СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОБОСТРЕНИЯ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ТРЕТЬЕМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ ПРИ СНИЖЕНИИ В ЭРИТРОЦИТАХ ГЛЮТАТИОНРЕДУКТАЗЫ

1. Цель изобретения - выявить, что при снижении активности в эритроцитах периферической крови беременных в третьем триместре гестации глютатионредуктазы отмечается обострение цитомегаловирусной инфекции.

2. Изобретение относится к медицине, а именно к разработке способа диагностики обострения цитомегаловирусной инфекции при снижении в эритроцитах периферической крови глютатионредуктазы.

3. Раскрытие изобретения

Наряду с гликолизом (анаэробным расщеплением глюкозы) в эритроцитах имеет место прямой путь окисления глюкозы до углекислоты и воды - гексомонофосфатный шунт [2]. В этом цикле НАДФ восстанавливается в НАДФ-Н. Нарушение реакций пентозного цикла при некоторых заболеваниях связано с разрушением структур эритроцитов и наступлением гемолитических кризов [3]. Образующаяся в реакции пентозного цикла НАДФ-Н используется в эритроцитах для восстановления окисленного глютатиона при участии глютатионредуктазы. Восстановление глютатиона при участии НАДФ-Н глютатионредуктазой связано с регенерацией окисленной формы НАДФ-Н. Восстановленный глютатион (GSH) на 96% принимает участие в реакции с тиоловыми группами. Сохранение глютатиона в восстановленном состоянии необходимо для предохранения ферментов эритроцитов от инактивации и предотвращения действия перекисей на мембрану эритроцитов [4-6]. При окислении восстановленного глютатиона снижается интенсивность гликолиза в эритроцитах [4]. Учитывая вышеизложенное, нормальное поддержание уровня глютатионредуктазы в эритроцитах обеспечивает их устойчивый ферментативный метаболизм и морфофункциональную целостность мембран. При обострении инфекционных процессов в организме беременных отмечается снижение активности глютатионредуктазы в эритроцитах периферической крови [1]. Изменение содержания глютатионредуктазы при обострении цитомегаловирусной инфекции в доступной литературе не было отмечено.

4. Новая техническая задача

Определяя уровень глютатионредуктазы в эритроцитах периферической крови у беременных на третьем триместре гестации, диагностируется обострение цитомегаловирусной инфекции.

5. В доступной литературе аналогов по данному вопросу не отмечено.

6. Осуществление изобретения

6.1. Исследования проводились на базе акушерского отделения ФГБУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН. Обследовано 25 рожениц в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией в стадии обострения (основная группа) и 20 беременных без патологии (контрольная группа). Диагноз обострения хронической цитомегаловирусной инфекции устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности (65%), а также наличия ДНК к ЦМВ.

6.2. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с учетом человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.

6.3. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat Fax 2100» (USA) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПЦР на аппарате ДТ-96 (Россия) с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

6.4. Глютатионредуктаза определялась спектрофотометрическим методом с использованием набора реагентов «Sentinel Diagnostics» (Италия) на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (USA).

6.5. Статистическая обработка проводилась непарным параметрическим критерием Стьюдента и методом Фишера.

В процессе исследования были получены следующие результаты: в эритроцитах периферической крови беременных на третьем триместре гестации снижается содержание глютатионредуктазы до 4,48±0,22 Ед/гНb (контроль - 9,00±0,15 Ед/гНb). Исследование периферической крови отмечает, что в это время происходит обострение цитомегаловирусной инфекции до титра антител к цитомегаловирусу 1:1600.

ЛИТЕРАТУРА

1. Луценко М.Т., Андриевская И.А. «Способ диагностики дыхательной функции эритроцитов беременных путем определения активности глютатионредуктазы в эритроцитах периферической крови при цитомегаловирусной инфекции». Патент №2402276, опубликован 27.10.2010, Бюллетень «Изобретения, полезные модели» № 30.

2. Рябов С.И. Основы физиологии и патологии эритропоэза. Л.: Медицина. Ленинградское отделение, 1971. 251 с.

3. Федоров Н.А. Нормальное кроветворение и его регуляция. М.: Медицина, 1976. 543 с.

4. Brewer G., Pewell R.D. Hexokinase activity as a function of age of the human erythrocytes // «Nature» (Lond). 1963. Vol. 199. 704 p.

5. Dische Z. The pentose phosphate metabolism in red cells // In: The red blood cell, Ed. Bishop Ch. and Surgenor D. New York, 1964. 189 p.

6. Jaffe E.R. Introduction to discussion of red cell. GSH metabolism the function of reduced glutatione in human erythrocytes // «Exp. Eye Res». 1971. Vol. 11. 306 р.