Результат интеллектуальной деятельности: Способ определения биологического возраста трупа

Изобретение относится к судебной медицине, а именно к судебно-медицинской экспертизе, криминалистике и предназначено для определения биологического возраста трупа при фрагментации тела.

По литературным данным проблема судебно-медицинской идентификации личности всегда была объектом особого внимания, и значительную актуальность она приобретает в случаях массовых жертв при техногенных чрезвычайных ситуациях, сопровождающихся фрагментацией тел. Вследствие глубоких термических поражений кожи особые приметы (рубцы, татуировки) утрачивают свое диагностическое значение. При этом визуальное опознание погибшего зачастую невозможно (Баринов Е.Х., Щербаков В.В., Федулова М.В., Гончарова Н.Н. Идентификация личности при чрезвычайных ситуациях с массовыми человеческими жертвами /под ред. Ю.И. Пиголкина. - М.: «Медицинский информационно-аналитический центр», 2008. - 235 с.).

Наиболее близким является способ определения биологического возраста трупа по фрагменту мозжечка, взятому в верней полулунной дольке, и подсчету высоты грушевидных нейронов, расстоянию между их телами и количеству иммунопозитивных к S-100 тел грушевидных нейронов (Баландин А.А., Железнов Л.М., Баландина И.А., Косарева П.В., Бородулин Д.В. Способ определения биологического возраста трупа. - Патент на изобретение РФ №2623141 от 22.06.2017).

Недостатки: выявление небольших возрастных периодов (20-30 лет и 60-70 лет), трудоемкость способа (подсчет высоты каждого грушевидного нейрона и расстояния между их телами).

Технический результат: увеличение возрастных периодов, упрощение и удешевление способа при высокой точности.

Поставленная задача решается способом определения биологического возраста трупа, заключающимся в том, что в участке неповрежденного мозолистого тела забирают материал на гистологическое исследование, измеряют диаметры всех глиальных макрофагов, которые попали в область исследования и суммируют их; при результате, равном 185 мкм и менее, делают вывод о биологическом возрасте трупа 25 лет и моложе, при результате 530 мкм и более, делают вывод о биологическом возрасте трупа 67 лет и старше.

Практически способ осуществляют гистологическим исследованием тканей (Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. Микроскопическая техника. - М.: Медицина. - 1996. - С. 4-50, 339-445) следующим образом:

Исследуют участки ткани мозолистого тела, например, в области валика мозолистого тела.

Кусочки фиксируют в 10% растворе забуференного по Лилли формалина (рН-7,2) в течение 24 часов (Петров, С.В., Киясов А.П. Иммуногистохимическая диагностика опухолей человека: руководство для врачей-морфологов. - Казань, 1998. - 165 с.).

Материал промывают в проточной воде в течение 30 минут, а затем подвергают обезвоживанию и заливке в парафин по следующей схеме: спирт 60,0% - 2 часа, спирт 70,0% - 2 часа, спирт 96,0% - 2 часа, спирт 96,0% - 2 часа, спирт + ксилол (1:1) - 2 часа, ксилол + парафин (1:1) - 2 часа, парафин I 56° - 2 часа, парафин II 56° - 1 час.

Кусочки заливают в парафиновые блоки.

На ротационном микротоме изготавливают гистологические срезы толщиной 4-6 микрон.

Часть срезов окрашивают гематоксилин-эозином (Хонин Г.А., Барашкова С.А., Семченко В.В. Морфологические методы исследования в ветеринарной медицине: Учебное пособие. - Омск: Омская областная типография, 2004. - С. 63-66). Парафиновые срезы доводят до воды. Затем

окрашивают гематоксилином в течение 1-15 минут. Промывают в воде 3-5 минут. Дифференцируют в спирте, подкисленном соляной кислотой (1% раствор соляной кислоты в 70% спирте), несколько секунд с последующим восстановлением подщелоченной водой (около 1 минуты). Далее промывают в проточной воде в течение 10 минут. Ополаскивают дистиллированной водой. Окрашивают 1% эозином - 1-2 минуты. Снова ополаскивают дистиллированной водой. Обезвоживают, просветляют и заключают под покровное стекло. В результате глиальные макрофаги окрашиваются в темный сине-фиолетовый цвет.

Морфометрический (количественный) анализ исследуемых трех гистологических образцов проводят с использованием программного пакета BioVision, version 4,0 (Австрия). Захват изображений обеспечивают использованием цифровой камеры для микроскопа САМ V200, Vision (Австрия). Размеры гистологических объектов выражают в мкм.

Морфометрический анализ включает измерение диаметров всех глиальных макрофагов, находящихся в трех образцах (объектив ×40). Далее суммируют эти диаметры и получают суммарный диаметр всех глиальных макрофагов. При результате, равном 185 мкм и менее, делают вывод о биологическом возрасте трупа 25 лет и моложе, при результате 530 мкм и более, делают вывод о биологическом возрасте трупа 67 лет и старше.

С помощью данных методов изучались ткани мозолистого тела, полученные при судебно-медицинском исследовании 219 трупов (106 лиц мужского пола и 113 лиц женского пола) в возрасте от 17 до 86 лет, не имеющих повреждений и патологических изменений мозолистого тела.

Проведенный статистический анализ установил, что изменение количества глиальных макрофагов при гистологическом исследовании можно использовать, для определения биологического возраста трупа человека.

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1.

Согласно акту судебно-медицинского исследования, на месте происшествия были обнаружены фрагменты трупа женщины. Следственные органы интересовал биологический возраст трупа, при этом его внешнее состояние не позволяло ответить на данный вопрос.

При микроскопическом исследовании тканей мозолистого тела в области валика выявили, что общее количество глиальных макрофагов, попавших в исследование равно 9, а суммарный диаметр всех глиальных макрофагов равен 117.

Составлена формула расчета:

Пример: D1+D2+D3+D4+…+D9=117 мкм - моложе 25 лет,

где D - диаметр глиального макрофага.

На основании указанных признаков был сделан вывод, что фрагменты трупа принадлежат лицу, биологический возраст которого составляет менее 25 лет или моложе (нормативные данные для этой возрастной группы включают: суммарный диаметр всех глиальных макрофагов менее 185 мкм).

Пример 2.

Согласно акту судебно-медицинского исследования, в подвальном помещении офисного многоэтажного дома был обнаружен труп мужчины со следами насильственной смерти, травматическими повреждениями мягких тканей лица, переломом хрящей носа и носовой перегородки, множественными гематомами в области глазниц, скулы, шеи и в области запястья правой верхней конечности. Травматическое повреждение мягких тканей лица и костей лицевого отдела черепа затрудняло определение возраста пострадавшего.

Следственные органы интересовал вопрос о биологическом возрасте трупа.

При микроскопическом исследовании тканей мозолистого тела в области валика выявили, что общее количество глиальных макрофагов равно 24, а суммарный диаметр - 592 мкм.

Составлена формула:

Пример: D1+D2+D3+D4…+D23+D24=592 мкм - старше 67 лет,

где D - диаметр глиального макрофага.

На основании указанных признаков был сделан вывод, что труп принадлежит лицу, биологический возраст которого составляет 67 лет и старше (нормативные данные для этой возрастной группы включают: суммарный диаметр всех глиальных макрофагов, попавших в исследование 530 мкм и более).

Способ по изобретению позволяет определять биологический возраст человека и более объективно решать задачи, поставленные перед судебно-медицинским экспертом следственными органами.