СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РЕАГЕНТА ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ МЕЧЕНОГО ТЕХНЕЦИЕМ-99м НОРФЛОКСАЦИНА

Изобретение относится к области фармацевтической химии, в частности к способам получения реагентов для приготовления радиофармпрепаратов (РФП), применяемых для диагностики бактериальных воспалений.

Возможность использования противомикробных препаратов из группы фторхинолонов в ядерной медицине была впервые продемонстрирована на ципрофлоксацине гидрохлориде. Введение изотопной метки технеция-99m (^99mТс) в его структуру явилось новым подходом к проблеме визуализации воспалительных очагов. Обосновывается это тем, что фторхинолоны связывают и ингибируют фермент ДНК-гиразу, присутствующий в делящихся бактериях. Вследствие этого нарушается репликация ДНК и синтез клеточных белков микроорганизмов. Считается, что фторхинолоны не связываются с мертвыми бактериями и не накапливаются в участках асептического воспаления. Эти свойства обеспечивают высокую специфичность РФП на их основе к воспалительным очагам [В.С. Скуридин, Н.В. Варламова, М.Л. Белянин, С.И. Сазонова, Ю.Н. Конковская. Получение меченого технецием-99 м ципрофлоксацина для диагностических исследований // "Химико-фармацевтический журнал". - 2009. - №9. - С.35-39].

Известен способ получения реагента для приготовления меченого технецием-99 м норфлоксацина [В. Варламова, В.С. Скуридин, С.И. Сазонова. Получение и медико-биологические испытания меченого технецием-99 м норфлоксацина гидрохлорида. // Бюллетень сибирской медицины, 2010. - т.9, №6. - С.108-115], заключающийся в приготовлении солянокислого раствора олова (II) хлорида дигидрата с концентрацией олова 7 мг/мл путем осторожного смешивания 0,07 мг олова (II) хлорида дигидрата и 0,2 мл 1М соляной кислоты с последующим доведением объема дистиллированной водой до 10 мл; 0,25-0,3 мг приготовленного раствора упаривают во флаконах до суха при температуре 100°С, добавляют 4-5 мг порошка норфлоксацина гидрохлорида, укупоривают, стерилизуют в автоклаве и хранят в холодильнике.

Данный способ является наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату и выбран в качестве прототипа.

Недостатком способа прототипа является упаривание раствора олова (II) хлорида дигидрата до суха при температуре 100°С, что снижает стабильность и срок годности реагента для приготовления радиофармпрепарата за счет изменения химических свойств олова (II) хлорида дигидрата, вследствие воздействия высокой температуры.

Задача изобретения - создание способа приготовления реагента для получения меченого технецием-99 м норфлоксацина, позволяющего увеличить срока годности реагента.

Технический результат заключается в повышении стабильности реагента для получения меченого технецием-99 м норфлоксацина.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе приготовления реагента для получения меченого технецием-99 м норфлоксацина, включающем приготовление солянокислого раствора олова (II) хлорида дигидрата и его смешивание с порошком норфлоксацина гидрохлорида, согласно изобретению, полученную смесь замораживают при температуре жидкого азота, затем подвергают лиофильной сушке при температуре Т=-50ºС в вакууме - 0,0015 Торр, в течение не менее 20,5 часов, с последующим досушиванием в течение не менее 5,5 часов при температуре +16±2°С.

Новым в предлагаемом способе является лиофилизация порошка норфлоксацина гидрохлорида и раствора хлорида олова, включающая в себя заморозку и выдерживание в http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%92%D0%B0%D0%BA%D1%83%D1%83%D0%BC" \o "Вакуумой камере, где происходит возгонка растворителя и удаление основной массы Н₂О, с последующим удалением связанной влаги (досушивание).

Лиофилизация раствора хлорида олова увеличивает стабильность и срок годности реагента для приготовления радиофармпрепарата на основе меченого технецием-99 м норфлоксацина, а также не влияет на качество и радиохимическую чистоту указанного радиофармпрепарата.

Новые признаки проявили в заявляемой совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и неочевидные для специалиста. Идентичной совокупности признаков в известных технических решениях не обнаружено.

Изобретение может быть использовано в химико-фармацевтической промышленности при разработке новых радиофармпрепаратов на основе меченого технецием-99 м норфлоксацина.

На фиг. 1 изображена сцинтиграмма тела крысы через 1 ч после внутривенного введения радиофармпрепарата на основе меченого технецием-99 м норфлоксацина, который был получен из реагента, приготовленного по предлагаемому способу.

Осуществление способа рассмотрим на примере конкретного выполнения. В мерную пробирку вносят навеску олова (II) хлорида дигидрата (SnCl₂·2Н₂О) массой 0,07 г, осторожно приливают 0,2 мл 1М соляной кислоты (НСl). По окончании растворения доводят объем кипяченой дистиллированной водой до 10 мл. Полученный раствор имеет концентрацию олова 7 мг/мл. Использовали только свежеприготовленный раствор.

Во флакон вместимостью 10 мл вносят 0,25-0,30 мг приготовленного раствора олова и 4-5 мг порошка норфлоксацина гидрохлорида. Содержимое флакона замораживают при температуре жидкого азота, погружая его в контейнер с жидким азотом. После этого флакон помещают в камеру сублиматора и подвергают лиофильной сушке при заданных параметрах лиофилизатора: Т=-50ºС, вакуум - 0,0015 Торр. При этих условиях проводят лиофильную сушку в течение не менее 20,5 часов. Затем флакон перемещают в верхнюю лиофильую камеру и проводят досушивание в течение не менее 5,5 ч при температуре +16±2°С.

В первой фазе процесса лиофилизации глубокая и быстрая заморозка важна для получения качественного продукта, т.к. размеры кристаллов льда получаются меньше и они быстрее испаряются на следующем этапе.

В ходе лиофилизации лед удаляется из замороженного образца в процессе возгонки. Процесс осуществляется за счет работы коллектора и вакуумного насоса. Для обеспечения этого процесса в рабочей камере создается высокий вакуум (0,0015 Торр) Температура коллектора, в котором конденсируется пары воды и растворителя, должна быть минимум на 15÷20°С ниже, чем температура плавления образца.

Такие параметры процесса как температура сушки, величина вакуума, температура конденсации взаимозависимы, и изменения одного из них неизбежно ведет за собой изменение других параметров.

Процесс досушивания при температуре ниже +16±2°С протекает более длительное время, при температуре выше +20°С происходит агломерация частиц.

В работе использовали лиофильную сушилку FreeZone (Labconco).

Из приготовленного реагента получили радиофармпрепарат, путем внесения во флакон с реагентом 5 мл раствора натрия пертехнетата, ^99mTc с активностью 110-1480 МБк/мл с последующим инкубированием в течение 20 мин до полного растворения. Радиохимическая чистота полученного радиофармпрепарата составила 98,8% на момент приготовления и через 4 часа после приготовления. Испытания, проведенные на экспериментальных животных, показали, что после внутривенного введения накопление радиофармпрепарата в печени меньше, чем в почках (фиг. 1), что соответствует должному и свидетельствует о сохранении качества радиофармпрепарата.

Определение срока хранения реагентов проводилось на опытной партии из 24 флаконов. Образцы хранились при температуре от +2 до +10ºС. Для определения срока хранения из приготовленных образцов реагента получали радиофармпрепарат с последующим определением в нем радиохимической примеси (РХП) невосстановленного ^99mТс (IV), которая по существующим нормам не должна превышать 1%. Изготовление радиофармпрепарата, с последующим определением в нем радиохимической примеси невосстановленного ^99mТс (IV), проводили с интервалом 30 суток. Было показано, что реагенты сохраняют свои свойства в течение 1 года, что соответствует требованиям предъявляемым к сроку их хранения. Таблица 1 - определение радиохимической примеси в РФП «Норфлоксацин, ^99mТс» при определении срока хранения реагента.

Описанный выше способ по сравнению с известными имеет преимущество, заключающееся в увеличении срока годности реагентов для приготовления радиофармпрепарата на основе меченого технецием-99 м норфлоксацина.

Таблица 1