×
24.01.2019
219.016.b304

Способ прогнозирования риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза с использованием генетических данных

Вид РИД

Изобретение

Юридическая информация Свернуть Развернуть
Краткое описание РИД Свернуть Развернуть
Аннотация: Изобретение относится к области медицинской диагностики, в частности к способу прогнозирования риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза. Способ включает выделение ДНК из периферической венозной крови, анализ комбинации полиморфизмов генов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609. Фактором риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза у женщин является комбинация генетических вариантов аллеля G rs2241423 с аллелем G rs7766109 с аллелем A rs4953655 и генотипом TT rs9939609. Изобретение позволит формировать среди женщин на доклиническом этапе группы риска по развитию сочетания миомы матки и аденомиоза и своевременно реализовывать в этих группах необходимые лечебно-профилактические мероприятия по предупреждению развития миомы матки и аденомиоза. 3 пр.
Реферат Свернуть Развернуть

Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано для прогнозирования риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза.

Миома матки – одна из наиболее распространенных доброкачественных опухолей женской половой сферы, которая возникает у 20-40% женщин репродуктивного возраста [Tаylоr D.K., Hоlthоusеr K., Sеgаrs J.H., et. al. Recent scientific advances in leiomyoma (uterine fibroids) research facilitates better understanding and management // J List. 2015. V. 4. P. 183]. Клинические проявления данного заболевания связаны с маточными кровотечениями, болью, сдавливанием смежных органов, невынашиванием беременности [Commandeur A.E., Styer A.K., Teixeira J.M. Epidemiological and genetic clues for molecular mechanisms involved in uterine leiomyoma development and growth // J Human Reproduction Update. 2015. V. 21(5). P. 593-615]. Как следствие, миома матки становится главной причиной гистерэктомии во многих странах мира.

Аденомиоз – доброкачественное заболевание матки, характеризующееся наличием гетеротопических эндометриальных желез и стромы в миометрии [Harada T., Khine Y.M., Kaponis A., et. al. The Impact of Adenomyosis on Women’s Fertility // J Obstetrical & Gynecological Survey. 2016. V. 71(9). P. 557-568]. Является одной из основных причин бесплодия, меноррагии, диспареунии, а также хронических тазовых болей, что в совокупности приводит к общему ухудшению качества жизни женщин.

Актуальность доброкачественных пролиферативных заболеваний матки, к которым относятся миома матки, аденомиоз, связана с достаточно высокой распространенностью и коморбидностью этих патологических состояний вследствие общности этиологии и патогенеза. Поэтому они достаточно часто встречаются сочетано. Так, 80-85% женщин с аденомиозом имеют сопутствующую миому матки [Сочетанные доброкачественные опухоли и гиперпластические процессы матки (миома, аденомиоз, гиперплазия эндометрия): проект клинических рекомендаций по ведению больных / Л. В. Адамян и др. – Москва: Изд-во Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии им. В. И. Кулакова, 2015. – 92 с]. В основе патогенетических механизмов формирования миомы матки и аденомиоза лежат молекулярно-генетические и эпигенетические изменения, тесно связанные с гормональными нарушениями.

С практической точки зрения представляется крайне необходимым выделение критериев индивидуального прогнозирования у женщин риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза на основании исследования генов-кандидатов с целью выявления индивидуумов, предрасположенных к формированию миомы матки и аденомиоза.

В изученной научно-медицинской и доступной патентной литературе авторами не было обнаружено способа прогнозирования риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза на основе данных о комбинации генетических вариантов локусов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609.

Для оценки сложившейся патентной ситуации был выполнен поиск по охранным документам за период с 1990 по 2017 гг. Анализ документов производился по направлению: способ прогнозирования риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза на основе молекулярно-генетических данных в зависимости от полиморфных маркеров генов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609.

За прототип выбран патент РФ № 2557954 (дата публикации 27.07.2015) «Способ прогнозирования риска развития сочетанных пролиферативных заболеваний репродуктивной системы у женщин», который заключается в выделении ДНК из периферической венозной крови, проведении анализа комбинаций генетических вариантов полиморфных маркеров генов цитокинов гена регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G/А RANTES), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 A/T MIP1β), фактора стромальных клеток (-801 G/A SDF1), интерлейкина-1 (-511 C/T IL-1B), моноцитарного хемоаттарактанта протеина -1 (C/G MCP-1), интерлейкина-4 (-590 С/T IL-4). Повышенный риск развития сочетания миомы матки с эндометриозом и гиперпластическими процессами эндометрия прогнозируют при выявлении сочетания аллелей -403 А RANTES, G MCP-1,+1931 A MIP 1β, -590 C IL-4 или сочетания аллелей -403 А RANTES,+1931 A MIP 1β, -801 G SDF1, -511 C IL-1B.

Недостаток метода заключается в том, что он позволяет прогнозировать риск развития сочетания миомы матки с эндометриозом и гиперпластическими процессами эндометрия, которое среди женщин встречается значительно реже по сравнению с сочетанием миомы матки и аденомиоза (внутреннего эндометриоза). Согласно данным литературы, сочетание миомы и аденомиоза наблюдается в 80-85% случаев, а сочетаниe миомы мaтки с гиперпластическими процессами эндометрия и гeнитальным эндометриозoм регистрируются в 15-25% случаев [Сочетанные доброкачественные опухоли и гиперпластические процессы матки (миома, аденомиоз, гиперплазия эндометрия): проект клинических рекомендаций по ведению больных / Л. В. Адамян и др. – Москва: Изд-во Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии им. В. И. Кулакова, 2015. – 92 с].

Задачей настоящего исследования является расширение арсенала способов диагностики, а именно создание способа прогнозирования риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза на основе данных о сочетании однонуклеотидных полиморфизмов генов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609.

Технический результат использования изобретения – получение критериев оценки риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья на основе данных о комбинации генетических вариантов локусов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609.

В соответствии с поставленной задачей был разработан способ прогнозирования риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза, включающий:

- выделение ДНК из периферической венозной крови;

- анализ полиморфизмов генов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609;

- прогнозирование повышенного риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья в случае выявления комбинации генетических вариантов: аллеля G rs2241423 с аллелем G rs7766109 с аллелем A rs4953655 и генотипом TT rs9939609.

Новизна и изобретательский уровень заключаются в том, что из уровня техники не известна возможность прогноза риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза по наличию указанной комбинации генетических вариантов локусов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609.

Способ осуществляют следующим образом:

ДНК выделяют из образцов периферической венозной крови индивидуумов в 2 этапа. На первом этапе к 4 мл крови добавляют 25 мл лизирующего буфера, содержащего 320мМ сахарозы, 1% тритон Х-100, 5мМ MgCl2, 10мМ трис-HCl (pH=7,6). Полученную смесь перемешивают и центрифугируют при 4ºС, 4000 об./мин. в течение 20 минут. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 4 мл раствора, содержащего 25 мМ ЭДТА (рН=8,0) и 75 мМNaCl, ресуспензируют. Затем прибавляют 0,4 мл 10% SDS, 35 мкл протеиназы К (10мг/мл) и инкубируют образец при 37ºС в течение 16 часов.

На втором этапе из полученного лизата последовательно проводят экстракцию ДНК равными объемами фенола, фенол-хлороформа (1:1) и хлороформа с центрифугированием при 4000 об./мин. в течение 10 минут. После каждого центрифугирования производят отбор водной фазы. ДНК осаждают из раствора двумя объемами охлажденного 96% этанола. Сформированную ДНК растворяют в бидистиллированной, деионизованной воде и хранят при -200С. Выделенную ДНК использовали для проведения полимеразной цепной реакции синтеза ДНК.

Анализ всех локусов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609 осуществляют методами полимеразной цепной реакции (ПЦР) синтеза ДНК. ПЦР проводят на аппарате IQ5 (Bio-Rad) в режиме real time с использованием ДНК-полимеразы Thermus aquaticus производства фирмы «Силекс-М» и стандартных олигонуклеотидных праймеров и зондов, синтезированных фирмой «Синтол» с последующим анализом полиморфизмов методом дискриминации аллелей. Для дискриминации аллелей используют программу Bio-Rad «IQ5-Standart Edition».

Возможность использования предложенного способа для оценки риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза подтверждает анализ результатов наблюдений 109 женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья РФ, имеющих сочетание миомы матки с аденомиозом и 981 человек контрольной группы. Обследование пациенток проводили врачи гинекологического отделения и отделения вспомогательных репродуктивных технологий перинатального центра Белгородской областной клинической больницы Святителя Иоасафа. В контрольную группу включали женщин, не имеющих пролиферативных заболеваний органов малого таза и доброкачественных заболеваний молочных желез. Формирование контрольной выборки осуществляли при профилактических осмотрах (диспансеризации). Обследование женщин проводили врачи консультативно-диагностического отделения перинатального центра Белгородской областной клинической больницы Святителя Иоасафа.

Критерии включения в исследуемые выборки:

1. Женщины русской национальности, родившиеся в Центральном Черноземье России и не имеющие между собой родства;

2. Добровольное согласие пациенток на проведение исследования.

3. В группу больных включали индивидуумов только после установления диагнозов миомы матки и аденомиоза, подтвержденных с помощью клинических, клинико-инструментальных и клинико-лабораторных методов исследования.

Критерии исключения из исследуемых выборок:

1. Пациентки со злокачественными заболеваниями органов малого таза и молочных желез;

2. Женщины с нерусской национальностью, родившиеся вне Центрального Черноземья;

3. Индивидуумы, отказавшиеся от участия в исследовании.

Типирование молекулярно-генетических маркеров осуществляли в лаборатории «Молекулярной генетики человека» медицинского института Белгородского государственного национального исследовательского университета.

Изучение роли комбинации генетических вариантов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609 в формировании сочетания миомы матки и аденомиоза проводили с помощью программного обеспечения АРSampler [http://sources.redhat.com/cygwin/], использующего метод Монте-Карло марковскими цепями и байесовскую непараметрическую статистику [A Gibbs sampler for identification of symmetrically structured, spaced DNA motifs with improved estimation of the signal length [Text] / A. V.Favorov, M. S. Gelfand, A. V. Gerasimova [et al.] // Bioinformatics. – 2005. – Vol. 21, № 10. – P. 2240-2245].
Установлено, что комбинация из четырех генетических вариантов: аллель G rs2241423 с аллелем G rs7766109 с аллелем A rs4953655 и генотипом TT rs9939609 в группе пациенток с сочетанием миомы матки и аденомиоза (30,19%) встречается чаще в 1,64 раза, чем в контрольной группе (18,43%, p=0,004). Следовательно, эта комбинация гентических вариантов является фактором риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза (OR=1,91, 95% CI 1,23-2,99).

Таким образом, результаты, полученные с помощью биоинформатического анализа, свидетельствуют о значимом вкладе комбинации полиморфных вариантов генов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609 в формирование сочетания миомы матки и аденомиоза. Фактором риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза у женщин является комбинация генетических вариантов аллеля G rs2241423 с аллелем G rs7766109 с аллелем A rs4953655 и генотипом TT rs9939609.

В качестве примеров конкретного выполнения разработанного способа приведены примеры генетического обследования по локусам rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609 трех женщин-добровольцев русской национальности, являющихся жителями Центрального Черноземья, не имеющих среди родственников 1-й степени родства больных доброкачественными пролиферативными заболеваниями матки.

Пример 1. У женщины А. была выявлена комбинация генетических вариантов аллеля G rs2241423 с аллелем G rs7766109 с аллелем A rs4953655 и генотипом TT rs9939609. На основании этого женщина включена в группу риска по развитию сочетания миомы матки и аденомиоза. Повторное обследование через 1 год подтвердило обоснованность прогноза. Назначен комплекс лечебных мероприятий, регулярный профилактический осмотр (посещение гинеколога раз в 6 месяцев).

Пример 2. У женщины В. была выявлена комбинация генетических вариантов аллеля G rs2241423 с аллелем G rs7766109 с аллелем A rs4953655 и генотипом TT rs9939609. На основании этого у нее прогнозируют повышенный риск развития сочетания миомы матки и аденомиоза. Данная женщина включена в группу риска по развитию сочетания миомы матки и аденомиоза, ей назначен комплекс профилактических мероприятий по предупреждению развития миомы матки и аденомиоза (лечение хронических гинекологических заболеваний, рациональное питание, физическая активность, нормализация психо-эмоционального состояния, регулярный профилактический осмотр (посещение гинеколога раз в 6 месяцев и УЗИ органов малого таза) и др.). Повторные осмотры подтвердили эффективность проведенного комплекса профилактических мероприятий.

Пример 3. У женщины С. была выявлена комбинация генетических вариантов аллеля А rs2241423 с аллелем А rs7766109 с аллелем G rs4953655 и генотипом AA rs9939609. На основании этих результатов данную пациентку включили в группу с низким риском развития сочетания миомы матки и аденомиоза, что подтверждено дальнейшим наблюдением.

Применение данного способа позволит формировать среди женщин на доклиническом этапе группы риска по развитию сочетания миомы матки и аденомиоза и своевременно реализовывать в этих группах необходимые лечебно-профилактические мероприятия по предупреждению развития миомы матки и аденомиоза.

Способ прогнозирования риска развития сочетания миомы матки и аденомиоза, включающий выделение ДНК из периферической венозной крови методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК, анализ полиморфизмов генов, отличающийся тем, что анализируют полиморфизмы генов rs2241423, rs7766109, rs4953655 и rs9939609 и прогнозируют повышенный риск развития сочетания миомы матки и аденомиоза у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья в случае выявления комбинации генетических вариантов аллеля G rs2241423 с аллелем G rs7766109 с аллелем A rs4953655 и генотипом TT rs9939609.
Источник поступления информации: Роспатент

Показаны записи 1-10 из 142.
20.01.2018
№218.016.1c6b

5-гидроксиникотинат калия, обладающий кардиопротекторной активностью

Изобретение относится к калиевой соли 5-гидроксиникотиновой кислоты формулы СНNОK,
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002640580
Дата охранного документа: 10.01.2018
17.02.2018
№218.016.2cae

Способ профилактики ишемической нейропатии зрительного нерва карбамилированным дарбэпоэтином в эксперименте

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и офтальмологии, и может быть использовано для профилактики ишемической нейропатии зрительного нерва. Способ включает моделирование ишемической нейропатии зрительного нерва путём ежедневного внутрибрюшинного введения...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002643579
Дата охранного документа: 02.02.2018
04.04.2018
№218.016.3672

Способ прогнозирования риска развития преэклампсии на основе комбинаций генов матриксных металлопротеиназ

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития преэклампсии на основе комбинаций генов матриксных металлопротеиназ. Из периферической венозной крови женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002646448
Дата охранного документа: 05.03.2018
10.05.2018
№218.016.4678

Способ напыления газотермических покрытий на внутренние поверхности и устройство для его реализации

Изобретение относится к технологии напыления газотермических покрытий и может быть использовано в машиностроении, авиационной и ракетно-космической технике, станкостроении, нефтегазодобывающей промышленности, энергетике и в городских сетях. Способ напыления газотермических покрытий на...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002650471
Дата охранного документа: 13.04.2018
10.05.2018
№218.016.4697

Универсальный механизм перемещения

Изобретение относится к области машиностроения и может быть использовано для создания сложных роботизированных станков и манипуляторов с возвратно-поступательным осевым перемещением исполнительного звена и одновременным вращением его вокруг этой оси. Механизм содержит корпус с расположенным в...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002650473
Дата охранного документа: 13.04.2018
10.05.2018
№218.016.4825

Способ прогнозирования риска развития гиперпластических процессов эндометрия на основе генетических данных

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития гиперпластических процессов эндометрия у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья. Из периферической венозной крови выделяют ДНК. Методом полимеразной цепной реакции анализируют...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002650988
Дата охранного документа: 18.04.2018
10.05.2018
№218.016.4827

Способ прогнозирования риска развития миомы матки

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития миомы матки у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья. Из периферической венозной крови выделяют ДНК методом полимеразной цепной реакции. Анализируют полиморфизмы генов rs7538038,...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002650990
Дата охранного документа: 18.04.2018
10.05.2018
№218.016.482d

Способ прогнозирования риска развития генитального эндометриоза

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития генитального эндометриоза. Из периферической венозной крови выделяют ДНК. Методом полимеразной цепной реакции проводят анализ полиморфизмов генов rs713586, rs10441737, rs887912. В случае выявления у...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002650994
Дата охранного документа: 18.04.2018
18.05.2018
№218.016.50b0

Способ прогнозирования риска развития ишемического инсульта с учетом генетических факторов

Способ прогнозирования риска развития ишемического инсульта с учетом генетических факторов относится к биохимии. Изобретение может быть использовано для выявления риска развития инсульта у индивидуумов русской национальности, являющихся жителями Центрального Черноземья. Способ включает...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002653450
Дата охранного документа: 08.05.2018
29.05.2018
№218.016.5292

Способ прогнозирования риска развития преэклампсии тяжелого течения с учетом генетических данных

Изобретение относится к генетике. Описан способ прогнозирования риска возникновения преэклампсии тяжелого течения у женщин русской национальности, уроженках Центрального Черноземья, относится к области медицинской диагностики. Способ включает выделение ДНК из периферической венозной крови....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002653765
Дата охранного документа: 14.05.2018
Показаны записи 1-10 из 74.
20.01.2013
№216.012.1daa

Способ оценки эффективности терапии у больных хроническим гломерулонефритом

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии и молекулярной диагностике, и касается способа оценки эффективности терапии циклофосфамидом у больных хроническим гломерулонефритом. Отбирают венозную кровь, выделяют ДНК и выявляют носительство аллелей локуса +1931 А/Т MIP-1β. В случае...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002473088
Дата охранного документа: 20.01.2013
27.01.2013
№216.012.20db

Способ прогнозирования уровня артериального давления у беременных в зависимости от генетического полиморфизма эндотелина 1

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования уровня артериального давления у беременных, включающий выделение ДНК из лимфоцитов периферической венозной крови и анализ полиморфизма K198N гена эндотелина 1 (ЕТ-1) методом полимеразной цепной реакции. В случае...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002473912
Дата охранного документа: 27.01.2013
20.03.2013
№216.012.3026

Способ ранней диагностики послеродового эндометрита

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ ранней диагностики послеродового эндометрита, включающий выделение РНК из эпителиальных клеток цервикального канала у женщин на поздних сроках беременности или на 3-4 сутки после родов, проведение обратной транскрипции с получением кДНК...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002477861
Дата охранного документа: 20.03.2013
27.06.2014
№216.012.d880

Способ прогнозирования риска развития сахарного диабета второго типа у больных гипертонической болезнью

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития сахарного диабета второго типа у уроженцев Центрального Черноземья, больных гипертонической болезнью. Осуществляют выделение ДНК и проводят анализ полиморфного варианта гена лимфотоксина α (+250G/A Ltα)....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002521202
Дата охранного документа: 27.06.2014
20.11.2014
№216.013.075d

Способ прогнозирования течения и эффективности терапии сахарного диабета 2 типа

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования течения и эффективности терапии сахарного диабета 2-го типа у индивидуумов русской национальности. После выделения ДНК из периферической венозной крови проводят анализ полиморфного варианта +250A/G гена лимфотоксина α...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002533286
Дата охранного документа: 20.11.2014
20.11.2014
№216.013.0807

Способ прогнозирования уровня гликированного гемоглобина у больных сахарным диабетом 2 типа

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования уровня гликированного гемоглобина y индивидуумов русской национальности, больных сахарным диабетом 2 типа. После выделения ДНК из периферической венозной крови проводят анализ полиморфного варианта гена рецептора...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002533456
Дата охранного документа: 20.11.2014
10.02.2015
№216.013.2503

Способ прогнозирования риска развития хронической плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у беременных

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у беременных. Осуществляют забор периферической венозной крови и выделение ДНК. Проводят анализ генов факторов коагуляции ,и....
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002540928
Дата охранного документа: 10.02.2015
27.04.2015
№216.013.4708

Способ генотипирования полиморфизма rs2551715 гена глутатионредуктазы у человека

Изобретение относится к биотехнологии, молекулярной биологии и генетике и представляет собой способ генотипирования полиморфизма rs2551715 гена глутатионредуктазы (GSR) человека. Способ заключается в генотипировании полиморфизма методом полимеразной цепной реакции и методом полиморфизма длин...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002549688
Дата охранного документа: 27.04.2015
20.05.2015
№216.013.4bdb

Способ прогнозирования риска формирования миомы матки

Изобретение относится к области медицины. Изобретение представляет способ прогнозирования риска развития изолированной миомы матки, включающий забор и исследование периферической венозной крови, отличающийся тем, что из периферической венозной крови выделяют ДНК, проводят типирование...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002550933
Дата охранного документа: 20.05.2015
27.07.2015
№216.013.6717

Способ прогнозирования уровня артериального давления у женщин в конце беременности

Изобретение относится к области медицины и касается способа прогнозирования уровня артериального давления у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России. Способ включает выделение ДНК из лимфоцитов периферической венозной крови и анализ...
Тип: Изобретение
Номер охранного документа: 0002557944
Дата охранного документа: 27.07.2015
+ добавить свой РИД