СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ РЕЦИДИВОВ У БОЛЬНЫХ РАКОМ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ РТА

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования развития рецидивов у больных раком слизистой оболочки полости рта.

Одной из важных задач клинической онкологии является поиск критериев прогноза заболевания до клинического проявления рецидивов, что может способствовать индивидуализации тактики адъювантных методов лечения и, в конечном итоге, определить продолжительность жизни больного.

Известен способ прогноза течения рака слизистой оболочки полости рта, основанный на оценке в сыворотке крови и ткани опухоли концентрации матриксных металлопротеиназ (см. Клишо Е.В., Кондакова И.В., Чойнзонов Е.Л. Черемисина О.В., Чижевская С.Ю., Шишкин Д.А. Прогностическая значимость определения металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов у больных плоскоклеточным раком органов головы и шеи // Онкохирургия. -2011. - №1, т.3. - с. 17-22). Авторами проведено комплексное изучение содержания ММП-2, ММП-9 и их тканевых ингибиторов ТИМП-1 и ТИМП-2 в сыворотке крови с целью выявления показателей, значимых для прогноза общей и безрецидивной выживаемости больных опухолями головы и шеи. В результате проведенных исследований установлено, что высокий уровень содержания ТИМП-1 и ММП-9 в сыворотке крови является признаком плохого прогноза двухлетней общей, безрецидивной выживаемости больных плоскоклеточным раком органов головы и шеи.

Однако указанный способ прогнозирования имеет определенные недостатки. Один из них, что в большинстве исследований динамика изменения уровня экспрессии матриксных металлопротеиназ по мере прогрессии заболевания СОПР не отслеживалась. Выводы о наличии прогностического значения уровней матриксных металлопротеиназ, которое было выявлено в единичном проспективном когортном исследовании, должны быть подтверждены в аналогичных исследованиях.

Известен способ прогнозирования прогрессии рака слизистой оболочки полости рта на основании экспрессии транскрипционного фактора NF-кВ (см. Спирина Л.В, Чойнзонов Е.Л., Кондакова И.В., Шишкин Д.А., Чижевская С.Ю. Экспрессия транскрипционных факторов NF-кВ и НIF-1 в плоскоклеточных карциномах головы и шеи: связь с прогнозом заболевания. // Вопросы онкологии. -2013. -№5. С.575-579). Изменение содержания в ткани опухоли транскрипционного фактора NF-кВ р50 было сопряжено с лимфогенным метастазированием плосколеточных карцином головы и шеи, при этом наблюдалась минимальная экспрессия транскрипционного фактора NF-кВ на стадии опухоли Т2-3.

Однако данный способ прогнозирования течения рака СОПР основан на сопряжении уровня ядерного транскрипционного фактора каппа-В и регионарного метастазирования, а связь этого показателя с рецидивированием рака СОПР не установлена. Кроме того, авторы установили такое сопряжение лишь для одной из изоформ ядерного транскрипционного фактора каппа-В - NF-кВ р50.

Техническим результатом изобретения является улучшение прогнозирования развития рецидивов у больных раком слизистой оболочки полости рта.

Задачей изобретения является выявление критериев прогноза рецидивирования у больных раком слизистой оболочки полости рта.

Технический результат достигается тем, что в ткани опухоли, взятой во время оперативного вмешательства, определяют уровень транскрипционного фактора каппа-В - NF-кВ р65 и при его значении 16,0 УЕ/мг белка в лунке и более прогнозируют высокий риск развития рецидивов в срок от 6 до 24 месяцев.

Изобретение «Способ прогнозирования развития рецидивов у больных раком слизистой оболочки полости рта» является новым, так как оно неизвестно из уровня медицины в области поиска критериев прогноза заболевания путем исследования факторов транскрипции в ткани рака СОПР.

Новизна изобретения заключается в оценке индивидуальных особенностей ткани опухоли активизировать факторы транскрипции, ответственные за протекцию клетки от апоптоза и способствующие их пролиферативной активности, инвазивному потенциалу.

Изобретение «Способ прогнозирования развития рецидивов у больных раком слизистой оболочки полости рта» является промышленно применимым, так как может быть использовано в учреждениях здравоохранения, в научно-исследовательских онкологических институтах, онкологических диспансерах и других медицинских учреждениях, занимающихся лечением рака СОПР.

Изобретение «Способ прогнозирования развития рецидивов у больных раком слизистой оболочки полости рта» выполняется следующим образом.

Образцы опухолевой ткани, полученные при выполнении хирургических вмешательств по поводу рака СОПР у 141 пациентов со стадией Т_1-3N_0-2M₀, выделяли в течение 2-3 часов после операции, очищали от участков некроза, кровоизлияний и помещали в жидкий азот. Образцы тканей замораживали и размораживали однократно для осуществления количественного анализа.

Уровень продукции транскрипционного фактора NF-кВ р65 в ядерных экстрактах определяли с использованием наборов для твердофазного ИФА на ИФА-анализаторе «Anthos 2020». Перед определением активности исследуемых ферментов опухолевую ткань гомогенизировали до порошкообразного состояния. Приготовление ядерных экстрактов для определения NF-кВ р65 проводили в соответствии с рекомендациями фирмы производителя Caymanchem (США). Полученный супернатант использовали для определения количественного содержания транскрипционного фактора методом ИФА с помощью тест-систем ELISA-based Trans АМТМ NFкВ/р65 protein assay (Active Motif, Carlsbad, СА, USA). Результаты определения содержания транскрипционных факторов в тканевом супернатанте выражали в условных единицах на мг белка в лунке.

В течение двух лет после операции состояние пациентов контролировалось и выявлялись случаи рецидивов заболевания.

Дифференциальная точка разделения концентрации NF-кВ р65 в ткани опухоли для прогнозирования высокого риска рецидива заболевания была определена методом ROC-анализа. С этой целью состояние 141 пациента клинической группы ранжировали следующим образом: 1 - рецидив есть, 0 - рецидива нет. Далее определяли уровень NF-кВ р65 в ткани опухоли, при достижении которого диагностическая чувствительность и специфичность прогнозирования рецидива заболевания были наибольшими по значению.

Критическим значением уровня NF-кВ р65, определенным в ткани опухоли для больных раком СОПР с высоким риском возникновения рецидива, явилось 16 УЕ/мг белка в лунке. Если у больного раком СОПР содержание NF-кВ р65 в операционном биоптате ≥ 16 УЕ/мг белка в лунке, то риск рецидива заболевания в ближайшие два года после операции высокий.

Для апробации разработанного способа прогнозирования рецидивов рака слизистой оболочки полости рта под нашим динамическим наблюдением в течение двух лет находились 132 больных обоего пола, у которых при поступлении был поставлен диагноз рака слизистой оболочки полости рта Т_2-3N_0-2М₀. Больные подвергались химиолучевому и оперативному лечению с последующей верификацией стадии процесса.

Всем больным проводилось исследование уровней транскрипционного фактора NF-кВ р65 в супернатанте операционного биоптата. В 84 образцах опухоли рака СОПР значение показателя составило 16,0 УЕ/мг белка в лунке и выше. Обнаруженный уровень NF-кВ р65 в ткани опухоли сопровождался развитием локальных рецидивов у 71 из 84 пациентов в период от 6 до 24 месяцев. Среди пациентов с содержанием NF-кВ р65 в ткани опухоли ниже 16,0 УЕ/мг белка в лунке рецидив заболевания в ближайшие 24 мес. после операции был выявлен у 9 из 48 больных.

Диагностическая чувствительность прогнозирования высокого риска рецидива заболевания составила 84,5%, диагностическая специфичность 81,3%, диагностическая точность 83,3%.

Приводим клинические примеры использования способа.

Пример №1

Больной П., возраст - 1966 г. р., госпитализирован в отделение «Опухолей головы и шеи» Ростовского научно-исследовательского онкологического института 07.12.2015 г. с диагнозом: рак языка, St.II Т2N0М0, Кл. гр. 2.

При поступлении жалобы на боли в полости рта в течение 5 месяцев, наличие изъязвленной опухоли на языке, неприятный запах изо рта, похудение и повышенное слюнотечение.

Локальный статус: Региональные лимфатические узлы шеи пальпаторно не определялись. При орофарингоскопии - на слизистой боковой поверхности свободной части языка с переходом на нижнюю поверхность языка справа опухолевый инфильтрат с некрозом и опухолевой язвой до 2,0×2,0 см.

При рентгенографии нижней челюсти в прямой и правой боковой проекциях было исключено поражение костных структур нижней челюсти. Общее состояние больного удовлетворительное, процесс оценен как резектабельный. Противопоказания для проведения хирургического лечения отсутствовали. 9.12.2015 г. выполнены гемирезекция языка справа, шейная лимфаденэктомия справа, трахеостомия; г. а. №95738/15 - G2 плоскоклеточный рак без ороговения, №102356-61/15 - в клетчатке, слюнной железе, л/узлах метастазов, опухоли нет.

В ткани опухоли, взятой во время хирургического вмешательства, методом ИФА определили уровень NF-кВ р65, который составил 16,8 УЕ/мг белка в лунке.

Послеоперационный период протекал гладко. Деканюляция произведена на 2 сутки. Носо-пищеводный зонд был удален на 6 сутки. Заживление происходило первичным натяжением, швы сняты на 9 сутки. Выписан из ООГШ 22 декабря 2015 года в удовлетворительном состоянии.

С 11.01.16 по 01.02.16.г.в ГОД г. Таганрога больному проведен послеоперационный курс ДГТ в СОД 40 Гр. С марта 2016 по июль 2016 года больному проведено 6 курсов ПХТ по схеме (цисплатин 100 мг в/в капельно в 1-й день, 5-фторурацил по 500 мг в/в капельно с 1 по 4 дни).

17.10.2016 года повторно обратился в КДО ФГБУ «РНИОИ» МЗ РФ с жалобами на резко болезненную опухоль в области культи языка. Обследован: УЗИ шеи от 8.11.16 «гиперплазия шейных лимфоузлов справа до 7 мм, слева до 11 мм»; СРКТ шеи от 19.10.16 - «рецидив опухоли языка 2,9×2,2 с неоднородной структурой, не связан с сосудами шеи». Выполнена эксцизионная биопсия рецидивной опухоли языка - гистологический анализ №28958/16 -G1 плоскоклеточный рак без ороговения.

10.11.16.г повторно госпитализирован в ООГШ ФФГБУ «РНИОИ» МЗ РФ. 14.11.16. г. больному выполнена реоперация: глоссэктомия, резекция дна полости комбинированная с реконструктивно-пластическим компонентом, трахеостомия. Гистологический анализ операционного материала №94089-92/16 «G2 плоскоклеточный рак с ороговением, изъязвлением. Послеоперационный период протекал гладко, больной деканулирован на 4-е сутки после операции. Перемещенный кожный лоскут в полости рта прижился первичным натяжением. 29.11.16. г больной выписан из отделения ООГШ в удовлетворительном состоянии под наблюдение онколога по месту жительства для проведения адъювантных курсов ПХТ.

Пример №2

Больной X., возраст 1937 г. р., госпитализирован в отделение «Опухолей головы и шеи» РНИОИ 23.04.2015 г. Установлен диагноз: рак слизистой оболочки нижней челюсти, St.III, Т3N0M0, Кл. гр. 2.

При поступлении жалобы на опухоль во рту, интенсивные боли, неприятный запах изо рта, снижение массы тела на 15 кг за 1 год из-за невозможности питания твердой пищей, обильное слюноотделение.

При оценке местного статуса установлено, что лимфоузлы шеи четко не пальпируются. При орофарингоскопии - на слизистой альвеолярного отростка нижней челюсти справа в проекции 6,7 зубов опухолевая язва, распространяющаяся также на слизистую оболочку ретромолярной области с переходом на слизистую твердого неба, корень языка, дно полости рта, переднюю небную дужку. Морфологическое исследование биоптата №22065/15 - 02 плоскоклеточный рак с ороговением от 30.03.15.г.

Больному 20.05.2015 выполнена шейная лимфаденэктомия справа; резекция нижней челюсти справа с резекцией корня языка, ротоглотки; трахеостомия. Послеоперационные результаты морфологического исследования: г. а.№38248-50/15 -G1 плоскоклеточный рак с ороговением, №38251-2/15 после декальцинации - опухоли нет; г.а. №38253-8/15 - в лимфоузлах метастазов нет.

Послеоперационный период протекал без осложнений - на 7 сутки выполнена деканюляция, послеоперационные раны зажили первичным натяжением, подвижность в культе языка сохранена.

В ткани опухоли, взятой во время оперативного вмешательства, методом ИФА определили уровень 1 NF-кВ р65, который составил 9,8 УЕ/мг белка в лунке. Пациент выписан на 15 сутки после операции. Состояние удовлетворительное.

С 15.06.16 по 8.07.16.г. больному проведен послеоперационный курс ДГТ в СОД 40Гр. С июля по октябрь 2015 года больному проведено 5 курсов ПХТ по схеме карбоплатин 450 мг в 1-й день, 5-фторурацил по 500 мг с 1-го по 4-й дни. Осмотр 16.11.16. г.: жалоб не предъявляет, общее состояние удовлетворительное. Лимфатические узлы шеи пальпаторно не определяются. Культя языка подвижна, образований, подозрительных в отношении рецидива опухоли в полости рта, не обнаружено. Питание самостоятельное естественным путем, полноценное. Функция глотания без поперхивания, речь несколько затруднена. Находится под наблюдением в течение 19 месяцев. Признаков рецидива не наблюдается.

Технико-экономическая эффективность способа заключается в возможности объективной оценки состояния направленности развития патологического процесса; своевременного прогнозирования развития генерализации; принятия адекватных лечебных мероприятий.

Технико-экономическая эффективность заявленного «Способа прогнозирования развития рецидивов у больных раком слизистой оболочки полости рта» позволяет прогнозировать риск рецидивирования заболевания, проводить объективный контроль за развитием злокачественного процесса (рака СОПР), предположить развитие рецидивов до их клинического проявления и включить больных в группу риска для интенсивного наблюдения, своевременно принять меры для назначения адъювантного лечения.

Доступность, относительная простота и практичность оценки факторов транскрипции позволяет использовать их в повседневной клинической практике с целью индивидуализации адъювантного лечения. Индивидуальное планирование химио-лучевой терапии является залогом ее эффективности и минимального риска осложнений лечения, что лежит в основе улучшения качества жизни пациентов.