ПРОИЗВОДНЫЕ 2-АМИНО-ПИРИМИДИНА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ JNK

Настоящее изобретение в целом относится к области медицинской химии и лечению воспалительных нарушений. В частности, настоящее изобретение относится к пролекарствам ингибиторов JNK, способам изготовления указанных ингибиторов, а также к соответствующим способам, лекарственным формам и композициям для ингибирования JNK и лечения JNK-опосредованных расстройств, и т.д.

JNK, c-Jun N-терминальные киназы (JNKs), являются членами семейства митоген-активируемых протеинкиназ, также как и р38 и киназы, регулируемые внеклеточными сигналами (ERKs). Были идентифицированы три различных гена (jnk1, jnk2 и jnk3), кодирующих 10 сплайс-варианта. JNK1 и JNK2 экспрессируются в различных тканях, тогда как JNK3 в основном экспрессируется в нейронах и, в меньшей степени, в сердце и семенниках. Члены JNK-семейства активируются провоспалительными цитокинами, такими как фактор некроза опухолей альфа (TNF-альфа) и интерлейкин-1бета (IL-1бета), а также под воздействием стрессов, обусловленных факторами окружающей среды. Активацию JNKs опосредуют киназы, вышестоящие по сигнальной цепочке, МКК4 и МКК7, за счет двойного фосфорилирования Thr-183 и Tyr-185. Было показано, что МКК4 и МКК7 могут активироваться различными вышестоящими по сигнальной цепочке киназами, включая МЕКК1 и МЕКК4, в зависимости от внешних сигналов и клеточного окружения. Специфичность JNK-сигнализации достигается за счет образования JNK-специфичного сигнального комплекса, включающего множественные компоненты киназного каскада, с вовлечением каркасных белков, которые называют JNK-взаимодействующими белками. Было показано, что JNKs играют важную роль в воспалительном процессе, функции Т-клеток, апоптозе и подавлении программы гибели клеток, за счет фосфорилирования специфических субстратов, включая факторы транскрипции, например c-Jun (компонент семейства белков-активаторов 1 (АР1)) и ATF2, а также не-факторы транскрипции, такие как IRS-1 и BcI-2. Считают, что избыточная активация JNK представляет собой важный механизм аутоиммунных, воспалительных, метаболических, неврологических расстройств, а также рака.

Ревматоидный артрит (RA) является системным аутоиммунным заболеванием, которое характеризуется хроническим воспалением суставов. Помимо опухания суставов и боли, вызванной воспалительным процессом, у большинства пациентов с RA в конечном счете развиваются истощающие повреждения и деформация суставов. Целый ряд убедительных фармакологических и генетических доказательств, основанных на клеточных и животных моделях, наглядно показывают значимость и важность активированной JNK в патогенезе RA. Во-первых, патологическая активация JNK была обнаружена как в человеческих артритных суставах у пациентов с RA, так и в артритных суставах грызунов в животных моделях артрита. Кроме того, ингибирование активации JNK селективными ингибиторами JNK блокировала продукцию провоспалительных цитокинов и ММР в синовиоцитах человека, макрофагах и лимфоцитах. Важно, что введение селективных ингибиторов JNK крысам с вызванным адъювантом артритом или мышам с коллаген-индуцированным артритом эффективно защищало суставы от разрушения и существенно снижало опухание лапок за счет ингибирования экспрессии цитокинов и коллагеназы.

Астма является хроническим воспалительным заболеванием дыхательных путей, которое характеризуется наличием клеточного воспалительного процесса и бронхиальной гиперчувствительностью, связанной со структурными изменениями в дыхательных путях. Было показано, что это заболевание может быть вызвано многими типами клеток в дыхательных путях, включая Т-лимфоциты, эозинофилы, тучные клетки, нейтрофилы и клетки эпителия. Выяснилось, что JNKs представляют собой перспективную терапевтическую мишень для астмы, по результатам недавнего предварительного исследования клинической эффективности: было показано, что ингибиторы JNK в существенной мере блокируют продукцию RANTES в активированных человеческих гладкомышечных клетках дыхательных путей. Что еще более важно, ингибиторы JNK продемонстрировали хорошую эффективность в хронических моделях на крысах и мышах в отношении их способности снижать клеточную инфильтрацию, воспаление, гиперчувствительность, пролиферацию гладкомышечных клеток и выработку IgE. Эти наблюдения говорят в пользу важной роли JNKs в аллергическом воспалении, в процессе перестройки дыхательных путей, связанном с гиперчувствительностью. Таким образом, ожидается, что блокирование активности JNK будет иметь преимущество при лечении астмы.

Диабет 2 типа является наиболее серьезным и распространенным метаболическим заболеванием, которое характеризуется инсулиновой резистентностью и нарушением секреции инсулина, как результат хронического вялотекущего воспаления и нарушенного липидного обмена, связанного с оксидативным стрессом. Сообщалось, что активность JNK аномально повышена в различных диабетических тканях-мишенях при состояниях тучности и диабета.

Активация пути JNK за счет провоспалительных цитокинов и оксидативного стресса негативно регулирует инсулиновую сигнализацию путем фосфорилирования субстрата инсулинового рецеаптора-1 (IRS-1) по Ser³⁰⁷, и таким образом вносит вклад в инсулиновую резистентность и толерантность к глюкозе. Было представлено убедительное генетическое доказательство с помощью изящно выполненных исследований на животной модели с использованием jnk^-/- мышей, скрещенных либо с генетически (ob/ob) тучными мышами, либо с тучными по диете мышами. Потеря функций JNK1 (JNK1^-/-), но не JNK2 (jnk2^-/-), защищало тучных мышей от прибавки в весе, повышало устойчивость уровня глюкозы в крови и увеличивало плазменный уровень инсулина. Эти исследования показали потенциальную полезность ингибитора JNK в лечении тучности/диабета 2 типа.

Нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера (AD), Паркинсона (PD) и инсульт, представляют собой заболевания ЦНС характеризуется потерей синапсов, атрофией и гибелью нейронов. Было показано, что путь JNK, приводящий к активации c-Jun, имеет отношение к апоптозу изолированных первичных эмбриональных нейронов и множественных линий нервных клеток при индукции различных стимулов. Избыточная активация JNK наблюдалась в человеческом мозге пациентов с AD или срезах мозга грызунов, полученных в животных моделях нейродегенеративных заболеваний. Например, было обнаружено повышенное количество фосфо-JNK в аутопсийных образцах мозга от пациентов с AD. Введение JNK-ингибиторного пептида (JIP-1 пептид) в модели AD на грызунах, вызванного введением (3-амилоидного пептида, предотвращало нарушение синаптической пластичности. В животных моделях PD (модель МРТР) наблюдался повышенный уровень фосфо-МКК4 и фосфо-JNK, сопутствующий гибели нейронов. Аденовирусный перенос гена JNK-ингибиторного пептида (пептид JIP-1) в стриатум мышей уменьшал поведенческие расстройства за счет ингибирования МРТР-зависимой JNK, активации c-Jun и каспазы, таким образом блокируя гибель нейронов в черном веществе. Кроме того, в животной модели ишемического инсульта, индуцированного глутаматной эксайтотоксичностью, мыши, дефицитные по JNK3, но не JNK1 или JNK2, были устойчивы к эпилептическим припадкам или гибели нейронов, опосредованным дигеновой кислотой (антагонистом глутаматного рецептора). Эти данные говорят в пользу того, что JNK3 в основном ответственен за глутаматную эксайтотоксичность, которая является важным компонентом при состояниях ишемии. Обобщая вышесказанное, появились данные, которые свидетельствуют в пользу JNKs как привлекательной мишени для многих заболеваний ЦНС, связанных с гибелью нервных клеток.

Неконтролируемые клеточный рост, пролиферация и миграция, в совокупности с разрегулированным ангиогенезом приводит к образованию злокачественных опухолей. Возможно, путь JNK-передачи сигнала действует не только при апоптозе; недавно было показано, что хроническая активация JNK, приводящая к активации АР1, вносит свой вклад в выживаемость раковых клеток конкретных типов, таких как клетки глиальной опухоли и BCL-ABL-трансформированные В-лимфобласты. В случае глиальных опухолей наблюдается повышенная активность JNK/AP1 в большинстве первичных образцов опухолей мозга. Было показано, что в случае трансформированных В-лимфобластов, BCL-ABL активируют путь JNK, который в свою очередь активирует экспрессию анти-апоптотического гена bcI-2. Примечательно, что мультилекарственная резистентность и гиперпролиферация, наблюдаемые у пациентов с трудно поддающейся лечению AML (острой миелоидной лейкемией), связана причинно-следственной связью с постоянной активностью JNK, присутствующей в таких AML-образцах. Результатом активации JNK в лейкемических клетках является индукция экспрессии эффлюксных насосов, таких как mdr1 и MRP1, ответственных за мультилекарственную резистентность. Кроме того, при активации JNK-пути также происходит активация генов с преимуществом выживания в ответ на оксидативный стресс, включая глутатион-3-трансферазу и γ-глутамилцистеинсинтазу.

Заболевания почек характеризуются потерей функции нефронов, которая вызвана прогрессирующим гломерулосклерозом и тубулоинтерстициальным фиброзом. Почечная недостаточность может развиваться как следствие многих состояний, включая воспаление, гипертензию, диабет, или же острого повреждения тканей, вызванного антибиотиками, контрастных агентов или другими веществами с нефротоксическим действием. Было показано, что JNK-сигнализация была активирована в патологических образцах, полученных для многих почечных заболеваниях человека, включая иммуно- и не-иммуно-обусловленный гломерулонефрит, диабетическую нефропатию, гипертензию, острое повреждения (1), и, по-видимому, играет сигнальную роль в поликистозной болезни почек (2). Убедительное доказательство центральной роли JNK и терапевтического потенциала ингибиторов JNK подтверждается исследованиями на животных моделях повреждения почек. JNK повышен в крысиной модели гломерулонефрита, индуцируемого антителами к клубочковой базальной мембране, и функция почек была улучшена специфическим ингибитором как при острых, так и хронических типах заболевания (3). JNK также повышен у крыс линии DahI, чувствительных к развитию гипертензии при солевой диете - модели гипертензивной почечной недостаточности (4), а также в моделях ишемически-реперфузионного повреждения почек (5, 6). Клеточными механизмами, за счет которых JNK может вносить вклад в повреждение почек, являются, частично, активация провоспалительных медиаторов в макрофагах, а также активация профибротических, и проапоптотических путей непосредственно в клетках почечных клубочков и тубулярного эпителия (7). Способность улучшать функцию почек за счет ингибирования JNK в моделях многих заболеваний говорит в пользу того, что JNKs являются привлекательными мишенями для терапии заболеваний почек различной этиологии.

Настоящее изобретение предлагает соединение формулы I

и его фармацевтически приемлемые соли, в которой:

m равно от 0 до 2;

n равно от 0 до 2;

p равно от 0 до 3;

X представляет собой СН или N;

каждый из R¹ независимо представляет собой: водород или С_1-6алкил;

каждый из R² независимо представляет собой: С_1-6алкил, C_1-6алкокси-группу, гало-С_1-6алкил или гало-C_1-6алкокси-группу;

R³ представляет собой: C_1-6алкилсульфонил-C_1-6алкил, тетрагидротиофенил-1,1-оксид-C_1-6алкил или тетрагидротиопиран-1,1-оксид-С_1-6алкил;

каждый из R⁴ независимо представляет собой: C_1-6алкил, C_1-6алкокси-группу, гало-C_1-6алкил или гало-C_1-6алкокси-группу;

R⁵ представляет собой группу формулы (а) или (b):

, ;

в которой:

q равно 0 или 1;

r равно 0 или 1;

Y представляет собой: NR⁹ или CR¹⁰R¹¹;

каждый из R⁶ и R⁷ независимо представляет собой: водород, карбокси-группу, карбокси-C_1-6алкиловый эфир или C_1-6алкил, или же R⁶ и R⁷ совместно образуют C_1-2алкиленовую группу;

R⁸ представляет собой водород или C_1-6алкил;

R⁹ представляет собой водород или C_1-6алкил;

R¹⁰ представляет собой водород или C_1-6алкил и

R¹¹ представляет собой водород, C_1-6алкокси-группу, NH₂C(O)-, C_1-6алкил; гидрокси-C_1-6алкил; карбокси-группу; карбокси-C_1-6алкил; карбокси-C_1-6-алкиловый эфир или карбокси-C_1-6-алкил-C_1-6-акиловый эфир.

Настоящее изобретение также предлагает способ получения соединения, представляющего собой объект данного изобретения, и способ применения такого соединения для лечения JNK-обусловленных заболеваний и состояний.

Все публикации, процитированные в настоящем описании, включены в него полностью посредством ссылки.

Определения

Если не указано иное, ниже следующие термины, использованные в данной Заявке, включая описание и формулу изобретения, имеют значение, раскрытое далее. Следует отметить, что использованные в описании и прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа включают также и формы множественного числа, если из контекста однозначно не следует иное. Таким образом, используемая в данном тексте фраза «сущность» относится к одной или более таких сущностей; например, «соединение» относится к одному или более соединений или, по меньшей мере, к одному соединению. В связи с этим, термины "один или более" и "по меньшей мере один" можно использовать в данном тексте как равнозначные.

Используемые в данном описании, как в промежуточных фразах, так и в тексте формулы изобретения, термины "включает(ют)" и "включающий" следует интерпретировать как не имеющие ограничивающее значение. Это означает, что эти термины следует интерпретировать равнозначно фразам "имеющий по меньшей мере" или "включающий по меньшей мере". Термин "включающий", в тех случаях когда он использован в контексте способа, означает, что данный способ включает по меньшей мере указанные стадии, но может включать и дополнительные стадии. Термин "включающий", если он используется в контексте соединения или композиции, обозначает, что данное соединение или данная композиция включает по меньшей мере указанные признаки или компоненты, но может включать также и дополнительные признаки или компоненты.

Если не указано иное, используемое в данном тексте слово «или» используется во "включающем" смысле "и/или", а не в "исключающем" смысле "или/или".

В данном описании термин "независимо" используется для указания того, что переменная употребляется в каждом случае безотносительно наличия или отсутствия переменной, имеющей то же самое или иное значение в составе одного и того же соединения. Таким образом, в соединении, в котором R" встречается дважды и определяется как "независимо углерод или азот", оба радикала R" могут представлять собой углерод, оба радикала R" могут представлять собой азот, или один из радикалов R" может представлять собой углерод, а второй - азот.

В тех случаях, когда любая из переменных (например m, n, p, q, Q, r, R¹, R², R³, R⁴, X, X¹, X², X³, X⁴, X⁵, Y¹, Y², Z¹ и Z²) встречается более одного раза в любой части формулы, изображающей и описывающей соединения, используемые или заявленные в настоящем изобретении, их значение в каждом случае не зависит от их значений в любом другом случае. Кроме того, комбинации заместителей и/или переменных допустимы только при условии, что получаемые соединения представляют собой устойчивые соединения.

Каждый из символов "*" на конце связи или линия "^--", проведенная через связь, обозначает место присоединения функциональной группы или другой химической частицы к остальной части молекулы, частью которой она является. Так, например:

MeC(=O)OR⁴ whe, где = от или .

Связь, проведенная внутрь циклической системы (в отличие от присоединенной к определенному атому) указывает на то, что эта связь может быть присоединена к любому подходящему кольцевому атому.

Используемые здесь термины "возможно" или "как вариант" обозначают, что описываемые далее событие или обстоятельство могут иметь, но не обязательно имеют место, и что такое описание включает примеры, в которых указанные событие или обстоятельство не имеют место. Например, "возможно, замещен" обозначает, что такая, возможно, замещенная группа может включать водород или заместитель.

Используемый в данном тексте термин "примерно" обозначает «приблизительно», «в районе», «грубо» или «около». Если термин "примерно" используется совместно с численным диапазоном, он модифицирует этот диапазон путем расширения его границ выше и ниже указанных численных значений. Обычно термин "примерно" используется в данном тексте с целью преобразования численной величины выше и ниже указанной величины с колебанием в 20%.

Некоторые соединения по настоящему изобретению могут проявлять таутомеризм. Таутомерные соединения могут существовать в виде двух или более взаимопревращаемых молекул. Прототропные таутомеры возникают при миграции ковалентно связанного атома водорода между двумя атомами. Таутомеры, как правило, существуют в равновесии, и попытки выделить индивидуальные таутомеры обычно приводят к смеси, химические и физические свойства которых соответствуют свойствам смеси соединений. Положение равновесия зависит от химических характеристик молекулы. Например, у многих алифатических альдегидах и кетонах, например в ацетальдегиде, преобладает кето-форма, в то время как у фенолов преобладает енольная форма.

Используемые в данном описании технические и научные термины имеют обычное значение, понятное специалисту в той области техники, к которой относится настоящее изобретение, если не определено иное. В настоящем описании даны ссылки на различные методики и материалы, известные специалисту в данной области техники. Стандартные справочные издания, в которых изложены общие принципы фармакологии, включают: Goodman and Gilman′s The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10^th Ed., McGraw Hill Companies Inc., New York (2001). При осуществлении настоящего изобретения можно использовать любые подходящие материалы и/или способы, известные специалисту в данной области техники. Однако в настоящей Заявке описаны предпочтительные материалы и способы. Материалы, реагенты и т.д., на которые даны ссылки в нижеследующем описании и примерах, можно получать из коммерческих источников, если не указано иное.

Определения, раскрытые здесь, можно применять для получения химически корректных комбинаций, таких как "гетероалкиларил", "галоалкилгетероарил", "арилалкилгетероциклил", "алкилкарбонил", "алкоксиалкил" и т.п. Если термин "алкил" используется как суффикс, следующий за другим термином, как, например, в случае "фенилалкил" или "гидроксиалкил", имеется в виду, что алкильная группа, раскрытая выше, содержит один или два заместителя, выбранных из другой конкретной обозначенной группы. Так, например, термин "фенилалкил" относится к алкильной группе, содержащей один или два фенильных заместителя, и, таким образом, включает бензил, фенилэтил и бифенил. "Алкиламиноалкил" представляет собой алкильную группу, содержащую один или два алкиламино-заместителя. "Гидроксиалкил" включает 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 1-(гидроксиметил)-2-метилпропил, 2-гидроксибутил, 2,3-дигидроксибутил, 2-(гидроксиметил), 3-гидроксипропил и т.д. Соответственно, Используемый в данном тексте термин "гидроксиалкил" обозначает подгруппу гетероалкильных групп, раскрытых ниже. Термин -(ар)алкил относится как к незамещенной алкильной, так и к аралкильной группе. Термин (гетеро)арил или (гет)арил относится к арильной или к гетероарильной группе.

Используемый в данном тексте термин "ацил" обозначает группу формулы -C(O)R, в которой R представляет собой водород или низший алкил, раскрытый здесь. Используемый в описании термин "алкилкарбонил" обозначает группу формулы C(=O)R, в которой R представляет собой алкил, раскрытый в данном тексте. Термин ацил относится к группе -C(=O)R, содержащей 6 атомов углерода. Используемый в данном тексте термин "арилкарбонил" обозначает группу формулы C(=O)R, в которой R представляет собой арильную группу; Используемый в данном тексте термин "бензоил", обозначает "арилкарбонильную" группу, в которой R представляет собой фенил.

Используемый в данном тексте термин "алкил" обозначает насыщенный одновалентный углеводородный остаток с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащий от 1 до 10 атомов углерода. Термин "низший алкил" обозначает линейный или разветвленный углеводородный остаток, содержащий от 1 до 6 атомов углерода. Используемый в данном тексте термин "_C1-10 алкил" относится к алкилу, включающего от 1 до 10 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, без ограничения, низшие алкильные группы, в том числе, метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил или пентил, изопентил, неопентил, гексил, гептил и октил.

Если термин "алкил" использован как суффикс, следующий после другого термина, например, как в случае "фенилалкил" или "гидроксиалкил", он относится к алкильной группе, раскрытой выше, которая содержит один или два заместителя, выбранных из другой конкретной названной группы. Так, например, "фенилалкил" обозначает такой радикал R′R′′-, в котором R' представляет собой фенильный радикал, a R′′ представляет собой радикал алкиленовой группы, раскрытый здесь, при этом следует понимать, что место присоединения фенилалкильной частицы расположено на радикале алкиленовой группы. Примеры арилалкильных радикалов включают, без ограничения, бензил, фенилэтил, 3-фенилпропил. Термины "арилалкил" или "аралкил" следует интерпретировать аналогичным образом, за исключением того, что R′ представляет собой арильный радикал. Термины "(гет)арилалкил" или "(гет)аралкил" следует интерпретировать аналогичным образом, за исключением того, что R′, возможно, представляет собой арильный или гетероарильный радикал.

Используемый в данном тексте термин "алкилен" обозначает бивалентный насыщенный линейный углеводородный радикал, включающий от 1 to 10 атомов углерода (например, (CH₂)_n) или разветвленный насыщенный бивалентный углеводородный радикал, включающий от 2 до 10 атомов углерода (например, -CHMe- или -CH₂CH(i-Pr)CH₂-), если не указано иное. За исключением ситуации с метиленовой группой, открытые валентности алкиленовой группы не присоединены к одному и тому же атому. Примеры радикалов алкиленовой группы включают, без ограничения, метилен, этилен, пропилен, 2-метил-пропилен, 1,1-диметил-этилен, бутилен, 2-этилбутилен.

Термин "алкенил" обозначает линейный моновалентный углеводородный радикал, включающий от двух до шести атомов углерода или разветвленный моновалентный углеводородный радикал, включающий от трех до шести атомов углерода, содержащий по меньшей мере одну двойную связь, например, этенил, пропенил и т.п.

Используемый в данном тексте термин "алкокси" обозначает -О-алкильную группу, включающую алкильную группу, раскрытую выше, например: метокси-, этокси-, н-пропилокси-, изопропилокси-, н-бутилокси-, изобутилокси-, трет-бутилокси-, пентилокси-, гексилокси-группа, а также их изомеры. Используемый в данном тексте термин "низшая алкокси-группа" обозначает алкокси-группу, содержащую "низшую алкильную" группу, раскрытую выше. Используемый в данном описании термин "_C1-10 алкокси-группа" относится к -О-алкильной группе, в которой алкил представляет собой C_1-10.

Используемый в данном тексте термин "алкилсульфонил" обозначает группу -SO₂R, которой R представляет собой алкил, раскрытый в данном описании.

Используемый в данном тексте термин "алкилсульфонилалкил", обозначает группу -R′SO₂R, в которой R представляет собой алкил, a R′ - алкиленовую группу, раскрытые в данном описании. Примерами алкилсульфонилалкильной группы являются 3-метансульфонил-пропокси-, 2-метансульфонил-этокси-группа и т.п.

Используемый в данном тексте термин "тетрагидротиофенил-1,1-оксид-C_1-6алкил" обозначает группу -RR′, в которой R представляет собой алкиленовую группу, раскрытую здесь, a R′ представляет собой тетрагидротиофенил-1,1-оксид. Примеры тетрагидротиофенил-1,1-оксид-C1-6алкила включают 1,1-диоксо-тетрагидро-1λ⁶-тиофен-3-илметил и 2-(1,1-диоксо-тетрагидро-1λ⁶-тиофен-3-ил)-этил.

Используемый в данном тексте термин "тетрагидротиопиран-1,1-оксид-C_1-6алкил" обозначает группу -RR′, в которой R представляет собой алкиленовую группу, раскрытую в данном описании, a R′ представляет собой тетрагидротиопиран-1,1-оксид. Примерами тетрагидротиопиран-1,1-оксид-C_1-6алкила являются 1,1-диоксо-гексагидро-1 лямбда*⁶*-тиопиран-3-илметил и 2-(1,1-диоксо-гексагидро-1 лямбда*⁶*-тиопиран-3-ил)-этил.

Используемый в данном тексте термин "карбокси-группа" обозначает группу формулы -COOH.

Используемый в данном тексте термин "алкиловый эфир карбоновой кислоты" обозначает группу формулы -COOR, в которой R представляет собой алкил, раскрытый в данном описании.

Используемый в данном тексте термин "карбокси-алкил" обозначает группу формулы -R′-COOH, в которой R′ представляет собой алкиленовую группу, раскрытую в данном описании.

Используемый в данном тексте термин "карбокси-алкил-алкиловый эфир" обозначает группу формулы -R′-COOR, в котором R представляет собой алкил, a R′ - алкиленовую группу, раскрытую в данном описании.

Термин "арил" обозначает моновалентную циклическую ароматическую углеводородную группу, состоящую из моно-, би- или трициклического ароматического кольца. Арильная группа, возможно, содержит заместители, раскрытые в данном описании. Примеры арильных групп включают, без ограничения: возможно, замещенные фенил, нафтил, фенантрил, флуоренил, инденил, пенталенил, азуленил, оксидифенил, бифенил, метилендифенил, аминодифенил, дифенилсульфидил, дифенилсульфонил, дифенилизопропилиденил, бензодиоксанил, бензофуранил, бензодиоксилил, бензопиранил, бензоксазинил, бензоксазинонил, бензопиперадинил, бензопиперазинил, бензопирролидинил, бензоморфолинил, метилендиоксифенил, этилендиоксифенил, и т.п., включая их частично гидрогенизированные производные.

Термин "основание" включает, без ограничения, NaOH, KOH, LiOH и карбонаты щелочных металлов, таких как карбонат калия, карбонат натрия, карбонат лития, бикарбонат натрия, карбонат цезия и т.п.

Термин "циклоалкил" или "карбоциклическое кольцо" обозначает моновалентную насыщенную карбоциклическую группу, состоящую из моно- или бициклических колец. Циклоалкил, возможно, содержит один или более заместителей, причем каждый заместитель независимо представляет собой гидрокси-группу, алкил, алкокси-группу, атом галогена, галоалкил, амино-группу, моноалкиламино-группу или диалкиламино-группу, если не указано иное. Примеры циклоалкильных групп включают, без ограничения: циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, и т.п., включая их частично ненасыщенные производные.

Термин "гетероциклоалкил-низший алкил" обозначает группу формулы -R^a-R^b, в которой R^a представляет собой низшую алкиленовую группу, a R^b представляет собой гетероциклоалкил, раскрытый в данном описании.

Используемый в данном тексте термин "гетероарил" или "гетероароматический" обозначает моноциклический или бициклический радикал, состоящий из 5-12 атомов кольца, включающий по меньшей мере одно ароматическое кольцо, содержащее от четырех до восьми атомов в кольце, включающее один или более гетероатомов N, О или S, причем остальные кольцевые атомы представляют собой атомы углерода; при этом подразумевается, что место присоединения гетероарил ьного радикала расположено на ароматическом кольце. Специалисту в данной области техники хорошо известно, что гетероарильные кольца характеризуются меньшей ароматичностью, по сравнению с их аналогами, полностью состоящих из атомов углерода. В связи с этим, для целей настоящего изобретения требуется, чтобы гетероарильная группа хотя бы в некоторой степени обладала ароматичностью. Примеры гетероарильных групп включают моноциклические ароматические гетероциклы, содержащие от 5 до 6 атомов кольца и от 1 до 3 гетероатомов, и включают, без ограничения, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, пирролил, пиразолил, имидазолил, оксазол, изоксазол, тиазол, изотиазол, триазолин, тиадиазол и оксадиаксолин, которые, возможно, содержат один или более, предпочтительно один или два заместителя, выбранных из гидрокси-группы, циано-группы, алкила, алкокси-группы, тио-группы, низшей галоалкокси-группы, алкилтио-группы, атома галогена, галоалкила, алкилсульфинил, алкилсульфонил, галогена, амино-группы, алкиламино-группы, диалкиламино-группы, аминоалкила, алкиламиноалкила и диалкиламиноалкил, нитро-группы, алкоксикарбонила и карбамоила, алкилкарбамоила, диалкилкарбамоила, арилкарбамоила, алкилкарбониламино-группы и арилкарбониламино-группы. Примерами бициклических групп являются, без ограничения, хинолинил, изохинолинил, бензофурил, бензотиофенил, бензоксазол, бензизоксазол, бензотиазол и бензизотиазол. Бициклические группы, возможно, содержат заместители в обоих кольцах, тем не менее место присоединения расположено в кольце, содержащем гетероатом.

Используемый в данном тексте термин "гетероциклил", "гетероцикл" или "гетероциклоалкил" обозначает моновалентный насыщенный циклический радикал, состоящий из одного или более колец, предпочтительно из одного или двух колец, включающих от трех до восьми атомов в каждом кольце, включающих один или более гетероатомов в кольце (выбранных из N, O или S(O)_0-2), которые, возможно, независимо содержат один или более, предпочтительно один или два заместителя, выбранных из гидрокси-группы, оксо-группы, циано-группы, низшего алкила, низшей алкокси-группы, низшей галоалкокси-группы, алкилтио-группы, атома галогена, галоалкила, гидроксиалкила, нитро-группы, алкоксикарбонила, аминогруппы, алкиламино-группы, алкилсульфонила, арилсульфонила, алкиламиносульфонила, ариламиносульфонила, алкилсульфониламино-группы, арилсульфониламино-группы, алкиламинокарбонила, ариламинокарбонила, алкилкарбониламино-группы, арилкарбониламино-группы, если не указано иное. Примеры гетероциклических радикалов включают, без ограничения, азетидинил, пирролидинил, гексагидроазепинил, оксетанил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, оксазолидинил, тиазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, пиперазинил, пиперидинил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, хинуклидил и имидазолинил.

Используемый в данном тексте термин "гидроксиалкил" обозначает алкильный радикал, раскрытый в данном описании, в котором от одного до трех атомов водорода на различных атомах углерода земещен(ы) гидрокси-группой(ами).

Использованные общепринятые сокращения включают: ацетил (Ас), азо-бис-изобутирилнитрил (AIBN), атмосферы (Атм), 9-борабицикло[3.3.1]нонан (9-BBN или BBN), трет-бутоксикарбонил (Boc), ди-трет-бутил пирокарбонат, или Boc ангидрид (BOC₂O), бензил (Bn), бутил (Bu), регистрационный номер в Chemical Abstracts (CASRN), бензилоксикарбонил (CBZ или Z), карбонил диимидазол (CDI), 1,4-дибицикло[2.2.2]октан (DABCO), трифторид диэтиламиносеры (DAST), дибензилиденацетон (dba), 1,5-диазабицикло[4.3.0]нон-5-ен (DBN), 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (DBU), N,N′-дициклогексилкарбодиимид (DCC), 1,2-дихлорэтан (DCE), дихлорметан (DCM), диэтилазодикарбоксилат (DEAD), ди-изо-пропилазодикарбоксилат (DIAD), гидрид ди-изо-бутилалюминия (DIBAL или DIBAL-Н), ди-изо-пропилэтиламин (DIPEA), N,N-диметилацетамид (DMA), 4-N,N-диметиламинопиридин (DMAP), N,N-диметилформамид (DMF), диметилсульфоксид (DMSO), 1,1′-бис-(дифенилфосфино)этан (dppe), 1,1′-бис-(дифенилфосфино)ферроцен (dppf), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид (EDCl), этил (Et), этилацетат (EtOAc), этанол (EtOH), этиловый эфир 2-этокси-2Н-хинолин-1-карбоновой кислоты (EEDQ), диэтиловый эфир (Et₂O), O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N′N′-метанолтетраметилуроний гексафторфосфат уксусная кислота (HATU), уксусная кислота (НОАс), 1-N-гидроксибензотриазол (HOBt), высокоэффективная жидкостная хроматография (HPLC), изопропанол (IPA), гексаметилдисилазан лития (LiHMDS), метанол (MeOH), точка плавления (mp), MeSO₂- (мезил, или Ms), метил (Me), ацетонитрил (MeCN), м-хлорпербензойная кислота (МСРВА), масс-спектр (ms), метил-трет-бутиловый эфир (МТВЕ), N-бромсукцинимид (NBS), N-карбоксиангидрид (NCA), N-хлорсукцинимид (NCS), N-метилморфолин (NMM), N-метилпирролидон (NMP), пиридиний хлорхромат (РСС), пиридиний дихромат (PDC), фенил (Ph), пропил (Pr), изопропил (i-Pr), фунты на дюйм квадратный (psi), пиридин (pyr), комнатная температура (rt или RT), трет-бутилдиметилсилил или TpeT-BuMe₂Si (TBDMS), триэтиламин (TEA или Et₃N), 2,2,6,6-тетраметилпиперидин 1-оксил (TEMPO), трифлат или CF₃SO₂- (Tf), трифторуксусная кислота (TFA), 1,1′-бис-2,2,6,6-тетраметилгептан-2,6-дион (TMHD), O-бензотриазол-1-ил-N,N,N′,N′-тетраметилуроний тетрафторборат (TBTU), тонкослойная хроматография (TLC), тетрагидрофуран (THF), триметилсилил или Me₃Si (TMS), р-толуолсульфоновая кислота моногидрат (TsOH или pTsOH), 4-Me-C₆H₄SO₂- или тозил (Ts), N-уретан-N-карбоксиангидрид (UNCA). Общепринятая номенклатура, включая префиксы нормальный (н-), изо, вторичный (втор-), третичный (трет-) и нео, употребляются в обычном значении, если они используются совместно с алкильной частью. (J. Rigaudy and D.P.Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.).

Термин "гетероарил" обозначает моноциклическую или бициклическую группу, включающую от 5 до 12 атомов кольца, содержащую по меньшей мере одно ароматическое кольцо с одним, двумя или тремя кольцевыми гетероатомами, выбранными из N, О или S, причем оставшиеся атомы кольца представляют собой атомы C, при этом подразумевается, что место присоединения гетероарильного радикала расположено на ароматическом кольце. Гетероарильное кольцо, возможно, содержит заместители, раскрытые в данном описании. Примеры гетероарильных групп включают, без ограничения, возможно, замещенные имидазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, пиразинил, тиенил, тиофенил, фуранил, пиранил, пиридинил, пирролил, пиразолил, пиримидил, пиридазинил, хинолинил, изохинолинил, бензофурил, бензофуранил, бензотиофенил, бензотиопиранил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензооксадиазолил, бензотиазолил, бензотиадиазолил, бензо-пиранил, индолил, изоиндолил, индазолил, триазолил, триазинил, хиноксалинил, пуринил, хиназолинил, хинолизинил, нафтиридинил, птеридинил, карбазолил, азепинил, диазепинил, акридинил и т.п., включая их частично гидрогенизированные производные.

Термины "гало", "галоген" и "галид" используются в данном тексте равнозначно и относятся к радикалам фтора, хлора, брома иода.

Термин "галоалкил" означает алкил, раскрытый в данном описании, в котором один или более атомов водорода замещены одинаковыми или различными атомами галогена. Термин "низший галоалкил" обозначает углеводородный остаток с линейной или разветвленной цепью, содержащий от 1 до 6 атомов углерода, замещенных одним или более атомами галогена. Примеры галоалкилов являются -CH₂Cl, -CH₂CF₃, -CH₂CCl₃, -CF₂CF₃, -CF₃, и т.п.

Термин "гетероциклил" или "гетероциклоалкил" обозначает моновалентную насыщенную группу, включающую от одного до двух колец, содержащих один, два, три или четыре гетероатома (выбранных из атомов азота, кислорода или серы). Гетероциклильное кольцо, возможно, содержит заместители, раскрытые в данном описании. Примеры гетероциклических групп включают, без ограничения, возможно, замещенные пиперидинил, пиперазинил, гомопиперазинил, азепинил, пирролидинил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, хинуклидил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, тиадиазолилидинил, бензотиазолидинил, бензоазолилидинил, дигидрофурил, тетрагидрофурил, дигидропиранил, тетрагидропиранил, тиаморфолинил, тиаморфолинилсульфоксид, тиаморфолинилсульфон, дигидрохинолинил, дигидроизохинолинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил и т.п.

Предпочтительные радикалы для химических групп, определения которых даны выше, приведены в Примерах.

Термин "возможно, замещенный" обозначает группу, которая независимо содержит от нуля до трех заместителей, выбранных из низшего алкила, галогена, OH-группы, циано-группы, амино-группы, нитро-группы, низшей алкокси-группы или галоген-низшего алкила.

Предпочтительные "окислители" включают перкислоты, такие как м-хлорпербензойная кислота (МСРВА) и перуксусная кислота, при этом для окисления тиоэфира до сульфона можно использовать другие окислители, такие как пероксид водорода, перманганатные соли или персульфатные соли.

"Уходящая группа" обозначает группу в значении, относящемся к области синтетической органической химии, т.е. это атом или группа, которые могут быть замещены в условиях реакции замещения. Примерами уходящих групп являются, без ограничения, галоген-, алкан- или ариленсульфонилокси-группа, например метансульфонилокси-, этансульфонилокси-, тиометил, фенилсульфонилокси-, тозилокси- и триенилокси-, дигалофосфиноилокси-, возможно, замещенные бензилокси-, изопропилокси-, ацилокси-группа и т.п.

Термин "возможно", или "как вариант" обозначает, что далее описанное событие или обстоятельство может, но не обязательно должно иметь место, а также то, что данное описание включает примеры, в которых это событие или обстоятельство имеет место, равно как и примеры, в которых оно отсутствует.

Термин "агонист" относится к соединению, которое повышает активность другого соединения или сайта рецептора.

Термин "антагонист" относится к соединению, которое уменьшает или нивелирует действие другого соединение или сайта рецептора.

Термин "потенциальное лекарство" относится к соединению или препарату, которые следует протестировать на предмет возможных эффектов при лечении болезненного состояния у животных, независимо от того, обладает ли указанное потенциальное лекарство какой-либо известной биологической активностью.

Используемый в данном тексте термин "гомологичный" относятся к белкам, которые выполняют по существу одну и ту же функцию у представителей другого вида и имеют в существенной мере идентичную последовательность, в той мере, насколько их считают в данной области техники разными версиями одного и того же белка, которые различаются, в первую очередь, между видами, в которых они встречаются. Так, например, человеческий ERG, мышиный ERG и крысиный ERG считают гомологичными друг другу.

Термин "модулятор" обозначает молекулу, которая взаимодействует с мишенью. Подобные взаимодействия относятся, без ограничения, к агонисту, антагонисту и т.п., раскрытым в данном описании.

"Болезнь" и "болезненное состояние" обозначает любое заболевание, состояние, симптом, расстройство или показание.

Термин "клеточная линия" относится к клону иммортализованных клеток млекопитающих. "Стабильная" клеточная линия - это клеточная линия, которая демонстрирует в значительной мере устойчивые характеристики с течением времени (например, при каждом удвоении). Стабильная клеточная линия в рамках данного изобретения обеспечивает значительную долю клеток, которые способны обеспечивать сопротивление более, чем примерно 50 МОм, амплитуду тока более, чем примерно 200 пА, и обеспечивать амплитуду тока, которая изменяется не более чем примерно на 20% за один час при контрольных условиях.

Термин "фармацевтически приемлемые соли" соединения обозначает соли, которые являются фармацевтически приемлемыми, как раскрыто в данном описании, которые обладают желаемой фармакологической активностью соединения-предшественника. Такие соли включают:

(1) соли, полученные в результате добавления неорганических кислот, таких как хлороводородная кислота, бромоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п.; или органических кислот, таких как уксусная кислота, бензолсульфоновая кислота, бензойная, камфорсульфоновая кислота, лимонная кислота, этансульфоновая кислота, фумаровая кислота, глюкогептоновая кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гликолевая кислота, гидроксинафтойная кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, малоновая кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, муконовая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, пропионовая кислота, салициловая кислота, янтарная кислота, винная кислота, p-толуолсульфоновая кислота, триметилуксусная кислота и т.п.; или

(2) соли, полученные либо за счет замены кислого протона, присутствующего в соединении-предшественнике, ионом металла, например, ионом щелочного металла, ионом щелочно-земельного металла или ионом алюминия; либо за счет координирования этого протона с органическим или неорганическим основанием. Приемлемые органические основания включают диэтаноламин, этаноламин, N-метилглюкамин, триэтаноламин, трометамин и т.п. Приемлемые неорганические основания включают гидроксид алюминия, гидроксид кальция, гидроксид калия, карбонат натрия и гидроксид натрия.

Следует понимать, что все ссылки на фармацевтически приемлемые соли включают формы, полученные добавлением растворителя (сольваты) или кристаллические формы (полиморфы), раскрытые в данном описании, одних и тех же солей, полученных в результате добавления кислоты.

Предпочтительными фармацевтически приемлемыми солями являются соли, полученные из уксусной кислоты, хлороводородной кислоты, серной кислоты, метансульфоновой кислоты, малеиновой кислоты, фосфорной кислоты, винной кислоты, лимонной кислоты, а также соли натрия, калия, кальция, цинка и магния.

Термин "сольваты" обозначает формы, полученные в результате добавления растворителя, содержащие как стехиометрическое, так и нестехиометрическое количество растворителя. Некоторые соединения склонны захватывать молекулы растворителя в фиксированном молярном соотношении в кристаллическом твердом состоянии, образуя таким образом сольват. Если растворителем является вода, образующийся сольват представляет собой гидрат, если растворителем является спирт, образующийся сольват представляет собой алкоголят. Гидраты образуются при комбинировании одной или более молекул воды с одним из веществ, в которых вода сохраняет свое молекулярное состояние как Н₂О, причем такая комбинация может давать один или более гидратов.

Термин "субъект" включает млекопитающих и птиц. Термин "млекопитающие" обозначает любого представителя класса млекопитающих, включая, без ограничения, человека; приматов, например шимпанзе и другие виды обезьян; сельскохозяйственных животных, например крупный рогатый скот, лошадей, овец, коз и свиней; домашних животных, например кроликов, собак и кошек; лабораторных животных, включая грызунов, таких как крысы, мыши и морские свинки и т.п. Термин "субъект" не указывает на определенный возраст или пол.

"Терапевтически эффективное количество" обозначает количество соединения, которое, при его введении субъекту для лечения болезненного состояния, является достаточным для осуществления такого лечения болезненного состояния. Термин "терапевтически эффективное количество" варьируется в зависимости от соединения, болезненного состояния, подлежащего лечению, тяжести заболевания, подлежащего лечению, возраста и относительного здоровья субъекта, способа и формы введения, решения лечащего врача или ветеринара, и других факторов.

Используемый в данном тексте термин "фармакологический эффект" охватывает эффекты, испытываемые субъектом, которые достигают предполагаемой цели терапии. Например, фармакологический эффект представляет собой такой эффект, который приводит к предотвращению, облегчению или снижению недержания мочи у субъекта, получающего лечение.

Термин "болезненное состояние" обозначает любое заболевание, состояние, симптом или показание.

Термин "лечение" болезненного состояния включает (i) предотвращение болезненного состояния, т.е. обеспечение того, чтобы у субъекта не проявлялись клинические симптомы болезненного состояния, которые могут развиваться как следствие или предшествовать данному болезненному состоянию, при этом субъект еще не испытывает болезненное состояние или у субъекта еще не проявляются его симптомы; (ii) ингибирование болезненного состояния, т.е. прекращение развития болезненного состояния или его клинических симптомов; или (iii) облегчение болезненного состояния, т.е. обеспечение временного или постоянного уменьшения болезненного состояния или его клинических симптомов.

Все патенты и публикации, указанные в данном тексте, полностью включены в настоящее описание посредством ссылки.

Номенклатура и структуры

В целом, использованная в настоящей Заявке номенклатура основана на AUTONOM™ v.4.0, компьютеризированной системе Института Бейльштейна для генерирования систематической номенклатуры IUPAC. Химические структуры, приведенные в описании, были изображены с помощью программы ISIS® version 2.2. Любая открытая валентность, показанная на атоме углерода, кислорода, серы или азота в структуре, обозначает наличие атома водорода, если не указано иное. Если азот-содержащее гетероарильное кольцо изображено с открытой валентностью на атоме азота, и на гетероарильном кольце показаны переменные, такие как R^a, R^b или R^c, эти переменные могут быть связаны или присоединены к открытой валентности азота. Если в структуре присутствует хиральный центр, но на этом хиральном центре не показана его специфическая стереохимия, данная структура охватывает оба энантиомера, обусловленные этим хиральным центром. Если приведенная в описании структура может существовать в различных таутомерных формах, такая структура охватывает все подобные таутомеры. Подразумевается, что атомы, представленные в приведенных здесь структурах, охватывают все природные изотопы этих атомов. Так, например, подразумевается, что представленные здесь атомы водорода включают дейтерий и тритий, а атомы углерода включают изотопы С¹³ и С¹⁴.

В некоторых вариантах осуществления соединения формулы I,

или его фармацевтически приемлемых солей, в которой:

m равно от 0 до 2;

n равно от 0 до 2;

p равно от 0 до 3;

X представляет собой СН или N;

каждый из R¹ независимо представляет собой: водород или C_1-6алкил;

каждый из R² независимо представляет собой: C_1-6алкил, C_1-6алкокси-гало-C_1-6алкил или гало-C_1-6алкокси-группу;

R³ представляет собой: C_1-6лкилсульфонил-C_1-6алкил, тиофенил-1,1-оксид-C_1-6алкил или тетрагидротиопиран-1,1-оксид-C_1-6лкил;

каждый из R⁴ независимо представляет собой: C_1-6алкил, C_1-6алкокси-гало-C_1-6алкил или гало-C_1-6алкокси-группу;

R⁵ представляет собой группу формулы (а) или (b):

, ;

в которой:

q равно 0 или 1;

r равно 0 или 1;

Y представляет собой: NR⁹ или CR¹⁰R¹¹;

каждый из R⁶ и R⁷ независимо представляет собой: водород или C_1-6алкил; или же R⁶ и R⁷ совместно образуют C_1-2алкиленовую группу;

R⁸ представляет собой: водород или C_1-6алкил;

R⁹ представляет собой: водород или C_1-6алкил;

R¹⁰ представляет собой: водород или C_1-6алкил; и

R¹¹ представляет собой: C_1-6алкил, гидрокси-C_1-6алкил, карбокси-группу, карбокси-C_1-6валкил, карбокси-C_1-6алкиловый эфир или карбокси-C_1-6алкил-C_1-6алкиловый эфир.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, m равно 0 или 1.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, m равно 0.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, m равно 1.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, n равно 0 или 1.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, n равно 0.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, n равно 1.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, p равно от 0 до 2.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, p равно 0 или 1.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, p равно 0.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, p равно 1.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, q равно 0.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, q равно 1.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, r равно 0.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, r равно 1.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, X представляет собой CH.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, X представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹ представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹ представляет собой C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, каждый из R² независимо представляет собой C_1-6алкил, C_1-6алкокси-группу или атом галогена.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, каждый из R² независимо представляет собой C_1-6алкил или атом галогена.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R² представляет собой C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R³ представляет собой C_1-6алкилсульфонил-C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R³ представляет собой тетрагидротиофенил-1,1-оксид-C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R³ представляет собой тетрагидротиопиран-1,1 -оксид-C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R³ представляет собой: 3-метансульфонил-пропил или 1,1-диоксо-тетрагидро-1λ6-тиофен-3-илметил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R³ представляет собой 3-метансульфонил-пропил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R³ представляет собой 1,1 -диоксо-тетрагидро-1λ6-тиофен-3-ил метил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, каждый из R⁴ независимо представляет собой C_1-6алкил или атом галогена.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁴ представляет собой C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁵ представляет собой группу формулы (а).

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁵ представляет собой группу формулы (b).

В некоторых вариантах осуществления формулы I, каждый из R⁶ и R⁷ независимо представляет собой: водород или C_1-6алкил, или же R⁶ и R⁷ совместно образуют C_1-2алкиленовую группу.

В одном из вариантов осуществления формулы I, R⁶ представляет собой: водород, карбокси-группу, карбокси-C_1-6алкиловый эфир.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁶ представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁶ представляет собой С₁₆алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁷ представляет собой водород или метил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁷ представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁷ представляет собой C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁶ и R⁷ совместно образуют C_1-2алкиленовую группу.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁶ и R⁷ совместно образуют метилен.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁶ и R⁷ совместно образуют этилен.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁸ представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁸ представляет собой C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, Y представляет собой NR⁹.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, Y представляет собой CR¹⁰R¹¹.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁹ представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R⁹ представляет собой C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹⁰ представляет собой водород.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹⁰ представляет собой C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹¹ представляет собой: C_1-6алкил, гидрокси-C_1-6алкил, карбокси-группу, карбокси-C_1-6алкил, карбокси-C_1-6алкиловый эфир или карбокси-C_1-6алкил-C_1-6алкиловый эфир.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹¹ представляет собой: C_1-6алкил или гидрокси-C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹¹ представляет собой C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹¹ представляет собой гидрокси-C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹¹ представляет собой карбокси-группу.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹¹ представляет собой карбокси-C_1-6алкиловый эфир.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹¹ представляет собой карбокси-C_1-6алкил.

В некоторых вариантах осуществления формулы I, R¹¹ представляет собой карбокси-C_1-6алкил-C_1-6лкиловый эфир.

Примеры соединений, охваченных настоящим изобретением и входящих в объем настоящего изобретения, приведены ниже в Таблице 1, вместе с точками плавления (MP) и величинами аффинности IC₅₀ для выбранных соединений.

Таблица 1 # Структура Название (AUTONOM) МР, °С IC50 1 Этиловый эфир [1-(4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбонил)-пиперидин-4-ил]-уксусной кислоты 175.0-177.0 0.5496 2 Этиловый эфир (R)-1-(4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбонил)-пиперидин-3-карбоновой кислоты 96.0-98.0 0.0734 3 (4-{4-[4-(1,1-Диоксо-тетрагидро-1А6-тиофен-3-илметокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-((R)-4-этил-3-метил-пиперазин-1-ил)- 225.0 (HCl-соль) 0.0459

метанон     4 (S)-1-(4-{4-[4-(3-Метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбонил)-пиперидин-3-карбоновая кислота 270.0-276.0 0.1074 5 Амид 1-(4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбонил)-пиперидин-4-карбоновой кислоты 219.0-221.0 0.0917 6 [4-(1-Гидрокси-1-метил-этил)-пиперидин-1-ил]-(4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1 -ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-метанон 196.0-198.0 0.086 7 Этиловый эфир 1-(4-{4-[4-(1,1-диоксо-тетрагидро-1λ6-тиофен-3-илметокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбонил)-пиперидин-4-карбоновой кислоты 209.0-211.0 0.0514

8 1-(4-{4-[4-(1,1-Диоксо-тетрагидро-1А6-тиофен-3-илметокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбонил)-пиперидин-4-карбоновая кислота 172.0-174.0 0.0708 9 (4-{4-[4-(1,1-Диоксо-тетрагидро-1А6-тиофен-3-илметокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-((8)-4-этил-3-метил-пиперазин-1-ил)-метанон 198.0-204.0 (HCI-соль) 0.0194 10 Этиловый эфир 1-(4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбонил)-4-метил-пиперидин-4-карбоновой кислоты 171.0-173.0 0.0584 11 ((R)-1-пропил-пирролидин-3-ил)-амид 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновойкислоты 140.0-142.0 (HCl-соль) 0.1642

12 ((R)-1-этил-пирролидин-3-ил)-амид 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты 229.0-231.0 0.0938 13 ((SH-этил-пирролидин-3-ил)-амид4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты 160.0-162.0 (HCl-соль) 0.3356 14 ((R)-1-пропил-пиперидин-3-ил)-амид 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновойкислоты 185.0-190.0 (HCl-соль) 0.0898 15 ((R)-1-этил-пиперидин-3-ил)-амид 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты 180.0-185.0 (HCl-соль)

16 ((S)-1-пропил-пиперидин-3-ил)-амид 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты 185.0-190.0 0.163 17 ((S)-1-этил-пиперидин-3-ил)-амид 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты 180.0-185.0 0.1158 18 1-(4-{4-[4-(3-Метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбонил)-4-метил-пиперидин-4-карбоновая кислота 172.0-174.0 0.1529 19 Метил-(1-метил-пиперидин-2-илметил)-амид 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1 -ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты   0.0796

20 (1-Этил-пирролидин-2-илметил)-амид 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты   0.081 21 (1R,4S)-2,5-Диаза-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил-(4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1 -ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-метанон   0.1447 22 (4-{4-[4-(3-Метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-(8-метил-3,8-диаза- бицикл о[3.2.1]окт-3-ил)-метанон   0.0998 23 (4-{4-[4-(3-Метансульфонил-пропокси)-индазол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-((S)-3-метил-пиперазин-1-ил)-метанон   0.073

24 (4-{4-[4-(3-Метансульфонил-пропокси)-индазол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-((R)-3-метил-пиперазин-1-ил)-метанон 245.0-250.0 (HCl-соль) 0.0597 25 (4-{4-[4-(1,1-Диоксо-тетрагидро-1λ6-тиофен-3-илметокси)-индазол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-((S)-3-метил-пиперазин-1 -ил)-метанон 245.0-250.0 (HCl-соль) 0.0458 26 (3-Этокси-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-8-ил)-(4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1 -ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-метанон; соединение с муравьиной кислотой 125.0-130.0 (формиатная соль) 0.0894 27 (4-{4-[4-(1,1-Диоксо-тетрагидро-1λ6-тиофен-3-илметокси)-индазол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-((3)-3-метил-пиперазин-1-ил)-метанон 245.0-250.0 (HCl-соль) 0.0606

28 (3,3-Диметил-пиперазин-1 -ил)-(4-{4-[4-(1,1-диоксо-тетрагидро-1А6-тиофен-3-илметокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексил)-метанон >300 (HCl-соль)- 0.0978 29 (1-Этил-пиперидин-3-ил)-амид 4-{4-[4-(1,1-диоксо-тетрагидро-1λ6-тиофен-3-илметокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты 205.0-210.0 (HCl-соль) 0.0928 30 ((S)-1-этил-пиррол идин-2-илметил)-амид 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты   0.0854 31 ((RH-этил-пирролидин-2-илметил)-амид 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты   0.0977

Методы

В одном из аспектов настоящая заявка предлагает способ лечения JNK-опосредованного расстройства у субъекта, страдающего JNK-опосредованным расстройством, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества любого из приведенных выше соединений.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, такое JNK-опосредованное расстройство характеризуется клеточной пролиферацией.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, таким JNK-опосредованным расстройством является артрит.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, артрит представляет собой ревматоидный артрит.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, таким JNK-опосредованным расстройство является астма.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, таким JNK-опосредованным расстройством является диабет.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, таким JNK-опосредованным расстройством является болезнь Альцгеймера.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, таким JNK-опосредованным расстройством является болезнь Паркинсона.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, таким JNK-опосредованным расстройством является ишемический инсульт.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, таким JNK-опосредованным расстройством является рак.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, в случаях, когда данное JNK-опосредованное расстройство представляет собой рак, таким раковым заболеванием является рак мозга.

В некоторых вариантах осуществления способа лечения JNK-опосредованного расстройства, в случаях, когда данное JNK-опосредованное расстройство представляет собой рак, таким раковым заболеванием является лейкемия.

В одном из аспектов в настоящей заявке предложена фармацевтическая композиция, включающая соединение по любому из раскрытых выше вариантов осуществления, смешанное по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, вспомогательным веществом или разбавителем.

Еще в одном аспекте настоящей заявки предложено применение любого из указанных выше соединений в изготовлении лекарственных средств для терапевтического и/или профилактического лечения JNK-опосредованного расстройства.

В некоторых вариантах осуществления предлагается применение раскрытого выше соединения для изготовления лекарственных средств, в случаях когда JNK-опосредованное расстройство представляет собой аутоиммунное расстройство, воспалительное расстройство, метаболическое расстройство, неврологическое заболевание или рак.

В некоторых вариантах осуществления предлагается применение раскрытого выше соединения для изготовления лекарственных средств, в случаях когда JNK-опосредованное расстройство представляет собой ревматоидный артрит, астма, диабет II типа, Болезнь Альцгеймера, Болезнь Паркинсона или инсульт.

Еще в одном аспекте настоящей заявки предложено соединение по любому из раскрытых выше вариантов осуществления, предназначенное для применения в лечении JNK-опосредованного расстройства.

Соединения по настоящему изобретению представляют собой JNK-модуляторы, и поэтому ожидается, что они будут эффективны при лечении широкого спектра JNK-опосредованных расстройств. Примерами JNK-опосредованных расстройств являются, без ограничения, аутоиммунные расстройства, воспалительные расстройства, метаболические расстройства, неврологические заболевания и рак. Следовательно, соединения по настоящему изобретению можно применять для лечения одного или более подобных расстройств. В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению можно применять для лечения JNK-опосредованных расстройств, таких как ревматоидный артрит, астма, диабет II типа, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона или инсульт.

Способы введения и фармацевтические композиции

Настоящее изобретение охватывает фармацевтические композиции, включающие по меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению или индивидуальный изомер, рацемическую или нерацемическую смесь изомеров или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, совместно по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем и, возможно, другими терапевтическими и/или профилактическими ингредиентами.

В целом, соединение по настоящему изобретению вводят в терапевтически эффективном количестве любым из принятых способов введения для агентов, имеющих подобное предназначение. Подходящие диапазоны доз обычно составляют 1-500 мг в сутки, предпочтительно 1-100 мг в сутки, и наиболее предпочтительно 1-30 мг в сутки, в зависимости от множества факторов, таких как тяжесть заболевания, подлежащего лечению, возраст и относительное здоровье субъекта, эффективность используемого соединения, способ и форма введения, показания, по которым было назначено введение, а также предпочтения и опыт лечащего врача. Средний специалист в области лечения таких заболеваний способен, избегая излишних экспериментов, основываясь на личных знаниях и материалах данной Заявки, установить терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению для конкретного заболевания.

Соединения по настоящему изобретению можно вводить в виде лекарственных форм, включая те, которые пригодны для орального (включая трансбуккальное и сублингвальное), ректального, назального, местного, пульмонального, вагинального или парентерального (включая внутримышечное, внутриартериальное, спинальное, подкожное и внутривенное) введение или в форме, пригодной для введения путем ингаляции или инсуффляции. Предпочтительным способом введения, как правило, является оральный, с удобным суточного режимом дозирования, который можно подбирать в соответствии с тяжестью заболевания.

Соединение или соединения по настоящему изобретению, объединенные с одним или более подходящими адъювантами, носителями или разбавителями, могут входить в фармацевтические композиции и дозированные лекарственные формы. Фармацевтические композиции и дозированные лекарственные формы могут быть составлены из обычных ингредиентов в обычном соотношении, с добавлением (или без добавления) дополнительных активных веществ или основ, а лекарственные формы с однократной дозировкой могут содержать любое подходящее эффективное количество активного компонента в соответствии с целевым диапазоном суточных доз, которые предполагается использовать. Фармацевтические композиции можно применять в виде твердых субстанций, например таблеток или наполненных капсул, мягких лекарственных форм, порошков, лекарственных форм с замедленным высвобождением, либо жидкостей, таких как растворы, суспензии, эмульсии, эликсиры или заполненные капсулы для орального применения; или в форме суппозиториев для ректального или вагинального введения; или в форме стерильных растворов для инъекций для парентерального применения.

Лекарственные формы, содержащие примерно один (1) мг активного компонента или, в более широком диапазоне, примерно от 0.01 до примерно ста (100) мг на таблетку, представляют собой подходящие в соответствующих случаях типичные дозированные лекарственные формы.

Соединения по настоящему изобретению можно включать композиции в виде большого разнообразия лекарственных форм для орального введения. Фармацевтические композиции и лекарственные формы могут включать соединение или соединения по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые соли в качестве активных компонентов. Фармацевтически приемлемые носители могут быть как твердыми, так и жидкими. Твердые лекарственные формы включают порошки, таблетки, пилюли, капсулы, саше, суппозитории и гранулы для рассасывания. Твердый носитель может представлять собой одно или более веществ, которые могут также представлять собой разбавители, ароматизаторы, солюбилизаторы, лубриканты, суспендирующие вещества, связующие вещества, консерванты, вещества для улучшения распадаемости таблеток или материалы для инкапсулирования. В порошках таким носителем обычно является тонко измельченное твердое вещество, которое представляет собой смесь с тонко измельченным активным компонентом. В случае таблеток активный компонент обычно смешивают с носителем, обладающим необходимой связывающей способностью, в подходящем соотношении и изготовляют таблетки желаемых формы и размера. Порошки и таблетки предпочтительно содержат от примерно одного (1) до примерно семидесяти (70) процентов активного вещества. Подходящие носители включают, без ограничения, карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактозу, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагант, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу натрия, низкоплавкий воск, какао-масло и т.п. Предполагается, что термин "изготовление" включает приготовление лекарственной формы активного вещества с инкапсулирующим материалом в качестве носителя, с получением капсулы, в которой активный компонент, с носителем или без него, окружен носителем, который с ним связан. Аналогичным образом, сюда включены саше и пастилки для рассасывания. Таблетки, порошки, капсулы, пилюли, саше и пастилки для рассасывания могут быть в виде твердых форм, пригодных для орального введения.

Другие формы, подходящие для орального введения, включают жидкие лекарственные формы, включая эмульсии, сиропы, эликсиры, водные растворы, водные суспензии, или твердые лекарственные формы, которые переводить непосредственно перед применением в жидкие лекарственные формы. Эмульсии могут быть приготовлены в растворах, например в водных растворах пропиленгликоля, или могут содержать эмульгирующие вещества, например лецитин, сорбитан моноолеат или камедь. Водные растворы могут быть приготовлены путем растворения активного компонента в воде и добавления подходящих красителей, ароматизаторов, стабилизаторов и загустителей. Водные суспензии можно приготовить путем диспергирования мелкоизмельченного активного компонента в воде с вязким материалом, таким как природный или синтетический каучуки, смолы, метилцеллюлоза, натрия карбоксиметилцеллюлоза, и другие хорошо известные суспендирующие вещества. Твердые формы включают растворы, суспензии и эмульсии, и могут содержать, помимо активного компонента, красители, корригенты, стабилизаторы, буферы, искусственные и натуральные подсластители, диспергирующие вещества, загустители, солюбилизаторы и т.п.

Соединения по настоящему изобретению могут быть включены в лекарственные формы для парентерального введения (например, путем инъекции, например болюсной инъекции или непрерывной инфузии) или могут быть представлены в виде дозированных лекарственных форм: ампулы, предварительно заполненные шприцы, контейнеры для инфузий в малом объеме или многодозовые контейнеры с добавленным консервантом. Такие композиции могут быть в виде таких форм, как суспензии, растворы или эмульсии на масляной или водной основе, например растворы в водном полиэтиленгликоле. Примеры маслянистых или неводных носителей, разбавителей, растворителей или основ включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла (например, оливковое масло) и органические эфиры для инъекций (например, этилолеат), а также могут содержать агенты, применяемые для конкретных лекарственных форм, например консерванты, увлажняющие, эмульгирующие или суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Как вариант, активный компонент может быть в форме порошка, который получают путем асептического извлечения стерильного твердого вещества, или путем лиофилизации из раствора для восстановления перед применением с помощью подходящей основы, например, стерильной апирогенной воды.

Соединения по настоящему изобретению можно включать в лекарственные формы для местного нанесения на эпидерму в виде мазей, кремов или лосьонов, или в виде трансдермального пластыря. Мази и кремы, например, можно составлять на водной или масляной основе, с добавлением подходящих загустителей и/или гелеобразующих агентов. Лосьоны можно составлять на водной или масляной основе и, как правило, они содержат один или более эмульгаторов, стабилизаторов, диспергирующих веществ, суспендирующих веществ, загустителей, или красителей. Лекарственные формы, предназначенные для местного введения в рот, включают: пастилки для рассасывания, содержащие действующие вещества на ароматизированной основе, как правило, на основе сахарозы, камеди или траганта; пастилки, содержащие активный компонент на инертной основе, такой как желатин и глицерин или сахароза и камедь; и ополаскиватели для рта, содержащие активный компонент в подходящем жидком носителе.

Соединения по настоящему изобретению могут быть также включены в лекарственную форму для введения в виде суппозиториев. Сначала расплавляют низкоплавкий воск, например смесь глицеридов жирной кислоты или какао-масло, и активный компонент равномерно диспергируют, например, путем перемешивания. Расплавленную гомогенную смесь затем разливают в формы удобного размера и оставляют для охлаждения и затвердевания.

Соединения по настоящему изобретению могут быть включены в лекарственную форму для вагинального введения. Такие формы включают пессарии, тампоны, кремы, гели, пасты, пены или спрэи, которые содержат, помимо активного компонента, подходящие носители, известные в данной области техники.

Соединения, представляющие собой объект настоящего изобретения, могут быть включены в лекарственную форму для назального введения. Такие растворы или суспензии вводят непосредственно в носовую полость обычными способами, например, с помощью флакона-капельницы, пипетки или спрэя. Такие лекарственные формы могут быть представлены в виде форм с однократной или многократной дозировкой. В последнем случае, для флакона-капельницы или пипетки, это обеспечивается за счет введения пациенту подходящего, предварительно определенного объема раствора или суспензии. В случае спрэя, это обеспечивается, например, с помощью дозировочного распыляющего пульверизатора.

Соединения по настоящему изобретению могут быть включены в лекарственную форму для аэрозольного введения, в частности, в дыхательные пути, включая интраназальное введение. При этом соединение, как правило, должно присутствовать в виде частиц небольшого размера, например порядка пяти (5) микрон или меньше. Такой размер частиц можно получить способами, известными в данной области техники, например путем микронизации. Активный компонент поставляют в аэрозольных баллонах под давлением с подходящим пропеллентом, таким как хлорфторуглерод (CFC), например, дихлордифторметан, трихлорфторметан или дихлортетрафторэтан, или диоксид углерода, или же с другим подходящим газом. Аэрозоль может также в целях удобства содержать поверхностно-активное вещество, например лецитин. Дозу лекарственного вещества можно контролировать с помощью градуированного клапана. Как вариант, активные компоненты могут быть представлены в форме сухого порошка, например порошковой смеси соединения на подходящей порошковой основе, такой как лактоза, крахмал, производные крахмала, например гидроксипропилметил-целлюлоза и поливинилпирролидин (PVP). Порошковый носитель образует гель в носовой полости. Порошковая композиция может быть представлена в виде лекарственной формы однократного дозирования, например в капсулах или картриджах, например, из желатина, или в блистерных упаковках, из которых порошок может быть введен посредством вдыхания.

По желанию можно изготавливать лекарственные формы с кишечнорастворимой оболочкой, приспособленные для введения с замедленным или контролируемым высвобождением активного компонента. Например, соединения по настоящему изобретению быть включены в трансдермальные или подкожные средства доставки лекарственных веществ. Такие системы доставки имеют преимущество, если необходимо замедленное высвобождение соединения и если критично соблюдение пациентом схемы лечения. Соединения в трансдермальных системах доставки часто нанесены на твердую подложку, которая может приклеиваться к коже. Интересующее соединение можно также комбинировать с веществами, способствующими проникновению, таким как азон(1-додецилазациклогептан-2-он). Системы доставки с замедленным высвобождением внедряют подкожно в подкожный слой хирургическим путем или с помощью инъекции. Подкожные имплантанты содержат соединение в липид-растворимой мембране, такой как силиконовой каучук, или в биодеградируемом полимере, таком как полимер молочной кислоты.

Предпочтительно, чтобы фармацевтические препараты были в виде дозированных лекарственных форм. В таких формах препарат разделен на единицы дозирования, содержащие подходящие количества активного компонента. Дозированная лекарственная форма может представлять собой упакованный препарат, упаковку, содержащую дискретные количества препарата, например упакованные таблетки, капсулы, а также порошки во флаконах или ампулах. Кроме того, дозированная лекарственная форма может сама по себе представлять собой капсулу, таблетку, саше или пастилку для рассасывания, или может представлять собой подходящее количество любых из перечисленных форм в упакованном виде.

Другие подходящие фармацевтические носители и их лекарственные формы описаны в следующем источнике: Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, издание E. W. Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania. Примеры фармацевтических лекарственных форм, содержащих соединение по настоящему изобретению, описаны ниже.

Дополнительные цели, преимущества и новые признаки настоящего изобретения будут очевидны специалисту в данной области при изучении примеров, следующих ниже; при этом подразумевается, что эти примеры не носят ограничивающий характер.

Синтез

Соединения по настоящему изобретению могут быть получены множеством способов, представленных в виде поясняющей схемы реакций синтеза, показанной и описанной ниже.

Исходные вещества и реагенты, используемые для получения этих соединений обычно являются коммерчески доступными у поставщиков, например в Aldrich Chemical Co., а также могут быть получены способами, известными специалистам в данной области техники, с помощью процедур, изложенных в литературных источниках, таких как Fieser and Fieser′s Reagents for Organic Synthesis; Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-15; Rodd′s Chemistry of Carbon Compounds, Elsevier Science Publishers, 1989, Volumes 1-5 and Supplementals; and Organic Реакцияз, Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-40. Нижеследующие схемы реакций синтеза являются всего лишь иллюстрацией некоторых способов, которыми могут быть синтезированы соединения по настоящему изобретению, при этом можно сделать множество модификаций этих схем реакций синтеза, которые можно предложить специалисту в данной области техники, обратившемуся к материалу, раскрытому в настоящей Заявке.

Исходные вещества и промежуточные соединения в схеме реакций синтеза можно выделять и очищать по желанию с помощью обычных процедур, включая, без ограничения: фильтрацию, ректификацию, кристаллизацию, хроматографию и т.п. Такие вещества могут быть охарактеризованы обычными средствами, включая физические константы и спектральные характеристики.

Если не указано противоположное, описанные здесь реакции предпочтительно проводят в инертной атмосфере, при атмосферном давлении, температуре реакции в диапазоне от примерно -78°C до примерно 150°C, более предпочтительно от примерно 0°C до примерно 125°C, и, что наиболее предпочтительно и удобно, приблизительно при комнатной температуре (или температуре окружающей среды), например, около 20°C.

Нижеприведенная Схема А изображает одну синтетическую процедуру, позволяющую получить конкретное соединение формулы I, в которой R представляет собой низший алкил и может быть одинаковым или различным в каждом случае, при этом m, n, p, q, r, X, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ таковы, как раскрыто в данном описании.

На стадии 1 Схемы А происходит реакция О-алкилирования, в которой гидроксииндольное соединение а реагирует с галогенидным соединением b с получением индольного соединения с. Эту реакцию можно проводить, например, в присутствии карбоната калия и иодида калия в полярном апротонном растворителе, например в ацетонитриле.

На стадии 2 индол с реагирует с дихлорпиримидином d с образованием индол-пиримидинового соединения е. Реакцию стадии 2 можно проводить в присутствии HOBt и карбоната калия в полярном растворителе.

На стадии 3 соединение е реагирует с циклогексиламином f, давая соединение индол-пиримидин-амина g. Реакцию на стадии 3 можно проводить в присутствии карбоната калия в полярном растворителе.

Карбоксильная группу соединения g подвергается гидролизу на стадии 4, давая соответствующую карбоновую кислоту h. Гидролиз на данной стадии можно осуществлять, например, в присутствии основания, такого как гидроксид натрия, в полярном апротонном растворителе.

На стадии 5 происходит образование амида, при этом соединение h реагирует с амином i, давая амид соединения j, которое представляет собой соединение формулы I по настоящему изобретение. Синтез амида можно проводить через промежуточное образование хлорида кислоты (не показано) или с помощью различных амид-связывающих агентов, таких как ECDI или другой карбодиимид.

Можно осуществить множество вариаций процедуры по Схеме А, самоочевидных специалистам в данной области техники. Конкретные детали при получении соединений по настоящему изобретению раскрыты в нижеследующих Примерах.

Ниже приведенные сокращения могут быть использованы в нижеследующих Способах получения и Примерах.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ПРИМЕРЫ

Нижеследующие способы получения и примеры даны, чтобы помочь специалистам в данной области техники в более четком понимании и осуществлении настоящего изобретения. Следует понимать, что эти примеры не ограничивают объем настоящего изобретению, а лишь являются его наглядным представлением и иллюстрацией.

Пример 1: (1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*⁶*-тиофен-3-ил)-метанол

К раствору 1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-карбоновой кислоте (5.0 г) в THF (100 мл) добавляли по каплям LAH (35 мл 1М THF раствора). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение пяти часов, и затем охлаждали на ледяной бане. Добавляли воду (3 мл) и NaOH (6 мл 15% водного раствора), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 часов. Смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 3.59 г (1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-ил)-метанола.

Пример 2: 1,1 -диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-ил метиловый эфир толуол-4-сульфоновой кислоты

Смесь (1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-ил)-метанола (3.59 г), 4-толуолсульфонил хлорида (9.11 г) и пиридина (5.8 мл) в хлороформе (50 мл) нагревали до 60°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли с помощью 100 мл 1Н HCl и экстрагировали с помощью метиленхлорида. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (60% EtOAc в гексане) с получением 4.012 г 1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-илметилового эфира толуол-4-сульфоновой кислоты.

Пример 3: 4-(3-Метилсульфанил-пропокси)-1-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индол

Метилсульфанил-пропокси)-1Н-индол (400.88 г) в 250 мл THF, 2 л 1Н K^tBuO и 381 г 4-хлор-2-метилсульфанил-пиримидина в 350 мл THF смешивали при охлаждении, поддерживая температуру не выше 40°C, и оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель затем удаляли в вакууме, и твердый остаток суспендировали в МеОН, фильтровали, промывали с помощью МеОН и воды, и высушивали с получением 87.56% 4-(3-метилсульфанил-пропокси)-1-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индола.

Пример 4: 1-(2-метансульфинил-пиримидин-4-ил)-4-(3-метансульфонил-пропокси)-1Н-индол

К 100.0 г 4-(3-метилсульфанил-пропокси)-1-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индолу в DCM (590 мл) и метанола (145 мл) добавляли по каплям МСРВА (204.3 г, 77%) в DCM (310 мл) и МеОН (155 мл) при -5°C в течение 1.5 ч. Вносили дополнительные 12.0 г МСРВА при 2°C, и реакционную смесь разбавляли через 20 минут с помощью 900 мл МТВЕ, который медленно добавляли в течение 20 мин при 12°C. Смесь оставляли перемешиваться в течение 1.5 ч при 20-22°C. Затем добавляли МТВЕ (300 мл), смесь фильтровали через 20 мин, твердый остаток промывали с помощью МТВЕ (2×200 мл), и растворитель удаляли в вакууме с получением 1-(2-метансульфинил-пиримидин-4-ил)-4-(3-метансульфонил-пропокси)-1Н-индола (90.2%).

Пример 5: метиловый эфир 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты

Этиловый эфир 4-амино-циклогексанкарбоновой кислоты (550 г) и 815 мл DIPEA добавляли к 1-(2-метансульфинил-пиримидин-4-ил)-4-(3-метансульфонил-пропокси)-1 Н-индолу (746.7 г) в 2.5 л DMA, смесь нагревали до 120°C в течение 4 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли по каплям воду (3 л), и получаемый осадок собирали путем фильтрации, промывали с помощью Н₂О и МеОН, и высушивали в вакууме при 48°C в течение ночи с получением метилового эфира 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты (90%).

Пример 6: 4-(3-метансульфонил-пропокси)-1Н-индол

1-Хлор-3-(метансульфонил)-пропан (160 г) добавляли к 1 Н-индол-4-олу (108.77 г) в 1 л MeCN, и добавляли 338 г K₂CO₃ и 13.36 г KI. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 80°C, затем охлаждали и фильтровали через целит. Фильтрат перегоняли в вакууме, и растворитель заменяли на DCM (700 мл). Смесь фильтровали, и растворитель удаляли в вакууме и заменяли на МеОН (600 мл). Растворитель частично удаляли в вакууме при 40°C, в результате чего происходила кристаллизация. После охлаждения снова добавляли МеОН и полученную кашицу фильтровали. Собранный твердый остаток промывали холодным МеОН и высушивали в течение ночи при 35°C в вакууме в атмосфере азота N₂ с получением 4-(3-метансульфонил-пропокси)-1 Н-индола (82%).

Пример 7: 1-(2-хлор-пиримидин-4-ил)-4-(3-метансульфонил-пропокси)-1Н-индол

4-(3-Метансульфонил-пропокси)-1 Н-индол (188.1 г), 2,4-дихлорпиримидин (221.25 г), НОВТ (20.08 г), K₂CO₃ (143.68 г) и DMA (1.6 л) нагревали до 85°C в течение 20 ч. Затем добавляли IPA (5 л), и смесь перемешивали в течение 20 мин, затем охлаждали до 0°C в течение 3 ч и фильтровали. Собранный твердый остаток промывали с помощью IPA и воды, и остаток высушивали в вакууме при 55°C в течение 4 суток с получением 1-(2-хлор-пиримидин-4-ил)-4-(3-метансульфонил-пропокси)-1Н-индола (94%).

Пример 8: (2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-гидразин

4-Хлор-2-пропилсульфанил-пиримидин (15.03 г), гидразин (10.69 г) и карбонат калия (15.37 г) добавляли к этанолу (150 мл), и смесь нагревали до 80°C в течение трех часов. Смесь охлаждали, фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии (CH₂Cl₂/гексан на силикагеле) с получением 7.036 г (2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-гидразина.

Пример 9: 4-метокси-1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индазол

(2-Пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-гидразин (7.036 г), 2-фтор-6-метокси-4-пропилсульфанил-бензальдегид (5.524 г) и DB (16.373 г) добавляли к DMSO (70 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа, затем перемешивали при 80°C в течение одного часа. Смесь охлаждали, разбавляли водой и фильтровали. Собранный твердый остаток промывали водой и высушивали при пониженном давлении с получением 4-метокси-1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индазола.

Пример 10: 1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индазол-4-ол

4-Метокси-1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индазол растворяли в метиленхлориде (100 мл), смесь охлаждали до -78°C и перемешивали. Добавляли BBR₃ (152.62 мкл), и смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре. Смесь делили между слоями воды и метиленхлорида, и объединенные органические слои промывали водой, насыщенным водным NaHCO₃ и солевым раствором, высушивали (MgSO₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индазол-4-ола.

Пример 11: 4-(2-метилсульфанил-этокси)-1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индазол

1-(2-Пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индазол-4-ол (600 мг), карбонат калия (1.104 г) и 1-хлор-2-метилсульфанил-этан 401.9 мг) добавляли к NMP (6 мл), и смесь нагревали до 80°C в течение трех часов. Смесь охлаждали, разбавляли водой и фильтровали. Собранный твердый остаток промывали водой и высушивали при пониженном давлении с получением 705 мг 4-(2-Метилсульфанил-этокси)-1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индазола.

Пример 12: (метансульфонил-этокси)-1-[2-(пропан-1-сульфонил)-пиримидин-4-ил]-1Н-индазол

4-(2-Метилсульфанил-этокси)-1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индазол (705 мг) и мета-перхлорбензойную кислоту (2.109 г, 77% твердого вещества) добавляли к метиленхлориду (10 мл), и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением 10% водного бисульфита натрия и экстрагировали метиленхлоридом. Объединенные органические слои промывали водой, насыщенным водным NaHCO₃ и солевым раствором, высушивали (MgSO₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(2-метансульфонил-этокси)-1-[2-(пропан-1-сульфонил)-пиримидин-4-ил]-1Н-индазола.

Пример 13: этиловый эфир 4-{4-[4-(2-метансульфонил-этокси)-индазол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты

Этиловый эфир 4-{4-[4-(2-метансульфонил-этокси)-индазол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты получали в ходе реакции этилового эфира 4-амино-циклогексанкарбоновой кислоты с 4-(2-метансульфонил-этокси)-1-[2-(пропан-1-сульфонил)-пиримидин-4-ил]-1Н-индазолом, согласно общему способу, описанному в Примере 5.

Пример 14: метиловый эфир 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты

1-(2-Хлор-пиримидин-4-ил)-4-(3-метансульфонил-пропокси)-1Н-индол (300 г), HCl-соль этилового эфира 4-амино-циклогексанкарбоновой кислоты (155 г) и К₂СО₃(170 г) в NMP (2.35 л) перемешивали при 80°C в течение 5 ч, и затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После этого реакционную смесь перемешивали на ледяной бане, добавляли медленно, при перемешивании 2.5 л воды, и продолжали охлаждение до окончания экзотермической реакции. Смесь фильтровали при охлаждении, и полученное твердое вещество промывали с помощью H₂O и высушивали в вакууме в течение ночи с получением метилового эфира 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты (97%).

Пример 15: натриевая соль 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты

К метиловому эфиру 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты (830.0 г) в IPA (7.5 л) добавляли 50% (вес/вес) водный раствор NaOH в H₂O (198.95 г), смесь оставляли перемешиваться при 82°C в течение 1 ч и затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После этого смесь затем фильтровали, твердый остаток промывали с помощью IPA и высушивали в вакууме при 60°C в течение 3 суток с получением 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоксилата натрия (96.9%).

Пример 16: 4-(1,1-иоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-илметокси)-1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индол

К NMP (20 мл) добавляли 1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индол-4-ол (1.56 г) и 1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-илметиловый эфир толуол-4-сульфоновой кислоты (2.37 г), а затем карбонат цезия (5.08 г). Смесь перемешивали при 70°C в течение 60 часов, после чего растворитель удаляли ректификацией. Остаток разбавляли с помощью 1Н HCl и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 2.96 г 4-(1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-илметокси)-1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1Н-индола.

Пример 17: 4-(1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-илметокси)-1-[2-(пропан-1-сульфинил)-пиримидин-4-ил]-1Н-индол

Раствор 4-(1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-илметокси)-1-(2-пропилсульфанил-пиримидин-4-ил)-1 Н-индола (1.16 г) в метиленхлориде (40 мл) охлаждали до 0°C и добавляли мета-перхлорбензойную кислоту (3.58 г). Смесь перемешивали в течение 45 минут и затем гасили добавлением насыщенного водного раствора NaHCO₃. Смесь экстрагировали с помощью метиленхлорида, и объединенные органические слои высушивали (MgSO₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1.2 г 4-(1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-илметокси)-1-[2-(пропан-1-сульфинил)-пиримидин-4-ил]-1Н-индола.

Пример 18: этиловый эфир 4-{4-[4-(1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-илметокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты

К раствору 4-(1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-илметокси)-1-[2-(пропан-1-сульфинил)-пиримидин-4-ил]-1Н-индола (1.2 г) и HCl-соли этилового эфира 4-амино-циклогексанкарбоновой кислоты (1.12 г) в NMP (5 мл) добавляли диизопропилэтиламин (1.4 мл). Смесь выдерживали при 80°C в течение 18 часов, затем охлаждали и вливали ее в воду (75 мл). Смесь экстрагировали метиленхлоридом, объединенные органические слои высушивали (MgSO₄), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (60% EtOAc в гексане) с получением этилового эфира 1.069 г 4-{4-[4-(1,1-диоксо-тетрагидро-1 лямбда*6*-тиофен-3-илметокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты.

Пример 19: натриевая соль 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты

К метиловому эфиру 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоновой кислоты (830.0 г) в IPA (7.5 л) добавляли 50% (вес/вес) водный раствор NaOH в H₂O (198.95 г), и смесь перемешивали при 82°C в течение 1 ч, и затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь затем фильтровали, твердый остаток промывали с помощью IPA, и высушивали в вакууме при 60°C в течение 3 суток с получением 4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоксилата натрия (96.9%).

Пример 20: этиловый эфир (R)-1-(4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбонил)-пиперидин-3-карбоновой кислоты

4-{4-[4-(3-Метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбоксилат натрия (0.4 г), этиловый эфир (R)-пиперидин-3-карбоновой кислоты (0.165 г), ВОР (0.537 г) и DIPEA (0.56 мл) добавляли к DMF (3 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли водой, и полученный осадок собирали путем фильтрации, промывали водой, высушивали при пониженном давлении, и очищали с помощью флэш-хроматографии (DCM/MeOH) с получением 39.6 мг этилового эфира (R)-1-(4-{4-[4-(3-метансульфонил-пропокси)-индол-1-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанкарбонил)-пиперидин-3-карбоновой кислоты, MP=175.0-177.0°C.

Дополнительные соединения, которые можно получить описанными выше способами, приведены в табл.1.

Биологические тесты

Пример 21: анализ JNK in vitro

Активность JNK измеряли по фосфорилированию GST-ATF2 (19-96) с помощью [γ-³³Р] АТР. Энзиматическую реакцию проводили при концентрации АТР равной Km и конечном объеме субстрата равном 40 мкл, в буфере, содержащем 25 мМ HEPES, pH 7.5, 2 мМ дитиотреитол, 150 мМ NaCl, 20 мМ MgCl₂, 0.001% Tween® 20, 0.1% BSA и 10% DMSO. Тест человеческой JNK2α2 включает 1нМ фермент, 1 мкМ ATF2, 8 мкМ АТР с 1 мкКи [γ-³³Р] АТР. Тест человеческой JNK1φ1 включает 2 нМ фермента, 1 мкМ ATF2, 6 мкМ АТР с 1 мкКи [γ-³³Р] АТР. Тест человеческой JNK3 (Upstate Biotech #14-501М) включает 2 нМ фермент, 1 мкМ ATF2, 4 мкМ АТР с 1 мкКи [γ-³³Р] АТР. Энзиматический анализ проводили в присутствии или отсутствии нескольких концентраций вещества. JNK с веществом преинкубировали в течение 10 мин, после чего инициировали энзиматическую реакцию добавлением АТР и субстрата. Реакционную смесь инкубировали при 30°C в течение 30 мин. В конце инкубации реакцию останавливали за счет переноса 25 мкл реакционной смеси к 150 мкл 10% суспензии glutathione-Sepharose® (Amersham # 27-4574-01), содержащей 135 мМ EDTA. Продукт реакции улавливали с помощью аффинной смолы и промывали на фильтровальной поверхности (Millipore, MABVNOB50) с помощью фосфатно-солевого буферного раствора шесть раз, для того чтобы удалить свободный радионуклеотид. Включение ³³Р в ATF2 измеряли количественно на сцинтилляционном счетчике для микроплашетов (Packard Topcount). Ингибирующий эффект соединения по отношению к JNK оценивали по величине IC₅₀, которую определяли из десяти кривых зависимости концентрация-ингибирующий эффект, сглаженных по 3-параметрической модели:

% ингибирования=Максимум/(1+(IC₅₀/[Ингибитор]^{угловой коэффициент}).

Анализ данных проводили в программе Microsoft Excel, с помощью которой количественного определяли параметры. Поясняющие результаты приведены ниже в табл.1.

Пример 22: анализ TNFα-индуцированной продукции IL-6 in vivo на крысах

Самок крыс Уистара линии Han, полученных от компании Charles River Laboratories, выдерживали в течение один недели перед использованием, чтобы они адаптировались и достигли приблизительной массы тела 101-130 г. Крысам вводили тестируемой соединение (N=8 на соединение) орально путем зондового питания за 30 мин до введения провокационной пробы 0.5 мкг рекомбинантного крысиного TNF-a (Biosource). Кровь собирали пункцией сердца через 90 мин после провокационной пробы TNF-α. Получали плазму с помощью пробирок с литий-гепарином (BD microtainer) и замораживали при -80°C до анализа. Уровень IL-6 определяли с помощью набора IL-6 ELISA kit (Biosource), предназначенного для анализа крысиного материала. Определяли величину процента ингибирования и ED₅₀ (которую вычисляли как доза соединения, при которой продукция TNF-α составляет 50% от контрольной величины).

Пример 23: анализ TNFα-индуцированной продукции IL-6 in vivo на крысах:

Самок крыс Уистара линии Han, полученных от компании Charles River Laboratories, выдерживали в течение одной недели перед использованием, чтобы они адаптировались и достигли приблизительной массы тела 114-132 г. Крысам вводили соединение 18 (N=8 на каждую дозу) подкожно, за 30 мин до внутрибрюшинного введения провокационной пробы 0.5 мкг рекомбинантного крысиного TNF-α (Biosource). Кровь собирали пункцией сердца через 90 мин после провокационной пробы TNF-α. Плазму получали с помощью пробирок с литий-гепарином (BD microtainer) и замораживали при -80°C до анализа. Уровень IL-6 определяли с помощью набора IL-6 ELISA kit (Biosource), предназначенного для анализа крысиного материала. Определяли величину процента ингибирования и ED₅₀ (которую вычисляли как доза соединения, при которой продукция TNF-α составляет 50% от контрольной величины).

Пример 24: коллаген-индуцированный артрит у грызунов: самок крыс Lewis, полученных от компании Harlan Laboratories, в возрасте 7-8 недель, выдерживали в течение один недели перед использованием, чтобы они адаптировались и достигли приблизительной массы тела 120-140 г. В нулевой день исследования крысам вводили внутрикожно (в.к.) в нескольких точках на спине эмульсию по 100 мкг бычьего коллагена II типа (Chondrex) в неполном адъюванте Фрейнда (IFA; суммарно 0.1 мл в 2-3 точки). Индукцию артрита обычно наблюдали на 12-14 сутки после введения; тем не менее, осуществляли повторную инъекцию 100 мкг коллагена/IFA примерно на 7-10 сутки (в.к., суммарно до 0.1 мл) у основания хвоста или в альтернативную точку на спине, чтобы синхронизировать индукцию заболевания. Дозирование соединения может быть профилактическим (начиная с момента повторной инъекции или на 1-2 сутки раньше) или терапевтическим (начиная со времени после повторной инъекции, что совпадает с начальными баллами заболевания, 1-2 - см. ниже клиническую оценку заболевания в баллах). Животных наблюдали на протяжении развития и прогрессирования заболевания в течение последующих 21 суток.

Состояние крыс оценивали по системе баллов (описанной ниже), проводя измерения объема лапок с помощью плетизмометрии для каждой лапки, или измеряя толщину лапок или суставов с помощью штангенциркуля. Базовые измерения проводили в нулевой день, и начинали снова при первых признаках опухания вплоть до трех раз в неделю до конца эксперимента. Оценку балов проводили, как описано ниже, для каждой лапки:

1=опухание и/или покраснение лапки или одного пальца.

2=опухание двух или более суставов.

3=сильное опухание лапки, при котором задействовано более чем два сустава.

4=тяжелый артрит целой лапки и пальцев.

Вычисляли артритный индекс у каждой из крыс путем сложения четырех баллов по каждой лапке, что давало максимальный балл равный 16. Для того, чтобы серийно оценивать начало и прогрессирование заболевания, определяли также объем задних лапок с помощью плетизмометрии.

В конце исследования, задние лапки (и другие ткани) собирали для определения веса, а также для гистологического, клеточного и/или молекулярного анализа. Кроме того, собирали кровь пункцией сердца, получали плазму с помощью пробирок с литий-гепарином (BD microtainer) и замораживали при -70°C до анализа. Уровень воспалительных цитокинов (например, TNF-α, IL-1 и IL-6) в плазме или гомогенизированной ткани суставов определяли с помощью наборов ELISA (R&D), предназначенных для анализа крысиного материала. Степень подавления заболевания или защиты от него оценивали по совокупности изменений клинически оцениваемых баллов, объема лапок и гистологических измерений, по сравнению с контрольными животными.

Пример 25: фармакокинетическое исследование на крысах

Исследование проводили на самках крыс Уистара линии Han (CRL: WI) (Charles River, Hollister, СА) весом в диапазоне 180-220 г. Животным было беспечен свободный доступ к стандартной лабораторной пище и питьевой воде, и их содержали в среде постоянной температурой/влажностью. Трем крысам на каждый дозовый режим вводили либо разовые 10 мг/кг IV болюсные дозы (50% циклодекстран/вода), либо разовые 10 мг/кг оральные дозы в виде суспензии, приготовленной на водной основе, содержащей 0.9% NaCl, 0.5% карбоксиметилцеллюлозу натрия, 0.4% полисорбат 80 и 0.9% бензиловый спирт. Собирали кровь у каждой из крыс, анестезированной с помощью CO₂:O₂ (60:40) через орбитальный синус или за счет пункции сердца через 1, 3, 6, 8, и 24 ч после дозирования. Анализировали уровень тестируемого соединения в плазме с помощью метода LC/MS. Согласно этому методу аликвоту плазмы обрабатывают, смешивая с ацетонитрилом для осаждения белков, центрифугируют для осветления супернатанта, затем дополнительно разбавляют формиатным буфером (50 мМ) и инъецируют в HPLC-хроматограф. Тестовые соединения отделяются от эндогенных интерферирующих веществ и последовательно смываются с HPLC-колонки для количественного масс-спектрометрического анализа.

Поскольку настоящее изобретение описано со ссылкой на его конкретные варианты осуществления, специалистам в данной области техники следует понимать, что можно сделать различные изменения и осуществить эквивалентные замены, не выходя за пределы сущности и объема настоящего изобретения. Кроме того, можно осуществить различные модификации, чтобы адаптировать конкретную ситуацию, материал, композицию материалов, способ, стадию или стадии способа, к объективной сущности и объему настоящего изобретения. Подразумевается, что все подобные модификации охвачены формулой изобретения, прилагаемой к настоящему описанию.