×
09.06.2019
219.017.7ca8

ШТАММ ACREMONIUM SP. Г25-ПРОДУЦЕНТ КОМПЛЕКСА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
№ охранного документа
0002320713
Дата охранного документа
27.03.2008
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к фармакологии, микробиологии, биотехнологии, может быть использовано при получении медицинского препарата, обладающего высокой гиполипидемической и противоопухолевой активностью. Штамм Acremonium sp.Г25 выделен из почвенного образца Тебердинского заповедника. Депонирован в Коллекции культур микроорганизмов ГНЦА под номером 348А. Изобретение обеспечивает получение комплексного препарата, обладающего высокой гиполипидемической и противоопухолевой активностью при гомеопатических концентрациях. 2 табл.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к области фармакологии, микробиологии, биотехнологии, точнее к получению медицинского препарата с использованием микроорганизмов - продуцентов.

Предшествующий уровень техники.

Культуры мицелиальных грибов являются источником биологически активных соединений. В клинике широко используются препараты с гиполипидемической, иммуносупрессивной, иммуностимулирующей и другими активностями. Установлена тесная связь иммунных реакций организма с его липидтранспортной системой. Большое значение имеет применение для медицинских целей липидов грибов как эссенциальных, так и регулирующих гомеостаз макроорганизма.

Известно биологически активное соединение "ловастатин", получаемый из штамма P.cetrinum. (Endo A., Kuroda M., Tsujita Y. ML-236A, ML-236B and ML-236C, new inhibitors of cholesterogenesis produced by P.cetrinum. J.Antibiot / 1976, v.29, p.1346-1348), который проявляет гиполипидемическую активность. Однако его концентрация при использовании достаточно велика.

Сущность изобретения.

Целью изобретения является использование штамма Acremonium sp.Г25 для получения комплексного препарата, обладающего высокой гиполипидемической и противоопухолевой активностью при низких (гомеопатических) концентрациях.

Штамм Acremonium sp.Г25 выделен из почвенного образца Тебердинского заповедника. Депонирован в Коллекцию культур микроорганизмов ГНЦА под номером 348А.

Штамм Acremonium sp.Г25 через 2 недели роста при 24°С характеризуется следующими морфологическими свойствами.

Солодовый агар: колонии медленно растущие, белые, умеренно опушенные, ватообразные со слегка поднятым центром. Д=30-35 мм. Воздушный мицелий по центральной части колонии. По периферии воздушный мицелий отсутствует. Обратная сторона желтовато-кремовая. Образуется розоватый диффузный пигмент.

Среда Райстрика: колонии белые, слабоопушенные, ватообразные по центру колонии. Д=30-35 мм. Обратная сторона желтовато-кремовая.

Среда Чапека: колонии слабоопушенные беловатым воздушным мицелием, несколько приплюснутые. Наблюдаются центрические кольца. Д=20-25 мм. 0братная сторона также с центрическими кольцами, кремоватая.

Сусло-агар: колонии умеренно опушенные в центре, светло-кремовые. Д=25-30 мм. Обратная сторона колонии кремовая.

Овсяный агар: колонии белые, опушенные ватообразные Д=90 мм. Воздушный мицелий достигает высоты 10 мм. Центр колонии более плотный, слегка приподнят. Обратная сторона кремовая.

Гаузе 1: колонии слабоопушенные беловатым воздушным мицелием, несколько приплюснутые. Д=15-20 мм.

Рост и развитие культуры на агаризованных средах происходит по мицелиальному типу с образованием редких конидиеносцев с фиалидами, на концах которых находятся склеенные в капельках конидии. Конидии цилиндрические с закругленными концами = 3-5×1-2 μm. Хламидоспоры не наблюдаются.

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения.

Комплексный препарат Г25 получается выращиванием штамма в глубинных условиях на посевной и ферментационной среде одного и того же состава, содержащей органический азот (может быть представлен гороховой или соевой мукой, БВК и т.д.), углеводы (меласса, солод, сахароза, глюкоза, крахмал картофельный и т.д.), минеральные соли (хлорид натрия, фосфорнокислый калий 1 и 2-х замещенный, аммоний сульфат) и воду, рН среды 6,5-7,2. Посевная стадия длительностью 48-72 часа, объем инокулята 5-15%. Процесс ферментации осуществляют в течение 10-14 суток при 24°С в условиях аэрации. Объем среды в колбах емкостью 750 мл составляет 100-200 мл.

По окончании ферментации отделяют мицелий от нативного раствора и экстрагируют препарат Г25 органическим растворителем (ацетон, спирт). Растворитель удаляют на роторном испарителе и целевой сырец реэкстрагируют из водной взвеси петролейным эфиром. Реэкстракт осушают безводным сульфатом натрия и концентрируют до окрашенного сиропообразного продукта. Комплексный препарат Г25 осаждают гексаном.

Пример: От одного литра культуральной жидкости отделяют мицелий центрифугированием или фильтрованием. Полученный влажный мицелий (80% влажности) экстрагируют 3-кратным объемом ацетона (по отношению к объему мицелия) в течение часа. Экстракт отделяют от мицелия фильтрованием и удаляют растворитель на роторном испарителе при 45°С. Целевой сырец реэкстрагируют из водной взвеси хлороформом (2 раза по 1/4 объема от объема водной взвеси). Экстракт расслаивают в делительной головке, нижний слой, содержащий пигменты, отбрасывают, а верхний водный слой реэкстрагируют бутанолом. Бутанольный слой отделяют и упаривают до сиропообразного продукта. Получают 0,4 г комплексного препарата Г25.

Биологическая активность комплексного препарата Г25.

Препарат проявляет высокую гиполипидемическую активность при использовании стандартной методики определения синтеза стеролов клетками культуры гепатоцитов Нер G2 по включению 3H-ацетата натрия в стеролы. Установлено, что ловастатин в дозе 200 мг/мл подавляет синтез стеролов на 50±6 (%). Комплексный препарат Г25 в разведении 1:10000 подавляет синтез стеринов на 23±4 (%), а в разведении 1:100000 - на 35±4%.

На модели гиперлипидемии кроликов in vivo под действием комплексного препарата Г25 в дозе 0,4 мг/кг показано максимальное снижение общего холестерина (ОХ) в крови кроликов на 40% триглицеридов (ТГ) на 19,3%, липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) на 75% и увеличение уровня липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) на 22%. В дозе 0,0004 мг/кг показано максимальное снижение OX в крови кроликов на 6,3%, ТГ на 18,8%, ЛПНП на 17,9% и увеличение уровня ЛПВП на 18,2%. При действии контрольного препарата ловастатина в дозе 4 мг/кг наблюдается снижение ОХ на 53%, ТГ на 46%, ЛПНП на 97% и повышение ЛПВП 18%. Сравнительные данные действия ловастатина и комплексного препарата Г25 приведены в таблице 1.

Таблица 1
Максимальное влияние ловастатина и комплексного препарата Г25 на уровень ОХ, триглицеридов, ЛПНП и ЛПВП в сыворотке крови кроликов
ПрепаратКонц. препарата (мг/кг)Максимальное снижение уровня ОХ (%)Максимальное снижение уровня ТГ (%)Максимальное увеличение уровня ХС ЛПВП(%)Максимальное снижение уровня ХС ЛПНП(%)
ловастатин453,545,817,797,1
Г250,439,219,322,175,1
Г250,00046,318,818,217,9

Комплексный препарат Г25 подавляет фитогемаглютенин (ФГА) индуцированную пролиферацию лимфоцитов крови доноров в концентрации 0,01-0,1 мкг/мл на 99%, что проиллюстрировано примером в таблице 2.

Таблица 2
Подавление ФГА-индуцированной пролиферации лимфоцитов доноров препаратом Г25
Контроль (имп/мин)Опыт (имп/мин) Жизнеспособность лимфоцитов
Спонт.ФГАФГА + Г25 (мкг/мл)КонтрольОпыт ФГА + Г25
Спонт.ФГА
10,10,011,00,10,01
1190517680447014971575314210,722
25169474356610237990,50,9141415
1Процент подавления99,799,199,1
2Процент подавления99,498,991,1

Комплексный препарат Г25 индуцирует апоптоз трансформированных лимфоидных клеток линии Yurkat в концентрации 100 нг/мл на 42%, снижая в этой же концентрации некроз на 31% и увеличивая количество гипердиплоидных клеток на 26-32% в концентрации 0,1-10 нг/мл.

Таким образом, заявленный комплексный препарат Г25 проявляет гиполипидимическую активность, которая проявляется в снижении содержания в крови животных общего холестерина, триглицеридов, нормализации соотношения ЛПВП и ЛПНП, и противоопухолевую активность, индуцируя апоптоз трансформированных лимфоидных клеток линии Yurkat при низкой концентрации.

ШтаммAcremoniumsp.ГНЦА№348А-продуценткомплексабиологическиактивныхсоединений,проявляющихгиполипидемическуюипротивоопухолевуюактивностьпринизкихконцентрациях.
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-3 из 3.
25.08.2017
№217.015.ac1f

Сорбент-активатор для очистки нефтезагрязненных почв и грунтов и способ его получения

Группа изобретений относится к сорбентам для восстановления нефтезагрязненных земель, ликвидации аварийных разливов нефти, утилизации отходов бурения. Предложен сорбент-активатор аборигенных почвенных нефтеокисляющих микроорганизмов, представляющий собой наноструктурированный...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002612286
Дата охранного документа: 06.03.2017
25.08.2017
№217.015.ba31

Сорбент-активатор для очистки нефтезагрязненных почв и грунтов и способ его получения

Изобретение относится к сорбентам для поглощения нефти. Предложен сорбент-активатор, представляющий собой наноструктурированный углерод-кремнеземный композит, полученный из смеси шунгита с рисовой шелухой при их массовом соотношении в смеси на 6 частей шунгита 1-24 части рисовой шелухи. Способ...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002615526
Дата охранного документа: 05.04.2017
09.06.2019
№219.017.7c63

Штамм lecanicillium sp. 347а - продуцент комплекса биологически активных соединений

Изобретение относится к области биотехнологии, фармакологии, микробиологии, точнее к получению медицинского препарата с использованием микроорганизмов - продуцентов. Штамм Lecanicillium sp. Г16 выделен из почвенного образца Тебердинского заповедника. Депонирован в Коллекции культур...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002322491
Дата охранного документа: 20.04.2008
Показаны записи 1-8 из 8.
26.08.2017
№217.015.d5ac

Способ получения 2,3,16,17,18,19-гексагидроолигомицина а и его применение для ингибирования роста дрожжей рода candida

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается нового производного макролидного антибиотика олигомицина А - 2,3,16,17,18,19-гексагидроолигомицина А, его структуры и способа его получения, а также применения для лечения заболеваний, вызванных дрожжевыми грибками рода...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002623087
Дата охранного документа: 22.06.2017
19.04.2019
№219.017.3311

Производные полиэтиленгликоля, содержащие ароматическую диазогруппу

Изобретение относится к пегилирующему агенту, содержащему ароматическую диазогруппу и имеющему следующую общую структуру: где Х - О или NH; n - целое число в интервале от 455 до 1140. Технический результат: получен новый пегилирующий агент, который связывается с полипептидами посредством...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002439091
Дата охранного документа: 10.01.2012
24.05.2019
№219.017.5f80

Противогрибковый полусинтетический полиеновый антибиотик, его водорастворимые соли и фармацевтические композиции на их основе

Настоящее изобретение относится к солям ацетату, L-глутамату, цитрату или фумарату N-(2-аминоэтил)амид амфотерицина В формулы I которые могут быть использованы в медицине. Предложены новые противогрибковые соединения со сниженной токсичностью и улучшенной стабильностью, фармацевтические...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002688658
Дата охранного документа: 22.05.2019
09.06.2019
№219.017.7c63

Штамм lecanicillium sp. 347а - продуцент комплекса биологически активных соединений

Изобретение относится к области биотехнологии, фармакологии, микробиологии, точнее к получению медицинского препарата с использованием микроорганизмов - продуцентов. Штамм Lecanicillium sp. Г16 выделен из почвенного образца Тебердинского заповедника. Депонирован в Коллекции культур...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002322491
Дата охранного документа: 20.04.2008
12.07.2019
№219.017.b327

Способ производства вакцины против гриппа

Изобретение относится к области медицины и касается способа производства вакцины против гриппа. Сущность изобретения включает заражение куриных эмбрионов вирусом гриппа, инкубацию, отбор вируссодержащей жидкости, очистку вируса гриппа, концентрирование и окончательную очистку вируса методом...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002423995
Дата охранного документа: 20.07.2011
12.07.2019
№219.017.b32e

Эритропоэтин, конъюгированный с полиэтиленгликолем

Изобретение относится к биотехнологии и к иммунологии. Изобретение представляет собой эритропоэтин, конъюгированный с полиэтиленгликолем, где ПЭГ присоединен к эритропоэтину посредством ароматической азогруппы. Изобретение позволяет увеличить время циркуляции эритропоэтина в крови с сохранением...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002433134
Дата охранного документа: 10.11.2011
12.07.2019
№219.017.b32f

Интерферон, конъюгированный с полиэтиленгликолем

Изобретение относится к биотехнологии и иммунологии. Представлен интерферон, коньюгированный с полиэтиленгликолем, где ПЭГ присоединен к интерферону посредством азогруппы. Изобретение позволяет увеличить время циркуляции интерферона в крови с сохранением значительной доли его биологической...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002433135
Дата охранного документа: 10.11.2011
13.12.2019
№219.017.ed74

Новые производные эремомицина и их применение для лечения бактериальных инфекций

Изобретение относится к производному эремомицина, которое может быть использовано в медицине и фармацевтической промышленности, соответствующему формуле: где Ру - независимо означает пиридин-2-ил, пиридин-3-ил, пиридин-4-ил, n=1-3, а также его кватернизованным N-Cалкильным производным,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002708628
Дата охранного документа: 10.12.2019
+ добавить свой РИД