×
20.11.2015
216.013.91a7

СПОСОБ ОЦЕНКИ АНАБОЛИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, гистологии и патологической анатомии, и может быть использовано для оценки анаболического действия лекарственных препаратов. Сущность заявляемого способа заключается в том, что дополнительно определяют интенсивность биосинтетических процессов в миосимпластах путем подсчета среднего количества гранул серебра на 1 ядро и определения процентного содержания ядер с 1, 2, 3 и более гранулами, на основании которого делают заключение об анаболическом действии лекарственных препаратов. Осуществление изобретения обеспечивает повышение точности морфологической оценки анаболического действия лекарственных препаратов за счет применения комплекса современных методов исследования (гистологического, гистохимического и морфометрического). Заявляемый способ обладает высокой точностью, прост в применении, эффективен и легко выполним в любой гистологической лаборатории. 2 пр.
Основные результаты: Способ оценки анаболического действия лекарственных препаратов, заключающийся в заборе от экспериментального животного участка скелетной мышцы для исследования, гистологической проводке участка скелетной мышцы, изготовлении и окраске гистологических препаратов гематоксилином и эозином на ядрышковые организаторы, морфометрической оценке гипертрофии мышечных волокон путем измерения поперечного сечения мышечных волокон и определения интенсивности биосинтетических процессов в миосимпластах путем подсчета среднего количества гранул серебра на 1 ядро и определения процентного содержания ядер с 1, 2, 3 и более гранулами по сравнению с интактными (контрольными) животными.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, гистологии и патологической анатомии, и может быть использовано для морфологической оценки анаболического действия лекарственных препаратов.

Одним из клинических проявлений анаболического действия лекарственных препаратов является увеличение объема скелетной мышечной ткани. Этот процесс может осуществляться по саркоплазматическому или миофибриллярному типу (Foss М, Kateyian S.: «Fox′s Physiological Basis for Exercise and Sport.» McGraw Hill. 1998.; G.T. Mangine, N.A. Ratamess, J.R. Hoffman, A.D. Faigenbaum, J. Kang, A. Chilakos The effects of combined ballistic and heavy resistance training on maximal lower - and upper-body strength in recreationally trained men / J Strength Cond Res, Vol. 22 (2008), 132-139).

Рост мышцы при гипертрофии неизменно сопряжен с активацией процессов синтеза белков на рибосомах (Bodine SC et al. Akt/mTOR pathway is a crucial regulator of skeletal muscle hypertrophy and can prevent muscle atrophy in vivo. Nat Cell Biol. 2001 Nov; 3 (11): 1014-9.; Pallafacchina G, Calabria E, Serrano A, Kalhovde JM & Schiaffmo S (2002). A protein kinase B-dependent and rapamycin-sensitive pathway controls skeletal muscle growth but not fiber type specification. Proc Natl Acad Sci USA 99, 9213-9218), то есть с активацией биосинтетических процессов в миосимпластах мышечных волокон. Масса и объем скелетной мышцы может меняться за счет изменения содержания белка, реализуемого через изменение числа ядер миосимпластов, скорости процессов транскрипции, трансляции и интенсивности протеолиза.

Известен способ морфологической оценки гипертрофии мышечных волокон путем биопсии с последующим микроскопическим исследованием и определением площади поперечного сечения мышечных волокон морфометрическими методами, который используется для диагностики нейродистрофических состояний, анаболического действия лекарственных препаратов.

Однако известный способ недостаточно точен, т.к. мышечная ткань при биопсии сильно сокращается и нормальное расположение мышечных волокон нарушается. Площадь поперечного сечения мышечных волокон - величина значительно варьирующая. Она зависит от места, где взята биопсийная проба, угла сечения, количества разрезов мышечного волокна (Hoppeler, Н. Exercise-induced ultrastructural changes in skeletal muscle. 1986. Int. J. Sports Med. 7, 187-204).

Наиболее близким по достигаемому техническому результату является способ оценки функциональной (биосинтетической) активности клеток путем окраски срезов, позволяющий дифференцировать в ядрах эу - и гетерохроматин (Яцковский, А.Н. Метод оценки функциональной активности клеточных ядер / А.Н. Яцковский // Арх. анат. - 1987. - Т. 92. - Вып. 1. - С. 76-79) и по преобладающему типу хроматина оценить интенсивность процессов транскрипции, а следовательно и биосинтетической активности клеток. Способ заключается в заборе участка скелетной мышцы для исследования, гистологической проводке материала, морфометрической оценке гипертрофии мышечных волокон путем измерения поперечного сечения мышечных волокон, изготовления и окраски гистологических препаратов на ядрышковые организаторы альциановым синим и сафранином, имеющих разную молекулярную массу. Различие размеров молекул определяет их способность диффундировать в неодинаковые по плотности структуры. Вследствие этого гетерохроматин окрашивается сафранином, а эухроматин - альциановым синим.

Способ достаточно прост и воспроизводим, используется для диагностики нейродистрофических состояний, анаболического действия лекарственных препаратов, но недостаточно точен из-за низкой информативности, что приводит к затруднению дифференцировки, кроме того, требует учитывать особенности фиксации скелетных мышц.

Авторы предлагают способ оценки анаболического действия лекарственных препаратов, позволяющий с высокой точностью оценить морфологические признаки анаболического действия лекарственных препаратов.

Техническим результатом заявляемого способа является повышение точности оценки анаболического действия лекарственных препаратов за счет подбора комплекса современных методов исследования (гистологического, гистохимического и морфометрического), позволяющих оценить гипертрофию и биосинтетическую активность мышечных волокон скелетной мышечной ткани.

Технический результат достигается тем, что интенсивность биосинтетических процессов в миосимпластах достигается путем определения (измерения) поперечного сечения мышечных волокон, подсчета среднего количества гранул серебра на 1 ядро миосимпласта и определения процентного содержания ядер с 1, 2, 3 и более гранулами в сравнении с интактными (контрольными) животными.

Способ осуществляют поэтапно следующим образом:

1. Забор участка скелетной мышцы для исследования и изготовление гистологических препаратов.

После эвтаназии экспериментальных животных методом декапитации, мышечную область левой задней конечности освобождают от соединительной и жировой ткани, из центральной ее части вырезают кусочки размером 0,5×0,3 см и помещают в 10% раствор забуференного формалина. Гистологический материал фиксируют 24 часа. Используют проводку с изопропанолом и заливку в парафин (Пешков М.В. Метод гистологической проводки тканей с использованием изопропанола и минерального масла / М.В. Пешков, И.И. Дыгало // Архив патологии. - 2009. - №3. - С. 39-41). Срезы тканей толщиной 6-8 мкм изготавливают на ротационном микротоме. Гистологические препараты окрашивают гематоксилином и эозином на ядрышковые организаторы (Бобров И.П. Модификация гистохимического метода выявления ядрышковых организаторов на гистологических срезах / И.П. Бобров, A.M. Авдалян, В.В. Климачев и др. // Архив патологии. - 2010. - №3. - С. 35-37).

2. Ход определения.

Оценивают гипертрофию мышечных волокон путем измерения поперечного сечения мышечных волокон. Для этого препараты, окрашенные гематоксилином и эозином, рассматривают в светооптическом микроскопе ЛОМО Микмед-6 на увеличении ×400. Изготавливают снимки гистологических препаратов с использованием цифровой камеры Canon PS А520. Препараты анализируют на фотографиях с помощью программного пакета Axio Vision 3.4LE.

Определение биосинтетической активности ядер миосимпластов производят путем изучения гистологического препарата и подсчета среднего количества гранул серебра на 1 ядро и определения процентного содержания ядер с 1, 2, 3 и более гранулами на увеличении ×400 светооптического микроскопа.

При определении поперечного сечения мышечных волокон и подсчете среднего количества гранул серебра на 1 ядро миосимпласта и определения процентного содержания ядер с 1, 2, 3 и более гранулами анализируют не менее 100 мышечных волокон.

Заявляемый способ позволяет с высокой точностью оценить морфологические признаки анаболического действия лекарственных препаратов.

Корректность оценки анаболического действия лекарственных препаратов была апробирована экспериментальным путем.

Эксперименты проводились на 30 аутбредных крысах-самцах сток Вистар массой 200-250 г, которые находились в индивидуальных клетках в условиях стандартной лабораторной диеты. Для создания необходимых экспериментальных условий животные были разделены на 2 группы: 1-я группа - интактные крысы; 2-я группа - крысы, которые получали лекарственный препарат.

Результаты исследований представлены в примерах 1-2.

Пример 1. Установлено, что у крыс 1-й группы средний размер поперечного среза мышечного волокна составил 4,7±0,16 мкм. При этом процент ядер с одним ядрышковым организатором составил 46%, с двумя - 48%, с тремя и более - 6%.

Пример 2. У крыс 2-й группы средний размер поперечного среза мышечного волокна составил 5,9±0,14 мкм, что в 1,3 раза превышало показатели в 1-й группе (p<0,05). При этом процент ядер с одним ядрышковым организатором уменьшился в 1,5 раза (31,6%), с двумя практически не изменился (49,2%), а с тремя возрос в 3,2 раза до 19,2% (p<0,001).

Таким образом, полученные результаты наглядно демонстрируют точность применения заявляемого способа, позволяющего с высокой точностью морфологически оценивать анаболический эффект лекарственных препаратов.

Способ оценки анаболического действия лекарственных препаратов, заключающийся в заборе от экспериментального животного участка скелетной мышцы для исследования, гистологической проводке участка скелетной мышцы, изготовлении и окраске гистологических препаратов гематоксилином и эозином на ядрышковые организаторы, морфометрической оценке гипертрофии мышечных волокон путем измерения поперечного сечения мышечных волокон и определения интенсивности биосинтетических процессов в миосимпластах путем подсчета среднего количества гранул серебра на 1 ядро и определения процентного содержания ядер с 1, 2, 3 и более гранулами по сравнению с интактными (контрольными) животными.
Источник поступления информации: Роспатент

Showing 11-20 of 34 items.
10.04.2015
№216.013.3cee

Способ лечения детского церебрального паралича в форме спастической диплегии в поздней резидуальной стадии

Изобретение относится к области медицины, а именно к неврологии. Проводят многоканальную низкочастотную электростимуляцию мышц нижних конечностей с помощью аппарата «АКорД». При этом электростимуляциею осуществляют в соответствии с фазами двигательного акта по схеме: в первый день проводят...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002547086
Дата охранного документа: 10.04.2015
27.04.2015
№216.013.463c

Способ герметизации панкреато-кишечного анастомоза

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии. После локальной резекции головки и тела поджелудочной железы формируют вначале заднюю, затем переднюю губы панкреато-кишечного анастомоза. Производят продольную панкреатоэнтеростомию, отступя 15 см от края культи отключенной по Ру кишечной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549484
Дата охранного документа: 27.04.2015
20.07.2015
№216.013.629b

Способ комплексного лечения хронического бронхита

Изобретение относится к медицине, пульмонологии и может быть использовано для комплексного лечения хронического бронхита. Используют преформированные физические факторы и устраняют с помощью мануальной терапии функциональные блоки грудного отдела позвоночника. В составе комплекса воздействия...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002556790
Дата охранного документа: 20.07.2015
10.08.2015
№216.013.6bbf

Способ реабилитации больных хронической обструктивной болезнью легких легкой и средней тяжести в стадии ремиссии

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано при реабилитации больных хронической обструктивной болезнью легких легкой и средней степени тяжести в стадии ремиссии. Проводят комплексное санаторно-курортное лечение. Через день с азотно-кремнистыми ванными...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002559141
Дата охранного документа: 10.08.2015
27.09.2015
№216.013.8043

Способ лечения веррукозной формы лейкоплакии слизистой оболочки полости рта

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для лечения веррукозной формы лейкоплакии слизистой оболочки полости рта. Для этого за 30 минут перед проведением криодеструкции под слизистую оболочку очага лейкоплакии вводят 0,5 мл 1% раствора никотиновой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002564432
Дата охранного документа: 27.09.2015
10.10.2015
№216.013.8244

Способ определения высокого тромбогенного риска при беременности для проведения гепаринопрофилактики

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и описывает способ определения высокого тромбогенного риска при беременности для проведения гепаринопрофилактики. Способ характеризуется тем, что осуществляют определение пиковой концентрации тромбина (ПКТ) и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002564945
Дата охранного документа: 10.10.2015
20.12.2015
№216.013.9aba

Способ восстановления церебральной гемодинамики у детей резидуального периода натальной травмы шейного отдела позвоночника в виде подвывиха сii

Изобретение относится к медицине, неврологии и может быть использовано при восстановлении церебральной гемодинамики у детей в резидуальном периоде натальной травмы шейного отдела позвоночника в виде подвывиха СII. Больному на фоне комплексного санаторно-курортного лечения ежедневно проводят...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002571235
Дата охранного документа: 20.12.2015
10.04.2016
№216.015.2ca4

Способ коррекции лагофтальма при хроническом параличе лицевого нерва

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначено для коррекции лагофтальма у больных с хроническим параличом лицевого нерва. Осуществляют вкол иглы-носителя с нитью из полидиаксанона с двунаправленными насечками для тредлифтинга в области наружного края орбиты...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002579351
Дата охранного документа: 10.04.2016
10.04.2016
№216.015.2d03

Способ доступа к внутренним органам груди при колото-резаных, колотых и огнестрельных ранениях

Изобретение относится к медицине, судебно-медицинской экспертизе. Формируют доступ при исследовании трупов с колото-резаными, колотыми и огнестрельными ранениями груди. Отсепарирование мягких тканей груди и удаление ребер производят на неповрежденной стороне. Удаляют часть грудины с сохранением...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002579352
Дата охранного документа: 10.04.2016
10.04.2016
№216.015.2dcb

Способ прогнозирования риска развития прогрессирующего дистресса гипотрофичного плода

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития прогрессирующего дистресса гипотрофичного плода. В сроке беременности 18-21 недель проводят допплерометрию маточных артерий (MA) и артерии пуповины (АП). Оценивают...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002579421
Дата охранного документа: 10.04.2016
Showing 11-20 of 46 items.
20.02.2015
№216.013.2830

Способ немедикаментозной профилактики осложнений беременности

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано у беременных женщин, участвующих в программе вспомогательных репродуктивных технологий. Для этого осуществляют воздействие с помощью гипербарической оксигенации в условиях барокамеры при избыточным...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002541745
Дата охранного документа: 20.02.2015
10.04.2015
№216.013.3aab

Способ лечения послеоперационных вентральных грыж

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано при лечении послеоперационных вентральных грыж. Для этого после выполнения грыжесечения на всю площадь грыжевого дефекта укладывают сетчатый имплантат с последующей фиксацией его на мышцах передней брюшной стенки....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002546507
Дата охранного документа: 10.04.2015
10.04.2015
№216.013.3cee

Способ лечения детского церебрального паралича в форме спастической диплегии в поздней резидуальной стадии

Изобретение относится к области медицины, а именно к неврологии. Проводят многоканальную низкочастотную электростимуляцию мышц нижних конечностей с помощью аппарата «АКорД». При этом электростимуляциею осуществляют в соответствии с фазами двигательного акта по схеме: в первый день проводят...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002547086
Дата охранного документа: 10.04.2015
27.04.2015
№216.013.463c

Способ герметизации панкреато-кишечного анастомоза

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии. После локальной резекции головки и тела поджелудочной железы формируют вначале заднюю, затем переднюю губы панкреато-кишечного анастомоза. Производят продольную панкреатоэнтеростомию, отступя 15 см от края культи отключенной по Ру кишечной...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549484
Дата охранного документа: 27.04.2015
20.07.2015
№216.013.629b

Способ комплексного лечения хронического бронхита

Изобретение относится к медицине, пульмонологии и может быть использовано для комплексного лечения хронического бронхита. Используют преформированные физические факторы и устраняют с помощью мануальной терапии функциональные блоки грудного отдела позвоночника. В составе комплекса воздействия...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002556790
Дата охранного документа: 20.07.2015
10.08.2015
№216.013.6bbf

Способ реабилитации больных хронической обструктивной болезнью легких легкой и средней тяжести в стадии ремиссии

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано при реабилитации больных хронической обструктивной болезнью легких легкой и средней степени тяжести в стадии ремиссии. Проводят комплексное санаторно-курортное лечение. Через день с азотно-кремнистыми ванными...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002559141
Дата охранного документа: 10.08.2015
27.09.2015
№216.013.8043

Способ лечения веррукозной формы лейкоплакии слизистой оболочки полости рта

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для лечения веррукозной формы лейкоплакии слизистой оболочки полости рта. Для этого за 30 минут перед проведением криодеструкции под слизистую оболочку очага лейкоплакии вводят 0,5 мл 1% раствора никотиновой...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002564432
Дата охранного документа: 27.09.2015
10.10.2015
№216.013.8244

Способ определения высокого тромбогенного риска при беременности для проведения гепаринопрофилактики

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и описывает способ определения высокого тромбогенного риска при беременности для проведения гепаринопрофилактики. Способ характеризуется тем, что осуществляют определение пиковой концентрации тромбина (ПКТ) и...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002564945
Дата охранного документа: 10.10.2015
20.12.2015
№216.013.9aba

Способ восстановления церебральной гемодинамики у детей резидуального периода натальной травмы шейного отдела позвоночника в виде подвывиха сii

Изобретение относится к медицине, неврологии и может быть использовано при восстановлении церебральной гемодинамики у детей в резидуальном периоде натальной травмы шейного отдела позвоночника в виде подвывиха СII. Больному на фоне комплексного санаторно-курортного лечения ежедневно проводят...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002571235
Дата охранного документа: 20.12.2015
10.04.2016
№216.015.2ca4

Способ коррекции лагофтальма при хроническом параличе лицевого нерва

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначено для коррекции лагофтальма у больных с хроническим параличом лицевого нерва. Осуществляют вкол иглы-носителя с нитью из полидиаксанона с двунаправленными насечками для тредлифтинга в области наружного края орбиты...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002579351
Дата охранного документа: 10.04.2016
+ добавить свой РИД