Результат интеллектуальной деятельности: СРЕДСТВО "ЦЕРУГЛАН", ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОРВОТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ И РЕГУЛИРУЮЩЕЕ ФУНКЦИИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА

Изобретение относится к области медицины и касается лекарственного средства на основе метоклопрамида гидрохлорида.

Химическое название метоклопрамида: 4-амино-5-хлор-N-[2-(диэтиламино)этил]-2-метоксибензамида гидрохлорид.

Фармакологическое действие метоклопрамида - противорвотное, противоикотное. Он является блокатором дофаминовых D₃-рецепторов. Угнетая пусковую зону рвотного центра, устраняет тошноту. Останавливает или предотвращает рвоту, успокаивает икоту. Регулирует и нормализует функцию желудочно-кишечного тракта: ускоряет опорожнение желудка и продвижение пищи по тонкой кишке. Показаниями для применения метоклопрамида являются: расстройства моторики верхнего отдела ЖКТ - изжога, рефлюкс-эзофагит, пилороспазм, гастрит; тошнота, позывы к рвоте, рвота различного генеза, атония желудка; зондирование двенадцатиперстной кишки и тонкого кишечника, рентгенологическое исследование желудка и тонкой кишки.

Известна инъекционная лекарственная форма метоклопрамида, содержащая помимо активного вещества натрия хлорид и натрия метабисульфит и имеющая рН раствора 5,5-7 (US п. 5561161, А 61 К 31/165, 1996 г.).

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является лекарственное средство "Церукал". Оно выполнено в форме раствора для инъекций и содержит в 1 мл 5 мг метоклопрамида (Энциклопедия лекарств, вып. 9, Москва, 2002, с. 952).

Целью настоящего изобретения является создание на основе метоклопрамида отечественного препарата в форме раствора для инъекций, нетоксичного, благодаря качественному и количественному подбору ингредиентов.

Для решения поставленной задачи и достижения технического результата предложено лекарственное средство, названное "Церуглан". Средство представляет собой раствор для инъекций и содержит в качестве действующего вещества метоклопрамида гидрохлорид. В качестве вспомогательных веществ "Церуглан" включает натрия сульфит безводный, натрия хлорид, динатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, Растворителем является вода для инъекций. Указанные компоненты "Церуглан" содержит в следующем соотношении, мас.%:
Метоклопрамида гидрохлорид - 0,4-0,6
Натрия сульфит безводный - 0,01-0,015
Натрия хлорид - 0,5-1,1
Динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты - 0,02-0,06
Вода для инъекций - Остальное
Пример. Получение раствора для инъекций "Церуглан"
Метоклопрамида гидрохлорид (в пересчете на 100% вещество), г - 5,270
Натрия сульфит безводный, г - 0,125
Натрия хлорид, г - 8
Динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, г - 0,40
Вода для инъекций, л - До 1
Воду для инъекций насыщают азотом. При перемешивании растворяют вспомогательные вещества. Получают бесцветный прозрачный раствор с рН около 6,3. В раствор загружают метоклопрамида гидрохлорид, перемешивают до полного растворения субстанции и доводят объем раствора до нужного значения водой для инъекций.

Провели изучение опытного препарата - раствора для инъекций "Церуглан" 10 мг/2 мл - в сравнении с раствором для инъекций "Церукал" 10 мг/2 мл производства фирмы "Арцнеймиттельверк Дрезден", Германия.

Исследование препаратов на острую токсичность проводили на разных видах животных (мышах, крысах, собаках).

При исследовании на субхроническую и хроническую токсичность при пероральном и внутривенном введении метоклопрамида в соответствующих дозах у всех животных отмечалась следующая картина отравления: у собак и кроликов - уменьшение количества потребленного корма, снижение прибавки массы тела, понос, анемия, увеличение содержания лактатдегидрогеназы и щелочной фосфатазы в сыворотке крови, седативный эффект, анорексия; у крыс - повышение уровня ГЩТ и ГПТ, а также общего билирубина в сыворотке крови. Самая низкая токсическая доза метоклопрамида для крыс и собак при хроническом пероральном введении составляла 11-35 мг/кг массы тела.

Для определения острой токсичности инъекционных препаратов "Церуглан" и "Церукал" было использовано 72 нелинейных мыши массой по 16-20 г. Их поделили на 6 групп по 6 животных в каждой. Препараты вводили животным в хвостовую вену в возрастающей дозе от 175 до 300 мг/кг.

В табл. 1 приведены результаты определения острой токсичности препарата сравнения "Церукал". LD₅₀ для него составляет (250±19) мг/кг. Абсолютно смертельная доза - 300 мг/кг. Абсолютно переносимая доза - 175 мг/кг.

В табл. 2 приведены результаты определения острой токсичности опытного препарата "Церуглан". Для него LD₅₀ составляет (237±17) мг/кг. Абсолютно смертельная доза - 250 мг/кг. Абсолютно переносимая доза - 100 мг/кг.

Подострую токсичность препарата изучали на беспородных белых крысах массой по 180-220 г. Препараты вводили внутрижелудочно в объемах и разведениях, указанных в табл. 3. Исходя из того, что терапевтическая доза метоклопрамида составляет 1 мг/кг, а десятикратная терапевтическая доза равна 10 мг/кг, лабораторных животных разделили на пять групп:
группа 1 - 10-кратная доза опытного препарата "Церуглан";
группа 2 - терапевтическая доза опытного препарата "Церуглан";
группа 3 - 10-кратная доза препарата сравнения "Церукал";
группа 4 - терапевтическая доза препарата сравнения "Церукал";
группа 5 - интактные животных, физиологический раствор.

Длительность введения препаратов составляла 14 сут. Во время эксперимента степень интоксикации оценивали по общему состоянию животных, состоянию шерстного покрова, изменению количества уриаций, дефекаций, саливации, наступлению тремора, судорог, изменению частоты и ритма дыхания.

После окончания введения препаратов проводили забой животных и их патологоанатомическое вскрытие с последующим взвешиванием органов брюшной полости и головного мозга. Для светооптического анализа отбирали образцы почек, печени, селезенки, тимуса и ткани головного мозга. Кроме того, в крови животных определяли такие биохимические и гематологические параметры, как общий белок, глюкоза, мочевина, активность наиболее важных аминотрансфераз - аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (ACT), щелочной фосфатазы, концентрация гемоглобина, содержание тромбоцитов и лейкоцитов.

В течение всего времени введения препаратов не зарегистрировано ни одного летального случая. Оба препарата, как в терапевтической, так и в 10-кратной терапевтической дозах, не вызывали статистически значимых отклонений в массе внутренних органов животных или других видимых признаков интоксикации.

В табл. 4 представлены результаты определения содержания общего белка, глюкозы, мочевины и активности обеих трансаминаз в плазме крови лабораторных животных. Из табл. 4 видно, что достоверного отличия результатов определения биохимических параметров не наблюдается ни при использовании терапевтической дозы, ни при использовании 10-кратной терапевтической дозы препаратов. Также не выявлено статистически значимых отличий от аналогичных показателей для контрольной группы животных.

В табл. 5 приведены результаты определения концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов и активности щелочной фосфатазы. Из этих результатов видно, что интегральные гематологические показатели при использовании опытного препарата и препарата сравнения в обеих исследованных дозах существенно не отличаются. Однако активность щелочной фосфатазы в группах с 10-кратной терапевтической дозой обоих препаратов повышена по сравнению как с контрольной группой животных, так и с группами, получавшими терапевтическую дозу препаратов. Статистически значимых отличий в активности фермента между "Церугланом" и "Церукалом" не обнаружено.

Результаты определения лейкоцитарной формулы крови в опытных и контрольной группах животных представлены в табл. 6. Лейкоцитарная формула в ответ на введение препаратов в обеих исследованных дозах практически не изменилась.

При проведении патологоанатомического вскрытия лабораторных животных установлено, что макроскопическое строение печени, почек, тимуса, селезенки и головного мозга обычное и соответствует строению этих органов у здоровых животных. При исследовании слизистой желудка обнаружено наличие единичных петехий, однако язвенных поражений слизистой не выявлено.

Печень соответствует норме. Гистоархитектоника органа выражена в специфической дольчатости строения. Выявляются очаги дилятации сосудистого русла, локальные мелкоклеточные инфильтраты в паренхиме и в области триад.

Почки нормального строения, капсула плотно прилегает к паренхиме органа. Легко различаются корковое и мозговое вещества. Корковое вещество состоит преимущественно из сосудистых клубочков и канальцев нефрона. Эпителий канальцев без патологических изменений. Мозговое вещество представлено лучами собирательных трубок, продольных и поперечных срезов петель нефрона.

Тимус нормального строения, покрыт тонкой капсулой. Корковое вещество преобладает над мозговым. Мозговое вещество характеризуется мелкими тимоцитами. В свою очередь периферия коры обильно инфильтрована большими и средними тимоцитами. В паренхиме органа встречаются расширенные капилляры.

Селезенка обычного строения, инкапсулирована. Идентифицируются красная и белая пульпа, граница между ними нерезкая. В красной пульпе встречаются локальные участки с дилятацией синусоидных структур, которые наполнены эритроцитарной массой.

Головной мозг. Цито- и гистоархитектоника обычные. В коре идентифицируются пять четких клеточных слоев. Ширина, густоклеточность слоев, состояние базофильной субстанции соответствуют норме. Деструктивных нейронов в поле зрения не наблюдается.

При введении "Церуглана" и "Церукала" в терапевтической дозе патологических изменений в изученных органах и в слизистой желудка не обнаружено. Их состояние практически неотличимо от состояния органов у животных в контрольной группе. Гистологическое строение печени, почек, тимуса, селезенки, ткани головного мозга без видимых признаков патологии.

При введении препарата сравнения в десятикратной терапевтической дозе при исследовании внутренних органов и слизистой желудка патологии не выявлено. Не обнаружено существенных изменений и в гистологических препаратах изученных органов.

При введении животным опытного препарата в десятикратной терапевтической дозе при макроскопическом исследовании органов получены такие же результаты, как и в случае применения препарата сравнения. Микроскопические исследования дали следующие результаты:
Печень. Значительных отклонений, выявляемых гистологическим методом, не обнаружено. Типичные по форме гепатоциты с хорошо очерченными ядрами, содержащими ядрышки. Гепатоциты формируют печеночные балки с желчевыводящими протоками и сопутствующими сосудами.

Почки обычного строения. Корковое вещество представлено сосудистыми клубочками и канальцами нефрона. Капсула почечного тельца плотно прилегает к сосудистым петлям. Крупные сосудистые магистрали сохранены, стенка без особенностей. Эпителиальная выстилка канальцев без патологических изменений. Имеются области с очаговыми мелкоклеточными инфильтратами.

Тимус. Корковое вещество, как и в контроле, преобладает над мозговым. В мозговом веществе обнаруживаются в основном мелкие тимоциты, а периферия коры обильно инфильтрована большими и средними тимоцитами. Сосудистый рисунок не выражен, хотя некоторые капилляры местами дилятированы и кровенаполнены.

Селезенка. Данные по гистоархитектонике органа не отличаются от данных, полученных для контрольной группы лабораторных животных. Капсула и трабекулярный остов хорошо выражены. В белой пульпе встречаются в основном первичные фолликулы. Граница между красной и белой пульпой нерезкая. Трабекулярные и пульпазные сосуды без патологических изменений.

Головной мозг не имеет видимых патологических изменений, выявляемых гистологическим методом. Кора имеет до пяти слоев с характерными по форме и размеру клетками, пятый слой достаточно уверенно можно поделить на два подслоя. Отмечается отчетливая горизонтальная слоистость, слабо выражена радиальная исчерченность. Ширина, густоклеточность слоев, цитоархитектоника, состояние базофильной субстанции существенно не отличаются от таковых в контрольной группе животных.

При исследовании местнораздражающего действия препаратов оценку раздражающего действия проводили по состоянию брюшной стенки лабораторных животных. При патологоанатомическом вскрытии брюшную стенку препарировали из области таза и оценивали ее на предмет выявления местных воспалительных процессов. Показано, что в ответ на введение препаратов видимых признаков воспаления не наблюдалось.