ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО ОТ ГАСТРОЭЗОФАГЕАЛЬНОЙ РЕФЛЮКСНОЙ БОЛЕЗНИ

Область техники

[0001] Настоящее изобретение относится к применению 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойной кислоты, ее соли или ее пролекарства (далее в настоящем описании может сокращенно обозначаться как соединение по настоящему изобретению) в качестве терапевтического средства или средства, улучшающего состояние гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (далее в настоящем описании может сокращенно обозначаться как GERD (гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь)).

Предшествующий уровень техники

[0002] GERD представляет собой заболевание, которое влияет на здоровый образ жизни в результате рефлюкса желудочной кислоты или содержимого желудка в пищевод и сопровождается причиняющими беспокойство симптомами или физическими осложнениями. Причиняющие беспокойство симптомы в основном представляют собой изжогу, кислую отрыжку и т.п. и могут возникать осложнения, такие как эзофагит (рефлюкс-эзофагит). При этом в последние годы GERD, не сопровождающуюся эзофагитом, также называли неэрозивной рефлюксной болезнью (NERD (неэрозивная рефлюксная болезнь)).

[0003] В настоящее время для лечения GERD используют ингибиторы протонного насоса, ингибиторы H2 гистамина, прокинетики желудочно-кишечного тракта, лекарственные средства китайской медицины и т.п. FDA США обращает внимание на то, что, в частности, ингибиторы протонного насоса, которые часто используют, связаны с увеличением скорости образования трещин и со связанной с Clostridium difficile диареей, и выдано предупреждение о том, что их использование следует ограничивать низкой дозой или коротким периодом времени. Несмотря на то, что существуют ограничения эффектов, ингибиторы несистематически используются, что рассматривают как проблему. Кроме того, известно, что существующие средства, включая ингибиторы протонного насоса, оказывают слабые эффекты на субъективные симптомы пациентов, которых классифицировали как страдающих NERD, которые не имеют повреждений слизистой оболочки, по сравнению с субъективными симптомами, сопровождающими рефлюкс-эзофагит, вызываемый повреждением слизистой оболочки. Для пациентов, для которых ингибиторы протонного насоса являются неэффективными, существует меньше вариантов, и невозможно в достаточной степени контролировать QOL (качество жизни) пациентов. Таким образом, крайне необходимо разрабатывать новые не имеющие побочных эффектов лекарственные средства для лечения GERD, в частности NERD, для которых существующее лечение является неэффективным.

[0004] Неожиданно соединение по настоящему изобретению представляет собой соединение, описанное в примере 2 (105) в патентном документе 1, а также опубликованное в патентном документе 2 и патентном документе 3. Однако в этих документах не указано, что соединение по настоящему изобретению является пригодным в качестве средства для GERD.

Литература предшествующего уровня техники

Патентный документ

[0005] Патентный документ 1: WO 2002/072564

Патентный документ 2: WO 2002/072145

Патентный документ 3: WO 2008/099907

Сущность изобретения

Задачи, подлежащие решению посредством изобретения

[0006] Целью настоящего изобретения является предоставление средства для лечения или улучшения состояния гастроэзофагеальной рефлюксной болезни.

Средства решения задач

[0007] В результате тщательного исследования авторы настоящего изобретения обнаружили, что указанная выше проблема решается соединением по настоящему изобретению, таким образом, осуществляя настоящее изобретение.

[0008] Другими словами, настоящее изобретение является таким, как указано ниже.

[1] Терапевтическое средство и/или средство для улучшения состояния гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, содержащее 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойную кислоту, представлено следующей ниже формулой:

(далее в настоящем описании может сокращенно обозначаться как соединение A), ее соль или ее пролекарство в качестве активного ингредиента.

[2] Средство по указанному выше пункту [1], где гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь является неэрозивной.

[3] Средство по указанному выше пункту [1] или [2], где симптомами гастроэзофагеальной рефлюксной болезни являются изжога и/или кислотный рефлюкс.

[4] Средство по любому из указанных выше пунктов [1]-[3], где гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь является устойчивой к ингибитору протонного насоса.

[5] Средство по любому из указанных выше пунктов [1]-[4], которое используют в комбинации с лекарственным средством, выбранным из ингибиторов протонного насоса, антагонистов H2 гистаминового рецептора, прокинетиков желудочно-кишечного тракта, пероральных антацидных смесей, защищающих слизистую оболочку средств и антагонистов дофаминовых рецепторов.

[6] Средство по любому из указанных выше пунктов [1]-[3], которое используют в комбинации с ингибитором протонного насоса.

[7] Средство по указанному выше пункту [5] или [6], где ингибитор протонного насоса представляет собой лекарственное средство, выбранное из омепразола, эзомепразола, пантопразола, рабепразола, тенатопразола, илапразола и лансопразола.

[8] Средство для подавления гиперчувствительности в пищеводе, содержащее 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойную кислоту, ее соль или ее пролекарство в качестве активного ингредиента.

[9] Средство для ингибирования транзиторного расслабления нижнего пищеводного сфинктера, содержащее 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойную кислоту, ее соль или ее пролекарство в качестве активного ингредиента.

[10] Средство по указанному выше пункту [9], которое снижает частоту транзиторного расслабления нижнего пищеводного сфинктера.

[11] Средство по указанному выше пункту [9] или [10] для подавления рефлюкса желудочной кислоты и/или содержимого желудка.

[12] Средство по любому из указанных выше пунктов [9]-[11] для предупреждения или предупреждения обострения, лечения и/или улучшения состояния гастроэзофагеальной рефлюксной болезни.

[13] Средство по указанному выше пункту [12], где гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь является неэрозивной.

[14] Средство по указанному выше пункту [12] или [13], где симптомами гастроэзофагеальной рефлюксной болезни являются изжога и/или кислотный рефлюкс.

[15] Средство по любому из указанных выше пунктов [12]-[14], где гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь является устойчивой к ингибитору протонного насоса.

[16] Средство по любому из указанных выше пунктов [12]-[14], которое используют в комбинации с лекарственным средством, выбранным из ингибиторов протонного насоса, антагонистов H2 гистаминового рецептора, прокинетиков желудочно-кишечного тракта, пероральных антацидных смесей, защищающих слизистую оболочку средств и антагонистов дофаминовых рецепторов.

[17] Средство по любому из указанных выше пунктов [12]-[14], которое используют в комбинации с ингибитором протонного насоса.

[18] Средство по указанному выше пункту [16] или [17], где ингибитор протонного насоса представляет собой лекарственное средство, выбранное из омепразола, эзомепразола, пантопразола, рабепразола, тенатопразола, илапразола и лансопразола.

[19] Средство для подавления рефлюкса желудочной кислоты и/или содержимого желудка, содержащее 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойную кислоту, ее соль или ее пролекарство в качестве активного ингредиента.

[20] Средство по пункту [19] для предупреждения и/или лечения отрыжки.

[21] Профилактическое или предупреждающее обострение гастроэзофагеальной рефлюксной болезни средство, содержащее 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойную кислоту, ее соль или ее пролекарство в качестве активного ингредиента.

[22] Средство по указанному выше пункту [21], где гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь является неэрозивной.

[23] Средство по указанному выше пункту [21] или [22], которое используют в комбинации с лекарственным средством, выбранным из ингибиторов протонного насоса, антагонистов H2 гистаминового рецептора, прокинетиков желудочно-кишечного тракта, пероральных антацидных смесей, защищающих слизистую оболочку средств и антагонистов дофаминовых рецепторов.

[24] Средство по указанному выше пункту [23], где ингибитор протонного насоса представляет собой лекарственное средство, выбранное из омепразола, эзомепразола, пантопразола, рабепразола, тенатопразола, илапразола и лансопразола.

[25] 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойная кислота, ее соль или ее пролекарство для применения для предупреждения или предупреждения обострения, лечения и/или улучшения состояния гастроэзофагеальной рефлюксной болезни.

[26] Применение 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойной кислоты, ее соли или ее пролекарства для изготовления профилактического или предотвращающего обострение, терапевтического средства и/или средства, улучшающего состояние гастроэзофагеальной рефлюксной болезни.

[27] Способ предупреждения или предупреждения обострения, лечения и/или улучшения состояния гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, включающий введение фармацевтически эффективного количества 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойной кислоты, ее соль или ее пролекарства пациенту с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью.

[28] 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойная кислота, ее соль или ее пролекарство для применения для подавления гиперчувствительности в пищеводе.

[29] Применение 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойной кислоты, ее соли или ее пролекарства для изготовления средства для подавления гиперчувствительности в пищеводе.

[30] Способ подавления гиперчувствительности в пищеводе, включающий введение фармацевтически эффективного количества 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойной кислоты, ее соли или ее пролекарства пациенту с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью.

[31] 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойная кислота, ее соль или ее пролекарство для применения для подавления транзиторного расслабления нижнего пищеводного сфинктера.

[32] Применение 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойной кислоты, ее соли или ее пролекарства для производства средства для подавления транзиторного расслабления нижнего пищеводного сфинктера.

[33] Способ подавления транзиторного расслабления нижнего пищеводного сфинктера, включающий введение фармацевтически эффективного количества 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойной кислоты, ее соли или ее пролекарства пациенту с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью.

[34] Лекарственное средство, образованное комбинированием 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойной кислоты, ее соли или ее пролекарства со средством, выбранным из ингибиторов протонного насоса, антагонистов H2 гистаминового рецептора, прокинетиков желудочно-кишечного тракта, пероральных антацидных смесей, защищающих слизистую оболочку средств и антагонистов дофаминовых рецепторов.

[35] Лекарственное средство по указанному выше пункту [34], где ингибитор протонного насоса представляет собой лекарственное средство, выбранное из омепразола, эзомепразола, пантопразола, рабепразола, тенатопразола, илапразола и лансопразола.

[36] Изделие, содержащее 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойную кислоту, ее соль или ее пролекарство, контейнер, содержащий соединение, и вкладыш в упаковку или этикетку, на которой указано, что соединение можно использовать для предупреждения, предупреждения обострения или для лечения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни и/или улучшения состояния ее симптомов.

Эффект изобретения

[0009] Соединение по настоящему изобретению подавляет гиперчувствительность, вызываемую кислотами и стимуляцией, отличной от кислот, и, таким образом, является эффективным для лечения GERD или улучшения состояния характерных симптомов, таких как изжога и кислая отрыжка. Соединение по настоящему изобретению также оказывает подавляющее действие на транзиторное расслабление нижнего пищеводного сфинктера, и, таким образом, также может задерживать начало или подавлять обострение GERD, подавляя рефлюкс желудочной кислоты или содержимого желудка.

Краткое описание чертежей

[0010] [Фиг. 1] На фиг. 1 представлены оценочные результаты соединения по настоящему изобретению на модели гиперчувствительности, вызываемой кислотой, где по оси ординат указано напряжение (V) электростимуляции, для которой демонстрируют конкретный ноцицептивный характер, и завершение перфузии соляной кислоты или физиологического раствора в пищевод принимают за 0 минут времени (минуты) на оси абсцисс, и незакрашенные окружности (○) означают здоровую контрольную группу, закрашенные окружности (•) означают контрольную группу, закрашенные треугольники (▲) означают группу, которой вводили соединение A (0,01 мг/кг), и незакрашенные треугольники (Δ) означают группу, которой вводили соединение A (0,1 мг/кг).

[Фиг. 2] На фиг. 2 представлены оценочные результаты соединения по настоящему изобретению на модели гиперчувствительности, вызываемой электростимуляцией, где по оси ординат указано напряжение (V) электростимуляции, для которой демонстрируют конкретный ноцицептивный характер, и завершение электростимуляции в течение 30 минут принимают за 0 минут времени (минуты) на оси абсцисс, и закрашенные окружности (•) означают контрольную группу, и закрашенные треугольники (▲) означают группу, которой вводили соединение A (0,1 мг/кг).

[Фиг. 3] На фиг. 3 представлены оценочные результаты соединения по настоящему изобретению на модели транзиторного расслабления нижнего пищеводного сфинктера, где по оси ординат указана частота транзиторного расслабления нижнего пищеводного сфинктера, и "***" означает значимое отличие (P<0,01) от контрольной группы (группа, которой вводили среду) по критерию множественного сравнения согласно критерию Стила.

Способ осуществления изобретения

[0011] В настоящем описании соединение по настоящему изобретению означает 4-[({6-[изобутил(1,3-тиазол-2-илсульфонил)амино]-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил}окси)метил]-3-метилбензойную кислоту, ее соль или ее пролекарство, и в частности соединение A можно получить улучшенным способом, описанным в WO 2002/072564, и известным способом, например, способом, описанным в Synlett 2002, №1, 239-242 или Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, 2^nd Edition (Richard C. Larock, John Wiley & Sons Inc., 1999) и т.п., и способами в сочетании.

[0012] Соли соединения по настоящему изобретению включают аддитивные соли кислот (например, неорганические соли, такие как гидрохлориды, гидроброматы, гидроиодиды, сульфаты, фосфаты и нитраты; и органические соли, такие как ацетаты, лактаты, тартраты, бензоаты, цитраты, метансульфонаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, толуолсульфонаты, изетионаты, глюкуронаты и глюконаты), соли щелочных металлов (калия, натрия и т.д.), соли щелочноземельных металлов (кальция, магния и т.д.), аммонийные соли или соли фармацевтически приемлемых органических аминов (например, тетраметиламмония, триэтиламина, метиламина, диметиламина, циклопентиламина, бензиламина, фенэтиламина, пиперидина, моноэтаноламина, диэтаноламина, трис(гидроксиметил)аминометана, лизина, аргинина и N-метил-D-глюкамина) и т.п. Соединение по настоящему изобретению можно преобразовывать в соответствующую соль известным способом.

[0013] Примеры пролекарств соединения по настоящему изобретению включают соединения, в которых карбоксигруппа соединения A является алкилэтерифицированной, фенилэтерифицированной, карбоксиметилэтерифицированной, диметиламинометилэтерифицированной, пивалоилоксиметилэтерифицрованной, этоксикарбонилоксиэтилэтерифицированной, фталидилэтерифицированной, (5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метилэтерифицированной, циклогексилоксикарбонилэтилэтерифицированной или метиламидированной, и эти соединения можно получать известными способами. Соединение, в котором карбоксигруппа соединения A является алкилэтерифицированной, предпочтительно представляет собой метил-4-({[6-(N-изобутилтиазол-2-сульфонамидо)-2,3-дигидро-1H-инден-5-ил]окси}метил)-3-метилбензоат.

[0014] В настоящем описании симптомы GERD в основном включают изжогу и кислую отрыжку, и их, как правило, называют характерными симптомами. В то же время, примеры второстепенных симптомов GERD включают эпигастралгию, дисфагию, рвоту, отрыжку и вздутие живота, и примеры нетипичных симптомов включают боль в груди, хронический кашель и гортанно-глоточные симптомы.

[0015] В настоящем описании улучшение состояния GERD означает, что один или более симптомов, наблюдаемых при GERD, исчезают или являются ослабленными по сравнению с симптомами до введения соединения по настоящему изобретению.

[0016] Соединение по настоящему изобретению является эффективным для улучшения состояния характерных симптомов, таких как изжога и/или кислая отрыжка, при GERD. Соединение по настоящему изобретению также является эффективным для лечения или улучшения состояния NERD, GERD, и, кроме того, эффективным для пациента с GERD или пациента с NERD, для которых средства, используемые в качестве терапевтических средств для GERD, в частности, ингибиторы протонного насоса, являются неэффективными. Кроме того, соединение по настоящему изобретению также оказывает ингибирующее действие на транзиторное расслабление нижнего пищеводного сфинктера (TLESR: транзиторное расслабление нижнего пищеводного сфинктера), и, таким образом, может задерживать начало или подавлять обострение GERD, подавляя рефлюкс желудочной кислоты и содержимого желудка. Соединение по настоящему изобретению в основном уменьшает воздействие желудочной кислоты на пищевод и, таким образом, является пригодным для лечения или улучшения состояния GERD.

[0017] Как правило, соединение по настоящему изобретению вводят перорально в дозе от 10 мг до 300 мг (например, 10 мг, 30 мг, 100 мг, 300 мг) для взрослого для введения от одного до трех раз в сутки. Естественно доза изменяется в зависимости от различных состояний, таких как возраст, масса тела, симптомы, терапевтические эффекты, способы введения и продолжительность лечения. Таким образом, в некоторых случаях является достаточным количество, меньшее указанной выше дозы, а в других случаях необходимым является введение вне диапазона.

[0018] Соединение по настоящему изобретению можно вводить в комбинации с другим средством для (1) дополнения и/или усиления эффектов предупреждения или предупреждения обострения, или лечения, или улучшения состояния гастроэзофагеальной рефлюксной болезни в результате введения соединения по настоящему изобретению, (2) улучшений фармакокинетики и всасывания соединения по настоящему изобретению или другого средства, и снижения дозы и/или (3) уменьшения побочных эффектов другого средства.

[0019] Сопутствующее лекарственное средство соединения по настоящему изобретению и другое средство можно вводить в форме комбинированного средства, в котором компоненты объединяют в составе, или можно вводить в виде различных составов. Введение в виде различных составов включает совместное введение и введение с интервалами. Для введения с интервалами, другое средство можно вводить после того, как вводят соединение по настоящему изобретению, или соединение по настоящему изобретению можно вводить после того, как вводят другое средство. Способы введения для каждого введения могут быть одинаковыми или различными. Примеры других средств в настоящем описании включают ингибиторы протонного насоса, антагонисты H2 гистаминового рецептора, прокинетики желудочно-кишечного тракта, пероральные антацидные смеси, защищающие слизистую оболочку средства и антагонисты дофаминовых рецепторов.

[0020] Примеры ингибиторов протонного насоса включают омепразол, эзомепразол, пантопразол, рабепразол, тенатопразол, илапразол и лансопразол.

Примеры антагонистов H2 гистаминового рецептора включают циметидин, ранитидин, фамотидин, роксатидин, низатидин и лафутидин.

[0021] Примеры прокинетиков желудочно-кишечного тракта включают домперидон, метоклопрамид, мозаприд, итоприд и тегасерод.

Примеры пероральных антацидных смесей включают маалокс (Maalox) (зарегистрированный товарный знак), алюдрокс (Aludrox) (зарегистрированный товарный знак) и гевискон Gaviscon (зарегистрированный товарный знак).

[0022] Примеры защищающих слизистую оболочку средств включают полапрецинк, экабет натрия, ребамипид, тепренон, цетраксат, сукральфат и плаунотол.

Примеры антагонистов дофаминовых рецепторов включают метоклопрамид, домперидон и левосульпирид.

[0023] Массовое отношение соединения по настоящему изобретению и другого средства не является конкретно ограниченным.

В качестве других средств можно вводить в комбинации два или более средств любого аналогичного типа или других типов.

Другие средства включают не только средства, которые были открыты на настоящее время, а также средства на основе указанного выше механизма, которые будут открыты в будущем.

[0024] Когда соединение по настоящему изобретению вводят независимо или вводят в комбинации с другим средством, соединение используют в виде твердого лекарственного средства для внутреннего применения или жидкого лекарственного средства для внутреннего применения для перорального введения.

[0025] Твердые лекарственные средства для внутреннего применения для перорального введения включают таблетки, пилюли, капсулы, порошки и гранулы. Капсулы включают твердые капсулы и мягкие капсулы. Для таких твердых лекарственных средств для внутреннего применения составы получают из одного или более активных веществ самих по себе, или после смешивания веществ с наполнителем (например, лактозой, маннитом, глюкозой, микрокристаллической целлюлозой или крахмалом), связывающим средством (например, гидроксипропилцеллюлозой, поливинилпирролидоном или алюмосиликатом магния), дезинтегрирующим средством (например, карбоксиметилцеллюлозой кальция), смазочным средством (например, стеаратом магния), стабилизатором, солюбилизатором (например, глутаминовой кислотой или аспарагиновой кислотой) и т.п. в соответствии с общепринятыми способами, и используют. Кроме того, по мере необходимости лекарственные средства можно покрывать покрывающими средствами (например, белым сахаром, желатином, гидроксипропилцеллюлозой и фталатом гидроксипропилметилцеллюлозы) или покрывать двумя или более слоями. Кроме того, также включены капсулы из веществ, которые могут всасываться, такие как желатин.

[0026] Жидкие лекарственные средства для внутреннего применения для перорального введения включают фармацевтически приемлемые растворы, суспензии, эмульсии, сиропы и эликсиры. Для таких жидких лекарственных средств одно или более активных веществ растворяют, суспендируют или эмульгируют в разбавителе, который является общепринятым (например, очищенной воде, этаноле или смеси этих жидкостей). Жидкие лекарственные средства могут дополнительно содержать средство для смачивания, суспендирующее средство, эмульгатор, подсластитель, ароматизатор, ароматическую добавку, консервант, буферное средство и т.п.

[0027] Настоящее изобретение будет более подробно описано посредством следующих ниже примеров. Однако следует отметить, что настоящее изобретение не ограничено ими. Специалисты в данной области могут проводить различные изменения и модификации на основании описания настоящего изобретения, и эти изменения и модификации также вводят в настоящее изобретение.

Примеры

[0028] Пример 1: Оценка на модели гиперчувствительности, вызываемой кислотой

Яванских макак (в возрасте от 4 до 6 лет, самок, Japan Laboratory Animals, Inc., без введения каких-либо средств) адаптировали к приматологическому креслу в течение 2 суток или более и содержали без доступа к корму в течение 12 часов или более. Затем на сутки эксперимента после измерения массы тела обезьян иммобилизовали на приматологическом кресле и адаптировали еще в течение одного часа или более. Через носовое отверстие вводили катетер для электростимуляции и проводили электростимуляцию в положении приблизительно на 10 см выше кардиального отдела желудка (верхний пищевод). Напряжение увеличивали с шагом приблизительно 2 В/сек и получали напряжение (В), для которого демонстрировали конкретный ноцицептивный характер (условный рефлекс избегания с попыткой вырваться из клетки) у индивидуума. Стимуляцию проводили три раза каждые 2-3 минуты в каждый оцениваемый момент времени и использовали среднее значение в качестве ноцицептивного порога в каждый момент времени. Проводили перфузию физиологического раствора или соляной кислоты (1,5н) из положения приблизительно 3 см выше кардиальной области (нижний пищевод) в желудок при скорости впрыска 160 мл/час в течение 30 минут. Ноцицептивные пороги измеряли до перфузии физиологического раствора в пищевод и после нее, перед перфузией соляной кислоты в пищевод и через 0, 30, 60, 90 и 120 минут после перфузии соляной кислоты в пищевод. Носитель или соединение A (0,01 и 0,1 мг/кг, соответственно) вводили подкожно за 30 минут до начала перфузии соляной кислоты.

[0029] Число животных в каждой группе являлось таким, как указано ниже: 3 животных в контрольной группе здоровых (группа, в которой в последовательном порядке проводили перфузию физиологического раствора, введение носителя и перфузию физиологического раствора), 5 животных в контрольной группе (группа, в которой в последовательном порядке проводили перфузию физиологического раствора, введение носителя и перфузию соляной кислоты) и в группе соединения A 0,01 мг/кг (группа, в которой в последовательном порядке проводили перфузию физиологического раствора, введение соединения A и перфузию соляной кислоты проводили) и 7 животных в группе соединения A 0,1 мг/кг (группа, в которой в последовательном порядке проводили перфузию физиологического раствора, введение соединения A и перфузию соляной кислоты проводили). Завершение перфузии соляной кислоты (в контрольной группе и группе, которой вводили соединение A) или физиологического раствора (в контрольной группе здоровых) в пищевод в течение 30 минут принимали за основное время (0 минут) и перфузию физиологического раствора в пищевод во всех тестируемых группах проводили от 90 до 120 минут до основного времени.

[0030] Ноцицептивного порога (В) использовали в качестве конечной точки. Конечную точку оценивали сравнением ноцицептивных порогов до и после перфузии соляной кислоты, ноцицептивного порога группы, которой вводили носитель в каждый момент времени и ноцицептивного порога группы, которой вводили соединения A в каждый момент времени.

[0031] Кроме того, после завершения эксперимента экстрагировали всю периферийную часть ткани нижнего пищевода приблизительно 3 см выше кардиальной области, в которую перфузировали кислоту, и погружали в фосфатный буфер с 4% параформальдегидом для получения, погруженного в парафин блока. Парафиновый срез толщиной 4 мкм получали из погруженного в парафин блока и помещали на предметное стекло, покрытое MAS (MATSUNAMI). Проводили окрашивание гематоксилин-эозином и наблюдали срез посредством микроскопии.

[0032] Результаты

Как представлено на фиг.1, ноцицептивные пороги контрольной группы здоровых не изменялись в течение всех моментов времени и являлись практически постоянными. Касательно ноцицептивного порога контрольной группы, ноцицептивный порог снижался сразу же после перфузии соляной кислоты, и сохранялся в течение 120 минут после перфузии соляной кислоты. С другой стороны, что касается ноцицептивного порога групп, которой вводили соединение A, понижение ноцицептивных порогов, наблюдаемое после перфузии соляной кислоты в контрольной группе, блокировали дозозависимым, и в группе, которой вводили 0,1 мг/кг соединения A, ноцицептивный порог снижался до нормального уровня. Кроме того, ингибирующее действие сохранялось даже через 120 минут после перфузии соляной кислоты. Кроме того, в ткани пищевода, в который перфузировали кислоту в экспериментальных условиях, наблюдали картины поражения и воспаления слизистой ткани пищевода.

[0033] На основании указанных выше результатов, было сделано предположение, что соединение по настоящему изобретению является эффективным при лечении или улучшении состояния симптомов GERD, вызываемых рефлюксом желудочной кислоты, в частности, изжоги и кислой отрыжки, сопровождающихся повреждениями слизистой оболочки пищевода.

[0034] Пример 2: Оценка на модели гиперчувствительности, вызываемой электростимуляцией

Яванских макак (в возрасте от 4 до 6 лет, самок, Japan Laboratory Animals, Inc., без введения каких-либо средств) адаптировали к приматологическому креслу в течение 2 суток или более и содержали без доступа к корму в течение 12 часов или более. Затем на сутки эксперимента после измерения массы тела обезьян иммобилизовали на приматологическом кресле и адаптировали еще в течение одного часа или более. Через носовое отверстие вводили катетер для электростимуляции и проводили электростимуляцию в положении приблизительно на 10 см выше кардиального отдела желудка (верхний пищевод). Напряжение увеличивали с шагом приблизительно 2 В/сек и получали напряжение (В), для которого демонстрировали конкретный ноцицептивный характер (условный рефлекс избегания с попыткой вырваться из клетки) у индивидуума. Стимуляцию проводили три раза каждые 2-3 минуты в каждый оцениваемый момент времени и использовали среднее значение в качестве ноцицептивного порога в каждый момент времени. Гиперчувствительность индуцировали длительной электростимуляцией до положения приблизительно 3 см выше кардиальной области (нижний пищевод). Другими словами, катетер для электростимуляции вводили через носовое отверстие и проводили электростимуляцию в положении нижнего пищевода в течение 30 минут. Носитель или соединение A (0,1 мг/кг) вводили подкожно за 30 минут до начала раздражения электростимуляцией. Число животных составляло по 3 в каждой группе.

[0035] Ноцицептивный порог (V) использовали в качестве конечной точки. Конечную точку оценивали сравнением ноцицептивных порогов до и после длительной электростимуляции, ноцицептивного порога группы, которой вводили носитель в каждый момент времени, и ноцицептивного порога группы, которой вводили соединение A в каждый момент времени.

[0036] Кроме того, после завершения эксперимента экстрагировали всю периферийно часть ткани нижнего пищевода приблизительно 3 см выше кардиальной области, в которой проводили электростимуляцию, и погружали в фосфатный буфер с 4% параформальдегидом для получения, погруженного в парафин блока. Парафиновый срез толщиной 4 мкм получали из погруженного в парафин блока и помещали на предметное стекло, покрытое MAS (MATSUNAMI). Проводили окрашивание гематоксилин-эозином и наблюдали срез посредством микроскопии.

[0037] Результаты

Как представлено на фиг. 2, касательно ноцицептивного порога контрольной группы (группа, в которой в последовательном порядке проводили введение среды и длительной электростимуляции) ноцицептивный порог понижался сразу после возбуждения и сохранялся до 120 минут после длительной электростимуляции. С другой стороны, относительно ноцицептивного порога группы, в которой вводили соединение A (группы, в которой в последовательном порядке проводили введение соединения A и длительную электростимуляцию), понижение ноцицептивного порога, наблюдаемое в контрольной группе после длительной электростимуляции, доходило до нормального уровня. Кроме того, ингибирующее действие сохранялось даже через 120 минут после длительной электростимуляции. Кроме того, в ткани пищевода, в которой проводили делительную электростимуляцию в экспериментальных условиях, не наблюдали картин повреждения и воспаления слизистой ткани пищевода.

[0038] На основании указанных выше результатов было сделано предположение, что соединение по настоящему изобретению является эффективным при лечении или улучшении состояния GERD, которое не вызвано воспалением, сопровождаемым рефлюксом желудочной кислоты или содержимого желудка, в частности NERD.

[0039] Пример 3: Оценка проникновения в центр

Яванских макак (в возрасте от 4 до 6 лет, самок, Japan Laboratory Animals, Inc., без введения каких-либо средств) иммобилизовали на приматологическом кресле и подкожно вводили им соединение A (0,1 мг/кг) с последующим забором крови через 180 минут после введения. Образцы крови центрифугировали при 10000×g при 4°C в течение 3 минут для сбора плазмы. Затем, собирали цереброспинальную жидкость под анестезией посредством внутривенного введения пентобарбитала натрия, а затем выделяли нижний пищевод, верхний пищевод, ганглий заднего корешка, спинной мозг и ствол головного мозга. Кроме того, ганглий заднего корешка и спинной мозг выделяли из спинного мозга грудного отдела с первого по шестой, который контролирует эзофагеальные нервы. К собранной ткани добавляли в 4 раза большее количество физиологического раствора в пересчете на сырую массу каждой ткани с последующей гомогенизацией с использованием гомогенизатора Physcotron с получением гомогената каждой ткани. Число животных составляло 3.

[0040] Концентрацию соединения A в каждой ткани измеряли способом LC/MS/MS (жидкостной хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией)

К образцам для 50 мкл калибровочной кривой и тестируемым образцам соединения A добавляли 1 мл ультрачистой воды и вещество внутреннего стандарта в условиях сильного охлаждения с последующим перемешиванием. В картридж для твердофазной экстракции (OAS1S MAX 30 мг/1 cc, Waters Corporation), который предварительно кондиционировали, нагружали каждый образец и проводили промывание с последующим центрифугированием и удаляли очищающую жидкость из картриджа сушкой. Кроме того, элюирование проводили 1 мл смешанной жидкости ацетонитрила/уксусной кислоты (49:1) и элюат концентрировали и сушили в потоке азота (40°C или менее). Остаток повторно растворяли в 200 мл метанола/0,1% об. раствора уксусной кислоты (70:30) с получением образца для измерения LC/MS/MS.

[0041] Анализ LC/MS/MS проводили в следующих условиях.

Условия LC

Измерительное устройство: Nanospace 3033 (Shiseido Co., Ltd.)

Аналитическая колонка: SunFire C18 3,5 мкм (2,1 мм внутренний диаметр × 100 мм, 3,5 мкм, Waters Corporation)

Подвижная фаза: ацетонитрил/0,1% об. раствора уксусной кислоты (70:30)

Очищающая жидкость для очистки входного отверстия (один компонент): 2-пропанол

Очищающая жидкость для очистки входного отверстия (два компонента): подвижная фаза [ацетонитрил/0,1% об. раствора уксусной кислоты (70:30)]

Скорость потока: 0,2 мл/мин

Температура колонки: 35°C

Температура образца: 4°C

Время анализа 13 минут

[0042] Условия MS/MS

Измерительное устройство: API4000 (AB SCIEX)

Источник ионов: ESI

Тип сканирования: MRM

Полярность: отрицательная

Температура: 650°C

Выбранный ион: Q1:499,0 (масса/заряд), Q3:147,3 (масса/заряд)

[0043] С использованием отношения площади пика (стандартное вещество/вещество внутреннего стандарта), получаемого измерением образца для калибровочной кривой строили калибровочную кривую (y=aX+b, Y: отношение площади пика, X: концентрация) из линии единичной регрессии способом наименьших квадратов, и отношения площадей пиков тестируемых образцов наносили на калибровочную кривую для вычисления измеряемой величины.

[0044] Результаты

Через 180 минут после введения соединения A средние концентрации в плазме, цереброспинальной жидкости, нижнем пищеводе, верхнем пищеводе, ганглии заднего корешка, спинном мозге и стволе головного мозга составляли 3,79, 0,07, 0,25, 0,28, 0,62, 0,19 и 0,22 нг/мл соответственно. Процентные отношения относительно концентрации в плазме составляли 1,9, 6,7, 7,3, 16,3, 5,1 и 5,7% соответственно.

[0045] Пример 4: Оценка действия на транзиторное расслабление нижнего пищеводного сфинктера (TLESR) (1)

Яванских макак (в возрасте от 4 до 6 лет, самок, Japan Laboratory Animals, Inc., без введения каких-либо средств) адаптировали к приматологическому креслу в течение 2 суток или более и содержали без доступа к корму в течение 12 часов или более. Затем на сутки эксперимента обезьян после измерения массы тела иммобилизовали на приматологическом кресле и адаптировали еще в течение одного часа или более. Через носовое отверстие вводили катетер для введения корма с высоким содержанием жира/воздуха и катетер-датчик для измерения давления. Корм с высоким содержанием жира вводили в желудок так, чтобы конечный объем составлял 80 мл, а затем вводили воздух до давления в желудке 10 мм рт.ст. и поддерживали. Давление в пищеводе измеряли катетером-датчиком в желудке, области нижнего пищеводного сфинктера и положении приблизительно 3 см выше нижнего пищеводного сфинктера. Частоту TLESR измеряли в течение 45 минут от момента введения корма с высоким содержанием жира до и после подкожного введения соединения A (0,1 мг/кг) до конца вентиляции.

[0046] Пример 5: Оценка действия на транзиторное расслабление нижнего пищеводного сфинктера (TLESR) (2)

Яванских макак (в возрасте от 4 до 6 лет, самок, Japan Laboratory Animals, Inc., без введения каких-либо средств) адаптировали к приматологическому креслу в течение 2 суток или более и содержали в течение 12 часов или более. Затем на сутки эксперимента после измерения массы тела обезьян иммобилизовали на приматологическом кресле и адаптировали еще в течение одного часа или более. Через носовое отверстие и ротовую полость вводили катетер для введения корма с высоким содержанием жира/воздуха и катетер-датчик для измерения давления. Корм с высоким содержанием жира вводили в желудок так, чтобы конечный объем составлял 80 мл, а затем вводили воздух до давления в желудке 20 мм рт.ст. и поддерживали. Давление в пищеводе измеряли катетером-датчиком в области нижнего пищеводного сфинктера и положениях приблизительно 2, 3 и 6 см выше нижнего пищеводного сфинктера. Соединение A вводили подкожно (0,01 и 0,1 мг/кг) и введение корма с высоким содержанием жира и вентиляцию проводили через 30 минут после подкожного введения. Частоту TLESR измеряли в течение 45 минут после введения корма с высоким содержанием жира до конца вентиляции. В этом эксперименте TLESR измеряли с учетом того, что реакция расслабления области нижнего пищеводного сфинктера являлась дольше на 0,5 секунд и не вызывалась перистальтическим движением, возникающим в пищеводе, и скорость понижения давления составляла более 0,5 секунд, и ее измеряли. Число животных в группах - контрольной группе (группе, которой вводили носитель), группе, которой подкожно вводили соединение A 0,01 мг/кг, и группе, которой подкожно вводили соединение A 0,1 мг/кг) - составляло 4 соответственно.

[0047] Результаты

TLESR совершенно не возникало до введения корма с высоким содержанием жира и введения воздуха, однако возникало в результате введения корма с высоким содержанием жира и введения воздуха. Как представлено на фиг.3, частота TLESR в группе, которой вводили соединение A, снижалась дозозависимым образом по сравнению с частотой TLESR в контрольной группе (группе, которой вводили носитель).

[0048] Как и в приведенных выше результатах, было сделано предположение, что соединение A снижает частоту TLESR после введения корма с высоким содержание жира и воздуха, и, таким образом, соединение по настоящему изобретению может задерживать начало или подавлять обострение GERD посредством подавления рефлюкса желудочной кислоты и содержимого желудка и, кроме того, является эффективным при лечении или улучшении состояния GERD.

Применимость в промышленности

[0049] Соединение по настоящему изобретению является пригодным для предупреждения или предупреждения обострения, лечения или улучшения состояния GERD.