СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 5-НИТРОИМИДАЗОЛА (ГРУППЫ НИДАЗОЛОВ)

Изобретение относится к фармацевтическому анализу, а именно к анализу материалов с помощью оптических средств, и может быть использовано при количественном определении производных 5-нитроимидазола (группы нидазолов) в субстанциях.

Препараты группы 5-нитроимидазола (5-НИМЗ) - высокоактивные антимикробные препараты широкого спектра действия для системного лечения инфекций, вызванных облигатными анаэробными бактериями, и ряда инфекционных заболеваний, вызванных простейшими. С точки зрения химического строения 5-НИМЗ - это синтетические низкомолекулярные соединения, содержащие нитрогруппу (NO₂) в положении 5-го имидазольного цикла. Наиболее широкое распространение и применение в медицинской практике получили метронидазол, тинидазол и орнидазол. Кроме того, в медицинской практике применяются препараты секнидазол, ниморазол, тернидазол, сатранидазол и некоторые другие.

Для количественного определения исследуемых препаратов используется метод неводного титрования - хлорная кислота в качестве титранта с кристаллическим фиолетовым в среде ледяной уксусной кислоты [Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия: В 2 ч. 4.1: Общая фармацевтическая химия. 4.2: Специальная фармацевтическая химия: Учебник по фармацевт. химии для студ. фармацевт, вузов и фак. / В.Г. Беликов. - 3-е изд., перераб. и доп. - Пятигорск: Пятигорская гос. фармацевт, акад., 2003. - 713 с; Максютина, Н.П. Методы анализа лекарств / Н.П. Максютина и др. - К.: Здоровья. - 1984. - 224 с].

Однако данный метод количественного определения исследуемых препаратов являются малочувствительными и неспецифичными.

Из патент РФ 2589845 (МПК G01N 33/15, G01N 31/22, G01N 21/78, опубл. 20.05.2016) известен способ количественного определения метилкарбаматных производных бензимидазола (группа бендазола) в фармакопейных препаратах путем растворения анализируемой пробы в воде очищенной, выдерживания на нагретой водяной бане до полного растворения при перемешивании, охлаждения и обработки аликвотной части приготовленного раствора последовательно каплями 0,1 Н спиртового раствора КОН (выдерживают 5 мин) и 0,5%-ным раствором вератрового альдегида в серной кислоте (выдерживают еще 3 мин) и фотоэлектроколориметрирования окрашенного раствора при длине волны 364 нм.

Цель изобретения состояла в разработке чувствительной методики количественного определения группы нидазолов в субстанциях.

Технический результат заключается в количественном определении метронидазола, тинидазола, орнидазола, ниморазола и секнидазола в субстанции с относительной ошибкой не более ± 0,80%.

Технический результат достигается тем, что в способе количественного определения производных 5-нитроимидазола в субстанциях растворяют анализируемую пробу в изопропиловом спирте, выдерживают до полного растворения при перемешивании и комнатной температуре, обрабатывают аликвотную часть приготовленного раствора сначала восстановителем в кислой среде и в присутствии хлорида аммония, а затем спиртовым раствором анисового альдегида в кислой среде, затем полученные окрашенные растворы фотоэлектроколориметрируют при длине волны 304 нм. В качестве восстановителя используется цинковая пыль.

Предлагаемый способ количественного определения исследуемых препаратов основан на следующих принципах:

Первая стадия: Превращение нитрогруппы в аминогруппу под действием цинковой пыли в соляной кислоте в присутствии гидрохлорида амина.

Вторая стадия. Взаимодействие синтезированных производных 5-аминоимидазола и 5-аминопиррола со спиртовым раствором анисового альдегида в кислой среде, приводящее к образованию окрашенных продуктов.

Количественное определение исследуемых препаратов проводят методом наименьших квадратов после статистической обработки калибровочных графиков.

Для приготовления 0,5%-ного спиртового раствора анисового альдегида в коническую колбу емкостью 200 мл помещают 0,5 г (или 0,445 мл) анисового альдегида и растворяют в смеси 85 мл абс. спирта и 15 мл конц. соляной кислоты при комнатной температуре и перемешивании. Срок хранения в склянке из темного стекла в течение 2 суток.

Пример.

Для приготовления растворов исследуемых препаратов точные навески порошков метронидазола (около 0,25 г), тинидазола (около 0,50 г), орнидазола (около 0,20 г), ниморазола (около 0,50 г) и секнидазола (около 0,10 г) растворяют в 50 мл абс. спирта в мерных колбах емкостью 100 мл, выдерживают при перемешивании и комнатной температуре до полного растворения и доводят объемы колб до метки тем же спиртом.

В мерных колбах на 100 мл к 5-9 мл приготовленных растворов группы нидазолов прибавляют 2-4 мл конц. соляной кислоты и осторожно небольшими порциями 5 г цинковой пыли и 0,1 г хлорида аммония. Затем добавляют еще 2 мл конц. соляной кислоты и 5 мл спирта, обмывая стенки колб. Для окончательного растворения цинковой пыли следует слегка подогреть содержимое на водяной бане в течение 3-5 мин. После охлаждения прибавляют 4 мл 0,5%-ного спиртового раствора анисового альдегида. Выдергивают 3 мин при комнатной температуре и встряхивании. Появляется ярко-желтое окрашивание, устойчивое в течение 2 ч. Доводят объемы колб спиртом до метки и измеряют оптическую плотность поглощения окрашенных растворов при 304 нм в кювете с поглощающим слоем 10,0 мм. Раствор сравнения - спирт.

Количественное определение исследуемых производных 5-нитроимидазола в субстанциях проводят методом наименьших квадратов после статической отработки калибровочных графиков. Подчинения интенсивности окрашивания растворов закону Бугера - Лаберта - Бера находятся в пределах концентраций метранидазола от 0,125 мг до 0,225 мг в 5-9 мл раствора, для субстанции тинидазола от 0,250 мг до 0,450 мг в 5-9 мл раствора, для субстанции орнидазола от 0,120 мг до 0,160 мг в 6-8 мл раствор, для субстанции ниморазола от 0,250 мг до 0,450 мг в 5-9 мл раствора, для субстанции секнидазола от 0,060 мг до 0,080 мг в 6-8 мл раствора. Коэффициенты а и b исследуемых производных 5-нитроимидазола в субстанциях вычислены после статической обработки калибровочных графиков с использованием метода наименьших квадратов и представлены в фиг. 1-5.

Сравнительные данные, подтверждающие преимущества предлагаемого способа количественного определения лекарственных средств производных 5-нитроимидазола в субстанциях перед методом титрования приведены на фиг. 6.

Относительная ошибка количественного определения группы нидазолов не превышает не более ± 0,80%.