ʺжевательной таблеткиʺ, иногда называемые ʺмягкие жевательные композицииʺ или "мягкая жвачка", обычно являются удобными для введения некоторым животным, в частности, кошкам и собакам, предпочтительно, собакам, и могут эффективно применяться для дозирования ветеринарных препаратов этим животным.

Подразумевают, что термины ʺЖевательная таблеткаʺ, "Мягкая жвачка" или "Мягкий жевательный фармацевтический продукт" означают фармацевтическую стандартную дозу, которая является твердой при комнатной температуре, и, которая после перорального введения является мягкой для жевания животным, и, которая функционально является жевательной, поскольку продукт имеет некоторую пластическую текстуру во время процесса разжевывания во рту. Такие мягкие жвачки имеют мягкость, которая является аналогичной приготовленному измельченному мясному фаршу. Жевательная таблетка или мягкая жвачка содержит носитель и другие неактивные ингредиенты.

Изоксазолиновое соединение альтернативно (или дополнительно) может системно вводиться местно с использованием трансдермальной лекарственной формы (т.е., лекарственной формы, которая проходит через кожу). Альтернативно (или дополнительно), композиция может системно вводиться местно через слизистые оболочки. Изоксазолиновая композиция альтернативно (или дополнительно) может системно вводиться парентерально, таким образом, как посредством внутримышечной инъекции, внутривенной инъекции, подкожной инъекции, имплантата (например, подкожного имплантата), инфузии, болюса и т.д.

Животные могут получать изоксазолиновое соединение, определенное ранее, один раз, два раза или три раза до прекращения инфестации клещом Demodex и успешного лечения генерализованного демодекоза. Одна обработка обеспечивает эффективность против клещей Demodex spp. в течение по меньшей мере 4 недель, 8 недель, 12 недель, 16 недель или 20 недель или 24 недель.

Как правило, изоксазолиновое соединение может вводиться всем видам животных, которые имеют заражение Demodex spp. или которым требуется лечение демодекоза.

Реципиентом продукта могут быть сельскохозяйственные животные, например, овцы, крупный рогатый скот, свиньи, козы; или животные-домашние питомцы, например, собаки, кошки или лошади. Особенно предпочтительным является применение у животных-домашних питомцев, например, собак или кошек, особенно собак.

Клещи Demodex spp., которые могут быть уничтожены посредством применения согласно настоящему изобретению, представляют собой, например, Demodex canis, Demodex injai, Demodex cornei, Demodex. cati, Demodex gatoi, Demodex bovis, Demodex ovis, Demodex caprae, Demodex aries.

"Инфестация клещами Demodex" относится к присутствию паразитов в количествах, которые представляют риск вреда для животных.

Посредством применения изоксазолиновых соединений, как описано в этой заявке, можно избежать недостатков предшествующего уровня техники, так как единственное (или максимально два или три раза, в зависимости от применяемого изоксазолинового соединения) введение соединения будет необходимым для достижения желательного эффекта.

Демодекоз диагностируют посредством клинической оценки и глубоких кожных соскобов, которые анализируют, используя микроскоп, на предмет присутствия клещей. Демодекоз считается генерализованным, когда наблюдают пять или более областей локализованного заболевания, или наблюдают пододемодекоз на двух или более ступнях, или, когда вовлеченной является полная область тела. Демодекоз может также быть классифицирован как либо ювенильный (собаки в возрасте до 18 месяцев), с наступлением у взрослых особей (собаки обычно старше четырех лет без предыдущей истории болезни), или хронический генерализованный (персистирующее заболевание в течение по меньшей мере шести месяцев).

В зависимости от применяемого конкретного изоксазолинового соединения, введение позволяет полностью ингибировать или уничтожить клещей Demodex spp., присутствующих на животном, которые вызывают демодекоз. Предпочтительно, микроскопическое излечение, т.е. множественные кожные соскобы без каких-либо клещей Demodex (яиц, личинок, нимф и взрослых особей) получают посредством введения изоксазолинового соединения. Предпочтительно, только одно введение является необходимым для микроскопического излечения.

Введение изоксазолинового соединения, например флураланера, способно уменьшить клинические признаки демодекоза, и, предпочтительно, по меньшей мере один из дерматологических признаков, например, повреждения кожи, такие как эритема, гнойники, пустулы, чешуйки и струпья, эксудацию, изъязвление и выпадение волос вплоть до алопеции, снижается существенно по сравнению с ситуацией до обработки или без обработки.

Введение изоксазолинового соединения, например, флураланера, способно обеспечить лечение вместе с симптоматической терапией (например, антибиотиками или антисептиками) проявление системных симптомов, таких как генерализованная лимфоаденопатия, летаргия и лихорадка.

Лечение генерализованного демодекоза у собак в большинстве случаев требует вспомогательной терапии. В дополнение к эффективной акарицидной терапии изоксазолиновыми соединениями согласно настоящему изобретению, для успешного лечения может быть предпринято лечение сопутствующих бактериальной кожной инфекции, внутренних паразитов и существующих основополагающих системных заболеваний.

Изоксазолиновое соединение, описанное в этой заявке, может применяться одновременно с подходящими антибиотиками для борьбы с вторичной бактериальной кожной инфекционной пиодермией, которая обычно ассоциирована с генерализованным демодекозом. Поверхностная пиодермия может излечиваться пероральными антибиотиками или местными антибиотиками. В некоторых случаях местная обработка бензоилпероксидом или шампунями на основе хлоргексидина будет применимой для борьбы с бактериальными вторичными инфекциями.

ПРИМЕР

Эффективность действия перорально вводимого флураланера (в виде жевательных таблеток Bravecto® с 13,64% флураланера) сравнивали с местно применяемым Advocate® (10% имидаклоприда/2,5% моксидектина) против генерализованного демодекоза у собак.

Способы

План исследования

Исследование планировали как параллельно-групповое, слепое, рандомизированное, одноцентровое и с положительным контролем по эффективности действия. Bravecto®, вводимое в виде жевательных таблеток единственный раз, представляло собой тестируемый продукт, а Advocate®, вводимое три раза с 28-дневными интервалами (в соответствии с этикеткой продукта), было включено как положительный контроль.

Тестируемая система представляла собой индивидуальную собаку. Собаки с клиническими признаками генерализованного демодекоза, например, эритемой, выпадением волос, акне, фолликулярными пустулами и струпьями были включены в исследование с добровольного согласия их владельцев и были возвращены их владельцам по завершении фазы испытаний на животных.

Собаки, включенные в исследование, в основном, были метисами и принадлежали к обоим полам, в возрасте свыше 12 месяцев, с массой тела по результатам взвешивания между 3,5 и 13,7 кг, и, за исключением клинических признаков генерализованного демодекоза, собаки были здоровы, и настолько, насколько можно было определить, собаки не подвергались обработке глюкокортикоидом или каким-либо продуктом с акарицидным эффектом в течение по меньшей мере 12 недель перед включением. Дополнительным требованием для включения было то, что глубокие кожные соскобы, проводимые до обработки, были положительными на клещей Demodex spp.

Шестнадцать собак (7 самцов и 9 самок), ранжированные в пределах половой принадлежности в убывающем порядке по индивидуальному количеству клещей до обработки были включены в исследование и распределены по двум равным группам. Каждую собаку содержали индивидуально в течение продолжительности исследования в условиях домашнего содержания/выгула, без контакта между животными, и кормили один раз в день в соответствии с рекомендациями изготовителя корма. Пригодная для питья водопроводная вода была доступна ad libitum.

Каждую собаку акклиматизировали к условиям содержания и поддержания в течение по меньшей мере 14 дней до обработки. В качестве меры предосторожности всех собак обрабатывали подкожно антибиотиком (цефовецином)), подходящего для лечения пиодермии, в Дни -14, -1, 13 и 27. Дополнительно, в Дни -14 и 27, глубокие кожные биопсийные пробы брали от каждой собаки после седации. Биопсийные пробы показали, что эксудативная пиодермия присутствовала у двух собак в каждой группе в День -14, и, что она проходила в День 27. Присутствовали хронический дерматит, эпидермальное акноэ и гиперкератоз, и не изменялись у всех собак в обоих случаях. Никаких воспалительных клеток или бактерий не наблюдали в биопсийных пробах в День 27, и антимикробную терапию останавливали. Дважды во время акклиматизации (День -14 и День -1) и в Дни 27/28, 56 и 84 после обработки каждую собаку клинически обследовал ветеринар.

Собак взвешивали на калиброванных и верифицированных электронных весах в Дни -2, 13, 27, 41, 55, 69 и 84 для расчета дозы для обработки, для применения седативных средств для взятия кожных соскобов и для документирования массы тела во время периода исследования. Наблюдения за общим состоянием здоровья проводили ежедневно на протяжении всего периода исследования.

Обработка

В День 0, собак одной группы обрабатывали один раз перорально жевательными таблетками Bravecto®, на основании индивидуальной массы тела собак, чтобы достичь минимальной дозы, равной 25 мг/кг массы тела и эффективности действия в течения 12 недель после обработки. Жевательные таблетку (таблетки) вводили через 20 (± 10) минут после предложения корма, помещая в заднюю часть полости рта над языком для инициации проглатывания.

Также в День 0, доступное для приобретения Advocate® вводили местно другой группе собак (положительные контроли) в соответствии с этикеткой продукта. Вследствие 28-дневной продолжительности эффективности действия Advocate®, этих собак повторно обрабатывали в День 28 и 56. В положении стоя, у собаки, отделяли покрытие пока кожа не становилась видимой, и Advocate® вводили непосредственно на кожу.

Обе обработанные группы наблюдали до обработки и повторно ежечасно в течение четырех часов после обработки последнего животного, на предмет возможных нежелательных явлений. Персонал, проводящий наблюдения после обработки работал ʺвслепуюʺ по отношению к обработке.

Оценки клещей

Глубокие кожные соскобы (~ 4 см²) были взяты с пяти участков на каждой собаке в Дни -4, 28, 56 и 84 и были исследованы под стереомикроскопом на присутствие клещей Demodex spp. Кожные соскобы собак, обработанных с использованием Advocate®, проводили в День 28 и День 56, перед нанесением второй или третьей обработки, соответственно. Соскобы с одних и тех же участков и/или участков новых повреждений производили при каждом последующем обследовании.

Клинические признаки и степень демодектических повреждений на каждой собаке оценивали в Дни, когда производили кожные соскобы, и регистрировали в стандартизованной форме. Следующие параметры оценивали и схематически наносили на силуэт (левосторонний и правосторонний) для каждой собаки: области тела с проявлением эритемы; области тела, покрытые пустулами, чешуйками и струпьями; области тела с выпадением волос (1=небольшое разреживание волос; 2=заметное выпадение волос; 3=отсутствие волос). Цветные фотографии, иллюстрирующие степень повреждений и их разрешение, получали для каждой собаки в День -4 и последовательно с приблизительно месячными интервалами до Дня 84 после обработки. Проводили полуколичественную оценку вторичного роста волос, сравнивая волосяной покров до и после 12-недельной продолжительности исследования.

Оценка эффективности действия

Первичной переменной оценки в исследовании являлось снижение числа клещей, подсчитанное в кожных соскобах (объединенных незрелых и взрослых живых клещей) после обработки.

Эффективность действия рассчитывали, используя геометрическое среднее по формуле Эббота:

Эффективность действия (%)=(Mpre - Mpost)/Mpre x 100

где Mpre составляло среднее число клещей до обработки, и Mpost означало количество клещей после обработки.

Дополнительно, группы сравнивали, используя ANOVA (методика обоаботки GLM в SAS) с эффектом от обработки после логарифмического преобразования данных по клещам (подсчет+1).

Одну собаку, обработанную Advocate®, исключили из исследования в День 59 вследствие злокачественной лимфомы. Результаты, относящиеся к этой собаке до Дня 56, перед ее исключением из исследования в День 59, были включены в результаты других собак в группе, обработанной Advocate®.

Результаты

Никаких нежелательных явлений, рассматриваемых как относящиеся к пероральной обработке жевательными таблетками Bravecto® или местной обработке с использованием Advocate®, не неблюдали у какой-либо собаки.

Обработка жевательными таблетками Bravecto® приводила к снижению среднего числа клещей, присутствующих в кожных соскобах, равному 99,8% в День 28, и равному 100% в Дни 56 и 84 после обработки. Обработка с использованием Advocate® приводила к снижению среднего числа клещей, присутствующих в кожных соскобах, равному 98,0% в День 28, 96,4% в День 56, и равному 94,7% в День 84. Статистически значимое (P ≤ 0,05) меньшее число клещей было обнаружено на собаках, обработанных Bravecto® в сравнении с собаками, обработанными Advocate® (Таблица 1).

Таблица 1: Геометрическое среднее снижений количества клещей Demodex spp. у собак, обработанных однократно перорально Bravecto® или местно Advocate® три раза с 28-дневными интервалами

^a Геометрическое среднее

^b Количество клещей считали без одной собаки, которую усыпили в День 59

^c Неприменимо

Показатель наличия эритематозных бляшек на собаках, обработанных однократно перорально жевательными таблетками Bravecto® снижался от 62,5% собак в День -4 до обработки до 12,5% собак через 12 недель после начала обработки.

Показатель наличия струпьев, пустул или чешуек снижался от 100% до обработки до 12,5% через 12 недель после начала обработки.

В сравнении, показатель наличия эритематозных бляшек на собаках, обработанных Advocate® три раза при 28-дневном интервале, снижался от 87,5% до 0%, а показатель наличия струпьев, пустул и чешуек снижался от 100% до 42,9% (Таблица 2).

Таблица 2. Снижение показателей наличия дерматологических изменений у собак с генерализованным демодекозом после обработки либо Bravecto® или Advocate®

^a Собак обрабатывали однократно перорально в День 0

^b Собак обрабатывали местно в День 0, в День 28 и снова в День 56. Оценки кожи проводили до обработки.

^c Количество клещей считали без одной собаки, которую усыпили в День 59.

Вторичный рост волос в сравнении с долей площади поверхности тела, покрытой волосами до обработки, обобщенно представлен в Таблице 3. В Дни 56 и 84 после начала обработки, вторичный рост волос на большинстве собак в обеих группах превышал волосяной покров собак на 90% в сравнении с оценкой до обработки.

Таблица 3. Вторичный рост волос на собаках с генерализованной демодектической чесоткой после обработки Bravecto® или Advocate®

^a Собак обрабатывали однократно перорально в День 0.

^b Собак обрабатывали местно в День 0, в День 28 и повторно в День 56. Оценки кожи проводили до обработки.

^c Количество клещей считали без одной собаки, которую усыпили в День 59.

Масса тела каждой собаки увеличивалась аналогично в обеих группах во время периода исследования.

Выводы

Единственное пероральное введение жевательных таблеток Bravecto® (13,64% флураланера) имеет высокую эффективность против генерализованного демодекоза, причем никаких клещей не могли обнаружить через 56 и 84 дней после обработки. Для сравнения, Advocate® (10% имидаклоприда/2,5% моксидектина) вводимое три раза с 28-дневными интервалами, также является высокоэффективным против генерализованного демодекоза, но большинство собак все еще были переносчиками клещей во всех временных точках оценки. Обе обработки приводили к заметному снижению повреждений кожи и увеличению роста волос через 12 недель после первоначальной обработки.