Способ повышения бактерицидной активности окситетрациклина

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для изучения антибиотикочувствительности микроорганизмов.

В современной антибактериальной терапии ведущее место принадлежит антибиотикам. Опыт последних лет свидетельствует о том, что в ходе их широкого применения развивается антибиотикорезистентность микрофлоры и даже антибиотикозависимость, что естественно приводит к потере терапевтического эффекта антибиотика как противомикробного препарата. При этом приспосабливаемость микрофлоры к антибиотикам настолько высока, что внедрение новых антибиотиков не соответствует нуждами медицины и ветеринарии. В большинстве случаев устойчивость обусловлена наличием у микроорганизмов особых генетических детерминант-R-плазмид, способных передаваться между таксономически далекими бактериями, придавая им резистентность к отдельным антибиотикам и их комбинациям (Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках // М.: Изд-во МГУ; Наука, 2004. - С. 128).

Использование нанотехнологий в фармакологии позволяет изменить свойства исходных веществ, повысить их специфическую активность, биодоступность, растворимость и ряд других показателей, однако их и влияние на персистентные характеристики микрофлоры, такие как антибиотикочувствительность и антибиотикорезистентность еще мало изучены.

Наиболее близким решением, принятым за прототип, является способ повышения эффективности антибиотиков (Патент №2400218), где повышена бактерицидная активность антибиотиков с использованием 0,15±0,05% раствора формалина.

Недостатками этого способа являются: использование формалина, применение которого во многих странах мира запрещено по причине высоких канцерогенных свойств и высокотоксичных соединений, образующихся в процессе хранения, а так же выпадение его в осадок при +9°С и ниже (Медуницин Н.В. Экспертный комитет по биологической стандартизации ВОЗ. Биопрепараты, №1, 2001. - С. 21-22).

Задачей заявленного изобретения является создание способа повышения бактерицидной активности окситетрациклина.

Поставленная задача достигается тем, что к 0,2 мл водного раствора окситетрациклина с содержанием от 1,21 до 625,0 мкг/мл, вносят 0,2 мл препарат арговит - с содержанием действующего вещества от 0,16 до 15,0 мкг/мл.

Препарат арговит представляет собой комплекс высокодисперсных наночастиц серебра (12 мг/мл) полученных электролучевым способом, поливинилпирролидона и водного раствора. Препарат обладает широким спектром антимикробного действия в отношении грамположительных и грамотрицательных, аэробных и анаэробных, спорообразующих и аспорогенных бактерий в виде монокультур и микробных ассоциаций. Производитель ООО НПЦ «Вектор Вита», e-mail: vectot-vita@ngs.ru. Очевидным преимуществом этого способа является отсутствие высокий токсичности препарата серебра арговит (4 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76) в сравнении с формальдегидом (2 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76).

Результат повышения антибиотикочувствительности условно-патогенной микрофлоры определяют по методу последовательных серийных разведений в МПБ (Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.Н. и др. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии. - 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 1984. - 256 с.).

Способность наночастиц серебра (Ag) препарата арговит повышать бактерицидную активность окситетрациклина иллюстрируется ниже следующими примерами.

К 0,2 мл водного раствора окситетрациклина с содержанием от 1,21 до 625,0 мкг/мл, вносили 0,2 мл препарат арговит - с содержанием действующего вещества от 0,16 до 15,0 мкг/мл, а результат повышения бактерицидной активности определяли по изменению значения минимальной подавляющей концентрации микрофлоры используя метод последовательных серийных разведений в МПБ с внесением 0,2 мл 1,5⋅10⁶ КОЕ/мл условно-патогенных микроорганизмов референтного штамма Е. coli АТСС 25922 и изолята Е. coli при последующем инкубировании в течении 24 ч при Т=37,5±0,5°С (Таблица 1).

Результаты исследований показали, что препарат арговит вызывал рост бактерицидной активности окситетрациклина в отношении референтного штамма Е. coli АТСС 25922 и изолята Е. coli выделенного от крупного рогатого скота при эндометрите в 64-258 раз.

Определение терапевтической эффективности антибактериального препарата окситетрациклин совместно с арговитом иллюстрируется примером промышленной применимости при лечении эндометрита у коров.

Для изучения сравнительной эффективности терапии эндометрита у коров по принципу аналога было сформировано две группы животных: первой группе (n=10) вводили рыбий жир внутриматочно 0,3 мл / на кг живой массы 1 раз в 48 часов, окситетрациклин гидрохлорид 40 мг / на кг живой массы 1 раз в 48 часов, трициллин 12 мг / на кг живой массы, 1 раз в 48 часов и утеротон 0,02 мл / на кг живой массы, внутримышечно, однократно 1 раз в 48 часов. Второй группе (n=10) вводили препарат, окситетрациклин гидрохлорид 40 мг / на кг живой массы 1 раз в 48 часов совместно с арговитом в виде 20,0% водного раствора внутримышечно в дозе 0,08 мл / на кг живой массы, 1 раза в 48 часов, утеротон 0,02 мл / на кг живой массы, внутримышечно, однократно 1 раз в 48 часов.

Терапевтическую эффективность препарата содержащего окситетрациклин и окситетрациклин с арговитом определяли по проценту выздоровления. Средняя продолжительность лечения эндометрита у коров контрольной группы составила 14,1±0,6 суток, в то время как при терапии эндометрита препаратами в опытной группе, средний срок лечения составил 10,3±0,1 суток.

Эффективность лечения в контрольной группе составила 80%, в опытной 100%, то есть на 20% выше. Использование данного способа позволяет оценивать повышение бактерицидной активности окситетрациклина препаратом арговит.