Результат интеллектуальной деятельности: СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ПОЛИПОЗНОГО РИНОСИНУСИТА У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии. Бронхиальная астма, сочетающаяся с полипозным риносинуситом, заслуживает особого внимания. Полипы носа усиливают проявления астмы (8). Доказательством роли полипозного риносинусита как триггера бронхиальной астмы могут служить многочисленные сведения об улучшении течения последней после лечения полипозного риносинусита (9).

Большинство авторов считают полипозный риносинусит инфекционно-аллергическим заболеванием (3).

Существует предположение о возможной этиологической роли инфекции Chlamydia pneumoniae в образовании носовых полипов (6). По данным D.B. Conley et al. (2004) (7), у 50% больных хроническим полипозным синуситом выявляется специфический IgE к стафиллококковому экзотоксину. Инфекция верхних дыхательных путей отображается в лабораторных показателях эндотоксикоза крови и включает биохимические (5) биофизические (4) и гематологические (2) исследования.

Синдром эндогенной интоксикации, в большей или меньшей степени, сопутствует любому соматическому, инфекционному, хирургическому и другим заболеваниям (2).

Существует способ прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой, заключающийся в биопсии слизистой носа с последующим цитологическим (морфологическим) исследованием (1).

Этот способ взят в качестве прототипа.

Недостатки известного способа:

1. Невозможность прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой.

2. Биопсия может спровоцировать осложнения в течении бронхиальной астмы виде бронхоспазма и кровотечения.

3. При заборе биоптата сложно найти и прогнозировать участок пролиферативно измененной слизистой.

Прогнозирование развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой позволяет выбрать наиболее оптимальный метод лечения.

Целью предлагаемого способа является прогнозирование развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой по лабораторным показателям эндотоксикоза с помощью дискриминантного анализа.

Цель достигается тем, что прогнозирование развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой, с помощью дискриминантного анализа, осуществляется путем определения в крови пациентов показателей эндотоксикоза - лейкоцитов, молекул средней массы, креатинина, мочевины и скорости оседания эритроцитов, с последующим введением их в дискриминантное уравнение и его решением.

Исследования проведены у 42 пациентов 1 группы, с бронхиальной астмой и полипозным риносинуситом; у 68 пациентов 2 группы, с бронхиальной астмой без полипозного риносинусита.

Способ содержит следующие приемы.

1. Метод подсчета лейкоцитов в камере.

Взятие и разведение крови производят пробирочным методом. В пробирку (лучше видалевскую) вносят 0,4 мл разводящей жидкости и 0,02 мл капиллярной крови. Полученное разведение практически считается равным 1:20. В качестве разводящей жидкости обычно употребляют 3-5%-ный раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим (уксусная кислота лизирует эритроциты, метиленовый синий окрашивает ядра лейкоцитов). Перед заполнением камеры Горяева пробирку с разведенной кровью тщательно встряхивают. Камеру заполняют так же, как для подсчета эритроцитов.

Лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов (1-2 на большой квадрат), поэтому для точности подсчет производят в 100 больших квадратах (неразграфленных).

Расчет: в 100 больших квадратах (1600 малых) сосчитано а лейкоцитов. Помня, что объем малого квадрата равен 1/4000 мм³, а кровь разведена в 20 раз, рассчитывают количество лейкоцитов в 1 мкл крови: 4000×20 и делят на 1600=а×1/2. Практически для получения действительного содержания лейкоцитов в 1 мкл крови достаточно полученное при подсчете число разделить пополам и приписать 2 нуля, (норма - 4-9×10^9/л).

2. Определение в крови молекул средней массы.

Для определения среднемолекулярных пептидов экспресс-методом в центрифужную пробирку наливают 1,0 мл крови, добавляют 0,5 мл 10% трихлоруксусной кислоты. Эту смесь встряхивают и цинтрифугируют в течение 30 минут при 3000 об/мин. Детекцию надосадочной части биологической жидкости, освобожденной от грубодисперстных белков, осуществляют после предварительного разведения, при котором к 0,5 мл надосадочной части биологической жидкости добавляют 4,5 мл дистиллированной воды. Измерения осуществляют на спектрофотометре СФ-16 или HITACHI-557 (Япония) при длине волны 280 нм (Е280). Норма - 0,24-0,28 единиц оптической плотности (ед. оп. пл.).

3. Ферментативный метод определения мочевины в крови.

Основанный на использовании фермента лейциндегидрогеназы, позволяющий избежать вмешательства в реакцию эндогенного аммония. Метод основан на использовании фермента лейциндегидрогеназы, связывающей ионы NH4+ в реакции с образованием L-изолейцина после гидролиза мочевины при участии уреазы. Метод проводят в два этапа.

Первый этап - связывание эндогенного NH4+. NH4+, содержащийся в исследуемом образце (сыворотка крови или моча), реагирует с 2-кетоизокапроновой кислотой в присутствии НАД (никотинамидадениндинуклеотид) H₂ и лейциндегидрогеназы с образованием L-изолейцина.

Второй этап. Определение концентрации NH4+ проводят с помощью той же реакции после добавления в среду инкубации фермента уреазы (норма 2,5-6,4 ммоль/л).

4. Ферментативный метод определения креатинина в крови.

Принцип данного метода заключается в том, что под действием креатининдеаминазы, содержащейся в стартовом реактиве креатинин превращается в устойчивое производное 1-метилгидантоин с высвобождением молекулы аммиака. Затем под действием глутаматдегидрогеназы осуществляется окисление НАДФ (никотинамидадениндинуклеотидфосфат)Н, сопровождающееся уменьшением поглощения при 340 нм и пропорциональное концентрации аммиака в смеси. Весь содержащийся в образце пациента аммиак предварительно удаляется глутаматдегидрогеназой перед добавлением стартового реактива, содержащего креатининдеаминазу.

Креатининдеаминаза

Креатинин+Н₂О→1-метилгидантоин+NH₃

Глутаматдегидрогеназа

NH₃+а-Окоглутарат+НАДФН+Н⁺→L-Глутамат+НАДФ⁺+Н₂О

Норма: мужчины - 53-97 ммоль/л

Женщины - 62-115 ммоль/л

Методика определения скорости оседания эритроцитов Вестергрена включает следующие этапы:

1. венозная кровь берется в вакуумные пробирки с К-ЭДТА (калий-этилендиаминтетраацетат) (капиллярная кровь берется в пробирки с К-ЭДТА);

2. пробу венозной (капиллярной) крови смешать с 5% раствором натрия цитрата в соотношении 4:1;

3. произвести забор крови в капилляр Вестергрена;

4. через 1 ч измерить скорость оседания эритроцитов по высоте столба прозрачной плазмы.

Нормы - мужчины - 1-10 мм/ч

Женщины- 2-15 мм/ч

Дискриминантами анализ позволил выявить функциональные параметры, по которым больные 2 группы отличались от больных 1 группы, и построить прогностическое дискриминантное уравнение:

D=6,900×лейкоциты(×10^9/л)+2,640×скорость оседания эритроцитов (мм/ч)+17,819×молекулы средней массы(ед. оп. пл.)+1,127×креатинин (мк моль/л)+24,801×мочевина(ммоль/л)

Граничное значение дискриминантной функции 223,12. При D больше или равно граничному значению дискриминантной функции можно прогнозировать развитие полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой. При D меньше граничного значения дискриминантной функции прогнозируют отсутствие полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой.

Данным методом обследовано 110 пациентов, из них 42 больных с бронхиальной астмой и полипозным риносинуситом, у 68 пациентов была бронхиальная астма без полипозного риносинусита.

Правильный прогноз подтвердился в 97,5% случаев.

Пример 1.

Больной А., 43 лет. Поступил с жалобами на приступы удушья. Клинический диагноз: Бронхиальная астма легкое персистирующее течение. Показатели крови: лейкоциты - 5,2×10X 9/л, скорость оседания эритроцитов - 5 (мм/ч), молекулы средней массы - 0,116 (ед. оп. пл.), креатинин - 64 (мк моль/л), мочевина - 2,8 (ммоль/л).

Указанные параметры вносили в дискриминантное уравнение:

D=6,900×5,2×10^9/л+2,640×5(мм/ч)+17,819×0,116(ед. оп. пл.)+1,127×64(мк моль/л)+24,801×2,8(ммоль/л)

Граничное значение дискриминантной функции 192,3; D меньше граничного значения (223,12), поэтому прогнозировано отсутствие полипозного риносинусита у больного с бронхиальной астмой.

Пример 2.

Больной К., 51 года. Поступил в стационар с жалобами на кашель, приступы удушья, заложенность носа. Клинический диагноз: Бронхиальная астма легкое персистирующее течение. Показатели крови: лейкоциты-8,5×10Х 9/л (%), скорость оседания эритроцитов - 10 (мм/ч), молекулы средней массы - 0,132 (ед. оп. пл.), креатинин - 97 (мк моль/л), мочевина - 7,2 (ммоль/л).

Указанные параметры вносили в дискриминантное уравнение:

D=6,900×8,5×10^9/л(%)+2,640×10(мм/ч)+17,819×0,132(ед. оп. пл.)+1,127×97(мк моль/л)+24,801×7,2(ммоль/л)

Полученный результат был больше граничного значения дискриминантной функции - 375,26, указывал на развитие полипов носа у больного бронхиальной астмой, которое подтвердилось морфологическим результатом исследования биоптата, выявившим слизисто-железистые полипы носа.

Используемые информационные источники

1. Агапов К.Т. Полипозный риносинусит. [Текст] / К.Т. Агапов. - М.: МЕДИЦИНА, 1991. - 152 с.

2. Беляков Н.А., Мирошниченко А.Г., Малахова М.Я., Изотова О.Г. Верификация эдотоксикоза у больных с разлитым перитонитом // Эфферентная терапия. - 1995. - Т.1, №2 - с. 14-19.

3. Муминов А.И., Плужников М.С., Рязанцев С.В. Полипозные риносинуситы. - Ташкент, 1990. - С. 67-69

4. Федоровский Н.М., Каперская К.С., Куренков Д.В., Смоляр А.В. Связывающая способность альбумина в оценке эндотоксемии // Вест, интенсивной терапии. - 1998. - N4. - С. 21-23.

5. Харьков А.Л. Эндогенные токсины в хирургии: современные исследования в биологии и медицине. Сообщение II. Диагностика // Клин. хирургия. - 1997. - N 11-12. - С. 90-93.

6. Apan T.Z. The possible association of Chlamydia pneumoniae infection with nasal polyps [Text] / T.Z. Apan, D. Alpay, Y.Alpay // Eur. Arch. Otorhinolaryngol. - 2007. - Vol. 264, №1. - P. 27-31.

7. Conley D.B. Chronic sinusitis with nasal polyps: staphylococcal exotoxin immunoglobulin E and cellular inflammation [Text] / D.B. Conley, A. Tripathi, A.M. Ditto, K. Reid, L.C. Grammer, R.C. Kern // Am.J. Rhinol. - 2004. - Vol. 18, №5. - P. 273-278.

8. Miller M.R. Standardisation of spirometry [Text] / M.R. Miller, J. Hankinson, V. Brusasco [et al.] // Eur. Respir. J. - 2005. - Vol. 26. - P. 319-338.

9. Smart B.A. Is rhinosinusitis a cause of asthma? [Text] / B.A. Smart // Clin. Rev. Allergy Immunol. - 2006. - Vol. 30, №3. - P. 153-164.